2-methoxyestradiol通过反应性氧基对U937白血病细胞的凋亡诱导作用

目的:探讨2-ME诱导U937白血病细胞凋亡的作用和机制。方法:实验分为白血病细胞株U937细胞含有等量DMSO RPMI 1640培养液的对照组、2-ME处理组、NAC处理组和2-ME+NAC处理组。MTT测定评价对U937细胞毒作用;采用Annexin V和NO染料标记细胞,流式细胞术检测细胞内NO生成和细胞凋亡;DHE测定细胞内超氧阴离子。结果:不同浓度2-ME(0.25、0.50、1.00、和2.00μmol.L-1)处理U937细胞48 h后,U937细胞活性均较对照组明显减少(P<0.05),随着2-ME浓度的增高,U937细胞的生存率逐渐减低,呈剂量依赖性。2-ME(2.00μmol.L-1)处理U937细胞8、12、18和24 h后的细胞凋亡率均高于对照组(P<0.05),随着处理时间的延长,细胞凋亡率逐渐升高;而2-ME处理U937细胞1、3及6 h后的细胞凋亡率与对照组比较差异均无显著性(P>0.05)。2-ME(2.00μmol.L-1)处理U937细胞产生NO荧光值显著增加,超氧阴离子为1.21±0.02,与对照组比较差异具有显著性(P<0.05)。2-ME处理U937细胞1 h时,细胞NO阳性率是46.74%±0.15%,与对照组(0.52%±0.21%)比较差异具有显著性(P<0.05);而细胞凋亡率(1.28%±0.07%)与对照组(1.59%±0.12%)比较差异无显著性(P>0.05);2-ME处理U937细胞3 h后,细胞凋亡率高于对照组(P<0.05),提示U937细胞NO的产生早于细胞凋亡。用NAC抑制反应性氧基(ROS)可保护U937细胞逃避2-ME的细胞毒作用和避免2-ME诱导的细胞凋亡。2-ME(2.00μmol.L-1)处理组U937细胞活性和细胞凋亡率分别是0.47%±0.02%和13.87%±0.69%,与对照组和2-ME+NAC处理组(0.82%±0.08%及2.98%±0.19%)比较差异均具有显著性(P<0.05)。结论:2-ME通过ROS诱导U937细胞凋亡,提示产生ROS的物质可能增强抗白血病作用。

2-甲氧基雌二醇对布-加综合征模型小鼠肝纤维化的影响

目的:探讨2-甲氧基雌二醇(2-MeOE2)对布-加综合征(BCS)所致肝纤维化的影响和可能机制。方法:40只C57BL/6J雄性小鼠随机分为4组,每组10只,BCS组、BCS+2-MeOE2组采用下腔静脉部分结扎法制备BCS模型,假手术组和2-MeOE2组行造模操作但不结扎;2-MeOE2组和BCS+2-MeOE2组每隔1日腹腔注射2-MeOE2(15 mg/kg)1次。6周后处死小鼠,取血清检测ALT与AST水平;取肝组织,HE染色观察病理改变,天狼星红染色观察胶原沉积情况,免疫组化染色观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,实时荧光定量PCR法检测肝组织中纤维连接蛋白(FN)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA的表达,Western blot法检测上述蛋白的表达。结果:与假手术组相比,BCS组小鼠肝脏淤血,胶原沉积,ALT、AST水平升高,α-SMA表达水平升高,FN、ColⅠ、HIF-1αmRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05);2-MeOE2可拮抗BCS导致的上述指标的变化(P<0.05)。结论:2-MeOE2可以改善BCS所致的小鼠肝纤维化,作用机制可能与改善肝细胞缺氧有关。

