益气活血解毒方对Lewis肺癌小鼠癌细胞Mg^(2+)-ATP酶、葡萄糖-6-磷酸酶活性的影响

目的观察益气活血解毒方药对小鼠Lewis肺癌癌细胞Mg2+-ATP酶、葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-P酶)活性的影响。方法应用酶细胞化学染色法观察Lewis肺癌细胞酶活性的改变。结果质膜标志酶Mg2+-ATPase、内质网标志酶G-6-Pase反应颗粒变小,数量减少,密度减低,提示酶活性明显下降。结论益气活血解毒方药降低肺癌细胞质膜标志酶Mg2+-ATPase及内质网标志酶G-6-Pase活性。

蟾蜍毒素对H22荷瘤小鼠肝癌细胞Mg^(2+)-ATP酶、葡萄糖-6-磷酸酶活性的影响

目的探讨醇溶性蟾蜍毒素对H22荷瘤小鼠肝癌细胞Mg2+-ATP酶(Mg2+-ATPase)、葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)活性的影响。方法用乙醇溶解蟾蜍分泌物原浆,采用减压蒸馏等方法进一步部分分离纯化,获得醇溶性的蟾蜍毒素混合物(EET),将其作用于H22荷瘤小鼠模型,计算肿瘤抑制率,应用酶化学染色法观察H22肝癌细胞酶活性的变化。结果蟾蜍毒素组和氟尿嘧啶组的肿瘤抑制率分别是32.0%和34.4%,与正常对照组比较差异显著(P<0.05),Mg2+-ATPase、G-6-Pase反应颗粒变小,数量减少,密度变低,提示酶活性明显下降。结论蟾蜍毒素可降低H22荷瘤小鼠肝癌细胞质膜标志酶Mg2+-ATPase及内质网标志酶G-6-Pase的活性,抑制肿瘤细胞的生长。

不同类型甜菜品种根中Mg^(2+)-ATP酶活性和产质量的关系

测定不同类型甜菜品种各生育时期根中Mg2+-ATP酶活性、可溶性总糖、可溶性蛋白含量和产量、含糖率。结果表明,在幼苗期和叶丛繁茂期,Mg2+-ATP活性呈先上升后下降趋势,从块根增长期直至糖分积累期,Mg2+-ATP酶的活性逐渐增强,并保持在全生育期最高水平。不同类型品种间存在差异,在各生育时期高糖型品种Mg2+-ATP酶活性较强。根中Mg2+-ATP酶活性与根中可溶性总糖呈正相关,与甜菜根的成熟进程正相关;Mg2+-ATP酶活性与可溶性蛋白质含量呈负相关,对可溶性糖的积累方面,二者的作用刚好相反。高糖型品种的可溶性总糖含量较高,相应的根中蛋白质含量很低,Mg2+-ATP酶活性较高。

鳖甲煎丸含药大鼠血清对人肝癌HEPG2细胞Mg^(2+)-ATP酶、G-6-P酶活性影响的实验研究

[目的]研究鳖甲煎丸含药大鼠血清对人肝癌HEPG2细胞Mg^(2+)-ATP酶、G-6-P酶活性的影响。[方法]将实验大鼠随机分为4组:空白对照组、鳖甲煎丸煎剂组、顺铂组、鳖甲煎丸联合顺铂用药组。待人肝癌HEPG2细胞贴壁生长状态良好,加入含药大鼠血清及对照组大鼠血清,培养后取材制作标本。利用Mg^(2+)-ATP酶、G-6-P酶细胞化学染色方法对标本进行染色。运用光镜观察酶反应。[结果]光镜下,鳖甲煎丸煎剂组、顺铂组、鳖甲煎丸联合顺铂用药组Mg^(2+)-ATP酶、G-6-P酶活性减弱,与空白对照组相比较有明显差异,差别有统计学意义(P<0.05)。[结论]鳖甲煎丸含药大鼠血清对人肝癌HEPG2细胞Mg^(2+)-ATP酶、G-6-P酶活性的影响有减弱作用。

