组蛋白甲基转移酶EZH2抑制p53活性

目的探讨组蛋白甲基转移酶主要成员及新的癌基因EZH2与肿瘤发生的关键分子p53之间的相互作用关系。方法利用肿瘤细胞系U2OS细胞,首先以免疫共沉淀方法进行了EZH2与p53的相互作用研究,进而采用蛋白质印迹及实时定量PCR方法对p53靶基因的表达进行了分析,最后利用流式细胞术及细胞核染色法分析了EZH2对细胞周期的影响。结果 p53与EZH2具有相互作用,EZH2抑制p53下游靶基因p21、mdm2及puma的表达;流式细胞术提示EZH2抑制p53诱发的细胞周期阻滞,进而支持了EZH2能再抑制p53的活性。结论本研究首次发现EZH2对p53转录活性及其生物学功能的抑制作用,丰富了p53调控网络,提出了EZH2参与肿瘤发生发展的新的分子机制,为肿瘤防治提供了新的研究线索。

肝癌细胞系中肝癌转移相关候选基因启动子区域CpG岛甲基化和表达水平的相关性研究(英文)

背景与目的:DNA甲基化被认为是反映细胞内DNA转录状态的重要表观遗传学标记。本研究旨在对启动子区域CpG岛的甲基化与基因转录水平的相关性进行评估。方法:采用甲基化特异性PCR的方法确定7个与肝癌转移相关的候选基因的启动子区域在6个肝细胞系(包括5个肝癌源性的)中的甲基化状态,并通过半定量PCR的方法确定6个基因稳定态的mRNA水平。结果:仅有纯合和杂合去甲基化的基因状态得到发现。RT-PCR分析表明除了OXCT基因在其处于杂合去甲基化状态的HepG2和HCCLM3细胞中不表达,在其他的情况下,7个候选基因均有表达。讨论:本研究中的7个肝癌转移相关基因的甲基化状态仅在细胞系中部分的反映了基因的转录状态,提示其它转录调控机制的存在。