2-甲氧基雌二醇对新生大鼠缺氧性肺动脉高压的保护作用

目的探讨2-甲氧基雌二醇(2-methoxyestradiol,2ME)在新生大鼠缺氧性肺动脉高压中的保护作用。方法96只Wistar新生大鼠随机分为常氧组、缺氧组和缺氧+2ME组,每组随机分为3 d、7 d、14 d、21 d亚组,每个亚组8只。缺氧组和缺氧+2ME组分别予以每日皮下注射生理盐水和2ME(剂量240μg/kg),常氧组在常氧环境下饲养,每日皮下注射生理盐水。直接测压法测量右心室收缩压(right ventricular systolic pressure,RVSP);苏木精-伊红染色观察肺血管形态,计算肺血管重塑指标肺小动脉中层血管壁厚度占血管外径的百分比(MT%)和肺小动脉中层截面积占血管总截面积的百分比(MA%);免疫组化法检测肺组织中缺氧诱导因子-1α(hypoxiainducible factor-1α,HIF-1α)、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)蛋白表达水平;实时荧光定量聚合酶链反应检测HIF-1α、PCNA mRNA表达水平。结果与常氧组比较,缺氧3、7、14、21 d时缺氧组、缺氧+2ME组RVSP升高,HIF-1α、PCNA蛋白和mRNA表达水平上调(P<0.05),缺氧7、14、21 d时缺氧组MT%、MA%增加(P<0.05);与缺氧组比较,缺氧3、7、14、21 d时缺氧+2ME组RVSP降低,HIF-1α、PCNA蛋白和PCNA mRNA表达水平下调(P<0.05),缺氧7、14、21 d时缺氧+2ME组MT%、MA%减少(P<0.05)。结论2ME可能通过抑制HIF-1α、PCNA表达,减轻肺血管重塑,对新生大鼠缺氧性肺动脉高压发挥保护作用。

2-甲氧基雌二醇诱导K562细胞凋亡及机制研究

本研究探讨2-甲氧基雌二醇(2-ME2)对K562细胞的诱导凋亡作用及其机制。采用不同浓度2-ME2处理K562细胞,MTT法检测K562细胞的增殖活性,DNA琼脂糖凝胶电泳和AnnexinV/PI双染色法检测K562细胞的凋亡效应,流式细胞术检测细胞线粒体膜电位的变化,RT-PCR和Westernblot方法分别检测相关基因mRNA和/或蛋白的表达变化。结果表明:2-ME2抑制K562细胞增殖呈时间和剂量依赖性;48小时的半数抑制浓度(IC50)为2μmol/L;2μmol/L2-ME2作用于K562细胞24、48、72小时,DNA凝胶电泳分析可见典型DNA梯形条带;AnnexinV/PI双染色法检测显示,细胞凋亡率分别为13.78%、22.32%和29.43%,而对照组凋亡率仅为1.78%(p<0.05);1、2和4μmol/L2-ME2分别处理K562细胞24小时,流式细胞术检测显示细胞线粒体膜电位下降;2μmol/L2-ME2处理K562细胞24、48和72小时,K562细胞中bcr/abl、bcl-2mRNA表达下调,而baxmRNA表达上调,Bcl-2、procaspase-3、procaspase-9、PARP(116kD)和p-Akt蛋白表达下调,胞浆Cyto-C和PARP活性片段(85kD)表达上调,而对总Akt蛋白表达无影响。结论:2-ME2通过升高bax/bcl-2比值降低线粒体膜电位、促使细胞色素C(Cyto-c)释放入胞浆、触发K562细胞的线粒体凋亡途径,活化caspase-3,导致K562细胞凋亡并抑制其增殖;通过下调bcr/ablmRNA表达以阻断PI3K/Akt信号通路也参与了该过程。

