Methylopila sp. YHT-1鉴定及其发酵产吡咯喹啉醌

以甲醇为唯一碳源,从土壤中筛选分离出一株分泌吡咯喹啉醌(PQQ)菌株YHT-1。通过形态学特征、生理生化特征和16S r RNA基因序列分析,鉴定为Methylopila sp.菌。经摇瓶发酵初步优化后,YHT-1在3 L发酵罐中发酵4 d,PQQ产量达113.6 mg/L。发酵产物经DEAE阴离子交换初步纯化、低温结晶,得到PQQ粗品,并经HPLC和紫外光谱分析,证实为PQQ。

Methylopila sp.SD-1与大豆联合修复苯磺隆污染土壤

分离得到1株苯磺隆降解菌株SD-1,根据表型、生理生化特征及16S rRNA基因序列分析,将其鉴定为Methylopila sp.SD-1,为首次报道能够降解苯磺隆的Methylopila属菌株,其在4d内完全降解50mg/L苯磺隆,最适降解温度、pH值分别为30℃和7.0,降解中间产物对大豆的毒性显著降低.大豆根系分泌物能促进菌株SD-1的生长,培养5d,菌株SD-1的数量由1.0×10^7CFU/mL增至6.7×10^7CFU/mL.分泌物中含有16种氨基酸,菌株SD-1对其中的Asp、Glu和Phe表现出明显的趋化性.接种菌悬液至苯磺隆污染土壤(3mg/kg)并种植大豆幼苗,培养4d,菌株SD-1依赖趋化性向大豆根系运动并定殖,存活率提高,根际土壤中苯磺隆的降解率相较于未种植大豆的处理提高36.0%.

吡咯喹啉醌产生菌的筛选和菌种鉴定

为了筛选产生吡咯喹啉醌(pyrroloquinoline quinone,PQQ)的菌株并提高PQQ发酵产量,该研究建立了一种快速的高效液相色谱法检测PQQ,并采用了以甲醇为唯一碳源的选择性培养基,利用光谱法对样品进行初筛,高效液相色谱法对初筛得到的结果再进行复筛。该研究还对筛选得到的菌株发酵产PQQ的培养基进行了优化。研究结果显示,从样品中筛选得到56株PQQ产生菌,摇瓶产量最高的1株为20.6 mg/L,通过16S rDNA测序分析,鉴定该菌株为Methylopila sp.。对培养基成分中的碳源甲醇进行了优化研究,当甲醇体积分数为2.5%时,PQQ产量最高,为26.3 mg/L,相比于初始甲醇1.0%提高了28%。该研究建立的高效液相色谱法为PQQ高产菌株的筛选提供一种快速检测方法,筛选到的菌株具有较高的甲醇耐受力和PQQ生产潜力,为之后的PQQ发酵研究提供参考。