目的:观察Rho激酶抑制剂法舒地尔(Fasudil)对人高侵袭潜能HCC细胞株3(human high metastatic liver cancer cells 3,HCCLM3)侵袭转移的影响,并且探讨其作用的机制。方法:应用100 mol/L Fasudil作用于HCCLM3细胞,采用肌动蛋白微丝荧光染...目的:观察Rho激酶抑制剂法舒地尔(Fasudil)对人高侵袭潜能HCC细胞株3(human high metastatic liver cancer cells 3,HCCLM3)侵袭转移的影响,并且探讨其作用的机制。方法:应用100 mol/L Fasudil作用于HCCLM3细胞,采用肌动蛋白微丝荧光染色和侵袭小室实验观察HCCLM3细胞的运动侵袭能力。HCCLM3细胞经过处理后分为阴性对照组、Fasudil作用组、BTBD7干扰组,通过Western印迹检测BTB/POZ结构域蛋白7(BR-C,ttk and bab/pox virus domain containing 7,BTBD7)、Ras同系物家族成员C(ras homolog family member C,Rho C)、Rho关联卷曲螺旋蛋白激酶2(Rhoassociated,coiled-coil containing protein kinase 2,ROCK2)、MMP2和MMP9蛋白表达水平,酶谱分析法检测MMP2和MMP9活性水平。BTBD7干扰组作为阳性对照。结果:Fasudil处理后HCCLM3侵袭运动能力下降,BTBD7,Rho C,ROCK2蛋白表达下调,MMP2和MMP9活性降低,与阴性对照组比较差异有统计学意义(均P<0.01)。结论:Fasudil具有干预BTBD7-ROCK2信号通路、抑制HCC侵袭转移的重要作用。展开更多
目的探讨人胃癌S期激酶相关蛋白2(S-phase k inase-assoc iated prote in 2,Skp2)表达的意义及与p27表达的关系。方法采用免疫组化方法检测138例原发性胃癌,配对癌旁胃黏膜,102例配对淋巴结转移胃癌组织,30例非典型增生,30例肠上皮化生...目的探讨人胃癌S期激酶相关蛋白2(S-phase k inase-assoc iated prote in 2,Skp2)表达的意义及与p27表达的关系。方法采用免疫组化方法检测138例原发性胃癌,配对癌旁胃黏膜,102例配对淋巴结转移胃癌组织,30例非典型增生,30例肠上皮化生(肠化),10例慢性浅表性胃炎和5例正常胃黏膜Skp2的表达及138例原发性胃癌p27的表达。结果Skp2表达的阳性率(%),肠化(12.68±0.86)及癌旁胃黏膜(19.32±1.22)均明显高于慢性浅表性胃炎(0.53±0.13)及正常胃黏膜(0.47±0.19)(P=0.000),后两者差异无显著性(P=0.716);非典型增生(16.74±0.82)明显高于肠化(P=0.000);原发性胃癌(31.34±2.17)明显高于非典型增生及癌旁胃黏膜(P值均=0.000);淋巴结转移胃癌组织(39.76±2.00)明显高于原发性胃癌(P=0.037)。胃癌Skp2的阳性率与分化程度(rho=0.315,P=0.000)、脉管内瘤栓(rho=0.303,P=0.000)及淋巴结转移(rho=0.254,P=0.000)呈正相关。胃癌Skp2表达与靶蛋白p27表达呈负相关(rho=-0.451,P=0.000)。结论Skp2蛋白过表达与胃癌的发生及转移有关;胃癌Skp2蛋白过表达与p27蛋白降解有关,提示Skp2蛋白过表达在胃癌发生、发展过程中可能起重要作用。展开更多