17β-雌二醇和2-甲氧基雌二醇对慢性低氧性肺动脉高压大鼠体内内皮素-1/一氧化氮体系的影响

目的:探讨17β-雌二醇(E2)及2-甲氧基雌二醇(2ME)对慢性低氧性肺动脉高压大鼠体内内皮素-1(ET-1)/一氧化氮(NO)体系的影响。方法:雌性SD大鼠48只,按随机数字表法平均分为6组(各组n=8):假手术组、去势组、低氧组、去势+低氧组、去势+低氧+E2组、去势+低氧+2ME组。去势组行卵巢切除术;非去势组打开腹腔找到卵巢后不做处理直接还纳缝合。术后去势+低氧+E2组皮下注射E2[20μg/(kg·d)],去势+低氧+2ME组皮下注射2ME[240μg/(kg·d)],其他组皮下注射生理盐水(0.1 ml/d)。低氧组大鼠置于低氧箱内饲养,非低氧组大鼠呼吸正常空气。连续饲养8周以建立低氧性肺动脉高压模型。分别测定血清ET-1、NO水平、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性及肺组织内皮素A受体(ET_AR)、内皮素B受体(ET_BR)、eNOS表达变化。结果:低氧组、去势+低氧组大鼠肺小动脉管壁增厚,管腔变窄明显,平均肺动脉压(mPAP)显著高于假手术组(P均<0.01);E2和2ME干预组大鼠上述形态学及mPAP改变相对较轻。与假手术组相比,去势组和低氧组血清ET-1和肺组织ET_AR mRNA及蛋白水平均明显升高,ET_BR mRNA及蛋白水平明显下降(P均<0.01);去势+低氧组以上指标变化更显著;E2和2ME干预后血清ET-1和肺组织ET_AR表达明显下降,但仍高于假手术组,同时ET_BR表达明显上升,但仍低于假手术组(P均<0.01);且去势+低氧+2ME组血清ET-1水平低于去势+低氧+E2组(P<0.05)。与假手术组相比,去势组肺组织eNOS蛋白水平明显下降(P<0.01);低氧组血清NO水平及肺组织eNOS蛋白水平明显下降(P<0.05或P<0.01);去势+低氧组血清NO水平、eNOS活性及肺组织eNOS mRNA和蛋白水平均明显下降(P均<0.01);去势+低氧+E2组和去势+低氧+2ME组上述指标较去势+低氧组均明显上升(P<0.05或P<0.01),但仍低于假手术组(P均<0.05)。结论:E2及2ME均能显著降低血清ET-1水平,减少肺组织ET_AR表达,增加ET_BR的表达,升高血清NO水平、eNOS活性及肺组织eNOS表达,通过改善ET-1/NO体系平衡部分逆转肺动脉高压。

替莫唑胺(TMZ)联合2-甲氧基雌二醇(2-ME)对小鼠胶质瘤化疗作用的体内实验研究

目的:探讨替莫唑胺(temozolomide,TMZ)联合2-甲氧基雌二醇(2-methoxyestradiol,2-ME)对SHG-44胶质瘤的抑制作用。方法:培养SHG-44细胞,建立裸鼠荷瘤模型,荷瘤后将裸鼠随机分空白对照组、TMZ组、2-ME组、TMZ+2-ME组,每组各7只,荷瘤后8 d分别给予TMZ、2-ME、TMZ+2-ME,观察肿瘤的生长情况,给药结束5周后取瘤计算抑瘤率,并制备瘤组织细胞悬液行流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western Blot法检测瘤组织HIF-1α、P53蛋白表达。结果:(1)TMZ组、2-ME组及2-ME+TMZ组肿瘤生长均低于空白对照组(P(0.05);2-ME+TMZ组肿瘤生长低于TMZ组。(2)2-ME+TMZ组、TMZ组及2-ME组的瘤细胞凋亡率均高于空白对照组(P(0.05),2-ME+TMZ组与TMZ组的凋亡率相比无统计学差异(P(0.05)。(3)2-ME+TMZ组HIF-1α蛋白表达明显低于TMZ组;2-ME+TMZ组P53蛋白表达明显高于TMZ组。结论:应用替莫唑胺(TMZ)联合2-甲氧基雌二醇(2-ME)对裸鼠皮下移植瘤的治疗作用优于单用TMZ或2-ME。

2-甲氧基雌二醇上调Bax/BCL-2比例诱导淋巴瘤Raji细胞凋亡的研究

目的:研究2-甲氧基雌二醇(2-ME2)对淋巴瘤Raji细胞的作用及其作用机制。方法:用不同浓度2-ME2作用于淋巴瘤Raji细胞,CCK8法检测2-ME2对Raji细胞增殖的影响;流式细胞仪FITC/PI双标法检测细胞早期的凋亡;蛋白印迹法检测2-ME2对Raji细胞BCL-2、Bax、Caspase-3、C-myc蛋白表达的影响。结果:2-ME2对Raji细胞的增殖具有明显抑制作用,其抑制率随着药物浓度的增高而增加,随着药物作用时间的延长而显著增高(r=0.9215)。流式细胞仪FITC/PI双染色法结果显示,2.5μmol/L 2-ME2处理24 h组的细胞凋亡率为(33.79±1.63)%,而48 h组的凋亡率高达(51.90±2.72)%,对照组Raji细胞为(7.08±0.36)%。2.5μmol/L 2-ME2处理Raji细胞12 h后,蛋白印迹检测结果显示,Bax蛋白表达上调,BCL-2蛋白下调,而Caspase-3蛋白表达亦上调,C-myc蛋白表达下调,之间均具有时效性关系。结论:2-ME2对淋巴瘤Raji细胞具有明显的抑制作用,且呈剂量和时间依赖性。其对淋巴瘤Raji细胞的作用机制可能与上调Bax/BCL-2比例,激活Caspase-3诱导癌细胞凋亡有关,下调C-myc蛋白表达也参与了凋亡过程。

