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ISOLATION AND PURIFICATION OF METHANE IVf ONOOXYGENASE FROM METHYLOMONAS SPECIES GYJ3
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作者 Ai Min LIU, Shu Ben LI, De Xun MIAO Wei LeYU, Fang ZHANG, Pu SU Lanzhou Institute of Chemical Physics, Chinese Academy of Sciences Lanzhou, 730000 §Institute of Traditional Chinese Veterinary Medicine, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Lanzhou, 730000 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 1991年第5期419-422,共4页
A three—component enzyme system that catalyzes in vivo the oxidation of CH_4 to CH_3OH has been purified with high specific activity from an unusual type I methanotroph through the use of stabilizing reagents.
关键词 mmo ISOLATION AND PURIFICATION OF methane IVf ONOOXYGENASE FROM METHYLOMONAS SPECIES GYJ3 NADH
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Construction of a broad-host-range Anderson promoter series and particulate methane monooxygenase promoter variants expand the methanotroph genetic toolbox
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作者 Etash H.Bhat Jessica M.Henard +6 位作者 Spencer A.Lee Dustin McHalffey Mahith S.Ravulapati Elle V.Rogers Logan Yu David Skiles Calvin A.Henard 《Synthetic and Systems Biotechnology》 SCIE CSCD 2024年第2期250-258,共9页
Methanotrophic bacteria are currently used industrially for the bioconversion of methane-rich natural gas and anaerobic digestion-derived biogas to valuable products.These bacteria may also serve to mitigate the negat... Methanotrophic bacteria are currently used industrially for the bioconversion of methane-rich natural gas and anaerobic digestion-derived biogas to valuable products.These bacteria may also serve to mitigate the negative effects of climate change by capturing atmospheric greenhouse gases.Several genetic tools have previously been developed for genetic and metabolic engineering of methanotrophs.However,the available tools for use in methanotrophs are significantly underdeveloped compared to many other industrially relevant bacteria,which hinders genetic and metabolic engineering of these biocatalysts.As such,expansion of the methanotroph genetic toolbox is needed to further our understanding of methanotrophy and develop biotechnologies that leverage these unique microbes for mitigation and conversion of methane to valuable products.Here,we determined the copy number of three broad-host-range plasmids in Methylococcus capsulatus Bath and Methylosinus trichosporium OB3b,representing phylogenetically diverse Gammaproteobacterial and Alphaproteobacterial methanotrophs,respectively.Further,we show that the commonly used synthetic Anderson series promoters are functional and exhibit similar relative activity in M.capsulatus and M.trichosporium OB3b,but the synthetic series had limited range.Thus,we mutagenized the native M.capsulatus particulate methane monooxygenase promoter and identified variants with activity that expand the activity range of synthetic,constitutive promoters functional not only in M.capsulatus,but also in Escherichia coli.Collectively,the tools developed here advance the methanotroph genetic engineering toolbox and represent additional synthetic genetic parts that may have broad applicability in Pseudomonadota bacteria. 展开更多
关键词 methanOTROPH methane monooxygenase PROMOTER Metabolic engineering Synthetic biology
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Coupled effects of methane monooxygenase and nitrogen source on growth and poly-β-hydroxybutyrate(PHB)production of Methylosinus trichosporium OB3b 被引量:5
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作者 Tingting Zhang Jiti Zhou +1 位作者 Xiaowei Wang Yu Zhang 《Journal of Environmental Sciences》 SCIE EI CAS CSCD 2017年第2期49-57,共9页
