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Diversity of Microflora in Colonic Mucus from Severe Ulcerative Colitis Patients Analyzed by Terminal Restriction Fragment Length Polymorphism and Clone Libraries of Bacterial 16S rRNA Gene Sequences 被引量:1
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作者 I-Nung Huang Yuri Sato +8 位作者 Mitsuo Sakamoto Moriya Ohkuma Shinobu Ohnuma Takeshi Naitoh Chikashi Shibata Akira Horii Junko Nishimura Haruki Kitazawa Tadao Saito 《Advances in Microbiology》 2014年第13期857-870,共14页
Although the gut microflora is thought to be an essential factor in the development of ulcerative colitis (UC), the entire gut microflora occurring in UC remains unknown. Most studies use feces to represent the microf... Although the gut microflora is thought to be an essential factor in the development of ulcerative colitis (UC), the entire gut microflora occurring in UC remains unknown. Most studies use feces to represent the microflora distribution;however, here we analyzed the bacterial diversity in colonic mucus from UC patients receiving colectomy surgery and control patients. The diversity of microflora was investigated using a combination of terminal restriction fragment length polymorphism (T-RFLP) and clone library analyses of the 16S rRNA gene sequences. In the T-RFLP analysis, the number of terminal restriction fragments (T-RFs) decreased significantly in UC patients when compared to control samples. Also in the clone library analysis, the number of operational taxonomic units (OTU) and the Shannon diversity index were reduced significantly in UC patients. These molecular analyses reveal an overall dysbiosis in UC patients. No specific pathogen was found, and a strong negative correlation in relative abundance of bacterial populations was observed between the phyla Bacteroidetes and Firmicutes in the UC patients. This is the first report showing a significant correlation between these two phyla, which may be important characteristics in the pathogenesis of UC. 展开更多
关键词 ULCERATIVE Colitis MICROFLORA Terminal Restriction fragment length polymorphism 16S rRNA gene CLONE Library
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Comparing the frequencies of restriction fragment length polymorphisms for dystrophin gene in Chinese with those from Japanese and Caucasian populations^1
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作者 YULong MINQINWANG +4 位作者 QUNBINWANG WEIYIWANG YUMEIYANG JINGDEZHU SHOUYUANZHAO 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 1993年第1期38-38,40-47,共9页
