79株临床分离MRSA的SCCmec基因分型及耐药性分析

目的:了解天津某医院临床分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药状况及葡萄球菌盒染色体mec(SCCmec)类型。方法:应用聚合酶链式反应(PCR)技术检测mecA基因,多重PCR方法对MRSA进行SCCmec基因分型。应用微量肉汤法及K-B纸片扩散法测试MRSA对青霉素、苯唑西林、氨苄西林、环丙沙星、莫西沙星、头孢唑林、氯霉素、林可霉素、庆大霉素、头孢曲松、红霉素、利福平、盐酸四环素、万古霉素、替考拉宁、复方磺胺甲恶唑、利奈唑胺、替加环素18种抗生素药物敏感性。大环内酯、林可霉素、链阳霉素B类抗生素诱导耐药的检测采用克林霉素-红霉素双纸片诱导试验(D试验)。结果:SCCmec分型显示79株受试MRSA均为SCCmecⅢ型菌株。79株MRSA临床株对包括苯唑西林在内的多种抗生素耐药,对氯霉素、复方磺胺甲唑耐药率相对较低,分别为3.80%、10.13%,对糖肽类抗生素和利奈唑胺、替加环素均敏感。7株红霉素耐药、林可霉素敏感MRSAD试验阳性。结论:天津某医院临床分离MRSASCCmec基因型均为Ⅲ型,且具有多重耐药的特征,红霉素耐药、林可霉素敏感株存在诱导耐药现象。

耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌红霉素耐药erm基因检测

目的 探讨耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌 (MRCNS)erm基因的存在状况。 方法 应用兼并引物扩增MRCNS菌的erm基因。 结果 5 5株MRCNS菌中有 4 5株检出erm基因。 结论 MRCNS菌获得erm基因的红霉素耐药率为 81.8%。

吸毒人员凝固酶阴性葡萄球菌的携带及耐药性

目的掌握广州市美沙酮门诊吸毒人员凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCoNS)的携带情况,并分析MRCoNS菌株的耐药情况。方法对广州市3个美沙酮门诊353名吸毒人员鼻腔分离出的MRCoNS菌株进行药敏试验和耐药基因检测。结果 353名吸毒人员CoNS携带率为42. 78%,MRCoNS携带率为29. 46%。MRCoNS对青霉素、头孢西丁、红霉素、复方新诺明、克林霉素、莫西沙星、四环素的耐药率较高,主要携带bla Z、msr A、lin A、erm C。MRCoNS菌株的多重耐药率高达65. 18%,而MSCo NS的多重耐药率不仅29. 17%,MRCo NS多重耐药风险是MSCoNS(甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌)的4. 55倍。结论广州市吸毒人群MRCoNS携带率和多药耐药率均偏高,需要加强该人群的卫生防护工作。

耐甲氧西林血浆凝固酶阴性葡萄球菌的检测

从３０株血浆凝固酶阴性的葡萄球菌中分离１３株耐甲氧西林血浆凝固酶阴性葡萄球菌（Ｍｅｔｈｉｃｉｌｉｎ－ＲｅｓｉｓｔａｎｔＣｏａｇｕｌａｓｅ－ＮｅｇａｔｉｖｅＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉＭＲ－ＣＮＳ）。ＭＲ－ＣＮＳ占ＣＮＳ分离率的４３．３％（１３／３０）。３０株ＣＮＳ对万古霉素全部敏感，Ｏｘａｃｉｌｉｎ的ＭＩＣ值≥８μｇ／ｍｌ的菌株同时耐１５种抗生素的９—１３种，Ｏｘａｃｉｌｉｎ的ＭＩＣ值≤２μｇ／ｍｌ的菌种只对１—５种抗生素耐药。由于ＭＲ－ＣＮＳ的分离率高，而且具有复合耐药性，所以我们要高度重视ＭＲ－ＣＮＳ引起的感染。

儿童肺炎链球菌分离株青霉素、红霉素耐药性与耐药相关基因研究

目的了解苏州地区儿童肺炎链球菌(Streptococcuspneumoniae,Sp)临床分离株青霉素、红霉素耐药的状况。方法对呼吸道感染患儿痰标本中分离到的26株Sp进行青霉素、头孢呋辛、头孢曲松、头孢噻肟、红霉素E test药敏试验,和与青霉素、红霉素耐药相关的pbp2B、ermB、ermA/B、mefA基因PCR检测,测得pbp2B基因产物进行测序并与SpR6株(青霉素敏感株,登录号:NC003098)序列比较。结果(1)pbp2B基因突变15株(58%),均为点突变,突变类型有A型11株(73%)、B型2株(13%)、C型1株(7%)、D型1株(7%);(2)11株无突变菌中青霉素、头孢呋辛、头孢曲松、头孢噻肟敏感株分别为9株(82%)、10株(91%)、11株(100%)、11株(100%);15株突变菌中青霉素、头孢呋辛、头孢曲松、头孢噻肟不敏感株分别为13株(87%)、11株(73%)、1株(7%)、1株(7%);11株A型突变株对青霉素均不敏感,10株对二代头孢不敏感;(3)ermB基因阳性9株(35%)、ermA/B基因阳性16株(62%)、mefA基因阳性7株(27%)、erm或(和)mef基因阳性21株(81%);(4)erm或(和)mef基因阳性株红霉素最低抑菌浓度为2～>256mg/L。结论pbp2B基因突变是本地区Sp青霉素耐药机制的主要遗传学基础之一;突变株中,A类突变率最高,表现对青霉素、二代头孢不敏感;ermA、ermB和mefA3种红霉素耐药基因单独或共同表达?

