清肠温中方含药血清调控NLRP6途径对Caco-2/HT29-MTX细胞共培养模型MUC2表达的影响

目的:研究清肠温中方含药血清调控NLRP6途径影响Caco-2/HT29-MTX细胞共培养模型MUC2分泌的作用机制。方法:使用SD大鼠制备清肠温中方含药血清;Caco-2/HT29-MTX细胞共培养构建单层肠上皮细胞模型;IL-1β刺激共培养细胞模拟体外肠道炎症模型;si-NLRP6质粒转染干扰NLRP6,研究清肠温中方作用机制。qPCR检测NLRP6、IL-18的mRNA表达水平;Western blot检测NLRP6、IL-18蛋白表达水平;免疫荧光染色观察MUC2表达。结果:正常培养的Caco-2/HT29-MTX细胞中,NLRP6敲除后,MUC2表达明显减少。清肠温中方含药血清增加IL-1β诱导的细胞炎症模型中NLRP6和IL-18 mRNA及蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01),且一定程度上抵消si-NLRP6的抑制作用。与模型组相比,清肠温中方含药血清干预后,促进MUC2蛋白表达恢复,si-NLRP6后一定程度上削弱了清肠温中方的作用。结论:清肠温中方含药血清通过调控NLRP6信号途径,进一步调节MUC2分泌,修复UC黏液屏障损伤。

大剂量MTX联合化疗治疗淋巴系统恶性肿瘤的临床和药动学研究

目的 :探讨大剂量甲氨蝶呤 (HD -MTX 3～ 4g/m2 )连续 2 4小时静脉输注 ,第 3 6小时CF解救联合其它化疗药物治疗淋巴系统恶性肿瘤的临床耐受性和药动学研究。方法 :分别对 11例淋巴系统恶性肿瘤进行共3 0个疗程大剂量MTX 3～ 4g/m2 连续 2 4小时静脉输注 ,第 3 6小时CF解救 ,同时行血药浓度监测。其中 2 2个疗程HD MTX在G CSF支持与其它化疗药物联合应用。结果 :一般出现 2～ 3级中性粒细胞减少 ,1～ 3级的粘膜毒性。其中 10个疗程伴有一过性转氨酶轻度升高 ,无严重毒副反应发生。 2 4小时血浆MTX浓度为 2× 10 - 4 ～ 5×10 - 5mol/L、48小时为 5× 10 - 6～ 5× 10 - 7mol/L、72小时 2× 10 - 7～ 5× 10 - 8mol/L。结论 :在血药浓度监测下 ,大剂量MTX 3～ 4g/m2 连续 2 4小时静脉输注 ,第 3

自主研制四极杆-线形离子阱质谱仪测定血清中甲氨蝶呤

本研究基于自主研制的QLIT-6610MD液相色谱-四极杆-线形离子阱-质谱联用仪,建立了准确测量血清中甲氨蝶呤的同位素稀释质谱法。采用甲醇沉淀血清样品的蛋白后测定上清液。通过基质匹配标准曲线定量,在10~5000μg/L浓度范围内,甲氨蝶呤的线性系数R^(2)>0.9990,定量限为10μg/L,质控品精密度优于6.94%,血清样本添加回收率为86.39%~97.84%,变异系数(CV)≤8.04%。应用QLIT-6610MD与AB QTRAP 6500+液相色谱-质谱联用仪同时测定70例临床血清样本,并采用Pearson系数与BLand-ALtman法进行比较。结果表明,2台仪器所测结果一致,QLIT-6610MD可达到三重四极杆质谱仪定量测定血清中甲氨蝶呤的水平,能够满足临床诊断需求,为临床质谱分析提供了一种新的国产仪器选择。此外,本研究还初步探讨了多级碎裂技术(MSn)测定血清中甲氨蝶呤的可能性,为后续研究奠定基础。