The restriction fragment length polymorphisms distribution and frequency of dystrophin gene in Chinese were studied by using 14 subeiones of the entire 14kb eDNA for the dystrophin as hybridization probes. Allelie fra... The restriction fragment length polymorphisms distribution and frequency of dystrophin gene in Chinese were studied by using 14 subeiones of the entire 14kb eDNA for the dystrophin as hybridization probes. Allelie fragments were detected in hybridization patterns of PvuⅡ/la. TaqⅠ/2b-3, Taq Ⅰ/5b-7. and Xba Ⅰ/10. Among them. the allelic fragments (26kb and 3.8kb) in PvuⅡ/2b-3 pattern and the allelic fragments (10.0kb and 8.4kb) in Taq Ⅰ/5b-7 patterns had never been reported previously. Compared with the data from Caucasians and Japanese. it indicated that here was a significant difference (P <0.01) of the allelic fragment frequency in Taq Ⅰ/2b-3 and Xba Ⅰ/10 patterns between Chinese and Caucasians. The frequencies of allelic fragments A2 (5.6kb) in Taq Ⅰ/8 and A2 (10.7kb) in EcoR V/9 were high in Caucasians, yet had not been detected in Chinese, the differences were also highly significant. But in Chinese and Caucasians. the BIB2 allelic frequencies in Taq Ⅰ/5b-7 are the same. As to the frequency of the allelic fragments A1A2 and B1B2 in Pvu Ⅱ/1a. there was no significant difference between Chinese and Japenese. 展开更多
关键词 营养不良基因 基因频率 中国人 日本人 高加索人 RFLP 比较研究
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Genotyping of human platelet antigen (HPA) system 5 of Chinese Han population in Shanghai by PCR restriction fragment length polymorphism(PCRRFLP)
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《中国输血杂志》 CAS CSCD 2001年第S1期376-,共1页
关键词 pcrRFLP length Genotyping of human platelet antigen system 5 of Chinese Han population in Shanghai by pcr restriction fragment length polymorphism HPA
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鸡金银羽位点基因型PCR-RFLP鉴定方法的建立及其应用研究 被引量:1
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作者 崔梦笛 倪慧勇 +5 位作者 刘华格 褚素乔 王学静 许利军 王志永 樊宝良 《中国家禽》 北大核心 2023年第2期8-14,共7页
为了建立一个快速、简便、有效鉴定鸡金银羽位点基因型的方法,试验通过对金银羽等位基因位点核苷酸序列进行分析,设计合成一对引物,应用该对引物对海兰褐、伊莎褐和大午金凤等采用金银羽羽色自别雌雄的蛋鸡配套系商品代公鸡(金银羽等位... 为了建立一个快速、简便、有效鉴定鸡金银羽位点基因型的方法,试验通过对金银羽等位基因位点核苷酸序列进行分析,设计合成一对引物,应用该对引物对海兰褐、伊莎褐和大午金凤等采用金银羽羽色自别雌雄的蛋鸡配套系商品代公鸡(金银羽等位基因杂合,Ss)和母鸡(金羽等位基因半合子,s-)进行了PCR-RFLP基因型鉴定分析。结果显示,PCR-RFLP方法的鉴定结果与实际基因型一致;采用该方法从960只白羽太行鸡母鸡中鉴定得到3只不携带显性白羽等位基因的银羽母鸡(银羽等位基因半合子,S-);以海兰褐父母代父本公鸡(金羽等位基因纯合,ss)作为父本与用本方法鉴定得到的3只银羽太行鸡母鸡进行杂交,来模拟金银羽自别雌雄的海兰褐蛋鸡商品代鸡的生产,获得的后代雏鸡绒羽颜色表型和性别符合海兰褐商品代鸡金银羽羽色自别雌雄的规律。上述结果表明,建立的PCR-RFLP方法能够快速、简便、有效且低成本地鉴定鸡金银羽位点基因型,为银羽纯合品系的建立提供了一个有效的个体金银羽位点基因型鉴定的方法。 展开更多