The coupled effects of nitrogen source and methane monooxygenase(MMO) on the growth and poly-β-hydroxybutyrate(PHB) accumulation capacity of methanotrophs were explored.The ammonia-supplied methanotrophs expressi... The coupled effects of nitrogen source and methane monooxygenase(MMO) on the growth and poly-β-hydroxybutyrate(PHB) accumulation capacity of methanotrophs were explored.The ammonia-supplied methanotrophs expressing soluble MMO(s MMO) grew at the highest rate, while N2-fixing bacteria expressing particulate MMO(p MMO) grew at the lowest rate. Further study showed that more hydroxylamine and nitrite was formed by ammonia-supplied bacteria containing p MMO, which might cause their slightly lower growth rate. The highest PHB content(51.0%) was obtained under nitrogen-limiting conditions with the inoculation of nitrate-supplied bacteria containing p MMO. Ammoniasupplied bacteria also accumulated a higher content of PHB(45.2%) with the expression of p MMO, while N2-fixing bacteria containing p MMO only showed low PHB production capacity(32.1%). The maximal PHB contents of bacteria expressing s MMO were low, with no significant change under different nitrogen source conditions. The low MMO activity,low cell growth rate and low PHB production capacity of methanotrophs continuously cultivated with N2 with the expression of p MMO were greatly improved in the cyclic NO3-N2 cultivation regime, indicating that long-term deficiency of nitrogen sources was detrimental to the activity of methanotrophs expressing pMMO. 展开更多
关键词 methane methanOTROPH PHB Nitrogen source methane monooxygenase
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Chiral model complexes for methane monooxygenase and their asymmetric catalysis of styrene epoxidation
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作者 魏俊发 俞贤达 金道森 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 1998年第3期247-254,共8页
Four chiral μ phenolato dinuclear (VO) 2, Cr 2, Mn 2, and Fe 2 complexes with a phenolic ligand bearing two L phenylanalines as complexing arms have been synthesized and characterized. Asymmetric epoxidations of styr... Four chiral μ phenolato dinuclear (VO) 2, Cr 2, Mn 2, and Fe 2 complexes with a phenolic ligand bearing two L phenylanalines as complexing arms have been synthesized and characterized. Asymmetric epoxidations of styrene with these complexes as chiral models of methane monooxygenase (MMO) and iodosylbenzene as an oxygen atom donor have been studied. The results reveal that the Mn 2 complex catalyzes asymmetric epoxidation of styrene with the formation of R (+) styrene oxide in 42.8% e.e. Contrarily, the (VO) 2 analogue complex gives S (-) styrene oxide in 19.2% e.e. EPR investigations suggest that the catalyzed epoxidations with the Mn 2, Cr 2 and Fe 2 complexes proceed via high valent oxometal intermediates; while in the case of the (VO) 2 complex as catalyst, the epoxidation proceeds by a pathway that involves a complex of metal iodine ligand. The catalytic activities of the complexes decrease in a sequence of Mn 2>Cr 2>(VO) 2>Fe 2. 展开更多
关键词 methane monooxygenase DINUCLEAR complex mimick enzyme EPOXIDATION ASYMMETRIC CATALYSIS BIOMIMETIC catalysis.
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Dioxygen oxidation of hydrocarbons by a methane monooxygenase-like system: diiron complex-O_2-Zn/HOAc-MV^(2+)
5
作者 魏俊发 何地平 俞贤达 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 1999年第2期131-137,共7页
The activation of dioxygen and incorporation into hydrocarbons have been achieved under mild conditions by a methane monooxygenase (MMO)-like system using a dinuclear iron complex [Fe2Dhist(OAc)2] BPh4 ·3H2O as t... The activation of dioxygen and incorporation into hydrocarbons have been achieved under mild conditions by a methane monooxygenase (MMO)-like system using a dinuclear iron complex [Fe2Dhist(OAc)2] BPh4 ·3H2O as the model complex, zinc powder as the electron donor, HOAc as the proton source and methylviologen as the electron transfer agent. The results show that styrene is oxygenated predominantly to styrene oxide (1 396 mol/100 mol of the Fe2 complex), benzaldehyde (16160) and acetophenone (986), and cyclohexane to cyclohexanol (9370) and cyclo-hexanone (2670). EPR studies indicate that the hypervalent ironoxo spiecs FeⅣFeⅣ=O, derived from FeⅢFeⅢ core via reduction, O2-binding and protonation, is the active intermediate which inserts the activated oxygen atom into C=C or C-H bond giving each product. The system closely resembles MMO and its close relative hemerythrin in the aspects of reaction phenomena, EPR characteristics and product distributions. The Mn2 analog cmplex、 Fe-Zn het-erodinuclear complex and mononuclear iron complex show no catalytic activity, indicating that dinuclear iron core is in-despansable to catalytic activity. 展开更多
关键词 methane monooxygenase model SYSTEM DIIRON complex BIOMIMETIC catalysis selective oxidation DIOXYGEN activation.