目的:研究转移相关基因2(metastasis tumor-associated protein 2,MTA2)在子宫颈鳞癌组织中的表达水平,探讨其与子宫颈鳞癌临床病理因素之间的联系及其预后价值。方法:采用免疫组织化学和RT-PCR检测MTA2蛋白及m RNA在子宫颈鳞癌、子宫...目的:研究转移相关基因2(metastasis tumor-associated protein 2,MTA2)在子宫颈鳞癌组织中的表达水平,探讨其与子宫颈鳞癌临床病理因素之间的联系及其预后价值。方法:采用免疫组织化学和RT-PCR检测MTA2蛋白及m RNA在子宫颈鳞癌、子宫颈上皮内瘤变及正常宫颈组织中的表达情况,分析其与临床病理因素的关系,同时综合临床病理资料及随访数据对子宫颈鳞癌患者进行预后分析。结果:MTA2蛋白在正常宫颈组织、子宫颈上皮内瘤变组织、宫颈鳞癌组织中的表达率分别为0,30.0%,73.4%,且其表达水平与宫颈癌国际妇产科协会(International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO)分期、淋巴结转移有关(P<0.05),而与患者年龄及肿瘤的分化程度无关(P>0.05);MTA2 m RNA在正常宫颈组织、子宫颈上皮内瘤变组织、宫颈鳞癌组织中的表达量分别为0.437±0.028,0.737±0.102,1.172±0.068,且其表达量亦与宫颈癌FIGO分期、淋巴结转移有关(P<0.05),而与患者年龄及肿瘤的分化程度无关(P>0.05);Kaplan-Meier法进行单因素生存分析,MTA2蛋白表达阳性患者与阴性患者无瘤生存期分别为(23.19±1.87)和(39.57±3.16)个月,经log-rank检验得出两组患者无瘤生存期差异有统计学意义(χ2=20.225,P<0.001);多因素COX比例风险模型预后分析显示,MTA2蛋白表达水平、FIGO分期及淋巴结转移为宫颈癌有效的独立预后指标(P<0.05)。结论:MTA2的高表达与宫颈癌的发生、进展及转移有关;MTA2蛋白表达水平、FIGO分期及淋巴结转移可作为宫颈癌预后的3个相对独立的因素;MTA2有可能成为判断宫颈癌患者进展及预后的一个新的分子标志物。展开更多
目的探讨转移相关蛋白2(MTA2)对前列腺癌预后的预测价值及在癌转移过程中的作用。方法收集空军军医大学第一附属医院2018年1月~2020年6月收治的50例前列腺癌患者的癌组织及配对癌旁组织样本用于免疫组织化学分析。根据MTA2蛋白的表达水...目的探讨转移相关蛋白2(MTA2)对前列腺癌预后的预测价值及在癌转移过程中的作用。方法收集空军军医大学第一附属医院2018年1月~2020年6月收治的50例前列腺癌患者的癌组织及配对癌旁组织样本用于免疫组织化学分析。根据MTA2蛋白的表达水平将样本分为两组,染色评分≥4为高表达组,<4为低表达组。对人前列腺癌细胞系(PC-3)转染shMTA2(MTA2-shRNA-pLKO.1)来沉默MTA2作为shMTA2组,转染Luc-shRNA-pLKO.1的细胞作为阴性对照组(shNC组),未转染的细胞作为空白对照组(control组)。通过MTT法检测细胞活力,Transwells实验进行体外迁移和侵袭分析。通过qRT-PCR或Western Blot检测细胞中MTA2、Eotaxin-1、CCR3、p-ERK1/2、t-ERK1/2和MMP-3的表达。结果前列腺癌组织中MTA2的染色评分显著高于癌旁组织(5.16±0.87 vs 2.34±0.39,t=9.221,P<0.001)。低表达组患者中出现淋巴结转移率为14.29%(2/14),高表达组患者中出现淋巴结转移率为52.78%(19/36),两组比较差异有统计学意义(χ^(2)=6.131,P=0.013)。与低表达组相比,高表达组患者的生存时间更长(χ^(2)=4.756,P=0.029)。与空白对照组相比,shMTA2组的细胞活力降低了56.87%(P<0.001),细胞迁移数量降低了65.80%(P<0.001),细胞侵袭数量降低了56.35%(P<0.001),Eotaxin-1、CCR3、p-ERK1/2和MMP-3的蛋白相对表达量依次降低了76.03%、69.12%、72.32%和54.67%(P<0.001)。结论前列腺癌组织中MTA2的表达水平升高且与患者的预后有关,沉默MTA2可降低前列腺癌细胞的迁移和侵袭能力,并抑制Eotaxin-CCR3-ERK1/2-MMP-3轴。展开更多