关键词 金银羽 基因型 性别鉴定 分子标记 pcr-限制性片段长度的多态性(pcr-RFLP)
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Association of TNF-α-238G/A and 308 G/A Gene Polymorphisms with Pulmonary Tuberculosis among Patients with Coal Worker’s Pneumoconiosis 被引量:12
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作者 HONG-MIN FAN ZHUO WANG +7 位作者 FU-MIN FENG KONG-LAI ZHANG JU-XIANG YUAN HONG SUI HONG-YAN QIU LI-HUA LIU XIAO-JUAN DENG JING-XUE REN 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2010年第2期137-145,共9页
Objectives Tumor necrosis factor-α (TNF-α) may play an important role in host's immune response to mycobacterium tuberculosis (M. tuberculosis) infection. This study was to investigate the association of TNF-α... Objectives Tumor necrosis factor-α (TNF-α) may play an important role in host's immune response to mycobacterium tuberculosis (M. tuberculosis) infection. This study was to investigate the association of TNF-α gene polymorphism with pulmonary tuberculosis (TB) among patients with coal worker's pneumoconiosis (CWP). Methods A case-control study was conducted in 113 patients with confirmed CWP complicated with pulmonary TB and 113 non-TB controls with CWP. They were matched in gender, age, job, and stage of pneumoconiosis. All participants were interviewed with questionnaires and their blood specimens were collected for genetic determination with informed consent. The TNF-α gene polymorphism was determined with polymerase chain reaction of restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP). Frequency of genotypes was assessed for Hardy-Weinberg equilibrium by chi-square test or Fisher's exact probability. Factors influencing the association of individual susceptibility with pulmonary TB were evaluated with logistic regression analysis. Gene-environment interaction was evaluated by a multiplieative model with combined OR. All data were analyzed using SAS version 8.2 software. Results No significant difference in frequency of the TNF-α-308 genotype was found between CWP complicated with pulmonary TB and non-TB controls (2,2=5.44, P=-0.07). But difference in frequency of the TNF-α-308 A allele was identified between them (2,2-5.14, P=0.02). No significant difference in frequencies of the TNF-α-238 genotype and allele (P=0.23 and P=0.09, respectively) was found between cases and controls either, with combined (GG and AA) OR of 3.96 (95% confidence