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Optimization of the Solid-phase Fermentation Medium of Metarhizium flavoviride by Response Surface Method
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作者 Li Maoye Lin Huafeng +4 位作者 Li Shiguang Pan Jing Xu Amei Chen Dexin Yin Jianli 《Plant Diseases and Pests》 CAS 2015年第1期35-40,共6页
Rice flour, puparium of yellow mealworm, peanut shell and sunflower seed shell are made into the culture medium, and the optimal solid-phase fermen- tation formula for M. flavoviride is figured out. In the solid-phase... Rice flour, puparium of yellow mealworm, peanut shell and sunflower seed shell are made into the culture medium, and the optimal solid-phase fermen- tation formula for M. flavoviride is figured out. In the solid-phase fermentation, Design-Expert is applied to analyze the significance of all components on the sporu- lotion, and response surface method used to optimize the fermentation medium of M. flavoviride. The results show that puparlum of yellow mealworm is the most sig- nificant component for the sporulation; and the optimal medium formula for the fermentation of M. flavoviride: 0.25-g rice flour, 0. 14-g yellow mealworm pupari- urn, 1.00-g peanut shell, and 0.25-g sunflower seedshell. In this optimal medium, the sporulation achieves 100. 013 × 10^8 spores/mL fungal liquid, 31.7% higher than that of the initial design. Application of the optimal formula will reduce the production cost, obtain higher yield of spores, produce no pollution, and offer tech- nical support for the future large-scale production. 展开更多
关键词 metarhizium flavoviride Solid-phase fermentation Response surface
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云南曲靖烤烟地下害虫绿色防控技术研究
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作者 曾嵘 吴剑 +7 位作者 王中康 张若璟 蔡永占 彭瑞琦 刘冬梅 秦树岗 朱燕文 付玲芳 《昆明学院学报》 2024年第3期18-22,共5页
在云南曲靖烤烟种植区开展地下害虫种群调查,明确为害烤烟的地下害虫主要为小地老虎、细胸金针虫、蛴螬和蝼蛄,其主要分布在30 cm耕作层土壤中.利用本土虫生真菌资源金龟子绿僵菌菌株,创制了生防制剂——10亿孢子/g金龟子绿僵菌颗粒剂.... 在云南曲靖烤烟种植区开展地下害虫种群调查,明确为害烤烟的地下害虫主要为小地老虎、细胸金针虫、蛴螬和蝼蛄,其主要分布在30 cm耕作层土壤中.利用本土虫生真菌资源金龟子绿僵菌菌株,创制了生防制剂——10亿孢子/g金龟子绿僵菌颗粒剂.在烤烟地起垄打塘时,撒施金龟子绿僵菌颗粒剂37.5~75.0 kg/hm^(2)对小地老虎和细胸金针虫等主要为害云南烤烟的地下害虫进行防治试验.结果发现,施药量为37.5 kg/hm^(2)和75.0 kg/hm^(2)的5 d后防效分别为83.65%和80.00%,而施药后40 d防效均保持在74.48%.金龟子绿僵菌颗粒剂在前期即对地下害虫起到良好的控制效果,与常规药剂处理防效相当,且绿僵菌制剂对烟苗生长无不良影响,具有促进烟苗生长的作用. 展开更多
关键词 地下害虫 虫生真菌 金龟子绿僵菌颗粒剂 防治效果
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金龟子绿僵菌CQMa421对棉蚜、绿盲蝽的田间防效