阿维A与MTX治疗泛发性脓疱型银屑病的疗效比较

目的 比较阿维A与MTX治疗泛发性脓疱型银屑病的疗效。方法 回顾调查我科自 1995年～ 2 0 0 1年的泛发性脓疱型银屑病的住院病历 ,其中糖皮质激素合用MTX治疗的病例 2 0例 ,糖皮质激素合用阿维A治疗的病例10例。用t检验比较发热、红斑和脓疱的平均消退时间 ,χ2 检验随访 1个月的复发率。结果 发热、脓疱的平均消退时间差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,红斑平均消退时间差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,阿维A组优于MTX组 ;两组复发率比较差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 在泛发性脓疱型银屑病的系统治疗中 ,糖皮质激素合用阿维A的疗效优于糖皮质激素合用MTX的疗效。

应用差异PCR技术研究MTX耐药细胞的遗传学改变

基因扩增是介导细胞产生耐药性的一种普遍性机制。为探讨MTX耐药的小鼠细胞中与耐药机制形成有关的分子遗传学背景 ,应用差异PCR技术 ,检测了MTX耐药细胞中DHFR基因的扩增和过表达 ,并对c myc及p5 3基因状态与dhfr扩增之间的相关性进行了探讨。结果表明 :dhfr的扩增和过表达直接介导细胞耐药。未检测到c myc的扩增和p5 3拷贝数的变化 ;也未检测到c mycmRNA水平的改变 ,但p5 3基因的mRNA水平明显升高 ,显示p5 3可正常表达。这些结果表明dhfr的扩增与这两个候选基因的状态无关 。

介导多药耐药的ABC转运蛋白超家族与MTX耐药性的关系研究

细胞耐药性的产生是导致肿瘤化疗失败的重要因素,尤其是多药耐药是目前研究的一个重点。ABC转运蛋白超家族成员介导药物的外排,与多药耐药密切相关。为了解该家族成员与MTX耐药的相关性,进一步探讨MTX的耐药机制,应用SuperArray基因芯片对MTX耐药前后编码ABC转运蛋白超家族成员的mdr1、mrp1、mrp2、mrp3、mrp5、mrp6和abcg27个基因进行检测,并对MRP1和MRP5蛋白表达进行了验证。结果显示,与MTX耐药性相关的ABC转运蛋白超家族成员主要为多药耐药相关蛋白,其中mrp1和mrp5呈现高表达,并且,在MTX抗性细胞中,MRP5在mRNA及蛋白水平的表达均明显增强,提示其在MTX耐药机制中起重要作用,可能为潜在的药物作用靶点。

腹腔镜下输卵管开窗取胚术联合局部注射MTX预防持续性异位妊娠的临床探讨

目的探讨输卵管妊娠行腹腔镜保守手术中使用甲氨喋呤(MTX)预防持续性异位妊娠的临床价值。方法对68例确诊为输卵管壶腹部妊娠的患者行腹腔镜开窗取胚术,将患者随机分为2组实验组(n=34)术中局部应用MTX20mg,对照组(n=34)局部注射等容量的生理盐水。于术前和术后d1、d4、d7、d10、d14查β-HCG及观察临床表现。结果2组术前一般情况和血β-HCG水平差异无显著性,但术后d1差异有显著性(P<0.05),术后d4、d7(P<0.01)和d10、d14(P<0.00)差异有极显著性。实验组无术后持续性异位妊娠(PEP),对照组出现6例术后PEP,二者差异有显著性(P<0.05)。结论在异位妊娠腹腔镜开窗取胚术中局部应用MTX可预防术后PEP的发生。

预防性应用MTX在腹腔镜保守治疗异位妊娠中的作用探讨

目的 探讨预防性应用MTX (甲氨碟呤 )在腹腔镜保守治疗异位妊娠中的作用。方法 回顾性分析我院 1 0年来施行腹腔镜保守治疗未破裂输卵管妊娠患者 4 5 8例 ,其中有 2 1 2例在术后的 2 4h内应用MTX5 0mg m2 肌肉注射一次 ,其他 2 4 6例患者中有 2 7例出现相应的症状后才应用。所有的患者均随访血 β hCG的变化 (术后第 1、 3、 7、 1 2天 )及相关并发症的出现。术后没避孕要求生育者 ,随访其再次妊娠情况。结果 ①术后 2 4h内应用MTX者 ,血 β hCG的值下降迅速 ,发生持续性异位妊娠者 4例 ,其中 3例手术。②没有在 2 4h内应用者 ,血 β hCG下降缓慢 ,其中有 2 7例发生了持续性异位妊娠 ,不同时间应用MTX后仍有 7例手术。③两组再次妊娠者中 ,宫内妊娠和异位妊娠的发生率相近。结论 术后 2 4h内预防性应用MTX者与没有在 2 4h内应用者相比 ,血 β hCG值下降迅速 ,术后发生持续性异位妊娠者数量少 。