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好氧甲烷氧化菌生理生态特征及其在自然湿地中的群落多样性研究进展 被引量:19
6
作者 邓永翠 车荣晓 +2 位作者 吴伊波 王艳芬 崔骁勇 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第14期4579-4591,共13页
甲烷氧化菌是一类可以利用甲烷作为唯一碳源和能源的细菌,在全球变化和整个生态系统碳循环过程中起着重要的作用。近年来,对甲烷氧化菌的生理生态特征及其在自然湿地中的群落多样性研究取得了较大进展。在分类方面,疣微菌门、NC10门及... 甲烷氧化菌是一类可以利用甲烷作为唯一碳源和能源的细菌,在全球变化和整个生态系统碳循环过程中起着重要的作用。近年来,对甲烷氧化菌的生理生态特征及其在自然湿地中的群落多样性研究取得了较大进展。在分类方面,疣微菌门、NC10门及两个丝状菌属甲烷氧化菌的发现使其分类体系得到了进一步的完善;在单加氧酶方面,发现甲烷氧化菌可以利用pM MO和sM MO两种酶进行氧化甲烷的第一步反应,Ⅱ型甲烷氧化菌中pM MO2的发现证实甲烷氧化菌可以利用这种酶氧化低浓度的甲烷;在底物利用方面,已经发现了越来越多的兼性营养型甲烷氧化菌,证实它们可以利用的底物比之前认为的更广泛,其中包括乙酸等含有碳碳键的化合物;在生存环境方面,能在不同温度、酸度和盐度的环境中生存的甲烷氧化菌不断被分离出来。全球自然湿地甲烷氧化菌群落多样性的研究目前主要集中在北半球高纬度的酸性泥炭湿地,Ⅱ型甲烷氧化菌Methylocystis、Methylocella和Methylocapsa是这类湿地主要的甲烷氧化菌类群,尤其以Methylocystis类群最为广泛,而Ⅰ型甲烷氧化菌尤其是Methylobacter在北极寒冷湿地中占优势。随着高通量测序时代的到来和新的分离技术的发展,对甲烷氧化菌的现有认识将面临更多的挑战和发展。 展开更多
关键词 甲烷氧化菌 甲烷 甲烷单加氧酶 湿地
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甲烷氧化菌及甲烷单加氧酶的研究进展 被引量:44
7
作者 韩冰 苏涛 +1 位作者 李信 邢新会 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1511-1519,共9页
甲烷氧化菌是以甲烷作为唯一碳源和能源进行同化和异化代谢的微生物,其关键酶之一是甲烷单加氧酶(MMOs),可以在氧气的作用下催化甲烷等低碳烷烃或烯烃羟基化或环氧化,甲烷氧化菌在自然界碳循环和工业生物技术中具有重要的应用价值。因此... 甲烷氧化菌是以甲烷作为唯一碳源和能源进行同化和异化代谢的微生物,其关键酶之一是甲烷单加氧酶(MMOs),可以在氧气的作用下催化甲烷等低碳烷烃或烯烃羟基化或环氧化,甲烷氧化菌在自然界碳循环和工业生物技术中具有重要的应用价值。因此,近20年来对于甲烷氧化菌和MMOs的研究一直倍受生物学家的关注。以下从现代生物技术的角度,对近年来国内外在甲烷氧化菌的分类与分布,MMOs的结构与功能、甲烷氧化菌与MMOs的基因工程等方面取得的研究成果进行了总结,全面综述了甲烷氧化菌及MMOs的应用基础研究现状,并对其今后的研究和应用方向提出了展望。 展开更多
关键词 甲烷氧化菌 甲烷单加氧酶 甲烷 分子生物学 工业生物技术
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甲烷单加氧酶的催化反应机理研究 被引量:6
8
作者 陈建波 夏春谷 +2 位作者 辛嘉英 崔俊儒 李树本 《化学进展》 SCIE CAS CSCD 2001年第5期376-381,共6页
本文就甲烷单加氧酶近年来在催化反应机理方面的最新研究成果进行了详细阐述。甲烷 C—H键的活化机理主要包括自由基回弹机理和协调的氧插入机理。运用自由基探针底物和量化计算等方法对烷烃羟基化反应机理的直接研究表明 ,目前没有一... 本文就甲烷单加氧酶近年来在催化反应机理方面的最新研究成果进行了详细阐述。甲烷 C—H键的活化机理主要包括自由基回弹机理和协调的氧插入机理。运用自由基探针底物和量化计算等方法对烷烃羟基化反应机理的直接研究表明 ,目前没有一个统一的机理来解释甲烷单加氧酶的反应过程。反应机理的类型可能取决于 MMO的来源或者其他因素。对甲烷单加氧酶的几种中间化合物的各种光谱学研究有力地推动了机理研究的发展。 展开更多