2ME2对全脑缺血大鼠HIF-1α的影响

目的探讨2-甲氧基雌二醇(2M E 2)对全脑缺血大鼠模型海马缺氧诱导因子-1α(H IF-1α)的影响。方法成年雄性SD大鼠120只,随机分为假手术组、缺血组和2M E 2组,后两组又分别分为6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、5 d和7 d亚组。采用改良的Pu lsineli法制作全脑缺血大鼠模型。应用N issl染色检测大鼠海马神经元数,免疫组化方法检测H IF-1α蛋白表达。结果与缺血组比较,2M E 2组海马CA 1区神经元计数增加,H IF-1α蛋白表达降低,48 h^7 d亚组与缺血组相应时间点比较有统计学差异。结论严重全脑缺血损伤急性期应用2M E 2可抑制H IF-1α的过度表达,具有神经保护作用。

肺癌荷瘤小鼠体内组织中2-甲氧基雌二醇纳米混悬剂的分布

目的:考察2-甲氧基雌二醇(2-ME)纳米混悬剂在肺癌荷瘤小鼠体内组织的分布特征。方法:70只昆明小鼠制作Lewis肺癌荷瘤鼠模型后随机分为2组,实验组小鼠尾静脉注射40 mg/kg的2-ME纳米混悬剂,对照组同法给予2-ME溶液。给药5、15、30、60、120、240、480 min后处死小鼠,取心、肝、脾、肺、肾、胃、脑及瘤组织,HPLC法测定血浆及上述组织中药物的质量浓度,计算总靶向效率和相对摄取率。结果:与对照组相比,实验组瘤体的总靶向效率由4.26%提高至15.20%,肺组织的总靶向效率由22.24%提高至50.32%;心、肝、脾、肺、脑、瘤组织的相对摄取率均大于1,瘤组织的相对摄取率最大。结论:制备的2-ME纳米混悬剂具有良好的瘤、肺靶向性。

小鼠体内2-甲氧基雌二醇静脉乳剂的药动学及组织分布特征

目的:考察2-甲氧基雌二醇(2-ME)静脉乳剂在小鼠体内的药动学及组织分布特征。方法:小鼠尾静脉注射2-ME静脉乳剂和对照液后,血浆及组织匀浆液经液-液萃取,采用反相高效液相色谱法测定2-ME浓度,用3P97药动学软件进行体内药动学及组织分布分析。结果:小鼠尾静脉注射2-ME静脉乳剂22.5mg/kg后,血药浓度经时过程均为二室模型,乳剂的消除半衰期延长,AUC增加,血浆药物清除速率降低,平均滞留时间是对照液的16.6倍,药物在肺、肝及脾组织的靶向参数均大于1。结论:2-ME乳剂具有一定的缓释及肺、肝、脾等组织靶向性特征。

2-甲氧雌二醇对HL60白血病细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨2-甲氧雌二醇对HL60白血病细胞增殖及凋亡的影响。方法运用四唑蓝（MTT）法和彗星电泳法检测2-甲氧雌二醇对HL60白血病细胞的增殖抑制及促凋亡作用；应用流式细胞技术检测Bcl-2蛋白的表达。结果（1）2-甲氧雌二醇在10～50μM浓度范围内作用72h以及30μM2-甲氧雌二醇在作用24、48、72h后对HL60白血病细胞有增殖抑制作用，这种作用呈时间-剂量依赖关系。（2）2-甲氧雌二醇在作用浓度为10、30、50μM时，HL60白血病细胞凋亡率分别为8．20％、28．20％、45．30％，与阴性对照组（1．00％）差异有统计学意义；30μM2-甲氧雌二醇在作用24、48、72h后，HL60白血病细胞凋亡率分别为3．71％、17．72％、43．58％，48、72h作用时间组与阴性对照组（1．00％）差异有统计学意义。（3）30μM2-甲氧雌二醇作用72h后的细胞，Bcl-2蛋白的表达较对照组显著减少。结论2-甲氧雌二醇具有对HL60白血病细胞增殖抑制及促凋亡作用，Bcl-2蛋白表达下调在此过程中可能发挥着重要的作用。