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作者 卓富彦 周若男 +5 位作者 蒙玲玲 李白成 张莉 郭荣 夏玉先 彭国雄 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期350-354,360,共6页
棉花是我国重要的经济作物,虫害严重制约了棉花生产,造成棉农的经济损失。目前,化学杀虫剂仍是防治棉花虫害的主要手段,长期使用化学杀虫剂导致棉蚜Aphis gossypii、绿盲蝽Apolygus lucorum产生抗药性,降低防治效果。本研究使用80亿孢子... 棉花是我国重要的经济作物,虫害严重制约了棉花生产,造成棉农的经济损失。目前,化学杀虫剂仍是防治棉花虫害的主要手段,长期使用化学杀虫剂导致棉蚜Aphis gossypii、绿盲蝽Apolygus lucorum产生抗药性,降低防治效果。本研究使用80亿孢子/mL金龟子绿僵菌CQMa421可分散油悬浮剂防治棉蚜、绿盲蝽,室内生测结果表明,金龟子绿僵菌CQMa421能有效侵染棉蚜和绿盲蝽,随着浓度的升高,对棉蚜和绿盲蝽的毒力增强。田间试验结果表明,该药剂能有效控制棉花主要害虫棉蚜和绿盲蝽。采用1200 mL/hm 2用量,药后14 d对棉蚜的防效达94.42%;采用1350 mL/hm 2用量,药后14 d对绿盲蝽的防效分别达到87.25%(新疆),91.62%(湖北)。 展开更多
关键词 棉花 绿僵菌 棉蚜 绿盲蝽
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黑龙江省松树天牛高致病力虫生真菌的筛选与鉴定
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作者 张瑶 宋小双 +3 位作者 张值荣 刁桂萍 李亚洲 邓勋 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期112-118,共7页
以获取对松树天牛高致病的生防真菌为目标,从黑龙江省森林土壤中初步分离得到18株虫生真菌,分别采用爬行法测定其对松树天牛幼虫、成虫的致病力,同时测定高致病力菌株的菌丝生长速度和产孢量,对高致病力菌株进行种类鉴定。结果表明:18... 以获取对松树天牛高致病的生防真菌为目标,从黑龙江省森林土壤中初步分离得到18株虫生真菌,分别采用爬行法测定其对松树天牛幼虫、成虫的致病力,同时测定高致病力菌株的菌丝生长速度和产孢量,对高致病力菌株进行种类鉴定。结果表明:18株虫生真菌对松树天牛幼虫、成虫均表现出不同程度的致病力。其中菌株M14-1、H_(2)表现出较强的致病力,在处理天牛幼虫、成虫的6 d,累计死亡率均达到了100%,菌株M14-1、H_(2)菌落生长速度快,产孢量大;在90 mm×15 mm(直径×深度)的马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基的培养皿上培养15 d时,菌落直径分别为5.68、4.91 cm,产孢量分别为3.86×10^(8)、4.1×10^(8)个·板^(-1)。在孢子浓度为10^(7)个·mL^(-1)时,菌株M14-1、H_(2)对松树天牛成虫的半致死时间(LT_(50))分别为4.15、4.31 d。经形态学和分子生物学鉴定,菌株M14-1、H_(2)皆属于金龟子绿僵菌(Mertarhizium anisopliae)。 展开更多
关键词 天牛 金龟子绿僵菌 致病力 种类鉴定
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棕色绿僵菌与高效氯氰菊酯复配杀蝇蛆的增效作用
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作者 李倩楠 马园 +5 位作者 郝陆瑶 张艳妮 郭志凯 丁玉林 杜山 王瑞 《动物医学进展》 北大核心 2024年第6期78-83,共6页
为了研究棕色绿僵菌(Metarhizium brunneum)与高效氯氰菊酯(beta-cypermethrin)复配在蝇蛆防控中的应用,试验测定了高效氯氰菊酯和棕色绿僵菌的相容性,以及单一棕色绿僵菌组、棕色绿僵菌与高效氯氰菊酯复配制剂组杀蝇蛆毒性试验。结果表... 为了研究棕色绿僵菌(Metarhizium brunneum)与高效氯氰菊酯(beta-cypermethrin)复配在蝇蛆防控中的应用,试验测定了高效氯氰菊酯和棕色绿僵菌的相容性,以及单一棕色绿僵菌组、棕色绿僵菌与高效氯氰菊酯复配制剂组杀蝇蛆毒性试验。结果表明,即使在较高浓度的下,高效氯氰菊酯对棕色绿僵菌的菌丝生长情况、孢子萌发率和孢子产量等无显著影响;高效氯氰菊酯与棕色绿僵菌联合使用确实可以增加棕色绿僵菌对蝇蛆的致死率,其中孢子浓度为1×10^(8)个/mL、1×10^(7)个/mL对蝇蛆的累计死亡率分别从90.0%、86.7%提高到100%;孢子浓度为1×10^(6)个/mL、1×10^(5)个/mL、1×10^(4)个/mL的累计死亡率分别从86.7%、50%和36.7%提高到93.3%、70%和63.3%。说明棕色绿僵菌与高效氯氰菊酯相容性良好,可以一起使用。低剂量的高效氯氰菊酯与棕色绿僵菌联用应用可以降低高效氯氰菊酯的使用量并提高生物防治效果。 展开更多
关键词 棕色绿僵菌 高效氯氰菊酯 蝇蛆 生物防治 增效作用
