瑞香狼毒和麻花秦艽乙醇提取物对3种杂草种子萌发的影响

为探究瑞香狼毒和麻花秦艽乙醇提取物对杂草种子萌发的抑制作用,本试验采用种子生物测定法,测定青海天然草地瑞香狼毒和麻花秦艽乙醇提取物及分离组分对野燕麦、旱雀麦和野芥菜的生物活性.结果表明:瑞香狼毒乙醇提取物对3种杂草种子萌发有一定的抑制作用,麻花秦艽乙醇提取物对3种杂草种子萌发表现为"低促高抑"的双重效应,而瑞香狼毒和麻花秦艽乙醇提取物的不同有机溶剂萃取相对杂草种子萌发抑制作用强弱顺序分别为旱雀麦>野芥菜>野燕麦和野芥菜>野燕麦>旱雀麦.瑞香狼毒保留时间为5.50 min组分对旱雀麦根长抑制率较高,达83.38%,对野芥菜根长抑制率为73.85%;而麻花秦艽保留时间为15.66 min组分对旱雀麦和野芥菜种子芽长和根长的抑制率较低,介于30.18%~56.68%.可见,瑞香狼毒对杂草种子萌发表现出较强的抑制作用,具有一定的开发利用价值.

瑞香狼毒根中总黄酮类化合物提取工艺的研究

以瑞香狼毒根中总黄酮类化合物为研究对象,对加热回流提取,超声辅助提取和索氏提取三种方法进行了比较,筛选出最佳提取方法为索氏提取。研究了提取温度,料液比,乙醇浓度和提取时间对提取率的影响。通过正交试验确定了最佳提取条件为料液比1∶30,乙醇浓度95%,提取时间4 h,提取温度80℃。在该条件下,瑞香狼毒根中总黄酮类化合物的提取率为1.64%。

瑞香狼毒成分抗惊厥作用的初步研究

目的:应用不同溶剂对天然植物瑞香狼毒进行提取,并对不同提取物进行抗惊厥活性的初步实验,探索其治疗癫痫的有效化学成分。方法:采用溶剂萃取法和抗癫痫活性实验,确定何种溶剂提取物抗癫痫活性比较强,并对活性较强提取物的化学成分加以分离,进行结构鉴定。结果:抗惊厥活性物质分别存在于乙醇、乙醚、丙酮和水层提取物中,其中丙酮提取物可使其抗惊厥的潜伏期由对照组的(8.6±1.9)min延长至(21.4±6.7)min;对丙酮提取物进行进一步研究,证明抗惊厥活性的有效成分为伞形花内酯,其作用可使抗惊厥的潜伏期由对照组的(8.6±1.9)min延长至(18.1±4.3)min。结论:初步实验证明瑞香狼毒具有抗惊厥作用,伞形花内酯是有效成分之一。

瑞香狼毒提取物抗实验性癫痫筛选研究

目的 对瑞香狼毒六种提取物 (依次为瑞香狼毒水、生离物、丙酮、石油醚、乙醚、乙醇提取物 )进行药效学及毒性比较研究 ,筛选出一种高效低毒的抗癫痫化合物 ,便于临床前机制探讨。方法 采用动物三种惊厥模型 ,测定瑞香狼毒六种提取物抗实验性癫痫半数有效量 (ED50 )。计算其半数致死量 (L D50 )。结果 瑞香狼毒提取物 ～ ,即丙酮、石油醚、乙醚、乙醇四种提取物对小鼠最大电休克发作实验 (MES)、戊四唑惊厥实验(MET)和电刺激大鼠皮层惊厥阈值 (TL S)模型均具有较强的对抗作用。而其中丙酮提取物毒性较低 ,治疗指数高达 14 .9。结论 瑞香狼毒丙酮提取物是一种抗惊厥作用较强而毒性小的有希望的抗癫痫化合物。