关键词 甲烷单加氧酶 反应机理 中间化合物 催化反应 分子氧 甲烷 活化机理
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甲烷生物催化氧化制甲醇──固定化细胞催化剂的制备及其催化性能的研究 被引量:10
9
作者 尉迟力 夏仕文 李树本 《催化学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第6期503-507,共5页
研究了利用无机载体(活性炭、氧化铝、分子筛等)吸附法和天然藻胶(海藻酸钙等)包埋法制备的固定化甲烷氧化细菌的催化性能及其在生物反应器中的反应.结果表明,在进行甲烷制甲醇的反应中,活性炭吸附制备的固定化细胞的操作稳定性... 研究了利用无机载体(活性炭、氧化铝、分子筛等)吸附法和天然藻胶(海藻酸钙等)包埋法制备的固定化甲烷氧化细菌的催化性能及其在生物反应器中的反应.结果表明,在进行甲烷制甲醇的反应中,活性炭吸附制备的固定化细胞的操作稳定性最好,但其初始酶活性与休止游离细胞相比损失了60%~80%;海藻酸钙包埋的固定化细胞初始酶活性高(与游离细胞相比,可保持55%~90%的酶活性),但反应中甲醇累积速率很低;而双重介质(琼脂陶瓷粒)包埋的固定化细胞有利于保持固定化细胞的酶活性,增加操作稳定性。 展开更多
关键词 固定化细胞 甲烷单加氧酶 甲烷 甲醇 生物催化
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甲烷氧化细菌Methylosinus trichosporium 3011甲醇累积条件的研究 被引量:12
10
作者 尉迟力 缪德埙 +2 位作者 李树本 索继栓 马清泉 《工业微生物》 CAS CSCD 北大核心 1995年第2期10-13,共4页
本文考察了甲烷氧化细菌Methylosi nus trichosporium 3011的生理特性及反应条件对甲烷单加氧酶和甲醇累积的影响。M.3011菌株在4℃保存30~40天内,菌株的细胞生长量和甲烷单加氧酶活性均不受影响。在生长对数期收获细胞,其甲烷单加氧... 本文考察了甲烷氧化细菌Methylosi nus trichosporium 3011的生理特性及反应条件对甲烷单加氧酶和甲醇累积的影响。M.3011菌株在4℃保存30~40天内,菌株的细胞生长量和甲烷单加氧酶活性均不受影响。在生长对数期收获细胞,其甲烷单加氧酶活力最高可达125nmol甲醇/mg(细胞干重)·min。在M.3011菌株的生长对数期后期收集细胞,将反应菌悬液浓度控制在0.15—0.3mg(细胞干重/ml,pH为6.7,反应温度为35℃,甲醇累积量可达3.1μmol甲醇/mg(细胞干重)·h。反应液的磷酸缓冲液的最适浓度为60mmol/L。 展开更多
关键词 甲烷氧化细菌 甲醇累积 甲烷单加氧酶
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甲烷单加氧酶的催化机理 被引量:6
11
作者 沈润南 尉迟力 +1 位作者 李树本 马清泉 《催化学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第4期310-314,共5页
研究了来源于Methylomonassp.GYJ3菌的甲烷单加氧酶(MMO)的催化机理.结果表明,用还原剂处理羟基化酶可得到不同还原态的羟基化酶,其中全还原态的羟基化酶具有MMO催化活性,还原酶和调节蛋白单独存在时均... 研究了来源于Methylomonassp.GYJ3菌的甲烷单加氧酶(MMO)的催化机理.结果表明,用还原剂处理羟基化酶可得到不同还原态的羟基化酶,其中全还原态的羟基化酶具有MMO催化活性,还原酶和调节蛋白单独存在时均没有MMO活性,确定了羟基化酶组分是MMO的催化活性中心.用紫外光谱法证实了NADH和还原酶之间的相互作用,即还原酶接受NADH的电子,使氧化态的FAD转化为还原态的FAD.MMO的电子传递过程为NADH→还原酶→羟基化酶.调节蛋白作用于还原酶和羟基化酶的电子传递过程能使MMO的活性提高40倍. 展开更多
