miR-210调控Mex3B蛋白对肺癌细胞侵袭和增殖的影响

目的:探讨miR-210和Mex3B蛋白对肺癌细胞侵袭和增殖能力的影响。方法:运用q PCR检测miR-210在正常肺组织和癌旁组织中的表达情况;运用q PCR检测Mex3B在肺癌组织、癌旁组织中的表达;q PCR检测miR-210在不同肺癌细胞株中(A549、H1299、H1650和H358)的表达水平;双荧光素酶报告基因系统检测miR-210对Mex3B转录的影响;细胞活性实验检测miR-210的表达对肺癌细胞活性的影响;平板克隆实验检测miR-210的表达对肺癌细胞A549的增殖能力的影响;Transwell侵袭实验检测miR-210的表达对肺癌细胞株A549的侵袭能力的影响。结果:和癌旁组织比较,miR-210在肺癌组织中表达明显增高,和癌旁组织比较,Mex3B在肺癌中表达较低,双荧光素酶报告基因系统检测结果显示,miR-210可以直接调控Mex3B的转录活性,抑制miR-210的表达活性后,A549肺癌细胞的细胞活性受到一定的抑制;抑制miR-210后,肺癌细胞株A549的侵袭和增殖能力明显降低。结论:miR-210可以靶向调控肺癌细胞的侵袭和增殖能力。

miR-181b调控Mex3B蛋白对动脉粥样硬化斑块形成及分子机制研究

目的探讨miR-181b靶向调控肌肉过量蛋白-3B(muscle excess protein-3,Mex3B)的表达在动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)斑块的形成及其分子作用机制。方法将雄性SD大鼠随机分成正常组、模型组、对照组和实验组。对照组和实验组分别尾静脉注射miR-181b-inhibitor-NC、miR-181b-inhibitor的混合液,正常组、模型组注射等剂量的生理盐水;注射完毕24 h后将维生素D3以600000 U/kg的剂量一次性腹腔注射进模型组、对照组、实验组大鼠体内后,每日以100 g高脂饲料喂养构建AS模型大鼠,正常组大鼠始终以等量基础饲料喂养。喂养60 d后,对大鼠进行颈动脉超声检查,测量管腔动脉后壁内膜-中层厚度(intima-media thickness of the posterior wall of the artery,IMT)和斑块面积(square,S)参数。RT-PCR检测各组miR-181b和Mex3B蛋白的mRNA的表达;Western blot检测各组Mex3B蛋白的表达水平;荧光素酶报告基因分析miR-181b和Mex3B的调控关系。结果与正常组相比,模型组大鼠颈动脉内膜增生明显,颈动脉IMT、斑块S、miR-181b和Mex3B蛋白的mRNA和蛋白的表达明显增大,与模型组相比,实验组大鼠大鼠颈动脉内膜增生明显减小,颈动脉IMT、斑块S、miR-181b和Mex3B蛋白的mRNA和蛋白的表达明显减小,差异均具有统计意义(P<0.05)。荧光素酶报告基因分析证明miR-181b与Mex3B靶向结合。结论miR-181b通过靶向调控Mex3B的表达参与动脉粥样硬化中的炎性应激反应,抑制miR-181b的表达能明显抑制炎症反应,抑制AS中斑块的形成。