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金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae Ma83)几丁质酶的纯化及性质 被引量:3
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作者 蔡荟梅 刘斌 +2 位作者 蔡敬民 杜先锋 樊美珍 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第4期56-60,共5页
由金龟子绿僵菌Ma83菌株产生的几丁质酶经硫酸铵盐盐析,Sephadex G-100柱层析,DEAE-纤维素柱层析分离纯化后,得到SDS-PAGE均一样品。酶的最适反应温度为50℃,半失活温度为65℃;酶的最适反应pH值为5.0,酶在pH4.0~7.0范围内较稳定。Ag^+... 由金龟子绿僵菌Ma83菌株产生的几丁质酶经硫酸铵盐盐析,Sephadex G-100柱层析,DEAE-纤维素柱层析分离纯化后,得到SDS-PAGE均一样品。酶的最适反应温度为50℃,半失活温度为65℃;酶的最适反应pH值为5.0,酶在pH4.0~7.0范围内较稳定。Ag^+、Co^(2+)、K^+、Mg^(2+)对Ma83几丁质酶有激活作用,而Hg^(2+)、Zn^(2+)、Pb^(2+)对几丁质酶活力有抑制作用。经计算Ma83菌株几丁质酶对胶体几丁质的K_m值为1.05 mg/mL。 展开更多
关键词 金龟子绿僵菌 几丁质酶 分离纯化 酶学性质
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莱氏绿僵菌Mr006鉴定及对草地贪夜蛾致病力
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作者 胡飞 徐婷婷 +7 位作者 彭辉 胡本进 苏贤岩 毕思佳 吴振晨 朱克旭 徐丽娜 王振营 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2024年第1期44-51,共8页
收集草地贪夜蛾致病性莱氏绿僵菌,丰富昆虫病原真菌资源,为草地贪夜蛾绿色防控生防制剂开发提供依据。采用形态学和ITS-r DNA序列分析相结合的方法对菌株Mr006进行了鉴定,以浸渍法生物测定了该菌株对草地贪夜蛾幼虫和蛹的致病力,并进行... 收集草地贪夜蛾致病性莱氏绿僵菌,丰富昆虫病原真菌资源,为草地贪夜蛾绿色防控生防制剂开发提供依据。采用形态学和ITS-r DNA序列分析相结合的方法对菌株Mr006进行了鉴定,以浸渍法生物测定了该菌株对草地贪夜蛾幼虫和蛹的致病力,并进行了田间应用效果评价。结果表明,分离的Mr006菌株鉴定为莱氏绿僵菌;该菌株对草地贪夜蛾幼虫、蛹均有致病力,用孢子浓度为1×10^(7)孢子/mL接种后,1~5龄幼虫的校正死亡率分别为91.16%、88.38%、70.71%、53.03%和22.73%,蛹的校正死亡率为76.26%;对草地贪夜蛾1~5龄幼虫和蛹的LC50分别为3.55×10^(4)、8.23×10^(4)、3.63×106、4.16×10^(7)、4.23×10^(8)和2.57×10^(5)孢子/mL;用孢子浓度为1×10^(8)孢子/mL接种后,1~5龄幼虫和蛹的LT50值分别缩短至3.47、3.94、4.90、6.73、9.01 d和4.02 d。田间喷施莱氏绿僵菌Mr006分生孢子悬浮液后20 d,对草地贪夜蛾田间防治效果可达64%以上,持效性较好。莱氏绿僵菌Mr006对草地贪夜蛾致病力强,具有较好的生防潜力。 展开更多
关键词 莱氏绿僵菌 鉴定 草地贪夜蛾 致病力 防治效果
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棕色绿僵菌胞外酶的诱导及发酵液生化特性研究
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作者 李倩楠 马园 +5 位作者 郝陆瑶 张艳妮 郭志凯 丁玉林 杜山 王瑞 《动物医学进展》 北大核心 2024年第5期50-55,共6页
为了研究不同液体培养基及诱导物对棕色绿僵菌作用过程中胞外酶的最佳诱导条件和发酵液的生化性质,从而在对家畜外寄生虫进行防治过程中更好地利用该菌,在前期研究基础上,试验使用培养效果较好的3种液体培养基加入不同诱导物对棕色绿僵... 为了研究不同液体培养基及诱导物对棕色绿僵菌作用过程中胞外酶的最佳诱导条件和发酵液的生化性质,从而在对家畜外寄生虫进行防治过程中更好地利用该菌,在前期研究基础上,试验使用培养效果较好的3种液体培养基加入不同诱导物对棕色绿僵菌进行液体发酵培养,检测发酵液的蛋白质含量、蛋白酶活性、磷酸酶活性以及杀蝇蛆效力等,确定该菌产生胞外酶和杀虫作用最适的培养基与诱导物。结果表明,蝇蛆三期幼虫诱导的枸橼酸培养基发酵液蛋白质浓度较高达404.45 mg/L、蛋白酶活性42.28 U/mL、酸性磷酸酶活性37.06 U/L、碱性磷酸酶11.04 U/L,同时杀蝇蛆效力也是最高的,达60%。因此,枸橼酸液体培养基是产生胞外蛋白质最佳培养基,较好的诱导物为蝇蛆三期幼虫。说明不同培养基及诱导物对棕色绿僵菌的代谢进程会产生显著影响,导致其代谢过程中分泌的蛋白质含量、蛋白酶和磷酸酶的活性产生明显差异,对杀蝇蛆效率产生影响。 展开更多
关键词 昆虫寄生性真菌 棕色绿僵菌 蝇蛆 胞外酶 发酵液
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Scanning Electron Microscopic Observation of Brontispa longissima Naturally Infected by Metarhizium anisopliae 被引量:1