活血行气方药物血清对SGC-7901人胃癌细胞Mg^(2+)-ATP酶G-6-P酶活性影响的实验研究

目的:观察活血行气方药物血清对SGC-7901人胃癌细胞Mg2+-ATP酶、G-6-P酶活性的影响。方法:采用酶细胞化学染色方法检测SGC-7901人胃癌细胞Mg2+-ATPase、G-6-Pase活性。结果:药物血清组Mg2+-ATP酶和G-6-P酶的酶反应颗粒变小,数量减少,密度减低,活性下降,明显低于对照组(P<0.05)。结论:活血行气方药物血清具有降低SGC-7901人胃癌细胞Mg2+-ATPase、G-6-Pase活性的作用。

咪达唑仑对山羊不同脑区Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性的影响

为研究咪达唑仑对山羊不同脑区Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性的影响,探讨其在中枢麻醉的作用机制。试验用15只健康山羊,3只为生理盐水对照组,其余为试验组,试验组山羊肌肉注射14 mg/kg体重咪达唑仑。分别在给药后诱导期、麻醉期、恢复Ⅰ期和恢复Ⅱ期4个时间点,每点剖杀3只山羊取脑组织,采用分光光度法测定不同脑区Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性。结果注射咪达唑仑能明显抑制山羊大脑、丘脑、小脑和脑干的Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性,这种变化趋势与山羊肌肉注射咪达唑仑麻醉后行为学变化基本一致,海马的Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性在整个麻醉过程中无明显变化。表明咪达唑仑的麻醉作用可能与抑制山羊大脑、丘脑、小脑和脑干的Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性相关。

连续两个生长季大气CO2浓度升高对银杏希尔反应活力和叶绿体ATP酶活性的影响

近年来,随着温室气体浓度不断上升,有关CO2浓度升高对植物影响的研究已取得一定进展,但CO2浓度升高对植物光合作用的影响需要从生理生化水平上进一步深入的研究。以沈阳城市森林树种银杏(Ginkgobiloba L.)为研究对象,利用开顶式气室研究连续两个生长季大气CO2浓度升高对银杏光合特性的影响。结果表明,在大气CO2浓度为700μmol.mol-1条件下,与对照相比,第1个生长季CO2处理的银杏叶片净光合速率极显著增加(P<0.01),希尔反应活力极显著增大(P<0.01)、Ca2+/Mg2+-ATP酶活性显著(P<0.05)或极显著增强(P<0.01)、光合产物淀粉的含量极显著增多(P<0.01);第2生长季CO2处理的银杏叶片净光合速率显著增加(P<0.05),希尔反应活力在通气60d时极显著(P<0.01)增大,Ca2+/Mg2+-ATP酶活性在处理30d时显著降低(P<0.05),淀粉含量增多。与第1个生长季相比,第2个生长季CO2处理的银杏叶片净光合速率降低,希尔反应活力减小,Ca2+/Mg2+-ATP酶活性减弱,叶绿素含量增多,淀粉含量减少。试验中出现了光合适应现象。

DM2肾病患者血清leptin水平与红细胞ATP酶活性的关系

目的:探讨了2型糖尿病(DM2)肾病患者血清瘦素(leptin)水平与红细胞膜Na+K+-ATP酶和Ca2+Mg2+-ATP酶活性改变参与DM2肾病发生的可能机制。方法:应用放射免疫分析和Reilni制膜法测定了40例DM2无肾病和32例DM2肾病患者血清leptin水平和红细胞膜Na+K+-ATP酶和Ca+2Mg+2-ATP酶含量,并与35名正常健康人作比较。结果:DM2无肾病组和肾病组血清leptin水平非常显著地高于正常人组(P<0.01)和红细胞膜Na+K+-ATP酶和Ca2+Mg2+-ATP酶水平显著地低于正常人组(P<0.01)。DM2肾病组与无肾病组亦有显著性差异(P<0.05)。结论:DM2的发生、发展与血清leptin水平和红细胞膜Na+K+-ATP酶和Ca2+Mg2+-ATP酶的活性有密切的关系。

知柏地黄汤对解脲脲原体感染模型大鼠精子线粒体Na^+-K^+-ATP酶及Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性的影响

