MiD51的SUMO化修饰参与异氟醚在脑缺血再灌注损伤的保护机制

目的 探讨 MiD51 的 SUMO 化修饰参与异氟醚脑保护的机制。方法 采用 30 只清洁级 C57/BL6 雄性小鼠随机分为 Sham 组、MCAO 组及 IsoPC 组。IsoPC 组异氟醚预处理 1h,连续 5 天后,构建 MACO 模型(缺血 40 分钟、再灌注 24 小时),检测异氟醚的脑保护效应及 MiD51、Drp1 的表达 及 MiD51 SUMO 化修饰情况,以及脑缺血再灌注损伤后的凋亡情况。结果 (1)TTC 染色,IsoPC 组较 MCAO 组脑梗死面积明显减少(P<0.01);MCAO 组神经细胞损伤明显,IsoPC 组可以明显减轻脑损伤;(2)IsoPC 组的细胞凋亡指数较 MCAO 组明显降低,且 MiD51 表达增多;IsoPC 具有明 显的脑保护的作用,且 MiD51 表达与 IsoPC 具有相关性(P<0.01);(3)小鼠大脑皮层缺血半暗区组织进行 Western Blot 及 IP,检测到 MiD51 的内 源性 SUMO1 修饰条带,IsoPC 组 MiD51 蛋白表达增加,Drp1 蛋白表达降低(P<0.05)。结论 异氟醚预处理通过增强 MiD51 的 SUMO 化修饰,从而影 响 Drp1 的招募及功能,最终减轻脑缺血再灌注损伤,发挥脑保护效应。

线粒体动态蛋白MiD51在肺癌细胞增殖与凋亡中的调控作用探讨

目的:探讨线粒体动态蛋白(mitochondrial dynamic protein of 51 kDa,MiD51)在肺癌细胞中的表达与生物学作用。方法:分别用qPCR与Western Blot实验,检测MiD51在肺癌组织中的表达。分别用MTT与克隆形成实验,检测下调MiD51表达对肺癌A549细胞增殖的影响。用流式细胞术检测下调MiD51表达对肺癌A549细胞凋亡的影响。结果:MiD51在肺癌组织中表达显著高于癌旁组织。干涉MiD51表达可抑制肺癌A549细胞的增殖与克隆形成,促进肺癌A549细胞的凋亡。结论:线粒体动态蛋白MiD51在肺癌组织中表达显著升高,进而促进肺癌细胞增殖、抑制凋亡,提示MiD51是潜在的肺癌分子治疗靶标。

线粒体分裂蛋白MiD51在HBV相关肝癌转移中的调控作用

目的研究线粒体分裂蛋白MiD51在调控HBV相关肝癌转移中的作用。方法(1)分别采用qRT-PCR、Western blot与免疫组化实验,评估15例HBV相关肝癌患者原发灶与转移灶组织中MiD51的表达;(2)利用siRNA下调HBV阳性肝癌细胞中MiD51表达后,用细胞划痕实验分析对肝癌细胞迁移能力的影响;(3)利用siRNA下调HBV阳性肝癌细胞中MiD51表达后,用Transwell侵袭实验分析对肝癌细胞侵袭能力的影响。结果(1)与原发灶相比,转移灶组织中MiD51分子的mRNA与蛋白水平均显著升高[RT-PCR:原发灶 vs 转移灶=(1.00±0.26) vs(2.65±0.31);Western blot:原发灶 vs转移灶=(1.00±0.02) vs (3.32±0.33);免疫组化:(0.43±0.04) vs (0.70±0.06)],差异有统计学意义(P<0.05);(2)下调MiD51表达可显著抑制肝癌细胞的迁移能力[siCtrl vs siMID51#1 vs siMID51#2=(69±2.65)% vs (44±2.40)% vs (43±1.53)%],差异有统计学意义(P<0.05);(3)下调MiD51表达可显著抑制肝癌细胞的侵袭能力[siCtrl vs siMID51#1 vs siMID51#2=(35.33±3.53) vs (16.33±1.86) vs (17.67±2.03)],差异有统计学意义(P<0.05)。结论线粒体分裂蛋白MiD51在HBV阳性肝癌的转移灶组织中表达显著上调,进而促进肝癌细胞的迁移与侵袭能力,提示MiD51是潜在的HBV阳性肝癌诊断与治疗的分子靶标。