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作者 陈雪华 江俊 《Plant Diseases and Pests》 CAS 2010年第2期38-40,共3页
[Objective] The purpose was to supply reference basis for studying invasion region of Metarhizium anisoplia in Brontispa longissima, invasion process and its control measures. [Method] The surface of B. longissima nat... [Objective] The purpose was to supply reference basis for studying invasion region of Metarhizium anisoplia in Brontispa longissima, invasion process and its control measures. [Method] The surface of B. longissima naturally infected by M. anisoplia which were collected from field were scanned and observed by scanning electron microscope. [Result] The regions naturally infected by M. anisoplia on surface of B. longissima included not only arthrodial membrane between abdomen and prothorax, but also both sides of abdomen and the rear part of end node of abdomen, where a large amount of structural material closely related to infection had been formed and observed, such as infection peg, mycelia and spore. [Conclusion] Damage degree of insect surface were different when M. anisopliae infected B. longissima under different environmental conditions, such as nutrient material, PH value, temperature and humidity, etc. 展开更多
关键词 Brontispa longissima Natural infection metarhizium anisoplia Scanning observation
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棕色绿僵菌最适培养基和杀蝇蛆分生孢子浓度探究
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作者 李倩楠 尹衍峰 +13 位作者 马园 焦万明 郝陆瑶 张艳妮 付伟 符江涛 贾晓晴 訾星月 马俊杰 郭志凯 丁玉林 杜山 陆静 王瑞 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第8期60-67,76,共9页
为了研究昆虫寄生性真菌—棕色绿僵菌(Metarhizium brunneum)的最适培养基和杀蝇蛆分生孢子浓度,试验对棕色绿僵菌在不同固体培养基、液体培养基、氯化钠浓度和pH值条件下的生长特征和产孢能力进行了测定,并分别统计不同浓度(1×10^... 为了研究昆虫寄生性真菌—棕色绿僵菌(Metarhizium brunneum)的最适培养基和杀蝇蛆分生孢子浓度,试验对棕色绿僵菌在不同固体培养基、液体培养基、氯化钠浓度和pH值条件下的生长特征和产孢能力进行了测定,并分别统计不同浓度(1×10^(4)个/mL、1×10^(5)个/mL、1×10^(6)个/mL、1×10^(7)个/mL和1×10^(8)个/mL)分生孢子悬液处理后第3,5,7天的蝇蛆累计死亡率。结果表明:棕色绿僵菌在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上培养第21天时的菌落直径最大(8.40 cm),然后从大到小依次为PPDA固体培养基(8.20 cm)、沙氏葡萄糖琼脂培养基(8.10 cm)、枸橼酸固体培养基(7.20 cm)、大豆蛋白胨固体培养基(4.90 cm)、玉米粉琼脂培养基(4.70 cm);在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上培养第21天时的分生孢子产量最高(4.830×10^(7)个/mL),然后从高到低依次为PPDA固体培养基(3.070×10^(7)个/mL)、沙氏葡萄糖琼脂培养基(1.770×10^(7)个/mL)、枸橼酸固体培养基(1.580×10^(7)个/mL)、大豆蛋白胨固体培养基(0.260×10^(7)个/mL)、玉米粉琼脂培养基(0.053×10^(7)个/mL);在萨氏液体培养基中培养第7天时的菌丝干重最高(10.6 mg/mL),然后从高到低依次为马铃薯液体培养基(8.0 mg/mL)、沙氏葡萄糖液体培养基(7.1 mg/mL)、玉米浸液液体培养基(0.2 mg/mL);在萨氏液体培养基中培养第7天时的分生孢子产量最高(5.29×10^(7)个/mL),然后从高到低依次为马铃薯液体培养基(2.86×10^(7)个/mL)、沙氏葡萄糖液体培养基(2.71×10^(7)个/mL)、玉米浸液液体培养基(1.53×10^(7)个/mL)。