miR-145在胃癌中的表达及其意义

目的:探讨微小RNA-145(miR-145)在胃癌中的表达及与临床病理特征和预后的关系.方法:收集62例胃癌患者肿瘤组织和配对癌旁组织标本,采用实时荧光定量-聚合酶链反应(q RT-PCR)方法检测miR-145的相对表达量,并分析其与临床病理资料和预后的关系.生存分析采用Kaplan-Meier法,并以Log-rank法比较组间差异,应用Cox模型进行多因素分析.结果:miR-145在胃癌组织中的表达水平显著低于配对癌旁组织(P<0.01).miR-145的表达水平与临床分期、浸润深度及淋巴结转移呈明显相关(P<0.05),与患者的年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、民族均无明显相关(P>0.05).miR-145高表达者生存时间明显高于低表达组(P<0.05).多因素分析未显示单一的因素与患者的生存相关.结论:miR-145在胃癌组织中呈低表达,且与预后相关,可能参与了胃癌的发生、发展过程,可成为胃癌诊断及预后判断的指标.

叶下珠水提物对HBx致肝癌细胞miRNA-21和miRNA-145异常表达的影响

目的:探讨HBx基因(简称HBx)对人肝癌Hep G2细胞mi RNA(亦称mi R或mincro RNA)-21、mi R-145表达的影响,以及叶下珠水提物对HBx和mi R-21、mi R-145异常表达的影响。方法:体外培养HBx阴性的Hep G2-CAT及稳定表达HBx的Hep G2-HBx细胞,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测mi R-21、mi R-145表达的变化;分别以不同浓度叶下珠水提物(15mg/ml、7.5 mg/ml、3.75 mg/ml、0 mg/ml)处理96h后,RT-PCR检测Hep G2-HBx细胞中HBx的表达变化,以及Hep G2-CAT和Hep G2-HBx细胞中mi R-21、mi R-145的表达变化。结果:叶下珠能浓度依赖性地抑制HBx的表达(<0.05或0.01),HBx蛋白可显著上调mi R-21表达及下调mi R-145的表达水平(<0.01)。叶下珠水提物明显下调Hep G2-HBx细胞中mi R-21表达水平,且随着药物浓度的增加抑制作用显著增强(<0.01);中浓度叶下珠水提物促进Hep G2-HBx细胞中mi R-145表达(<0.01),高浓度叶下珠水提物明显提高Hep G2细胞中mi R-145的表达(<0.01)。结论:抑制HBx进而下调mi R-21及上调mi R-145表达,或直接上调mi R-145表达可能是叶下珠抗肝癌的作用机制之一。

MicroRNA-145与肿瘤的关系及研究进展

随着人们对生命科学的认识不断加深,作为非编码RNA的重要代表micro RNA受到越来越多的青睐。人类多种肿瘤的发生发展及侵袭转移与micro RNAs（mi RNAs）存在着密切关系,mi RNAs可能成为一类新的致癌基因或抑癌基因,通过抑制靶m RNA翻译或诱导靶m RNA降解在转录后水平调控基因表达,参与肿瘤的发生、发展及侵袭转移。

MicroRNA-145增强非小细胞肺癌细胞对吉非替尼敏感性及其机制探讨

目的:探讨微小RNA-145(microRNA-145,miR-145)对非小细胞肺癌细胞系吉非替尼耐药的作用及其可能的潜在机制。方法:实时荧光定量PCR(Q-PCR)方法检测正常细胞及非小细胞肺癌细胞中miR-145的表达差异;不同时间5μmol/L吉非替尼干预肺癌细胞SPC-A-1和A549后,Q-PCR检测miR-145表达变化;miR-145 mimics和miR-145 inhibitors分别转染SPC-A-1和A549肺癌细胞后,CCK8检测细胞活力变化;双荧光素酶报告系统检测miR-145与ADAM19的靶向结合;miR-145 mimics转染SPC-A-1和A549肺癌细胞,Western blot检测ADAM19蛋白表达;Western blot检测5μmol/L吉非替尼干预后,SPC-A-1和A549肺癌细胞中ADAM19蛋白的表达;mi R-145 mimics转染SPC-A-1和A549肺癌细胞,再用5μmol/L吉非替尼干预,Western blot检测ADAM19蛋白的表达;采用si RNA抑制ADAM19表达,再用5μmol/L吉非替尼干预,CCK8检测细胞活力;采用BALB/C雌性裸鼠皮下接种肿瘤细胞的方法,观察上述效应。结果:QPCR结果显示,与正常肺上皮细胞系BEAS-2B相比较,肺癌细胞SPC-A-1和A549中mi R-145表达明显降低;5μmol/L吉非替尼干预SPC-A-1和A549细胞后,mi R-145表达显著上调;转染mi R-145 mimics后,CCK8结果显示两种细胞细胞活力下降;双荧光素酶报告系统结果显示,mi R-145靶向结合ADAM19基因的3’-UTR区;Western blot结果显示,5μmol/L吉非替尼诱导SPC-A-1和A549细胞后,两种细胞中ADAM19蛋白表达均降低;mi R-145 mimics转染SPC-A-1和A549细胞,之后给予5μmol/L吉非替尼治疗,ADAM19蛋白表达下调;si RNA抑制SPC-A-1和A549细胞中ADAM19表达,再给予5μmol/L吉非替尼治疗,CCK8结果显示,两种细胞的细胞活力显著降低;过表达BALB/C雌性裸鼠的mi R-145后,显著抑制皮下肿瘤生长,并且增强吉非替尼的抗肿瘤效果。结论:mi R-145显著增强肺癌细胞SPC-A-1和A549对吉非替尼的敏感性,其机制可能是通过靶向结合AMDM19基因的3’-UTR区域,从而抑制其表达。mi R-145有可能成为治疗非小细胞肺癌吉非替尼耐药的有效靶点。