关键词 甲烷单加氧酶 NADH 甲基单胞菌 还原酶 羟基化酶
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一个Ⅱ型甲烷氧化菌中甲烷单加氧酶羟基化酶的分离纯化和理化性质 被引量:4
12
作者 华绍烽 李树本 +4 位作者 辛嘉英 牛建中 夏春谷 唐威 胡宵雪 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期1007-1012,共6页
甲烷氧化细菌能够催化甲烷和一系列小分子烃类化合物的羟基化反应,对控制全球变暖起着重要作用,在工业催化和生物除污中具有非凡的潜能。应用层析方法纯化了Ⅱ型甲烷氧化细菌MethylosinustrichosporiumIMV3011中甲烷单加氧酶的羟基化酶... 甲烷氧化细菌能够催化甲烷和一系列小分子烃类化合物的羟基化反应,对控制全球变暖起着重要作用,在工业催化和生物除污中具有非凡的潜能。应用层析方法纯化了Ⅱ型甲烷氧化细菌MethylosinustrichosporiumIMV3011中甲烷单加氧酶的羟基化酶,并对其进行了表征。凝胶过滤法测定了该酶分子量为201.3kD;SDS-PAGE表明羟基化酶含有三个亚基(αβγ),分子量分别为58kD、36kD和23kD,比较两种方法证明该羟基化酶是一个同型二聚体构型(αβγ)2,总分子量为234kD。薄层等电聚焦测定该酶的等电点为5.2。酶的比活力为603.6nmol/(min.mg),活力回收为34.3%。HPLC法测定该酶的纯度在95%以上。原子吸收光谱显示每分子羟基化酶中含有3.02个Fe原子。羟基化酶的稳定性pH值为6.2~7.5,稳定性温度为低于35℃。菌株IMV3011的细胞表观构型呈现了长型、稍微弯曲的杆状形态。 展开更多
关键词 甲烷氧化细菌 甲烷单加氧酶 羟基化酶 纯化 理化性质
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甲基单胞菌整细胞催化环氧丙烷的连续生物合成 被引量:3
13
作者 辛嘉英 崔俊儒 +2 位作者 陈建波 李树本 夏春谷 《催化学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第5期457-460,共4页
利用含有甲烷单加氧酶 (MMO)的甲基单胞菌Methylomonassp .GYJ3整细胞催化丙烯环氧化制取环氧丙烷时 ,辅酶NADH的消耗和产物抑制是反应难以连续进行的主要原因 .为解决这些问题 ,通过批式反应考察了丙烯 甲烷共氧化反应合成环氧丙烷的... 利用含有甲烷单加氧酶 (MMO)的甲基单胞菌Methylomonassp .GYJ3整细胞催化丙烯环氧化制取环氧丙烷时 ,辅酶NADH的消耗和产物抑制是反应难以连续进行的主要原因 .为解决这些问题 ,通过批式反应考察了丙烯 甲烷共氧化反应合成环氧丙烷的可能性 ,发现反应气体中甲烷含量为 30 %时环氧丙烷的产量较高 .在搅拌式生物反应器中 ,通过最佳配比的混合反应气体的连续循环将产物环氧丙烷抽提出来 ,从而克服了产物抑制 .该生物反应器最初的环氧丙烷日产量为 2 6 8μmol,连续操作 12d后 ,MMO仍保留 96 展开更多
关键词 甲基单胞菌 甲烷单加氧酶 丙烯 环氧化 环氧丙烷 生物合成 甲烷 共氧化 酶催化
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甲烷单加氧酶的催化性能 被引量:5
14
作者 沈润南 李树本 +1 位作者 尉迟力 马清泉 《催化学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第3期238-242,共5页
研究了来源于Methylomonassp.GYJ3菌的甲烷单加氧酶(MMO)的催化性能.结果表明,当组成该酶的三个组分,羟基化酶、调节蛋白B和还原酶的摩尔比为1∶1.7∶2.0时,重组的MMO体系酶的比活最高,为34... 研究了来源于Methylomonassp.GYJ3菌的甲烷单加氧酶(MMO)的催化性能.结果表明,当组成该酶的三个组分,羟基化酶、调节蛋白B和还原酶的摩尔比为1∶1.7∶2.0时,重组的MMO体系酶的比活最高,为342nmol/(mg·min).当反应体系的pH在6.5~7.5时,MMO酶的活力最大.研究了纯MMO催化甲烷羟基化反应和丙烯环氧化反应的特性,以及金属离子和电子给体对MMO催化反应的影响. 展开更多