棕色绿僵菌在氯化钠浓度为0.15 mol/L或pH值为8的马铃薯葡萄糖琼脂培养基上培养第21天时的菌落直径最大,分生孢子产量最高。用棕色绿僵菌分生孢子悬液(浓度分别为1×10^(4)个/mL、1×10^(5)个/mL、1×10^(6)个/mL、1×10^(7)个/mL和1×10^(8)个/mL)处理第3天,家蝇三期幼虫的累计死亡率为13.3%~40.0%;处理第5天,家蝇三期幼虫的累计死亡率为26.7%~66.7%;处理第7天,家蝇三期幼虫的累计死亡率为40.0%~90.0%。浓度为1×10^(6)个/mL、1×10^(7)个/mL和1×10^(8)个/mL的分生孢子悬液处理第7天时家蝇三期幼虫的累计死亡率显著高于浓度为1×10^(4)个/mL、1×10^(5)个/mL的分生孢子悬液(P<0.05),且浓度为1×10^(6)个/mL、1×10^(7)个/mL和1×10^(8)个/mL的分生孢子悬液处理第7天时家蝇三期幼虫的累计死亡率之间差异不显著(P>0.05)。说明棕色绿僵菌的最适培养基为马铃薯葡萄糖琼脂培养基和萨氏液体培养基,培养基最适氯化钠浓度为0.15 mol/L、pH值为8;棕色绿僵菌分生孢子悬液对蝇蛆有较强的侵染杀灭作用,推荐的杀蝇蛆浓度为1×10^(6)个/mL。 展开更多
关键词 昆虫寄生性真菌 棕色绿僵菌 培养条件 分生孢子产量 蝇蛆 生防制剂
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金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae HN1)几丁质酶基因的克隆及高效表达 被引量:4
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作者 任文彬 张世清 黄俊生 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期31-36,共6页
几丁质酶是昆虫病原真菌金龟子绿僵菌致病力的主要因子之一。用RT-PCR方法,从分离筛选到的高毒力金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae伽HN1中,扩增得到几丁质酶基因全长,此基因全长为1275bp,登录号为DQ011865,经Blastn分析此基因序列与M... 几丁质酶是昆虫病原真菌金龟子绿僵菌致病力的主要因子之一。用RT-PCR方法,从分离筛选到的高毒力金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae伽HN1中,扩增得到几丁质酶基因全长,此基因全长为1275bp,登录号为DQ011865,经Blastn分析此基因序列与M.anisopliae E6的chi1基因(AFD2749)同源率为96%。以pET-22b(+)为基础载体,构建pET-chi重组表达载体,在大肠杆菌(Escherichia coli)BL 21中进行表达。经SDS-PAGE分析,获得了42kDa大小的重组目的蛋白,目的蛋白占表达总蛋白含量的63.3%。菌体经冷冻与超声波破碎后,按DNS法可测得几丁质酶的活性。 展开更多
关键词 金龟子绿僵菌 几丁质酶基因 大肠杆菌
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金龟子绿僵菌制剂对二化螟的防效及体内相关酶活性的影响
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作者 邓璇璇 匡炜 +2 位作者 方宝华 张亚 刘双清 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期65-69,共5页
用剂量为1.6×10^(7)/mL的金龟子绿僵菌CQMa421制剂处理二化螟幼虫,测定该制剂对二化螟幼虫的毒力及其对幼虫总蛋白含量及过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)等3种保护酶活性和羧酸酯酶(CarE)、乙酰胆碱酯酶(AC... 用剂量为1.6×10^(7)/mL的金龟子绿僵菌CQMa421制剂处理二化螟幼虫,测定该制剂对二化螟幼虫的毒力及其对幼虫总蛋白含量及过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)等3种保护酶活性和羧酸酯酶(CarE)、乙酰胆碱酯酶(AChE)、碱性蛋白酶(AKP)和谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)等4种解毒酶活性的影响。结果表明:经金龟子绿僵菌制剂处理后,二化螟幼虫的存活率呈持续下降趋势,半致死时间(LT_(50))为7.23 d,第10天死亡率为56.89%,说明金龟子绿僵菌制剂对二化螟幼虫具有显著毒力;金龟子绿僵菌制剂处理3d时,二化螟幼虫蛋白质含量最高;POD、CAT、SOD等3种保护酶活性分别在处理2、4、5 d时达到最高,分别为198.76、19.59和12.90 U/mg,均显著高于对照组相应酶的活性;4种解毒酶GSTs、AChE、CarE和AKP最高活性分别约为对照组的1.68、1.68、1.27和1.62倍,说明经金龟子绿僵菌制剂CQMa421处理后,二化螟幼虫体内稳态遭到破坏,进而受到毒害。 展开更多