interval of 1.30-12.09) at the -308 locus of the TNF-α gene, as compared to combination of the TNF-α-238 GG and TNF-α-308 GG genotypes. Multivariate-adjusted odds ratio of the TNF-α-238 GG and TNF-α-308 GA genotypes was 1.98 (95% CI of 1.06-3.71) for risk for pulmonary TB in patients with CWP. There was a synergic interaction between the TNF-a-308 GG genotype and body mass index (OR=4.92), as well as an interaction between the TNF-α-308 GG genotype and history of BCG immunization or history of TB exposure. And, the interaction of the TNF-α-238 GG genotype and history of BCG immunization or TB exposure with risk for pulmonary TB in them was also indicated. Conclusions TNF-α-308 A allele is associated with an elevated risk for pulmonary TB, whereas TNF-α-238 A allele was otherwise. 展开更多
关键词 Coal worker's pneumoeoniosis (CWP) Pulmonary tuberculosis (TB) Susceptibility polymorphism Tumor necrosis factor (TNF) α-308 α-238 Polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism pcr-RFLP) Interaction
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Analysis of Rb gene Xba Ⅰ polymorphism in Shaanxi aged atherosclerosis population
6
作者 刘军 舒青 +2 位作者 郑强荪 杜日映 张宁仔 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 2000年第3期224-226,共3页
Objective:To investigate variable number tandem repeat (VNTR) polymorphism of the 17th intron of Rb gene in Shaanxi aged population and the relationship between the polymorphism of Rb gene and atherosclerosis(AS) gene... Objective:To investigate variable number tandem repeat (VNTR) polymorphism of the 17th intron of Rb gene in Shaanxi aged population and the relationship between the polymorphism of Rb gene and atherosclerosis(AS) genetic suscepti- bility. Methods: VNTR polymorphism of the 17th intron of Rb gene were examined in 100 Shaanxi aged AS patients and 100 Shaanxi aged control individuals by PCR-Rb-Xba Ⅰ-RFLP. Results::Two alleles were found both in AS group and control group, which were separately 945 bp(S1) and 630bp + 315bp(S2). S1S2 genotype was the most frequent one in the two populations. Significant difference in allele frequency was not found between AS group and control group, and allele frequency was no significant difference between Chinese and Caucasian. Conclusion: Xba Ⅰ enzyme site of Rb gene could have been certainly stable in AS population, and it was inferred that the polymorphism locus was not liable to cause mutation, which might not implicated in the formation of AS. 展开更多
关键词 ATHEROSCLEROSIS RB gene Xba restrict fragment length polymorphism