Mcl-1和Bax基因在2-甲氧基雌二醇诱导骨髓增生异常综合征细胞凋亡中的调控作用

本研究探讨bcl-2基因家族成员调控2-甲氧基雌二醇(2-ME)诱导骨髓增生异常综合征(MDS)细胞凋亡的机制。用2-ME预处理MUTZ-1细胞,荧光比色法检测凋亡信号蛋白半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)活性,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测凋亡相关基因—髓细胞白血病基因-1(mcl-1)和bcl-2相关X蛋白(bax)mRNA的表达。结果表明:与对照组相比,2-ME增强MUTZ-1细胞内caspase-3活性,并呈浓度和时间依赖性(p<0.05);随着2-ME浓度的增加,细胞内mcl-1mRNA表达下降(p<0.05),且mcl-1mRNA表达量与相应时间点caspase-3活性呈负相关(r=-0.992,p<0.01),而baxmRNA表达没有明显变化(p>0.05)。结论:2-ME可能通过下调mcl-1表达和增强caspase-3活性的途径来调控MDS细胞凋亡。

2-甲氧基雌二醇诱导骨髓增生异常综合征MUTZ-1细胞凋亡机制的研究(英文)

为了研究2-甲氧基雌二醇(methoxyestradiol,2-ME)诱导骨髓增生异常综合征-难治性贫血伴原始细胞增多型(MDS-RAEB)细胞株MUTZ-1细胞凋亡的机制,将不同浓度的2-甲氧基雌二醇分别与MUTZ-1细胞在体外培养,同时设二甲亚砜和空白对照组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定2-ME对MUTZ-1细胞的生长抑制率,瑞氏-姬姆萨染色后观察2-ME引起细胞的形态学改变,流式细胞术分析细胞周期和凋亡率的变化,贝克曼全自动生化分析仪(synchron clinical system LX20)检测培养上清液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LD)的变化,DNA凝胶电泳验证2-ME诱导的细胞凋亡。结果表明:2-ME对MUTZ-1细胞的增殖具有明显的抑制作用,该细胞凋亡率明显升高,并呈现时间和剂量依赖性,经统计学处理与对照组相比较有显著性差异(P<0.05)。4μmol/L2-ME作用MUTZ-1细胞12小时后,细胞呈现典型的凋亡细胞形态特征;2-ME作用24小时后MUTZ-1细胞出现G2/M期阻滞;培养上清液中LD含量与对照组相比明显升高,差异具有显著性(P<0.05);4μmol/L2-ME作用MUTZ-1细胞48小时后,DNA凝胶电泳可见明显的DNA梯形条带。结论:2-ME对骨髓增生异常综合征细胞株MUTZ-1有较强的抗肿瘤效应,可能与细胞G2/M期阻滞引起的细胞凋亡有关;2-ME是一种有发展潜力的治疗骨髓异常综合征的药物。

2-甲氧基雌二醇对CEM细胞增殖的影响及其机制研究

目的研究2-甲氧基雌二醇(2-ME2)对人白血病细胞系CEM细胞的作用及其分子机制。方法采用MTT法检测不同浓度2-ME2处理CEM细胞48 h后细胞的增殖活性;2μmol.L-1 2-ME2处理CEM细胞0、24、48和72 h,采用RT-PCR法检测VEGF和hTERT mRNA的表达情况,Westernblot法检测Akt和p-Akt蛋白表达变化。结果不同浓度2-ME2能够有效抑制CEM细胞增殖,并呈量效关系,2μmol.L-1 2-ME2处理CEM细胞24、48和72 h可降低CEM细胞中的VEGF和hTERT mRNA表达,并降低Akt蛋白磷酸化水平,而总Akt蛋白表达无变化。结论 2-ME2能够有效抑制CEM细胞增殖,其可能作用机制与下调hTERT和部分通过下调VEGF mRNA表达,阻断PI3K/Akt信号通路转导有关。