瑞香狼毒丙酮提取物抗惊厥作用研究

目的 研究瑞香狼毒丙酮提取物 (AESC)抗惊厥作用。方法 采用五种动物惊厥模型 ,测定AESC时效关系 ,抗惊厥效应 ,并分析量效关系。结果 AESC能提高电刺激大鼠皮层惊厥阈值 ,384mg/kg灌胃和 174mg/kg腹腔注射 0 5～ 1h起效 ,2～ 3h达高峰 ,作用持续 7～ 10d ;而丙戊酸镁 15 0mg/kg腹腔注射作用虽强 ,但其维持时间仅 8h。AESC对小鼠听源性惊厥实验 (AS)、最大电休克惊厥实验 (MES)、戊四唑惊厥实验 (MET)均具有剂量依赖性对抗作用 ,其抗AS、MES、MET的ED50 分别为 10 3 0 5、12 3 83和 132 0 1mg/kg。AESC亦能拮抗大鼠海人藻酸惊厥 ,明显减少湿狗样颤抖 (WDS) (P <0 0 5 ) ,有效延长惊厥潜伏期 (P <0 0 5 )。结论 AESC对多种动物惊厥模型有效 ,是一种作用持续时间长 ,抗痫谱广的抗癫痫物质 ,其作用性质与丙戊酸镁相似。

瑞香狼毒超临界CO_2萃取物的杀螨毒力及机理初探

为了测定瑞香狼毒超临界CO2萃取物对朱砂叶螨的触杀毒力,并了解其作用机理,笔者采用玻片浸渍法测定瑞香狼毒超临界CO2萃取物(SCE)对朱砂叶螨的触杀毒力,观察其对朱砂叶螨的致毒症状;结果表明:SCE对朱砂叶螨24h的触杀LC50值为2.411mg/mL;中毒试螨表现出类似神经毒剂的致毒症状,如兴奋、痉挛等。随后测定了SCE对朱砂叶螨神经系统靶标酶(乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶)活性的影响。结果表明,SCE能够显著抑制试螨乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性;据此推测,SCE对朱砂叶螨可能具有神经毒性。

瑞香狼毒水提醇沉物对H22荷瘤小鼠抑瘤作用研究

目的采用水提醇沉工艺提取瑞香狼毒后获得上清液及沉淀物,分别探索两者对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用。方法将H22细胞浓度调整至5×106/ml,接种至小鼠右侧腋窝皮下,0.2 ml/只,建立荷瘤模型,24 h后将小鼠随机分为8组,分别为模型组,阳性对照组,上清液高、中、低剂量组(20、10、5 g/kg)及沉淀物高、中、低剂量组(20、10、5 g/kg),灌胃给药,统计各组动物的瘤质量、抑瘤率和体质量增长值。结果上清液各剂量组抑瘤作用随着给药量的降低而增高,上清液高、中、低剂量组抑瘤率分别为26%、61%、66%,上清液中、低剂量组动物瘤质量与模型组相比较显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);上清物各剂量组动物体质量增长值与模型组相比较差异无统计学意义(P>0.05)。沉淀物各剂量组抑瘤作用随着给药量的降低而减弱,沉淀物高、中、低剂量组抑瘤率分别为41%,26%,25%,与模型组相比较差异无统计学意义(P>0.05);沉淀物各剂量组动物体质量增长值明显下降,与模型组相比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论上清液和沉淀物中成分有所不同,上清液中抑瘤有效成分高,抑瘤效果好,沉淀物中也含有一定的抑癌有效成分,但其同时抑制动物体质量增长。

微波辅助提取瑞香狼毒总黄酮工艺条件的优化

目的:优化微波辅助提取瑞香狼毒总黄酮的工艺条件。方法:采用正交实验方法,考察料液比、溶剂乙醇浓度、微波功率、提取时间对总黄酮得率的影响,确定微波辅助提取瑞香狼毒总黄酮的最佳工艺条件。结果:微波辅助提取瑞香狼毒总黄酮的最佳条件为料液比1:25、乙醇体积分数90%、微波功率900W、提取时间60s,总黄酮平均得率为33.184mg/g。结论:微波辅助法提取瑞香狼毒总黄酮简单、易行,且快速、节能,值得推广应用。