CsA,MTX,MMF联合ATG预防非亲缘供者外周血造血干细胞移植后GVHD的疗效观察

本研究旨在探讨非亲缘供者外周血造血干细胞移植(URD-PBSCT)后的移植物抗宿主病(GVHD)预防方法、疗效及其对患者生存、复发的影响。对我院HLA高分辨相合或1个位点不合URD-PBSCT患者33例的临床资料进行总结,主要比较了不同GVHD防治方法下的GVHD发生率、疾病的复发率及患者的生存率。GVHD防治方法:环孢素A(CsA)+短疗程甲氨喋呤(MTX)+霉酚酸酯(MMF)+抗胸腺细胞球蛋白(URD-ATG组),其中13例加用CD25单克隆抗体(URD-ATG+CD25组)。结果显示,移植后所有患者100%植入,造血重建顺利。URD-ATG+CD25组、URD-ATG组急性GVHD的发生率分别为23.07%、45%%,慢性GVHD的发生率分别为0和47.4%,后者均显著高于前者(p<0.05);疾病的复发率分别为53.84%、15%,前者显著高于后者(p<0.05)。根据移植前患者疾病状态(稳定、进展)分层分析显示,进展期疾病的复发率显著高于稳定期(p<0.01),而URD-ATG+CD25组进展期疾病的复发率高达100%。URD-ATG+CD25组和URD-ATG组患者的1年总生存率(OS)分别为53.8%、75%;5年OS分别为38.5%、65%,URD-ATG组高于URD-ATG+CD25组(p<0.05);同时移植前疾病进展期患者的生存率显著下降。结论:在HLA相合或1个位点不合的URD-PBSCT中采用CsA+MTX+MMF+ATG的GVHD防治措施是安全可行的,对于进展期患者可考虑进一步减少ATG用量以减少复发,提高存活。

MTX与米非司酮预防持续性异位妊娠的分析

目的 探讨用氨甲蝶呤 (MTX)及米非司酮用于预防腹腔镜下保守性手术后持续性异位妊娠 (PEP)的治疗效果。 方法 对 2 0 1例异位妊娠患者行腹腔镜下保守性手术 ,10 9例在残腔内注入MTX 2 0mg ,另 92例术后口服米非司酮 3 0 0mg。 结果 保守性手术中用MTX后PEP发生率为 0 .92 % ,而米非司酮组为 2 .17% ,差异不显著 (P >0 .0 5 )。术后第 1d两组血 β -HCG均有大幅度下降 ,下降率分别为 73 .3± 0 .16%和 5 0 .8± 0 .2 1% ,而两组间比较也有明显差异 ,术后 3、6、12d血 β -HCG下降两组间差异不显著。 结论 用MTX及米非司酮能成功预防腹腔镜下保守性手术后PEP的发生 ,副作用小 ,是腹腔镜保守手术治疗异位妊娠有效的辅助手段。

腹腔镜联合甲氨喋呤(MTX)与单纯MTX保守治疗异位妊娠的疗效比较

目的比较腹腔镜联合MTX与单纯MTX保守治疗异位妊娠的临床疗效。方法选取2005年1月～2006年1月在四川省妇女儿童医院住院治疗的89例异位妊娠患者,分为腹腔镜联合MTX保守手术治疗组(A组)和单纯MTX保守治疗组(B组),分别观察两组患者治疗前血清β-HCG值、附件包块大小、住院天数、住院费用、出院时血中β-HCG浓度、输卵管通水情况、再次宫内妊娠以及再次同侧异位妊娠情况。结果A组比B组住院天数短(P<0.01),血中β-HCG下降快(P<0.01),再次宫内妊娠率高(P<0.05)。结论相对于单纯MTX药物保守治疗,腹腔镜联合MTX保守手术治疗异位妊娠疗效快,住院时间短,远期并发症少,再次宫内妊娠率高,具有良好的临床应用价值。