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PCR-RFLP鉴定隐孢子虫种类研究 被引量:23
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作者 张龙现 蒋金书 +3 位作者 刘群 宁长申 赵金凤 刘红英 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期555-559,共5页
为快速、准确鉴别人畜隐孢子虫种类,建立了巢式PCR扩增隐孢子虫18SrRNA基因的特殊区域,扩增片段测序结果表明:安徽牛源分离株(Cryptosporidiummuris)781bp;北京鸡源分离株(C.baileyi)776bp;北京牛源分离株(C.muris)781bp;河南牛源分离株... 为快速、准确鉴别人畜隐孢子虫种类,建立了巢式PCR扩增隐孢子虫18SrRNA基因的特殊区域,扩增片段测序结果表明:安徽牛源分离株(Cryptosporidiummuris)781bp;北京鸡源分离株(C.baileyi)776bp;北京牛源分离株(C.muris)781bp;河南牛源分离株(C.muris)725bp;长春牛源分离株(C.muris)776bp;宁夏鸡源分离株(C.baileyi)725bp,该片段位于18SrRNA全序列271~1103bp之间。使用Ssp 限制性内切酶消化发现C.muris产生418~420bp和305~363bp两个片段,C.baileyi产生544~545bp和185~231bp两个片段。所检测的6个分离株可以显著区分为C.muris和C.baileyi两个种,所建立的PCR-RFLP可以有效鉴别隐孢子虫种类。 展开更多
关键词 隐孢子虫 种类鉴定 pcr-RFLP 人兽共患病
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猪品种间ESR基因PCR-RFLP的初步研究 被引量:26
8
作者 李凤娥 熊远著 +2 位作者 邓昌彦 郑嵘 屈彦纯 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期37-39,共3页
利用聚合酶链反应 (PCR)技术 ,检测了不同猪品种的ESR基因PvuⅡ RFLP。结果表明 :品种间基因频率差异极显著 (P <0 .0 1 )。并试分析了PvuⅡ
关键词 聚合酶链反应-限制性片段长度多态性 雌激素受体(ESR)基因 产仔数
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中国脊髓灰质炎Ⅰ型野毒株的PCR-RFLP法分析 被引量:9
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作者 张礼壁 李杰 +5 位作者 原稔 郑红 侯晓辉 陆群 方勇 吉仓广 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第2期145-153,共9页
近年来我国流行地区分离的脊髓灰质炎病毒多为Ⅰ型野毒。本文报导对我国一些省、自治区防疫站从急性驰缓性麻痹病人粪便中分离的77株Ⅰ型野毒株,经PCR-RFLP法分析结果,发现不同地区分离的野毒株在电泳图像上有明显差异。根... 近年来我国流行地区分离的脊髓灰质炎病毒多为Ⅰ型野毒。本文报导对我国一些省、自治区防疫站从急性驰缓性麻痹病人粪便中分离的77株Ⅰ型野毒株,经PCR-RFLP法分析结果,发现不同地区分离的野毒株在电泳图像上有明显差异。根据电泳图像所显示的三种酶切条带的数目,可分为14个类型,而且同一省、自治区内不同地区(如新疆),或同一地区不同年份(如广东)的毒株也存在着明显差异。但在某些相邻省份如广东省与海南省,92年流行毒株电泳图像完全一致。说明本法虽不如核酸序列分析精确,但在一定程度上也能反映毒株间的差异,有助于说明流行株的亲疏关系,可用于研究毒株的分子流行病学。 展开更多
关键词 脊髓灰质炎 病毒 I型毒株 RFLP
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PCR-RFLP法检测亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T突变 被引量:2
10
作者 刘建伟 吴多斌 +2 位作者 叶玲 王磊 王鲁宁 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期210-212,共3页
目的 建立一种简便、实用的检测亚甲基四氢叶酸还原酶 (MTHFR)等位基因 C677T点突变的方法 ,并初步观察部分健康老人和老年血管性痴呆 (VD)患者中 MTHFR等位基因 C677T点突变情况。方法  PCR特异性扩增 MTHFR基因序列 ,扩增产物用限... 目的 建立一种简便、实用的检测亚甲基四氢叶酸还原酶 (MTHFR)等位基因 C677T点突变的方法 ,并初步观察部分健康老人和老年血管性痴呆 (VD)患者中 MTHFR等位基因 C677T点突变情况。方法  PCR特异性扩增 MTHFR基因序列 ,扩增产物用限制性内切酶 Hinf 酶切 ,经聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)分离、溴化乙锭染色后 ,观察酶切位点的限制性片段长度多态性 (RFLP)图谱。共检测标本 1 67例 ,其中健康老人(≥ 65岁 ) 1 38例、老年 VD 2 9例 ,并计算了各基因型频率和等位基因频率。结果 健康老人组和老年 VD患者组均检测到 C等位基因野生型 (CC)、杂合子 (CT)和 T等位基因纯合子 (TT)基因型 ,各组 MTHFR基因的 C677T点突变中 T突变位点的频率分别为 43.8%、51 .7%。结论 该方法简便、实用 ,适于一般实验室应用及流行病学调查。 展开更多