瑞香狼毒总黄酮超临界CO_2萃取工艺的优化

探讨超临界CO2萃取瑞香狼毒(Stellera chamaejasme L.)中总黄酮的优化工艺条件,采用响应曲面法考察萃取压力、萃取温度、乙醇用量对总黄酮收率的影响。结果表明,优化的萃取条件为萃取压力27 MPa、萃取温度52℃、乙醇用量3 mL/g,此条件下总黄酮收率为1.412%。

瑞香狼毒水提取物对人膀胱癌T24细胞Survivin表达的影响

目的研究瑞香狼毒水提取物对人膀胱癌T24细胞的抑制作用及生存素(Survivin)表达的影响。方法用不同浓度的瑞香狼毒水提取物处理T24细胞,分别用MTT法检测膀胱癌细胞抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫细胞化学检测药物作用后细胞中Survivin蛋白的表达。结果瑞香狼毒水提取物干预细胞后,①膀胱癌T24细胞增殖受到抑制,抑制效应呈剂量依赖性并随时间的延长逐渐升高;②瑞香狼毒水提取物可以促进膀胱癌T24细胞的凋亡;③膀胱癌T24细胞中的Survivin蛋白表达下降。结论瑞香狼毒水提取物可以通过下调Survivin蛋白的表达从而抑制膀胱癌T24细胞增殖,促进其凋亡,并具有浓度和时间依赖性。

瑞香狼毒药材毒性成分研究初探

目的建立瑞香狼毒药材蛋白质部位提取分离的方法以及分子量鉴定的方法,确定瑞香狼毒的毒性来源。方法饱和硫酸铵盐析法沉淀总蛋白;SephadexG-150、SephadexG-100、SephadexG-50凝胶梯度分离不同分子量的蛋白;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴别蛋白质的分子量。结果提取分离得到5个不同分子量的蛋白质,通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定它们的分子量依次为:14.4、35.0、28.0、23.0、94.0kDa。结论此方法可作为瑞香狼毒药材中蛋白质提取分离方法和分子量鉴定方法,为瑞香狼毒蛋白质部位的研究提供了方法依据,并确定了瑞香狼毒的毒性来源,通过确定分离出的蛋白质的分子量来确定蛋白质毒性位点。

不同干燥方式对瑞香狼毒总黄酮提取及抑菌活性的影响

以瑞香狼毒为原料,通过烘干、红外干燥及微波干燥3种方式将瑞香狼毒干燥至恒重,考察不同的干燥方式对瑞香狼毒总黄酮含量及抑菌活性的影响,结果表明,通过红外干燥处理提取的黄酮类化合物含量最高,烘干处理次之,而通过微波干燥方式前处理提取的黄酮类化合物含量最低。红外干燥处理后提取的黄酮类化合物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制效果强于其他2种方式,可能与红外干燥处理后得到的黄酮类化合物含量较高有关。

瑞香狼毒叶提取物对皮肤石膏样毛癣菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用

目的研究瑞香狼毒叶提取物对常见皮肤表面菌的抑菌活性。方法采用药敏纸片法和二倍稀释法测定瑞香狼毒叶提取物对石膏样毛癣菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用。结果瑞香狼毒叶95%乙醇提取物浓度为100 mg·mL-1时对金黄色葡萄球菌抑菌圈直径达12.8 mm,对石膏样毛癣菌抑菌圈直径达12.0 mm,二氯甲烷萃取物对金黄色葡萄球菌最低抑制浓度(MIC)为0.25 mg·mL-1,对石膏样毛癣菌MIC为0.50 mg·mL-1。结论瑞香狼毒叶提取物对石膏样毛癣菌和金黄色葡萄球菌均有抑制活性,其中对金黄色葡萄球菌抑制活性较强。

瑞香狼毒化学成分超声提取

采用系统溶剂提取法,对瑞香狼毒根化学成分进行超声提取,确定实验提取溶剂为工业乙醇(95%);以工业乙醇为溶剂,在料液比(W/V=1/4)和提取时间(30min/次)确定的情况下,提取温度40℃,提取3次时,其超声提取总提取率最高,为12.4%。