目的:研究知柏地黄汤对解脲脲原体(UU)感染模型大鼠精子线粒体Na^+-K^+-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶的影响。方法:80只雄性SD大鼠,随机分成假手术组、模型组、中药组(知柏地黄汤8.56g生药·kg-1·d-1)、西药组(强力霉素20mg·kg-1·d-1)、中西组(知柏地黄汤+强力霉素),除假手术组外,其他组均采用经大鼠膀胱注射UU建立UU感染动物模型,连续灌胃21d后处死,取标本检测精液子质量,分光光度法检测精子线粒体Na^+-K^+-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性。结果:与假手术组比较,UU感染模型大鼠精子浓度、精子活动率,a+b级精子百分率及精子线粒体Na^+-K^+-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性下降(P<0.01);治疗各组中精子活动率,a+b级精子百分率及精子线粒体Na^+-K^+-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性上升。结论:知柏地黄汤能够提高UU感染大鼠精子线粒体Na^+-K^+-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性。这可能是知柏地黄汤治疗UU感染所致不育症的机制之一。

小型猪复合麻醉剂对大鼠不同脑区突触体Ca^(2+),Mg^(2+)-ATP酶活性的影响

探讨Ca2+,Mg2+-ATP酶与小型猪复合麻醉剂全麻作用的关系,以判断该酶是否为该制剂作用的靶位之一。选取84只SD大鼠,先随机抽取12只为对照组,其余随机均分为高剂量小型猪复合麻醉剂组(腹腔注射7.5mg/kg)和低剂量小型猪复合麻醉剂组(腹腔注射5mg/kg),每个剂量组又随机均分为麻醉组、恢复Ⅰ组和恢复Ⅱ组等3个亚组。对照组腹腔注射生理盐水10mL/kg,5min后断头取材;麻醉组、恢复Ⅰ组和恢复Ⅱ组分别在翻正反射消失即刻、翻正反射恢复即刻和大鼠可直线爬行后断头取材,在生理盐水冰面上取脑,用4℃生理盐水将脑上的血迹冲洗干净,迅速分离双侧大脑皮层、海马、小脑、脑干、丘脑,立即液氮冷冻。制备脑粗突触体,采用比色法测定Ca2+,Mg2+-ATP酶活性。结果表明,小型猪复合麻醉剂的全麻作用与抑制小脑和丘脑突触体Ca2+,Mg2+-ATP酶活性相关,此酶可能是小型猪复合麻醉剂全麻作用的靶位之一。

小型猪特异性麻醉颉颃剂对大鼠不同脑区Ca^(2+),Mg^(2+)-ATP酶活性的影响

为探讨Ca2+,Mg2+-ATP酶在小型猪特异性麻醉颉颃剂催醒过程中的作用,144只Wistar大鼠随机分为对照组和试验组,2组再分为早期催醒组、中期催醒组和晚期催醒组。用分光光度法测定不同脑区Ca2+,Mg2+-ATP酶活性。结果显示大鼠在不同时期注射小型猪特异性麻醉颉颃剂后,大鼠不同脑区的Ca2+,Mg2+-ATP酶活性均被激活,且Ca2+,Mg2+-ATP酶活性的这种变化趋势与大鼠行为学的变化相一致。结果表明小型猪特异性麻醉颉颃剂催醒作用可能与激活脑干和海马等脑区的Ca2+,Mg2+-ATP酶活性相关。

强痛宁对大鼠中枢脑区Ca^(2+)、Mg^(2+)-ATP酶活性影响

通过测定强痛宁作用下大鼠中枢脑区Ca^(2+),Mg^(2+)-ATP酶活性变化,探讨其麻醉镇痛作用与中枢脑区Ca^(2+),Mg^(2+)-ATP酶相关性。将24只纯种SD大鼠随机分成对照组、诱导组、麻醉组和催醒组,于各时间点冰上采集大鼠各脑区,采用比色法测定Ca^(2+),Mg^(2+)-ATP酶活性。结果表明:药物作用引起诱导期及麻醉期大鼠大脑皮质、小脑、海马、丘脑及脑干区Ca^(2+),Mg^(2+)-ATP酶活性降低,与对照组比较差异显著(P<0.01或P<0.05);催醒期各脑区Ca^(2+),Mg^(2+)-ATP酶活性恢复到麻前水平。结果提示,强痛宁作用下引起大鼠各脑区Ca^(2+),Mg^(2+)-ATP酶活性降低,阻碍了神经细胞对痛觉刺激信息传导,产生麻醉镇痛作用。