关键词 pcr—RFLP法 检测 亚甲基四氢叶酸还原酶基因 老年血管性痴呆 VD 聚丙烯酞胺凝胶电泳 溴化乙锭染色 聚合酶链反应 限制性片段长度多态性
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PCR-TRFLP研究托盘包装冷却猪肉冷藏过程中的菌相变化 被引量:5
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作者 江芸 高峰 +2 位作者 徐幸莲 叶可萍 周光宏 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期565-572,共8页
应用PCR-末端限制性片段长度多态性分析(PCR-TRFLP),结合16S rRNA基因克隆文库和序列分析,研究托盘包装冷却猪肉在4℃贮藏过程中的菌相变化.结果表明:在整个贮藏过程的肉样TRFLP图谱中共产生35种谱带,表明冷却肉中微生物组成十分复杂;... 应用PCR-末端限制性片段长度多态性分析(PCR-TRFLP),结合16S rRNA基因克隆文库和序列分析,研究托盘包装冷却猪肉在4℃贮藏过程中的菌相变化.结果表明:在整个贮藏过程的肉样TRFLP图谱中共产生35种谱带,表明冷却肉中微生物组成十分复杂;对应于假单胞菌(Pseudomonas)的谱带峰在贮藏过程中变化明显,其相对峰面积由0 d的5.7%至贮藏末期达到83.4%,表明贮藏末期主要优势腐败菌为假单胞菌. 展开更多
关键词 冷却猪肉 托盘包装 菌相组成 pcr-末端限制性片段长度多态性分析
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应用PCR-RFLP和芯片生物分析系统鉴别河豚鱼品种 被引量:8
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作者 陈双雅 陈文炳 +3 位作者 张津 陈伟玲 徐敦明 周昱 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第22期200-202,共3页
应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态分析和芯片生物分析系统建立5种河豚的分子生物学品种鉴定新方法。首先提取鱼的DNA进行细胞色素b基因的PCR扩增,然后用DdeⅠ、HaeⅢ和NlaⅢ三种限制性内切酶进行酶切,在Agilent DNA1000芯片上对... 应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态分析和芯片生物分析系统建立5种河豚的分子生物学品种鉴定新方法。首先提取鱼的DNA进行细胞色素b基因的PCR扩增,然后用DdeⅠ、HaeⅢ和NlaⅢ三种限制性内切酶进行酶切,在Agilent DNA1000芯片上对酶切片段进行分离。该方法可成功区分5个河豚鱼品种,是一种快速、简便、有效的鱼类品种鉴定分析手段。 展开更多
关键词 河豚 pcr-RFLP 芯片生物分析系统 品种鉴定
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应用错配PCR和限制性片段长度多态性分析技术检测HBV YMDD变异株 被引量:6
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作者 唐漾波 黄梅芳 +3 位作者 孙剑 唐小平 骆抗先 魏绍静 《广东医学》 CAS CSCD 2002年第5期469-470,共2页
目的 建立简便易行的检测乙型肝炎病毒 (HBV)多聚酶基因 (P基因 )上YMDD变异株的方法 ,评价运用拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者对此变异的影响。方法 采用套式 /错配聚合酶链反应 (PCR)结合限制性片段长度多态性 (RFLP)分析技术对 10 ... 目的 建立简便易行的检测乙型肝炎病毒 (HBV)多聚酶基因 (P基因 )上YMDD变异株的方法 ,评价运用拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者对此变异的影响。方法 采用套式 /错配聚合酶链反应 (PCR)结合限制性片段长度多态性 (RFLP)分析技术对 10 8例治疗前HBVDNA(PCR)阳性正在拉米夫定治疗中的慢性乙型肝炎患者的HBVYMDD变异情况进行检测。结果 运用上述技术能有效区分HBVYMDD野生株和变异株 ;上述 10 8例患者经拉米夫定治疗后 ,HBVDNA阴转者 63例 (5 8 3 % ) ,HBVYMDD野生株和变异株分别为 2 3例 (2 1 3 % )和 2 2例 (2 0 4% )。结论 建立的套式 /错配PCR -RFLP分析技术可用于HBVYMDD变异株的临床监测 ; 展开更多
关键词 聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 多聚酶基因 HBV 乙型肝炎
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PCR-RFLP检测载脂蛋白CⅢ基因T-455C多态性方法的建立及应用 被引量:5
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作者 俞娟 王惠民 +3 位作者 张志泉 陈连英 周锦红 于婷 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期276-279,共4页