6类抗生素耐药基因在耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌中的分布及分析

目的了解6类抗生素耐药基因在耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)中的分布情况,为抗生素的合理使用及感染控制提供依据。方法应用K-B纸片扩散法对6种抗生素进行药敏试验,聚合酶链反应(PCR)对6类耐药基因进行检测。结果 MRCNS对氨苄西林、红霉素、四环素、庆大霉素和莫匹罗星的耐药率分别为100%、87.50%、30.21%、61.46%和27.08%,未检测出对万古霉素的耐药菌株;mecA、ermB、ermC、msrA、tetM、tetK、aac(6’)/aph(2")、aph(3’)-III和mupA耐药基因的阳性检出率分别为100.0%、10.42%、77.08%、46.86%、5.21%、2.08%、75.00%、39.58%和25.00%,未检测出ermA、ant(6’)-I、vanA和vanB耐药基因。结论 MRCNS能同时携带多种抗生素耐药基因,为多重耐药菌。

唐山地区医院儿科患者感染耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌耐药基因检测及耐药性分析

目的检测医院儿科患者感染耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)耐药基因,并分析其分布情况及与耐药性的关系,为抗MRCNS感染治疗及耐药性控制提供指导。方法收集儿科住院患者相关临床标本,分离MRCNS,经鉴定后进行耐药性分析;制作DNA模板液并设计引物,采用PCR扩增耐药基因,分析其分布情况。结果共分离出116株耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌,药敏试验显示分离株MRCNS对青霉素、头孢唑林、头孢曲松、红霉素、四环素、庆大霉素、妥布霉素的耐药率分别为94.84%、89.66%、74.13%、86.21%、40.52%、69.82%和82.76%;PCR扩增mecA基因大小为393bp,ermA基因为610bp,ermB基因为142bp,ermC基因为520bp,tetM基因为501bp,shv基因为786bp,oxa基因为822bp、aac(6′)/aph(2")基因为220bp、aph(3′)-III基因为292bp,ant(6′)-I基因为597bp,阳性率分别为97.41%、46.55%、37.93%、29.31%、79.31%、4.31%、4.31%、78.45%、42.24%和25.00%。结论医院儿科患者感染MRCNS携带耐药基因与耐药性关系密切,多数菌株对氨基糖苷类、四环素类、红霉素类以及β-内酰胺类抗菌药物都产生了不同程度的耐药性。

上海地区儿童化脓性链球菌的红霉素耐药基因研究

目的了解上海地区化脓性链球菌对红霉素的耐药情况及耐药基因谱的特点。方法2004年11月至2006年6月经复旦大学附属儿科医院传染病门诊诊断为猩红热的患儿，其咽拭子培养分离获得100株化脓性链球菌。应用PCR及序列分析法检测红霉素耐药基因mefA、ermA、ermB在该批菌株中的分布规律及其与红霉素耐药性的关系。结果上海地区化脓性链球菌的红霉素耐药率为98％，克林霉素耐药率为95％，两者耐药性的一致率为97％。100株菌株中含ermB基因的化脓性链球菌94株，占所有菌株的94％，对红霉素耐药率为100％；含mefA基因的化脓性链球菌16株，占所有菌株的16％，对红霉素耐药率为100％；100株菌株中未发现ermA基因。5株菌株未发现ermB基因及mefA基因，其中2株对红霉素敏感，3株对红霉素耐药。mefA基因单独阳性的菌株仅占1％。结论上海地区化脓性链球菌对红霉素普遍具有较高耐药率，且与克林霉素存在较严重的交叉耐药。ermB基因是决定上海地区化脓性链球菌对红霉素耐药的重要基因。

外科住院患者感染耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的耐药基因检测及耐药性分析

目的对南京市外科住院患者感染的耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的耐药相关基因进行检测,以更好地控制病原菌耐药性,减少外科感染。方法从南京市多家医院外科住院患者各类临床标本分离耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌70株,经纯培养获单菌落后进行鉴定,并进行药敏试验,然后对耐药基因进行PCR测序,对PCR扩增产物进行电泳检测并记录。结果耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌对于头孢噻肟和红霉素100%耐药,对万古霉素耐药率为0,对其他抗菌药物的耐药率大小依次为:左氧氟沙星>诺氟沙星>氨苄西林>妥布霉素>环丙沙星>克林霉素>头孢曲松>庆大霉素>四环素>利福平。PCR检测耐药基因,3株只携带mecA 1种耐药基因。15株携带2种耐药基因,分别为:ermA+mecA、aac(6′)/aph(2′′)+mecA和aph(3′)-III+mecA和tetM+mecA。29株携带3种耐药基因,携带方式分别为:ermA+aac(6′)/aph(2′′)+mecA、aph(3′)-III+ermA+mecA、ermA+tetM+mecA、aac(6′)/aph(2′′)+aph(3′)-III+mecA、aac(6′)/aph(2′′)+tetM+mecA和tetM+aph(3′)-III+mecA。20株携带4种耐药基因,携带方式分别为:aac(6′)/aph(2′′)+tetM+ermA+mecA、aph(3′)-III+tetM+aac(6′)/aph(2′′)+mecA、aph(3′)-III+tetM+ermA+mecA和aph(3′)-III+aac(6′)/aph(2′′)+ermA+mecA。有3株携带5种耐药基因,即ermA+aph(3′)-III+tetM+aac(6′)/aph(2′′)+mecA。结论耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌对常用抗菌药物的耐药性普遍较高,5种耐药基因在菌株中出现的频率不同,但所有病原菌都存在mecA基因,因而该菌的耐药性可能与mecA基因有关。