目的比较舌癌患者和正常人中转移相关蛋白2(metastasis associated protein 2,MTA2)的mRNA和蛋白表达水平,并探讨其差异的临床意义。方法选取经病理确诊为舌鳞癌患者95例,同时选取癌旁正常舌黏膜25例;同期另各取20例舌癌组织与20例癌旁...目的比较舌癌患者和正常人中转移相关蛋白2(metastasis associated protein 2,MTA2)的mRNA和蛋白表达水平,并探讨其差异的临床意义。方法选取经病理确诊为舌鳞癌患者95例,同时选取癌旁正常舌黏膜25例;同期另各取20例舌癌组织与20例癌旁正常上皮组织,采用免疫组化方法检测95例确诊为舌癌组织及25例相应癌旁正常舌黏膜上皮组织中MTA2的表达;采用RT-PCR和Western Blot分别检测20例舌癌组织与癌旁正常上皮组织中mRNA和蛋白的表达。分析MTA2在舌癌组织中的表达与患者的性别、年龄及癌组织分化程度的关系。结果 MTA2的mRNA和蛋白在舌癌组织中的表达明显高于癌旁组织(P<0.05)。MTA2在舌癌组织中的表达与患者性别、年龄无显著相关(P>0.05),而与癌组织的分化程度呈负相关(P<0.05)。结论 MTA2在舌癌组织中的表达高于癌旁组织,MTA2的表达与癌组织的分化程度呈负相关。展开更多
文摘目的:观察Rho激酶抑制剂法舒地尔(Fasudil)对人高侵袭潜能HCC细胞株3(human high metastatic liver cancer cells 3,HCCLM3)侵袭转移的影响,并且探讨其作用的机制。方法:应用100 mol/L Fasudil作用于HCCLM3细胞,采用肌动蛋白微丝荧光染色和侵袭小室实验观察HCCLM3细胞的运动侵袭能力。HCCLM3细胞经过处理后分为阴性对照组、Fasudil作用组、BTBD7干扰组,通过Western印迹检测BTB/POZ结构域蛋白7(BR-C,ttk and bab/pox virus domain containing 7,BTBD7)、Ras同系物家族成员C(ras homolog family member C,Rho C)、Rho关联卷曲螺旋蛋白激酶2(Rhoassociated,coiled-coil containing protein kinase 2,ROCK2)、MMP2和MMP9蛋白表达水平,酶谱分析法检测MMP2和MMP9活性水平。BTBD7干扰组作为阳性对照。结果:Fasudil处理后HCCLM3侵袭运动能力下降,BTBD7,Rho C,ROCK2蛋白表达下调,MMP2和MMP9活性降低,与阴性对照组比较差异有统计学意义(均P<0.01)。结论:Fasudil具有干预BTBD7-ROCK2信号通路、抑制HCC侵袭转移的重要作用。
文摘目的探讨人胃癌S期激酶相关蛋白2(S-phase k inase-assoc iated prote in 2,Skp2)表达的意义及与p27表达的关系。方法采用免疫组化方法检测138例原发性胃癌,配对癌旁胃黏膜,102例配对淋巴结转移胃癌组织,30例非典型增生,30例肠上皮化生(肠化),10例慢性浅表性胃炎和5例正常胃黏膜Skp2的表达及138例原发性胃癌p27的表达。结果Skp2表达的阳性率(%),肠化(12.68±0.86)及癌旁胃黏膜(19.32±1.22)均明显高于慢性浅表性胃炎(0.53±0.13)及正常胃黏膜(0.47±0.19)(P=0.000),后两者差异无显著性(P=0.716);非典型增生(16.74±0.82)明显高于肠化(P=0.000);原发性胃癌(31.34±2.17)明显高于非典型增生及癌旁胃黏膜(P值均=0.000);淋巴结转移胃癌组织(39.76±2.00)明显高于原发性胃癌(P=0.037)。胃癌Skp2的阳性率与分化程度(rho=0.315,P=0.000)、脉管内瘤栓(rho=0.303,P=0.000)及淋巴结转移(rho=0.254,P=0.000)呈正相关。胃癌Skp2表达与靶蛋白p27表达呈负相关(rho=-0.451,P=0.000)。结论Skp2蛋白过表达与胃癌的发生及转移有关;胃癌Skp2蛋白过表达与p27蛋白降解有关,提示Skp2蛋白过表达在胃癌发生、发展过程中可能起重要作用。