2-甲氧基雌二醇对脊髓损伤大鼠运动功能及神经细胞凋亡的影响

目的:探讨2-甲氧基雌二醇(2ME2)对脊髓损伤(SCI)大鼠运动功能及细胞凋亡的影响。方法:将成年雄性SD大鼠72只随机分为假手术组(n=24)、脊髓损伤组(n=24)、2ME2治疗组(n=24)。采用改良的Allen法制作脊髓损伤模型,造模成功后1、3、7、14、21、28d应用BBB运动评分系统对各组大鼠运动功能进行评估,造模成功后连续7天对2ME2治疗组大鼠腹腔注射2ME2(24mg/kg),第7天应用免疫荧光技术检测各组大鼠caspase-3表达,应用TUNEL染色进行凋亡细胞计数。结果:脊髓损伤组及2ME2治疗组损伤后随时间延长BBB评分升高,其中2ME2治疗组损伤后第14、21、28天BBB评分显著高于脊髓损伤组,差异具有显著性意义(P<0.05)。与假手术组(4.583±2.234)比较,脊髓损伤组(33.417±4.274)及2ME2治疗组(22.250±4.048)免疫荧光染色caspase-3蛋白表达阳性细胞数显著增加,2ME2治疗组caspase-3蛋白表达阳性细胞数较脊髓损伤组显著减少,差异具有显著性意义(P<0.05)。与假手术组(12.25±2.67)相比,脊髓损伤组(49.17±4.75)及2ME2治疗组(38.67±4.44)凋亡细胞数显著增多,2ME2治疗组凋亡细胞数较脊髓损伤组显著减低,差异具有显著性意义(P<0.05)。结论:2ME2改善脊髓损伤大鼠模型脊髓损后的运动功能,具有神经保护作用;2ME2降低脊髓损伤大鼠模型脊髓损后caspase-3蛋白表达,抑制神经细胞凋亡。

雌激素及其代谢产物对去势低氧肺动脉高压大鼠烷烃单加氧酶和低氧诱导因子-1α表达的影响

目的：探讨17β-雌二醇（E2）及2甲氧基雌二醇（2ME）对去势低氧肺动脉高压大鼠模型中烷烃单加氧酶（AIkB）和低氧诱导因子-1α（HIF-1α）的影响。方法：选6～7周龄雌性sD大鼠60只，去势手后采用随机数字表法将大鼠随机分为6组：常氧组（D=10），常氧＋E2组（n=1O），常氧＋2ME组（n=10），低氧组（n=10），低氧＋E2组（n=10），低氧＋2ME组（n=10）。低氧组持续低氧（24h，8周）；2ME组自造模之日起，每日皮下注射2ME（240μg／kg）；E2组每日皮下注射E2（20μg／kg）。连续饲养8周，以建讧低氧性肺动脉高压模型。测量平均肺动脉压（mPAP）后放血处死大鼠，观察有心室肥厚指数（RVHI），苏木素-伊红（HE）染色观察肺小动脉重构情况。采用免疫蛋白印迹法、反转录聚合酶链反应（RT-PCR）测定AIkB、HIF-1α的表达水平。结果：与常氧组比较，低氧组大鼠肺小动脉管壁增厚管腔变窄明显，mPAP、RVHI均显著升高，低氧＋E2组和低氧＋2ME组j：述形态学改变相对较轻，mPAP、RVHI均显著高于常氧组，且低氧＋E2组和低氧＋2ME组间无明显差异，常氧＋E2组和常氧＋2ME组肺小血管形态学无明显变化。HIF-1d表达水平在低氧组显著高于常氰组，低氧＋E2组、低氧＋2ME组亦升高，升高幅度不及低氧组，常氧＋E2组、常氧＋2ME组无明显变化。AlkB表达水平在低氧细显著低于常氧组，低氧＋E2组、低氧＋2ME组亦降低，降低幅度不及低氧组，常氧＋E2组、常氧＋2ME组无明显变化。结论：E2和2ME可能通过卜调低氧性肺动脉高压大鼠肺组织AlkB的表达，降低HIF-1α表达，进而缓解肺动脉高乐。