关键词 甲烷单加氧酶 甲烷利用细菌 催化性能 催化剂
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甲烷单加氧酶的化学模拟——酚氧双羧酸根桥联Fe_2(Ⅲ)和Mn_2(Ⅲ)配合物合成、表征及催化性能 被引量:7
15
作者 魏俊发 何地平 +1 位作者 俞贤达 金道森 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第4期415-422,共8页
合成表征了酚氧、双羧基桥联双组氨酸的手性双铁核配合物和双锰核配合物,研究了它们催化亚碘酸苯对烯烃的环氧化反应和对环烷烃的羟化反应.结果表明这种Fe_2(Ⅲ)和Mn_2(Ⅲ)配合物均是有效的甲烷单加氧酶(MMO)模型化合物,其中Fe_2配合物... 合成表征了酚氧、双羧基桥联双组氨酸的手性双铁核配合物和双锰核配合物,研究了它们催化亚碘酸苯对烯烃的环氧化反应和对环烷烃的羟化反应.结果表明这种Fe_2(Ⅲ)和Mn_2(Ⅲ)配合物均是有效的甲烷单加氧酶(MMO)模型化合物,其中Fe_2配合物能较好地再现MMO的某些性质,如电子光谱等.Fe_2配合物催化苯乙烯环氧化反应生成环氧苯乙烷的产率为840%(以催化剂计),且R-(+)-构型对映体过量(e.e.)达45.4%,相应的Mn_2配合物则以7080%产率给出环氧苯乙烷,R-(+)-构型对映体过量51.6%.Mn_2配合物还能够催化环己烯和环己烷的氧化反应,产物及其分布分别为环氧环己烷3880、环己烯醇603、环己烯酮189和环己醇1053、环己酮639%(以催化剂计).EPR研究表明MM=O是反应的活性中间体. 展开更多
关键词 甲烷单加氧酶 模型化合物 甲醇合成 催化剂 模拟
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外源电子给体对甲烷单加氧酶催化丙烯环氧化反应活性的影响 被引量:7
16
作者 沈润南 尉迟力 李树本 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期322-326,共5页
以丙烯氧化反应为指标研究了不同外源电子给体对甲烷细菌(Methylomonas sp.GYJ30)休止细胞催化活性的影响。结果表明甲烷、甲醇、甲醛和甲酸盐作为电子给体加入反应中,将甲烷单加氧酶催化丙烯环氧化反应活性分别提高5.3,12.7,10和12.4... 以丙烯氧化反应为指标研究了不同外源电子给体对甲烷细菌(Methylomonas sp.GYJ30)休止细胞催化活性的影响。结果表明甲烷、甲醇、甲醛和甲酸盐作为电子给体加入反应中,将甲烷单加氧酶催化丙烯环氧化反应活性分别提高5.3,12.7,10和12.4倍。以甲烷和甲醛作为外源电子给体时提高初始浓度对甲烷单加氧酶具有抑制作用;而以甲醇和甲酸盐作为电子给体时提高初始浓度对甲烷单加氧酶催化活性无明显抑制作用。研究了甲醇作为电子给体时它的代谢、环氧丙烷的积累以及催化反应活性与反应时间的关系。 展开更多
关键词 电子给体 甲烷单加氧酶 丙烯环氧化 生物技术
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甲烷单加氧酶的研究进展 被引量:3
17
作者 徐宁 辛嘉英 +2 位作者 王艳 董静 夏春谷 《生物技术通讯》 CAS 2013年第1期130-133,共4页
甲烷氧化细菌在转化甲烷制造新型燃料、单细胞蛋白和新功能酶生产、污水处理等方面有着潜在的应用前景,因此,甲烷单加氧酶作为其代谢过程中重要的酶系也受到人们的广泛关注。我们简要综述了近年来对甲烷单加氧酶的性质、结构、催化机理... 甲烷氧化细菌在转化甲烷制造新型燃料、单细胞蛋白和新功能酶生产、污水处理等方面有着潜在的应用前景,因此,甲烷单加氧酶作为其代谢过程中重要的酶系也受到人们的广泛关注。我们简要综述了近年来对甲烷单加氧酶的性质、结构、催化机理等方面的研究,特别是对颗粒性甲烷单加氧酶的相关性质进行了详细的阐述。 展开更多