MTX8日方案在异位妊娠保守治疗的疗效分析

目的观察甲氨蝶呤(MTX)8日方案对异位妊娠治疗的临床效果及副反应情况。方法对2009年1月～2013年3月我院妇科收治的具有保守治疗指征且要求保守治疗的235例异位妊娠患者,均采用MTX 8日方案治疗。结果 MTX 8日方案保守治疗成功157例(66.81%),改手术治疗78例(33.19%),≥2个疗程治疗成功者63例(46.50%)。副反应发生情况:白细胞减少35例(14.89%),血小板减少13例(5.53%),发生肝毒性16例(6.81%),恶心、呕吐126例(53.62%),口腔溃疡21例(8.94%),仅白细胞减少病例中有2例Ⅲ度副反应,占白细胞减少发生率的5.72%,其余无Ⅲ、Ⅳ度副反应发生。结论 MTX 8日方案在异位妊娠保守治疗成功率高,住院治疗时间较短,毒副反应轻,安全性高,适用于具有保守治疗指征且要求保守治疗的异位妊娠患者。

大剂量MTX治疗骨肉瘤毒副反应的预防及护理

骨肉瘤系最常见的原发性恶性骨肿瘤，临床上以青少年多发，单纯手术治疗5年生存率仅为20％左右，预后较差。目前，采用新辅助化疗配合手术治疗，使骨肉瘤5年生存率提高到55％～80％，以高浓度甲氨蝶呤（HD-MTX）、异环磷酰胺（IFO）、阿霉素（Adr）、卡铂（Carboplatin）等多药物联合化疗是国际上标准的化疗方案，其中MTX用量可达8～12g／m^2，

大剂量MTX治疗儿童急性淋巴性白血病的观察与护理

目的 :研究大剂量甲氨蝶呤 (HDMTX)治疗儿童急性淋巴性白血病的疗效。方法 :对 2 9例次急性白血病患儿行HDMTX化疗 ,观察其毒副作用及实施有效的护理。结果 :阻止了肿瘤细胞的生长 ,缓解了病情 ,延长了患儿的生存期。结论 :加强对应用HDMTX患儿的治疗与护理 ,是减少MTX毒副作用反应的主要措施。

益赛普联合MTX治疗非全身型幼年特发性关节炎的1年随访观察

目的:观察益赛普联合甲氨蝶呤(MTX)治疗非全身型幼年特发性关节炎(JIA)的1年随访。方法:选取2013年05月—2017年12月我院收治的80例非全身型JIA患儿为研究对象,按随机数字表法分为对照组和观察组,各40例,对照组给予MTX(10 mg/m^2)治疗,观察组给予益赛普(0.4 mg/kg,biw)联合MTX治疗,随访1年,比较两组远期疗效、血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素(IL)-1β、白细胞计数(WBC)、红细胞沉降率(ESR)水平及安全性。结果:治疗1年后观察组总有效率为90.00%,显著高于对照组的72.50%,差异有统计学意义(P <0.05);观察组血清TNF-α、CRP、IL-1β、WBC及ESR水平均显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组药物不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:益赛普联合MTX治疗非全身型JIA患儿的远期疗效显著,能够降低患儿的炎性水平,且安全性较高。

用彗星实验技术分析MTX对小鼠细胞DNA的损伤作用

MTX是一种抗叶酸药物 ,作用于增殖细胞 ,为了解其作用机制和探测其遗传毒性靶器官 ,以小鼠为研究对象 ,用彗星实验技术检测了MTX腹腔注射染毒后对脾、骨髓、胸腺、和外周血淋巴细胞的DNA损伤作用及其与MTX剂量间的相关。 1.2 5～ 5mg/kgMTX可诱发小鼠体内 4种细胞的DNA单链断裂 ,核DNA损伤程度与用药剂量呈正相关。不同种类细胞对MTX的易感性不同 ,脾、骨髓、胸腺、外周血淋巴细胞可能是MTX的遗传毒性靶细胞。