关键词 金龟子绿僵菌CQMa421制剂 二化螟 毒力 保护酶 解毒酶
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绿僵菌粗毒素对竹织叶野螟幼虫血细胞的影响
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作者 李文凯 许洋 +3 位作者 陈佳睿 倪德芳 李文哲 童应华 《森林与环境学报》 CSCD 北大核心 2024年第3期328-335,共8页
通过测定不同浓度梯度(200、500、1000、2000、5000 mg·L^(-1))绿僵菌粗毒素对竹织叶野螟幼虫的杀虫活性,及竹织叶野螟幼虫取食绿僵菌粗毒素(浓度为5000 mg·L^(-1))后其血细胞浓度和形态的变化,研究绿僵菌粗毒素对织叶野螟幼... 通过测定不同浓度梯度(200、500、1000、2000、5000 mg·L^(-1))绿僵菌粗毒素对竹织叶野螟幼虫的杀虫活性,及竹织叶野螟幼虫取食绿僵菌粗毒素(浓度为5000 mg·L^(-1))后其血细胞浓度和形态的变化,研究绿僵菌粗毒素对织叶野螟幼虫血细胞的影响。结果表明:以浓度为5000 mg·L^(-1)的绿僵菌粗毒素,采用浸叶法喂食4~5龄竹织叶野螟幼虫9 d后,幼虫的累计校正死亡率达97.37%,致死中时为3.91 d。竹织叶野螟幼虫取食粗毒素后,随着处理时间的延长其体内总血细胞浓度先升高后下降,在处理时间为2 d时达到最大值,为5.92×10^(6)个·mL^(-1),极显著高于对照(P<0.01)。各血细胞中,粒血细胞浓度、浆血细胞浓度均随着处理时间的延长呈现先升高后降低的变化趋势,且均在处理时间为2.0 d时达到最高值,分别为26.99×10^(5)、22.85×10^(5)个·mL^(-1),极显著高于对照(P<0.01);原血细胞、珠血细胞浓度分别在处理时间为1.5、2.0 d时达到最高值,极显著高于对照(P<0.01),随后急速下降;而类绛色血细胞浓度随着处理时间的延长总体呈下降趋势。在对竹织叶野螟幼虫取食绿僵菌粗毒素后其各类血细胞比例分析中发现,粒血细胞比例较高,为42.1%~47.9%,浆血细胞随着处理时间的延长比例显著升高(P<0.05),在处理时间为3.5 d时比例升至最高,为39.9%。显微观察发现,幼虫取食绿僵菌粗毒素后,当处理时间为2 d时,血细胞出现破裂、空泡化、内含物外流等现象。可见,绿僵菌粗毒素对竹织叶野螟幼虫有较强的毒力,且2~3 d对其血细胞的浓度和形态有较大影响。 展开更多
关键词 金龟子绿僵菌 粗毒素 竹织叶野螟 血细胞
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雄甾-4-烯-3,17-二酮11α羟化突变株Metarhizium anisopliae M28-203的代谢调控 被引量:2
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作者 叶丽 周珮 冯美卿 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期32-37,46,共7页
目的从营养代谢调控和转化条件控制两个方面入手提高雄甾-4-烯-3,17-二酮(androst-4-ene-3,17-dione,AD)11α羟化突变株Metarhizium anisopliaeM28-203转化效率。方法通过正交试验确定发酵培养基配方,对影响转化的一系列因素如:pH、... 目的从营养代谢调控和转化条件控制两个方面入手提高雄甾-4-烯-3,17-二酮(androst-4-ene-3,17-dione,AD)11α羟化突变株Metarhizium anisopliaeM28-203转化效率。方法通过正交试验确定发酵培养基配方,对影响转化的一系列因素如:pH、发酵时间、通气量、底物投料量及溶解性、细胞通透性进行控制,考察以上因素对羟化反应的影响,确定最佳转化条件。结果该突变株培养基最佳配方为葡萄糖30 g/L、玉米浆20 g/L、蚕蛹粉5 g/L、硫酸铵2.5 g/L、磷酸氢二钾1 g/L、硫酸镁0.5 g/L和硫酸亚铁0.02 g/L。在pH 6.0~6.5、菌龄48~60 h2、50 mL摇瓶装液量为30和40 mL、转化时间72 h时能取得最佳转化效果。在底物投料量为2 mg/mL时,采用4%无水乙醇溶解底物或加入0.75 mg/mL Tween 80均有利于羟化反应,在以上优化条件下转化率分别达到62.5%和66.8%。结论突变株Metarhizium anisopliaeM28-203能有效地在AD上引入11α羟基,为工业生产依普利酮及其他甾体药物提供关键中间体。 展开更多
关键词 生物转化 雄甾-4-烯-3 17-二酮 羟化反应 Metarhiziu manisopliae 代谢调控
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莱氏绿僵菌与常见化学农药的相容性研究
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作者 张希鹏 李志琳 +2 位作者 徐雪宁 王逸飞 刘守柱 《山东农业科学》 北大核心 2024年第10期148-152,共5页