肌球蛋白轻链激酶非激酶活性调节磷酸化肌球蛋白ATP酶活性及肌丝运动

肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)具有激酶和非激酶活性,在平滑肌收缩过程中起着关键酶调控的作用.为进一步阐明MLCK非激酶活性在平滑肌收缩过程中的调节作用,利用已删除部分激酶区域的MLCK重组体(pGEX-F6.5)在大肠杆菌中进行表达,采用亲和层析技术纯化表达的MLCK片段,应用EnzChek磷分析试剂盒检测MLCK片段对磷酸化肌球蛋白、水解重酶解肌球蛋白(heavy meromyosin,HMM)及肌球蛋白亚片段1(subfragment1,S1)ATP酶活性的影响,体外检测MLCK片段对肌动蛋白肌丝运动的调节.研究结果显示,pGEX-F6.5重组表达载体在大肠杆菌中以可溶性GST融合蛋白的形式表达.该融合蛋白经Glutathione-Sepharose4B纯化、SDS-PAGE鉴定得到较纯的单一表达条带.纯化的MLCK片段对磷酸化肌球蛋白、HMM和S1的ATP酶活性均有明显激活作用.MLCK片段激活磷酸化肌球蛋白ATP酶活性为:Vmax=(19.426±1.669)倍;Km=(0.486±0.106)μmol/L,MLCK片段对磷酸化HMM和S1的ATP酶活性也有相似的刺激作用.体外肌丝运动研究表明,随着MLCK片段浓度的增加,磷酸化肌球蛋白与肌动蛋白结合的数量不断增加,肌丝运动的速度也随之增加.上述结果表明,MLCK的C端非激酶活性具有调节磷酸化的肌球蛋白ATP酶活性及肌丝运动的作用.

抗衰益智胶囊对衰老大鼠脑组织三磷酸腺苷酶活性和血清白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α的影响

目的观察抗衰益智胶囊对衰老模型大鼠脑组织三磷酸腺苷(ATP)酶活性和血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,探讨其对脑组织的保护作用。方法受试动物按随机数字表法分为空白组和造模组。采用D-半乳糖腹腔注射造模,造模成功的大鼠分为模型组、脑复康组和抗衰益智胶囊高、低剂量组,各给药组给予相应药物灌胃,正常组和模型组每日给予等量生理盐水灌胃,连续60 d,测定各组大鼠脑组织Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶和血清IL-6、TNF-α含量。结果与空白组比较,模型组大鼠脑组织Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性降低,血清IL-6和TNF-α含量增高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠脑组织Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性升高,血清IL-6和TNF-α含量降低,差异有统计学意义(P<0.05),且以抗衰益智胶囊高剂量组作用为优。结论抗衰益智胶囊具有提高衰老大鼠脑组织ATP酶活性和降低促炎因子水平的作用。

Mg^(2+)抑制表达在爪蟾卵母细胞上P2X4受体介导的ATP-激活电流

本文旨在研究Mg2+对表达在非洲爪蟾卵母细胞上P2X4受体介导的ATP-激活电流(ATP-activated current,IATP)的调制及机理。大鼠P2X4受体野生型及突变体型cDNA在体外转录成cRNA,通过显微注射技术将该cRNA注入非洲爪蟾卵母细胞中进行表达。应用全细胞双电极电压钳技术研究Mg2+对IATP的影响。结果显示,细胞外液加MgCl2对IATP的影响如下:(1)Mg2+在0.5~10mmol/L范围内,浓度依赖性地抑制IATP,半效抑制浓度(IC50)为(1.24±0.07)mmol/L,冲洗10min后,IATP可恢复;(2)1mmol/L的Mg2+使IATP量-效曲线右下移,最大效应电流(Emax)降低了(42.0±2.1)%,但半数有效浓度(EC50)不变;(3)预加Mg2+80s后再加ATP,Mg2+对IATP抑制效应可达最大;(4)Mg2+对IATP的抑制不受膜电位的影响;(5)以100μmol/L ATP激活的电流为对照,将P2X4受体280位的天冬氨酸突变成不带电荷的谷氨酰胺后,相同浓度的ATP诱发的IATP幅值仅为对照值的(4.12±0.15)%;将280位的天冬氨酸突变成带负电荷的谷氨酸,IATP幅值和对照值相比没有显著性差异;(6)当P2X4受体280位的天冬氨酸缺失后,100μmol/L ATP诱发的IATP的幅值几乎为对照值的两倍,且0.5~10mmol/L的Mg2+对相应的IATP无明显影响。以上结果提示:Mg2+抑制P2X4受体介导的IATP是非竞争性的、可逆的、具有浓度依赖性、时间依赖性、无电压依赖性;Mg2+的这种抑制效应可能是通过作用于P2X4受体280位的天冬氨酸而实现的。