关键词 甲烷单加氧酶 可溶性甲烷单加氧酶 颗粒性甲烷单加氧酶 甲烷氧化细菌
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甲烷生物催化氧化制甲醇——几种化学物质对Methylosinus trichosporium 3011甲醇累积的影响 被引量:10
18
作者 尉迟力 缪德埙 李树本 《合成化学》 CAS CSCD 1993年第4期313-319,共7页
本文报导了在 Methylosinus trichosporium 3011细胞反应液中加入一些化学物质对甲醇累积的影响。结果表明,Na^+抑制甲烷单加氧酶的活性。当 M.trichosporium 3011细胞反应液中含高浓度磷酸根时,只有很少量甲醇累积下来。EDTA 和 Na_2ED... 本文报导了在 Methylosinus trichosporium 3011细胞反应液中加入一些化学物质对甲醇累积的影响。结果表明,Na^+抑制甲烷单加氧酶的活性。当 M.trichosporium 3011细胞反应液中含高浓度磷酸根时,只有很少量甲醇累积下来。EDTA 和 Na_2EDTA 甲醇累积的促进作用小于甲酸钠或甲酸的作用。但由于 EDTA 不仅可以抑制甲醇脱氢酶的活性,而且可以螯合 Na^+,而甲酸则可使 NADH 辅酶再生。因此,反应液中含有2mM EDTA 和20mM 甲酸时甲醇累积量最高。 展开更多
关键词 甲醇累积 甲烷 甲醇 生物氧化催化
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油气田土壤DNA提取方法及油气指示菌基因定量结果的比较 被引量:3
19
作者 邵明瑞 杨旭 +2 位作者 刘和 符波 姜谦 《工业微生物》 CAS CSCD 2014年第2期57-62,共6页
采用4种提取方法对油田上方6个土壤样品微生物总基因组DNA进行提取,并比较了其纯度和浓度。利用定量PCR技术定量分析各土壤中甲烷单加氧酶基因(pmoA)和丁烷单加氧酶基因(6moX)。与DNA试剂盒法相比,玻璃珠击打法、液氮研磨法、反复冻融... 采用4种提取方法对油田上方6个土壤样品微生物总基因组DNA进行提取,并比较了其纯度和浓度。利用定量PCR技术定量分析各土壤中甲烷单加氧酶基因(pmoA)和丁烷单加氧酶基因(6moX)。与DNA试剂盒法相比,玻璃珠击打法、液氮研磨法、反复冻融法得到DNA纯度较低,需纯化才能进行后续的PCR扩增。液氮研磨法得到的DNA完整性、纯度和得率较其他提取方法均较好,尤其对于生物量较少的深层油田土壤DNA提取较为实用,成本较低。甲烷单加氧酶基因(pmoA)和丁烷单加氧酶基因(6moX)的定量PCR结果表明,液氮研磨法提取DNA样品的定量结果在气区和油区均出现一定的高值。液氮研磨法较其他方法更适合于油田土壤DNA的提取。下一步研究可以把丁烷氧化茵作为油气指示茵研究中的重点检测对象。 展开更多
关键词 DNA提取 土壤微生物 甲烷单加氧酶基因 丁烷单加氧酶基因
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甲烷单加氧酶的催化性能和活性中心结构 被引量:4
20
作者 沈润南 李树本 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1995年第5期397-403,共7页
甲烷单加氧酶是甲烷利用细菌代谢甲烷过程中的重要酶系,它能够催化烷烃羟基化和烯烃环氧化反应;还能催化降解氯代烃类,可用于环境中氯代烃类化合物污染的治理,是具有广泛应用前景的生物催化剂.甲烷单加氧酶是含有μ-氧桥双核铁催... 甲烷单加氧酶是甲烷利用细菌代谢甲烷过程中的重要酶系,它能够催化烷烃羟基化和烯烃环氧化反应;还能催化降解氯代烃类,可用于环境中氯代烃类化合物污染的治理,是具有广泛应用前景的生物催化剂.甲烷单加氧酶是含有μ-氧桥双核铁催化活性中心的蛋白,它的研究对分子氧的活化、化学催化剂的设计具有重要意义.文章介绍了甲烷单加氧酶催化性能和机理的最新研究进展. 展开更多
关键词 甲烷利用细菌 甲烷单加氧酶 催化性能 活性中心
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