为明确莱氏绿僵菌Nr5772菌株与常见化学农药的相容性,本研究采用平板法测定了5种杀菌剂(苯醚甲环唑、甲基硫菌灵、戊唑醇、嘧菌酯、吡唑醚菌酯)和5种杀虫剂(吡虫啉、联苯菊酯、啶虫脒、阿维菌素、毒死蜱)对莱氏绿僵菌菌丝生长的影响。... 为明确莱氏绿僵菌Nr5772菌株与常见化学农药的相容性,本研究采用平板法测定了5种杀菌剂(苯醚甲环唑、甲基硫菌灵、戊唑醇、嘧菌酯、吡唑醚菌酯)和5种杀虫剂(吡虫啉、联苯菊酯、啶虫脒、阿维菌素、毒死蜱)对莱氏绿僵菌菌丝生长的影响。结果表明,5种杀菌剂几乎完全抑制莱氏绿僵菌的生长,相容性极差。杀虫剂联苯菊酯EC_(50)为12926.61 mg/L,与莱氏绿僵菌的相容性最好;吡虫啉、阿维菌素、啶虫脒EC_(50)分别为724.21、264.60、158.49 mg/L,远高于田间常规使用剂量,与莱氏绿僵菌也具有良好的相容性;毒死蜱的EC_(50)为283.38 mg/L,接近其田间常规使用剂量,对莱氏绿僵菌具有较强的抑制作用。综上,在本试验条件下,苯醚甲环唑等5种杀菌剂完全不能与莱氏绿僵菌混用,联苯菊酯、啶虫脒、阿维菌素和吡虫啉4种杀虫剂可与莱氏绿僵菌混用。 展开更多
关键词 莱氏绿僵菌 杀虫剂 杀菌剂 相容性 抑制率
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miR-120对台湾乳白蚁抵御绿僵菌的免疫反应的影响
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作者 张泓 李志强 +1 位作者 贾凤龙 陈伟文 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期948-957,共10页
本研究探究了miR-120在台湾乳白蚁Coptotermes formosanus抵御绿僵菌Metarhizium anisopliae的免疫反应中的作用。研究发现通过对台湾乳白蚁注射miR-120 agomir以增加白蚁体内miR-120的含量后,台湾乳白蚁的存活率降低约35%,绿僵菌对台... 本研究探究了miR-120在台湾乳白蚁Coptotermes formosanus抵御绿僵菌Metarhizium anisopliae的免疫反应中的作用。研究发现通过对台湾乳白蚁注射miR-120 agomir以增加白蚁体内miR-120的含量后,台湾乳白蚁的存活率降低约35%,绿僵菌对台湾乳白蚁的致死率提升约55%,同时显著抑制了台湾乳白蚁对绿僵菌的趋避反应。双荧光素酶报告系统等试验证实了miR-120靶向结合免疫基因Draper。通过对Draper进行注射法RNAi后,得到了类似于注射miR-120 agomir后的结果。研究结果表明,miR-120通过抑制靶基因Draper的表达,抑制了台湾乳白蚁抵御绿僵菌的免疫反应,最终导致台湾乳白蚁的存活率显著下降。该结果有助于进一步理解白蚁的免疫机制,并为开发抑制白蚁免疫防御反应的技术方法提供理论基础,有助于促进白蚁生物防治的发展。 展开更多
关键词 台湾乳白蚁 miR-120 免疫反应 绿僵菌 白蚁防治
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金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae HN1)几丁质酶与谷胱甘肽S-转移酶GST在大肠杆菌中的高效融合表达 被引量:1
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作者 任文彬 张世清 黄俊生 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第17期7900-7902,共3页
使用RT-PCR方法,从高毒力金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliaeHN1中,克隆得到一个全长为1 275 bp的几丁质酶基因,经Blast分析此基因序列与M.anisopliaeE6的chi1基因(AF02749)同源率为96%。将此基因克隆到pGEX-6p-1载体上,使之与载体上... 使用RT-PCR方法,从高毒力金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliaeHN1中,克隆得到一个全长为1 275 bp的几丁质酶基因,经Blast分析此基因序列与M.anisopliaeE6的chi1基因(AF02749)同源率为96%。将此基因克隆到pGEX-6p-1载体上,使之与载体上一个约26kD大小的谷胱甘肽S-转移酶(GST)相连,构建pGEX-chi融合表达载体,转化到大肠杆菌(Escherichia coli)BL 21中,经SDS-PAGE结果分析显示:表达出的融合蛋白大小为68 kD,此目的蛋白占表达总量的64.5%。经破碎处理后可检测到几丁质酶活性。 展开更多
关键词 金龟子绿僵菌 几丁质酶基因 融合蛋白 大肠杆菌
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平沙绿僵菌SG-A两种培养基比较及其对瓜绢螟的致病活力
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作者 胡海燕 张然然 +2 位作者 王亚丽 李晓莉 段会婷 《中国瓜菜》 CAS 北大核心 2024年第8期152-157,共6页