目的建立聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)检测载脂蛋白CⅢ(apoCⅢ)T-455C多态性的方法,探讨南通汉族人群中apoCⅢ多态性与高三酰甘油血症(HTG)的相关性。方法用PCR扩增apoCⅢ基因启动子区包含T-455C多态性在内的DNA片... 目的建立聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)检测载脂蛋白CⅢ(apoCⅢ)T-455C多态性的方法,探讨南通汉族人群中apoCⅢ多态性与高三酰甘油血症(HTG)的相关性。方法用PCR扩增apoCⅢ基因启动子区包含T-455C多态性在内的DNA片段,扩增产物用限制性内切酶BseGⅠ酶切后电泳,分析apoCⅢ基因型,同时采用生化方法检测研究对象的血脂和载脂蛋白水平。结果检测到3种基因型,分别为-455TT、-455TC和-455CC。HTG患者组和健康对照组apoCⅢ-455C等位基因频率(50.44%比33.11%)和apoCⅢ-455CC基因型频率(26.55%比12.16%)均有显著差异(P<0.01);C等位基因携带者患HTG的风险是非携带者的2.06倍(95%CI:1.31~3.24);-455C等位基因携带者有较高的三酰甘油(TG)和apoCⅢ蛋白水平(P<0.05)。结论PCR-RFLP是一种快速、敏感的分析apoCⅢ基因启动子区T-455C多态性的方法;apoCⅢ-455C等位基因与HTG的发生相关。 展开更多
关键词 载脂蛋白CⅢ 多态性 聚合酶链反应-限制性片段长度多态性 高三酰甘油血症
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白念珠菌菌丝相与酵母相ERG11基因PCR-RFLP比较分析 被引量:5
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作者 张宏 董正蓉 +1 位作者 谢明 易敏 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2006年第2期71-74,共4页
目的通过对白念珠菌菌丝相与酵母相ERGIl基因限制性片段长度多态性分析,比较两相细胞在DNA水平的差异。方法分别抽提来自同一亲本、对氟康唑敏感性不同的白念珠菌(CA-1,CA-2,CA-4,CA-6,CA-7,CA-9,CA-11,CA-13~CA-17)菌丝相... 目的通过对白念珠菌菌丝相与酵母相ERGIl基因限制性片段长度多态性分析,比较两相细胞在DNA水平的差异。方法分别抽提来自同一亲本、对氟康唑敏感性不同的白念珠菌(CA-1,CA-2,CA-4,CA-6,CA-7,CA-9,CA-11,CA-13~CA-17)菌丝相与酵母相基因组DNA,根据ERG11基因序列设计一对引物,对其进行PCR扩增(包括部分上游和下游非编码区),扩增产物分别用AccⅠ和MunⅠ消化、琼脂糖凝胶电泳后观察。结果各株白念珠菌菌丝相与酵母相均能扩增出约1734bp大小的目的片段,CA-7,CA-14,CA.16和CA-17株两相细胞ERG11基因RFLP图谱存在差异,其余受试菌株未见差异。结论从DNA全貌来看,白念珠菌菌丝相与酵母相ERG11基因存在差异。 展开更多
关键词 白念珠菌 茼丝相 酵母相 ERG11基因 差异 限制性片段长度多态性
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PCR-RFLP鉴别念珠菌、曲霉和隐球菌的探讨 被引量:3
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作者 秦振宇 吴绍熙 +3 位作者 吕桂霞 Roy L.Hopfer 张宏 郭宁如 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期76-78,共3页
为快速鉴别 3类医学上重要真菌———念珠菌、曲霉和隐球菌 ,应用聚合酶链反应 限制性片段长度多态(PCR RFLP)的分子生物学方法对白念珠菌、克柔念珠菌、季也蒙念珠菌、近平滑念珠菌、热带念珠菌、乳酒念珠菌、新生隐球菌格梯变种、新... 为快速鉴别 3类医学上重要真菌———念珠菌、曲霉和隐球菌 ,应用聚合酶链反应 限制性片段长度多态(PCR RFLP)的分子生物学方法对白念珠菌、克柔念珠菌、季也蒙念珠菌、近平滑念珠菌、热带念珠菌、乳酒念珠菌、新生隐球菌格梯变种、新生隐球菌新生变种、罗伦隐球菌、烟曲霉、黄曲霉和杂色曲霉进行体外研究。经PCR念珠菌、曲霉和隐球菌均扩增出 3 10bp的DNA片段 ,再行限制性内切酶HaeIII消化后分别呈现 2条、4条和 3条片段。本实验建立的PCR RFLP技术鉴别念珠菌、曲霉和隐球菌感染 ,具有快速和特异的特点 ,是对PCR诊断的重要补充 ,有潜在的临床应用价值。 展开更多
关键词 念珠菌 曲霉隐球菌 鉴别诊断 pcr-RFLP
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PCR-RFLP在细粒棘球绦虫种株鉴定中的应用 被引量:9
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作者 马秀敏 吾拉木.马木提 +5 位作者 丁剑冰 林仁勇 张亚楼 刘素辉 伊藤亮 温浩 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2008年第4期281-283,287,共4页