高剂量率低剂量辐射对人红细胞ATP酶的影响

目的研究低剂量辐射条件下高剂量辐射率对人红细胞ATP酶的影响,探讨高剂量率低剂量辐射在红细胞系统中是否存在兴奋效应。方法抽取10名健康志愿者静脉血,每份血均分成3份,其中2份在剂量率为17Gy/min,总吸收量为1Gy条件下照射,分别检测照射前及照射后1、2h后Na+K+-ATP酶与Ca2+Mg2+-ATP酶的活力。结果与未照射红细胞相比,照射后1、2h红细胞膜Na+K+-ATP酶与Ca2+Mg2+-ATP酶的活力均升高(P<0.05)。结论高剂量率低剂量辐射能提高红细胞ATP酶活力,改善红细胞膜的代谢,在红细胞系统中具有兴奋效应。

化学位移估算研究ATP构象随溶液pH值的变化

利用Johnson和Bovey的理论和方法计算了不同扭曲角χ(O4'-C1'-N9-C4)的ATP(5'-三磷酸腺苷)分子中糖环质子H1'和H2'由于环流效应引起的化学位移.H1'的化学位移与扭曲角χ有较强的依赖关系,反映了ATP在溶液中细微的构象变化.将计算结果与实验结果比较,证明在本文讨论的pH值范围(1～10)内,Mg2+加入后,ATP的扭曲角χ在230°～360°范围内变化.随溶液的pH值减小,ATP分子的构象由trans构象通过-gauche构象转变为cis构象.从而证明在酸性条件下,ATP倾向于以cis构象存在,而在碱性条件下trans构象更为稳定,从另一方面支持了在酸性条件下N1参与配位而在碱性条件下N7参与配位的结论.在讨论中也考虑了由pH变化所引起的环流强度的变化.

二至丸对自然衰老小鼠血液流变学及心肌能量代谢酶的影响

目的:研究长期给予二至丸对自然衰老小鼠血液流变学及心肌能量代谢的影响。方法:小鼠分为正常对照组和二至丸组,二至丸按1.8g.kg-1的剂量给予昆明种小鼠,并制备成含药饲料,自6月龄开始给药,至18月龄结束,测定其对血液流变学以及心肌组织Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶、SDH、LDH活性的影响。结果:二至丸组会使红细胞聚集指数降低,但是与空白对照组比较没有统计学意义;二至丸组能提高SDH酶、LDH酶、Na+K+ATP酶、Ca2+Mg2+ATP酶的活性,与空白组比较具有显著的有统计学意义(P<0.05)。结论:二至丸能够提高心肌有氧代谢能力,从而延缓机体衰老的进程。

胃癌和大肠癌患者血淋巴细胞酶活性的变化

目的探讨胃癌和大肠癌患者外周血淋巴细胞Mg2+-ATP酶和G-6-P酶活性变化与肿瘤生物学行为的关系。方法应用光镜酶细胞化学方法对人外周血淋巴细胞Mg2+-ATP酶与G-6-P酶定位,探讨酶活性与肿瘤生物学行为的关系。结果Mg2+-ATPase定位在淋巴细胞膜下方,G-6-Pase定位在细胞质内;两种酶平均光密度(AOD)值在胃癌和大肠癌患者组明显低于正常对照组(P<0.01),且低分化癌组低于高分化癌组(P<0.01),无淋巴结转移组高于有转移组(P<0.05)。结论外周血淋巴细胞Mg2+-ATP酶与G-6-P酶活性与胃肠肿瘤恶性度呈负相关。

光谱法研究不同pH范围内三磷酸腺苷与Mg^(2+)的相互作用

研究金属离子与ATP的相互作用方式,对于阐明金属离子与ATP参与的酶反应过程具有重要的意义。31P NMR光谱结果表明ATP分子的α-P在pH 2—8研究范围内都不参与键合作用,而β-P和γ-P都参与键合作用。1H NMR光谱结果表明,当ATP与Mg2+发生相互作用时,其磷酸根阴离子与腺嘌呤碱基都会参与配位作用。紫外吸收光谱结果表明在碱性条件时,Mg2+会引起ATP分子发生碱基堆积,而在酸性条件时,碱基堆积则不会发生。