为比较平沙绿僵菌SG-A在两种培养基上的生物学特性及对瓜绢螟不同虫态的致病力,室内测定了平沙绿僵菌SG-A在马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)和萨氏培养基(SDAY)上培养14 d后的菌落大小、产孢量及孢子萌发率等指标,并采用浸虫法测定了对瓜... 为比较平沙绿僵菌SG-A在两种培养基上的生物学特性及对瓜绢螟不同虫态的致病力,室内测定了平沙绿僵菌SG-A在马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)和萨氏培养基(SDAY)上培养14 d后的菌落大小、产孢量及孢子萌发率等指标,并采用浸虫法测定了对瓜绢螟不同虫态的致病力。结果表明,平沙绿僵菌SG-A在PDA培养基中培养14 d后的产孢量显著高于SDAY培养基,菌落大小和孢子萌发率差异不显著。平沙绿僵菌SG-A对瓜绢螟2龄、4龄幼虫和蛹均存在较高的致病力,孢子浓度越大,致病力越高,其中对蛹的致病力最高,LC_(50)为1.93×10^(5)个·mL^(-1),当孢子浓度为1×10^(8)个·mL^(-1)时,处理8 d蛹的累积死亡率为90%,2龄和4龄幼虫的累积死亡率也分别达到86.67%和83.33%,但4龄幼虫出现死亡的时间要早于蛹和2龄若虫,LT_(50)为2.60 d。综上所述,平沙绿僵菌SG-A对瓜绢螟各虫态均具有较高的致病力,可进一步挖掘其生防潜力。 展开更多
关键词 平沙绿僵菌 SG-A菌株 瓜绢螟 生物学特性 致病力
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Metarhizium anisopliae var.anisopliae Pr1A基因的克隆表达及抗血清研究
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作者 宋妍 张世清 黄俊生 《生物技术》 CAS CSCD 2006年第5期3-7,共5页
采用RT-PCR方法从本实验室分离筛选到的金龟子绿僵小孢变种Metarhizium anisopliae vat.anisopliae中,扩增得到PrlA基因全长,此基因全长为1242bp,经Blastn分析此基因序列与M.anopliae的PrlA基因(M73795)同源率为98%。以pET- 22b(+)为... 采用RT-PCR方法从本实验室分离筛选到的金龟子绿僵小孢变种Metarhizium anisopliae vat.anisopliae中,扩增得到PrlA基因全长,此基因全长为1242bp,经Blastn分析此基因序列与M.anopliae的PrlA基因(M73795)同源率为98%。以pET- 22b(+)为基础载体,构建pET-PrlA重组表达载体,在大肠杆菌(Escherichia.coli)BL 21(DE3)中进行表达。经SDS—PAGE分析,获得了约42kDa大小的重组目的蛋白,目的蛋白占表达总蛋白含量的63.2%。将表达的PrlA蛋白切胶回收后制备成抗原,免疫家兔4次后,采血收集抗血清,用ELISA测定效价为1/10000。结果表明,获得的抗体可用于更进一步的研究,将有利于我们进一步了解M.anisopliaeis的侵染机理,弄清楚各Pr蛋白酶的作用方式和对寄主的选择优势,提高生防控制的有效性。 展开更多
关键词 metarhizium anisopliae var.anisopliae Pr1A基因 克隆 表达 抗血清
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外源糖类和维生素对莱氏绿僵菌Metarhizium rileyi孢子萌发的促进作用 被引量:4
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作者 刘守柱 刘双双 +2 位作者 姜武玲 王馨玫 王文杰 《山东农业科学》 2020年第3期97-101,共5页
莱氏绿僵菌Metarhiziumrileyi是重要的昆虫病原真菌,对鳞翅目害虫有很好的防治效果,但存在杀虫速度慢的缺点。为了提高莱氏绿僵菌孢子的萌发速度,缩短对寄主的致死时间,在孢子悬液中分别添加不同糖类和维生素类,以测定外源营养对莱氏绿... 莱氏绿僵菌Metarhiziumrileyi是重要的昆虫病原真菌,对鳞翅目害虫有很好的防治效果,但存在杀虫速度慢的缺点。为了提高莱氏绿僵菌孢子的萌发速度,缩短对寄主的致死时间,在孢子悬液中分别添加不同糖类和维生素类,以测定外源营养对莱氏绿僵菌孢子萌发的促进作用。配制含有不同浓度糖和维生素的SMY液体培养基后,接种M.rileyi孢子,25℃、180r/min振荡培养,每隔24h,用血球计数板镜检孢子萌发率。结果表明:接种24h后,以10g/L甘露糖、5g/L维生素B6和5g/L维生素C对孢子萌发的促进作用较好,孢子萌发率分别为3.50%、3.67%和0.83%;随着培养时间延长,10g/L甘露糖、5g/L维生素C依然对孢子萌发有较好的促进作用,5g/L维生素B6对孢子萌发的促进作用逐渐降低;进一步测定甘露糖和维生素C对孢子萌发的浓度效应,甘露糖浓度为25.0g/L时对孢子萌发的促进作用最好,维生素C浓度为0.2g/L时最好。以上结果表明,对M.rileyi孢子萌发促进效果最好的外源营养是甘露糖和维生素C,最适浓度分别是25.0 g/L和0.2g/L。 展开更多
关键词 莱氏绿僵菌 孢子萌发 维生素
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