目的根据细粒棘球绦虫线粒体DNA rrnL区段基因特征,建立一种新的细粒棘球绦虫种株(基因型)鉴定技术。方法应用PCR-RFLP方法,对新疆不同地区44个囊型包虫病(CE)病人分离株标本提取DNA,用特异性引物对mtDNA rrnL基因片段进行PCR扩增,将扩... 目的根据细粒棘球绦虫线粒体DNA rrnL区段基因特征,建立一种新的细粒棘球绦虫种株(基因型)鉴定技术。方法应用PCR-RFLP方法,对新疆不同地区44个囊型包虫病(CE)病人分离株标本提取DNA,用特异性引物对mtDNA rrnL基因片段进行PCR扩增,将扩增产物用限制性内切酶SspI和Bg1Ⅱ消化,再用琼脂糖凝胶电泳分析片段大小,进行基因型鉴别。结果CE病人分离株PCR扩增产物均不能被限制性内切酶SspI酶切,为细粒棘球绦虫;其中43个病人分离株的PCR扩增产物不能被限制性内切酶Bg1Ⅱ酶切,为细粒棘球绦虫G1基因型;1个病人分离株的PCR扩增产物被Bg1Ⅱ切成158 bp和403 bp 2条DNA片段,为细粒棘球绦虫G6基因型。结论根据细粒棘球绦虫线粒体DNA rrnL区段基因特征建立的PCR-RFLP技术可用于细粒棘球绦虫的基因型鉴别。 展开更多
关键词 新疆 细粒棘球绦虫 基因型 聚合酶链式反应连接的限制性片段长度多态性(pcr-RFLP)
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应用RTPCR和RFLP分析肾型鸡传染性支气管炎病毒基因型 被引量:7
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作者 何永强 周继勇 +1 位作者 于涟 杜青云 《浙江农业学报》 CSCD 2000年第3期117-120,共4页
对来自浙江省 3个不同地区的肾型鸡传染性支气管炎病毒 (IBV JD ,DQ ,HY)和参考株H12 0 ,通过蛋白酶K SDS处理、酚 氯仿法抽提基因组RNA ,经RT PCR扩增得到了预期为 1.72kb的S1蛋白基因cDNA ,用限制性内切酶HaeIII,PstI,Ksp632I对S1基... 对来自浙江省 3个不同地区的肾型鸡传染性支气管炎病毒 (IBV JD ,DQ ,HY)和参考株H12 0 ,通过蛋白酶K SDS处理、酚 氯仿法抽提基因组RNA ,经RT PCR扩增得到了预期为 1.72kb的S1蛋白基因cDNA ,用限制性内切酶HaeIII,PstI,Ksp632I对S1基因cDNA进行RFLP分析。结果表明JD ,DQ ,HY毒株的RFLP带型相同 ,但与经典的肾型IBV代表株 (即T株、Gray株、Holte株 )以及呼吸型H12 0 均不相同 ,与国内已报道的肾型DL毒株也不同 ,表明浙江省流行的肾型IBV很可能是新的变异株。 展开更多
关键词 RT-pcr RFLP 肾型鸡传染性支气管炎病毒 基因型
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应用PCR-RFLP分析鉴别广西鸡毒霉形体 被引量:2
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作者 邓显文 谢芝勋 +4 位作者 谢志勤 唐小飞 刘加波 廖敏 庞耀珊 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2004年第3期41-44,共4页
针对鸡毒霉形体 (MG) 16S和 2 3SrRNA基因间的高变区序列设计合成了 1对引物 ,对MG菌株进行了PCR扩增 ,获得了 1条 899bp的DNA片段 ,而其他禽病病原DNA无扩增。扩增产物经用限制性内切酶AfaⅠ和DraⅠ进行酶切片段长度多态性分析 ,表明... 针对鸡毒霉形体 (MG) 16S和 2 3SrRNA基因间的高变区序列设计合成了 1对引物 ,对MG菌株进行了PCR扩增 ,获得了 1条 899bp的DNA片段 ,而其他禽病病原DNA无扩增。扩增产物经用限制性内切酶AfaⅠ和DraⅠ进行酶切片段长度多态性分析 ,表明各MG菌株酶切图谱间均存在差异。 展开更多
关键词 鸡毒霉形体 pcr 限制性片段长度多态性 广西
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复合PCR-RFLP技术用于尖音库蚊复组抗性相关酯酶基因分子分型 被引量:2
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作者 寇宇 叶榕 +4 位作者 潘劲草 乔传令 崔峰 于新芬 黄志成 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期269-271,共3页
目的应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测法,建立尖音库蚊抗性酯酶等位基因分型方法。方法根据尖音库蚊抗性酯酶基因保守区序列设计引物;提取单个蚊虫基因组DNA,采用PCR-RFLP分析的方法,对抗性酯酶等位基因分型。结果... 目的应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测法,建立尖音库蚊抗性酯酶等位基因分型方法。方法根据尖音库蚊抗性酯酶基因保守区序列设计引物;提取单个蚊虫基因组DNA,采用PCR-RFLP分析的方法,对抗性酯酶等位基因分型。结果酯酶基因扩增片段长度为860 bp,经限制性内切酶酶切后,尖音库蚊抗性Est-β11纯合型有5条带(70、89、147、198和347 bp);Est-β2纯合型出现4条带(60、147、207和437 bp);Est-β11/Est-β2杂合型出现5条带;Est-βN纯合型出现3条带(147、207和506 bp)。结论PCR-RFLP方法能快速、有效地检测尖音库蚊抗性酯酶等位基因类型。 展开更多
关键词 尖音库蚊复组 抗性基因 聚合酶链反应-限制性片段长度多态性 分子分型
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