分子量小于1万的瑞香狼毒醇提部位抗肿瘤活性

目的研究瑞香狼毒小于 10 000分子量醇提部位 (SCES) 抗肿瘤活性.方法 SCES以 0.625～ 5.0 g@ L- 1浓度处理 BEL- 7402、 SGC- 7901和 L- 1210细胞,检测细胞 MTT转化率. SCES以 2.5～ 10.0 g@ kg- 1@ d- 1× 10 d 剂量腹腔注射( ip) S180、 H22模型小鼠;以 CTX为阳性对照,计算抑瘤率.结果 SCES 0.625～ 5.0 g@ L- 1对 BEL- 7402、 SGC- 7901和 L- 1210细胞 MTT formazan的形成均有显著的抑制作用;抑制率分别为: 23.31 %～ 86.47 %, 11.43 %～ 88.89 %和 40.52 %～ 84.18 %. SCES 2.5, 5.0, 10.0 g@ kg- 1对移植肿瘤 S180抑制率分别为( 39.69± 19.34)%,( 44.42± 12.05)%,( 64.09± 12.45)%;对移植肿瘤 H22抑制率分别为( 24.48± 20.74)%,( 35.42± 16.05)%,( 54.25± 10.73)%; CTX对移植肿瘤 S180、 H22抑制率分别为( 63.37± 13.74)%,( 50.09± 11.58)%.结论 SCES对体外培养的肿瘤细胞及小鼠移植肿瘤的增殖均有明显抑制作用.

瑞香狼毒丙酮提取物抗惊厥谱的实验研究

目的:研究瑞香狼毒丙酮提取物(compounds of extracted by pyruvate from stellera chamaejasme L,CEPSC)抗惊厥作用。方法:采用动物5种惊厥模型,测定 CEPSC 时效关系,抗惊厥效应,并分析量效关系。结果:CEPSC 能提高电刺激大鼠大脑皮层惊厥阈值(TLS),384mg/kg 灌胃给药和174mg/kg 腹腔注射给药0.5～1h 起效,2～3h 达高峰,作用持续7～10天;而丙戊酸镁(VPA)150mg/kg 腹腔注射给药作用虽强,但其维持时间仅8h。CEPSC 对小鼠听源性惊厥(AS)、最大电休克惊厥(MES)、戊四唑惊厥(MS)均具有剂量依赖性对抗作用,其抗 AS、MES、ME 半数有效量(ED_(50))分别为103.05mg/kg,123.83mg/kg 和132.01mg/kg。CEPSC 亦能拮抗大鼠海人藻酸(KA)惊厥,明显减少湿狗样颤抖(WDS)频率(P<0.05),有效延长惊厥潜伏期(P<0.05)。结论:CEPSC 对动物多种惊厥模型有效,是一种作用持续时间长,抗惊厥谱广的具有开发价值的抗癫痫物质,其作用性质与 VPA 相似。

瑞香狼毒根乙醇提取物石油醚萃取相杀螨微乳剂的研制

【目的】为了增强瑞香狼毒根乙醇提取物石油醚萃取相的杀螨活性,开发相应的植物源杀螨微乳剂。【方法】通过调控溶剂、乳化剂、防冻剂、稳定剂的种类、含量配制微乳剂,利用稳定性、澄清度来控制其质量,采用玻片浸渍法对比制剂前后的杀螨活性,采用田间药效试验方法测定微乳剂的杀螨效果。【结果】瑞香狼毒根乙醇提取物石油醚萃取相微乳剂的最佳配方为(体积比):瑞香狼毒根乙醇提取物石油醚萃取相15%、十二烷基苯磺酸钙18%、二甲基亚砜1%、60%的乙醇2%、稳定剂1%、防冻剂3%、自来水补足至100%;在-4~60℃、pH值6.0~8.5,微乳剂稳定性良好;石油醚萃取相微乳剂LC50为1.25mg/mL,优于石油醚相萃取物(LC50为2.51mg/mL);微乳剂在施药1次,1、3、5、7d观察后,大田药效试验显示施药后7d,防治效果高达70%。【结论】瑞香狼毒根乙醇提取物石油醚萃取相微乳剂有望成为一种新的植物源杀螨剂。