文摘目的:研究转移相关基因2(metastasis tumor-associated protein 2,MTA2)在子宫颈鳞癌组织中的表达水平,探讨其与子宫颈鳞癌临床病理因素之间的联系及其预后价值。方法:采用免疫组织化学和RT-PCR检测MTA2蛋白及m RNA在子宫颈鳞癌、子宫颈上皮内瘤变及正常宫颈组织中的表达情况,分析其与临床病理因素的关系,同时综合临床病理资料及随访数据对子宫颈鳞癌患者进行预后分析。结果:MTA2蛋白在正常宫颈组织、子宫颈上皮内瘤变组织、宫颈鳞癌组织中的表达率分别为0,30.0%,73.4%,且其表达水平与宫颈癌国际妇产科协会(International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO)分期、淋巴结转移有关(P<0.05),而与患者年龄及肿瘤的分化程度无关(P>0.05);MTA2 m RNA在正常宫颈组织、子宫颈上皮内瘤变组织、宫颈鳞癌组织中的表达量分别为0.437±0.028,0.737±0.102,1.172±0.068,且其表达量亦与宫颈癌FIGO分期、淋巴结转移有关(P<0.05),而与患者年龄及肿瘤的分化程度无关(P>0.05);Kaplan-Meier法进行单因素生存分析,MTA2蛋白表达阳性患者与阴性患者无瘤生存期分别为(23.19±1.87)和(39.57±3.16)个月,经log-rank检验得出两组患者无瘤生存期差异有统计学意义(χ2=20.225,P<0.001);多因素COX比例风险模型预后分析显示,MTA2蛋白表达水平、FIGO分期及淋巴结转移为宫颈癌有效的独立预后指标(P<0.05)。结论:MTA2的高表达与宫颈癌的发生、进展及转移有关;MTA2蛋白表达水平、FIGO分期及淋巴结转移可作为宫颈癌预后的3个相对独立的因素;MTA2有可能成为判断宫颈癌患者进展及预后的一个新的分子标志物。
文摘目的探讨转移相关蛋白2(MTA2)对前列腺癌预后的预测价值及在癌转移过程中的作用。方法收集空军军医大学第一附属医院2018年1月~2020年6月收治的50例前列腺癌患者的癌组织及配对癌旁组织样本用于免疫组织化学分析。根据MTA2蛋白的表达水平将样本分为两组,染色评分≥4为高表达组,<4为低表达组。对人前列腺癌细胞系(PC-3)转染shMTA2(MTA2-shRNA-pLKO.1)来沉默MTA2作为shMTA2组,转染Luc-shRNA-pLKO.1的细胞作为阴性对照组(shNC组),未转染的细胞作为空白对照组(control组)。通过MTT法检测细胞活力,Transwells实验进行体外迁移和侵袭分析。通过qRT-PCR或Western Blot检测细胞中MTA2、Eotaxin-1、CCR3、p-ERK1/2、t-ERK1/2和MMP-3的表达。结果前列腺癌组织中MTA2的染色评分显著高于癌旁组织(5.16±0.87 vs 2.34±0.39,t=9.221,P<0.001)。低表达组患者中出现淋巴结转移率为14.29%(2/14),高表达组患者中出现淋巴结转移率为52.78%(19/36),两组比较差异有统计学意义(χ^(2)=6.131,P=0.013)。与低表达组相比,高表达组患者的生存时间更长(χ^(2)=4.756,P=0.029)。与空白对照组相比,shMTA2组的细胞活力降低了56.87%(P<0.001),细胞迁移数量降低了65.80%(P<0.001),细胞侵袭数量降低了56.35%(P<0.001),Eotaxin-1、CCR3、p-ERK1/2和MMP-3的蛋白相对表达量依次降低了76.03%、69.12%、72.32%和54.67%(P<0.001)。结论前列腺癌组织中MTA2的表达水平升高且与患者的预后有关,沉默MTA2可降低前列腺癌细胞的迁移和侵袭能力,并抑制Eotaxin-CCR3-ERK1/2-MMP-3轴。