实时荧光定量PCR法检测人骨肉瘤耐MTX细胞系中RFC、DHFR、GST-π的mRNA表达

[目的]研究RFC(还原叶酸载体)、GST-π(谷胱甘肽S转移酶π)、DHFR(二氢叶酸还原酶)mRNA在人骨肉瘤U2-OS细胞系及人骨肉瘤耐药细胞系U2-OS/R1-R3中的表达差异,并探讨其在人骨肉瘤MTX化疗耐药中的意义。[方法]采用冲击并逐步增加诱导药物浓度诱导的方法,诱导人骨肉瘤细胞系U2-OS,并建立耐MTX细胞系(U2-OS/R1-R3),利用荧光定量PCR技术在mRNA水平检测RFC、GST-π、DHFR在U2-OS及(U2-OS/R1-R3)中的表达。[结果]本试验成功建立三株人骨肉瘤耐药细胞系U2-OS/R1-R3中,荧光定量PCR结果显示MTX耐药与DHFRmRNA表达增加有关,与RFCmRNA的表达降低有关,与GST-πmRNA的表达增加有关。[结论]本试验在基因水平探讨人骨肉瘤细胞MTX化疗耐药机制,DHFR、GST-π基因表达的增加及RFC基因表达的降低参与了人骨肉瘤细胞的MTX耐药,为临床探索骨肉瘤患者的MTX耐药机制提供了重要的依据,为临床筛选MTX化疗不敏感患者提供重要的依据。

超声引导下局部注射MTX治疗有心搏异位妊娠的疗效分析

[目的]研究超声引导下局部注射MTX治疗有心搏异位妊娠的疗效。[方法]25例有胎心搏动的异位妊娠为研究组,以43例无胎心搏动的异位妊娠为对照组,研究组采用阴道超声引导下局部注射MTX同时结合全身用药,对照组仅全身治疗肌肉注射MTX。[结果]研究组与对照组治疗成功率无显著性差异。而研究组治疗前血HCG明显高于对照组。[结论]对有胎心搏动的异位妊娠,超声引导下局部注射MTX结合全身用药疗效较好。

冰冻康复新液对大剂量MTX导致口腔黏膜炎疗效的观察

目的:探索减少口腔黏膜炎(OM)疼痛、减少溃疡发生的治疗方法。方法:对88例白血病需要大剂量MTX治疗的患者进行常规护理干预,包括健康宣教、口腔溃疡分级护理,试验组在常规护理干预的同时增加冰冻康复新液含服,观察并记录OM的发生率、严重程度,并与只进行常规护理干预的对照组对比。结果:试验组患者均能良好接受冰块的刺激,试验组OM的发生率明显低于对照组,并且试验组的OM发生时间滞后于对照组。结论:试验组相对于对照组而言,对OM的预防与控制效果较为明显。

子宫动脉栓塞MTX介入及清宫术联合用于疤痕妊娠的疗效及可行性

目的探讨分析子宫动脉栓塞甲氨喋呤(MTX)介入及清宫术联合用于疤痕妊娠的疗效及可行性。方法选取2010年1月到2013年12月的剖宫产术后子宫疤痕妊娠患者96例,分为实验组(子宫动脉栓塞MTX介入加清宫术)和对照组(MTX局部注射加清宫术),各48例。比较两组患者治疗情况和预后情况。结果观察组停经时间、孕囊直径以及β绒毛膜促性腺激素(β-HCG)与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);观察组患者清宫术出血量和β-HCG转阴时间低于对照组,但医疗费用高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);观察组HCG恢复正常时间、超声瘢痕处包块消失时间、月经恢复时间与对照组相比,明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);两组患者月经规律、再次正常妊娠情况相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论子宫动脉栓塞MTX介入及清宫术联合用于疤痕妊娠的疗效确切,可以明显减少术中出血量和术中、术后并发症,值得在临床上推广。