急性高眼压后大鼠视网膜缺氧诱导因子-1α的上调促进了血-视网膜屏障损伤

目的：观察缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在大鼠急性高眼压后血-视网膜屏障（BRB）损伤中的作用。方法：大鼠随机分为正常对照组、假手术组和急性高眼压组。用免疫组织化学检测视网膜HIF-1α的表达；用分光光度计定量视网膜伊文思蓝（EB）的含量；给予HIF-1α抑制剂2-甲氧基雌二醇（2ME2）干预后再次检测视网膜HIF-1α的表达和定量视网膜EB的含量。结果：HIF-1α免疫组织化学结果显示视网膜HIF-1α在对照组未见阳性表达,在急性高眼压后3h HIF-1α阳性产物增多，12h时达高峰，然后逐渐减少；在3h和1d时视网膜周围部HIF-1α阳性产物明显比中央部多；各时间点HIF-1α阳性产物主要见于节细胞层，3h和12h HIF-1α阳性表达物还见于内核层。EB定量结果显示急性高眼压后的早期BRB已经受破坏，之后逐渐恢复，而且存在部位差异。2ME2干预后，免疫组织化学和EB定量显示在相同时间点、相同部位视网膜的HIF-1α表达以及EB渗漏量均明显减少。结论：急性高眼压后大鼠视网膜HIF-1α的上调促进了血-视网膜屏障损伤。

2-甲氧基雌二醇纳米混悬剂的安全性实验

目的观察抗癌新药2-甲氧基雌二醇(2-ME)纳米混悬剂的安全性,为其临床试验提供依据。方法分别进行兔耳缘静脉刺激性实验和溶血性实验,豚鼠过敏性实验,小鼠急性毒性实验。结果 2-ME纳米混悬剂对兔静脉血管无明显刺激作用;2-ME无明显溶血作用;过敏性实验显示,激敏后30 min内2-ME纳米混悬剂组豚鼠未出现竖毛、挠鼻、呼吸困难等过敏症状;急性毒性实验显示,静脉注射给药后第14天,2-ME纳米混悬剂组小鼠心脏、肝脏、肺脏等组织无肉眼可见的黑斑、充血等病理变化。结论 2-ME纳米混悬剂毒性较低,无溶血性、过敏性及刺激性,初步判断该制剂可供静脉注射用。

2-甲氧基雌二醇对SKM-1细胞凋亡中bcl-2/bax表达的影响

目的探讨2-甲氧基雌二醇（2-ME）对骨髓增生异常综合征SKM-1细胞凋亡过程中bcl-2/bax表达的影响。方法 2-ME与SKM-1细胞共同培养,流式细胞术分析细胞凋亡率和细胞周期;RT-PCR技术检测bcl-2和bax mRNA表达。结果 1~8μmol/L 2-ME作用后,SKM-1细胞凋亡率上升呈剂量依赖性;细胞被阻滞于G2/M期;细胞bcl-2 mRNA表达量下调,bax mRNA表达量上调。结论 2-ME诱导SKM-1细胞凋亡与细胞G2/M期阻滞和bcl-2/bax比率下降有关。

2-甲氧基雌二醇对原代骨髓瘤细胞分化的作用

本研究观察2-甲氧基雌二醇对多发性骨髓瘤患者原代细胞诱导的分化作用。采用CD138+磁珠分离纯化7例骨髓瘤患者原代骨髓瘤细胞,通过形态观察、细胞表面标志分析和细胞分泌轻链蛋白的情况,观察2-甲氧基雌二醇对多发性骨髓瘤原代骨髓瘤细胞分化的影响。结果表明:患者原代骨髓瘤细胞经0.5μmol/L2-甲氧基雌二醇分别作用36及72小时后,细胞形态向成熟阶段发展,表现为细胞胞核缩小,胞浆丰富,核浆比例下降,核仁减少或消失,核染色质变粗、变密。CD49e阳性细胞率由(11.02±1.75)%(DMSO对照组)增加到(23.80±1.62)%(36小时组)及(35.68±1.85)%(72小时组),差异具有统计学意义(P<0.05);细胞分泌轻链蛋白由(225.7±30.4)ng/ml(DMSO对照组)升高到(296.7±18.8)ng/ml(36小时组)及(378.9±15.8)ng/ml(72小时组),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:较低浓度2-甲氧基雌二醇可诱导骨髓瘤患者原代骨髓瘤细胞向成熟阶段分化。