瑞香狼毒根部提取物对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡作用的影响

目的:探讨瑞香狼毒根部提取物(SCE)对人肺腺癌A549细胞作用和潜在机制。方法:细胞划痕和MTT用以评价和筛选SCE对A549细胞抑制的最佳浓度;激光共聚焦和荧光显微镜分别观察不同浓度SCE作用于A549后线粒体膜电位和染色质变化;Western blot检测p53、MDM2蛋白表达。结果:SCE药物组A549细胞较空白对照组在24、48 h迁移率均显著降低(P<0.01);在1~20μg/mL范围内,随着药物浓度的增加,A549细胞抑制率增强;与空白对照组比较,SCE低、中、高剂量组绿色荧光细胞占比逐渐增加;随着SCE浓度升高,A549细胞荧光增强至白色,染色质凋亡呈碎块状;与空白对照组比较,SCE低、中、高浓度组p53蛋白表达显著上升(P<0.05);与空白对照组和SCE低浓度组比较,SCE中、高浓度组MDM2蛋白表达显著下降(P<0.01)。结论:SCE能够显著抑制肺腺癌A549细胞增殖,其作用机制可能与作用于线粒体膜电位和p53/MDM2负反馈通路有关。

瑞香狼毒甲醇提取物抗瘤机理研究

目的 研究瑞香狼毒甲醇提取物的抗瘤机理。方法 用不同剂量的瑞香狼毒甲醇提取物 (简称醇提物 ) ,观察其体内对荷瘤鼠和所荷肿瘤生长的作用 ;MTT法研究其体内对荷瘤鼠脾细胞转化及NK活性 ,体外对正常鼠脾细胞生长、转化和NK活性以及对 3株肿瘤细胞增殖的影响 ;流式细胞术和透射电镜检测其体外对K5 6 2的细胞周期和凋亡及p5 3、bcl 2和c myc基因表达的影响 ;台盼蓝拒染法检测其体外对K5 6 2增殖曲线的影响。结果 体内 ,每天 5 μg kg醇提物可抑制肿瘤生长 ,提高荷瘤鼠免疫功能。体外 ,0 .1～ 10 μg ml醇提物可刺激脾细胞增殖和协同最适量和亚适量ConA刺激脾细胞转化 ,0 .1、1μg ml醇提物可提高脾细胞NK杀伤活性 ,0 .1～ 10 μg ml醇提物对K5 6 2、S180和YAC 1的增殖均有抑制作用 ,K5 6 2最为敏感。 0 .5 μg ml醇提物作用的K5 6 2 ,处于G0 G1 期的细胞和凋亡细胞显著增加 ,p5 3基因表达显著增加 ,bcl 2和c myc基因表达显著下降。K5 6 2在 0 .5 μg ml醇提物作用2 4h后洗去或不洗去培养 9d ,细胞虽仍存活 ,但密度却不增加。结论 醇提物在一定剂量范围内可抑制肿瘤细胞生长 ,提高荷瘤鼠免疫功能。抗瘤机理与其可刺激脾细胞增殖 ,协同ConA刺激脾细胞转化和提高脾细胞NK杀伤活性及阻滞肿瘤细胞周期 ,?

瑞香狼毒活性成分对东亚飞蝗的生物活性和病理学研究

采用活体生物试验方法进行活性跟踪,选取瑞香狼毒对东亚飞蝗毒杀活性最高的石油醚萃取部分,测定瑞香狼毒活性成分对东亚飞蝗的生物活性及其中肠消化道的组织病理学影响.结果表明:瑞香狼毒活性成分对东亚飞蝗具有拒食、触杀、胃毒活性及生长发育抑制作用,其中拒食活性最为显著,24h、48h拒食中浓度(AFC50)分别为317.63、113.20mg/L;96h触杀致死中浓度(LC50)、胃毒致死中浓度(LC50)分别为548.21mg/L、2486.19mg/L;生长发育抑制作用也十分明显,48h生长发育抑制中浓度(EC50)为39.75mg/L.东亚飞蝗中肠组织病理学变化研究结果表明,瑞香狼毒萃取物可破坏东亚飞蝗中肠的正常组织结构,引起其中肠柱状上皮细胞脱落坏死.