真武汤介导lncRNA NEAT1/miR-31-5p/IGFBP7分子轴抑制慢性心力衰竭进程的机制研究

目的:探讨真武汤通过lncRNA NEAT1/miR-31-5p/IGFBP7分子轴抑制慢性心力衰竭(CHF)进程的机制。方法:将雄性SD大鼠分为对照组、模型组、阳性对照组和真武汤低、中、高剂量组,每组各10只。除对照组外,其余各组采用腹腔注射阿霉素的方法建立CHF模型,阳性对照组给予美托洛尔灌胃,真武汤低、中、高剂量组给予真武汤(生药含量6、12、18 g/kg)灌胃。检测各组大鼠左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS),血清脑钠肽(BNP)水平,心脏体重比,心肌病理改变,心肌中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平及lncRNA NEAT1、miR-31-5p、IGFBP7表达水平。培养大鼠心肌H9c2细胞,采用双荧光素酶报告基因实验检测lncRNA NEAT1靶向miR-31-5p、miR-31-5p靶向IGFBP7。结果:与模型组比较,真武汤低、中、高剂量组的LVEF、LVFS增加,血清BNP水平降低(P<0.05);与模型组比较,真武汤低、中、高剂量组的心肌TNF-α、IL-1β、MDA水平降低,SOD水平增加(P<0.05);与模型组比较,真武汤低、中、高剂量组的心肌lncRNA NEAT1、IGFBP7表达降低,miR-31-5p表达增加(P<0.05)。H9c2心肌细胞中,lncRNA NEAT1靶向miR-31-5p、miR-31-5p靶向IGFBP7。结论:真武汤可能通过lncRNA NEAT1/miR-31-5p/IGFBP7分子轴改善CHF大鼠心功能并减轻炎症反应、氧化应激反应。

MiR-31-5p调控非小细胞肺癌吉非替尼耐药机制的研究

目的:探讨miR-31-5p对吉非替尼耐药的影响及其作用机理。方法:利用TargetScan、miRDB、mirDIP和ENCORI等在线工具预测PRSS8的靶向miRNAs,并从高通量数据库(GEO)搜索并下载与吉非替尼耐药相关的miRNA芯片数据,筛选差异表达的miRNAs。利用实时荧光定量PCR技术(RT-qPCR)检测miR-31-5p在吉非替尼敏感的NSCLC(PC9)和对吉非替尼产生耐药的NSCLC(PC9/GR)表达。将PC9/GR细胞分为两组,分别转染miR-31-5p NC、miR-31-5p mimic;应用CCK8技术测定经转染处理后的细胞对吉非替尼的敏感性;应用蛋白免疫印迹分析法(WB)测定细胞PRSS8、BAX、BCL-2的表达。结果:生信分析表明miR-31-5p为靶向PRSS8且在吉非替尼耐药细胞中异常表达的miRNA。实时定量PCR分析表明,miR-31-5p在PC9/GR细胞中的表达量相比PC9细胞有所降低(P<0.0001)。miR-31-5p mimic组细胞增殖速度明显低于NC组(均P<0.0001)。在miR-31-5p mimic组中,与NC组相比,BAX蛋白的表达水平显示出上升趋势(P<0.001),而BCL-2水平下降(P<0.05)。进一步研究发现,miR-31-5p mimic组PRSS8 mRNA(P<0.0001)、蛋白均下调(P<0.05)。结论:非小细胞肺癌耐药细胞PC9/GR中miR-31-5p表达明显下降,且miR-31-5p通过降低PRSS8的表达可能有助于逆转PC9/GR细胞对吉非替尼药物耐药的情况。

结直肠癌癌组织中miR-106a、miR-92a、miR-31与其新生血管生成及侵袭转移的关系研究

目的 探究结直肠癌(CRC)癌组织中miR-106a、miR-92a、miR-31与其新生血管生成及侵袭转移的关系。方法 选取本院2018年1月至2020年1月诊治的100例结直肠癌患者作为CRC组,另选取同期健康体检者60例作为对照组。全部均行实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-106a、miR-92a、miR-31表达量,采用免疫组化法检测CD34表达,计算微血管密度(MVD);术后随访3年,收集患者肿瘤侵袭转移等资料。分析miR-106a、miR-92a、miR-31与CRC新生血管生成及侵袭转移的关系。结果 CRC组miR-106a、miR-92a、miR-31表达量及MVD均比对照组高(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,miR-106a、miR-92a、miR-31表达量与CRC患者MVD均呈正相关(P<0.05)。单因素分析显示,侵袭转移组肿瘤高、中分化程度人数及TNM分期Ⅲ、Ⅳ期人数比未侵袭转移组多,术前miR-106a、miR-92a、miR-31表达量比未侵袭转移组高(P<0.05)。多元逐步回归分析显示,肿瘤分化程度、TNM分期、术前miR-106a表达量、术前miR-92a表达量、术前miR-31表达量均为CRC患者肿瘤侵袭转移的独立影响因素(P<0.05)。结论 结直肠癌癌组织中miR-106a、miR-92a、miR-31高表达,且与结直肠癌新生血管生成及侵袭转移密切相关。

lncRNA TUG1靶向调节miR-31-5p对急性胰腺炎小鼠炎症反应的影响

目的:探讨长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(lncRNA TUG1)在急性胰腺炎(AP)中的作用机制。方法:体外培养小鼠胰腺腺泡细胞系(MPC-83),用脂多糖(LPS,10μg/ml)和雨蛙素(Caerulein,100 nmol/L)处理3 h,建立AP模型。实验分为对照组(control组)、AP组、AP+sh-NC组、AP+sh-TUG1组、AP+sh-TUG1+inhibitor-NC组、AP+sh-TUG1+miR-31-5p inhibitor组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中lncRNA TUG1和miR-31-5p表达水平;CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA检测细胞上清液中IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA TUG1和miR-31-5p之间的靶向关系。构建AP小鼠模型,给予相应的干预后,qRT-PCR检测胰腺组织中lncRNA TUG1和miR-31-5p表达水平;试剂盒检测血清中炎症因子IL-1β、TNF-α含量和淀粉酶(AMY)和脂肪酶(Lipase)活性;HE染色观察胰腺组织病理学变化;TUNEL检测胰腺组织中细胞凋亡。结果:在Caerulein和LPS共同处理的MPC-83细胞中lncRNA TUG1水平、细胞凋亡率、IL-1β和TNF-α水平升高,miR-31-5p水平、细胞活力降低(均P<0.05);敲低lncRNA TUG1可上调miR-31-5p,增加细胞活力,降低IL-1β和TNF-α水平,抑制细胞凋亡(均P<0.05);下调miR-31-5p表达可减弱敲低lncRNA TUG1对细胞炎症反应的抑制作用。miR-31-5p是lncRNA TUG1的直接靶标。在体内敲低lncRNA TUG1表达可上调AP小鼠胰腺组织中miR-31-5p表达,降低IL-1β、TNF-α水平,减少细胞凋亡,改善胰腺组织损伤。结论:敲低lncRNA TUG1可能通过上调miR-31-5p表达水平,抑制炎症反应,改善AP。

circLRP6调节miR-31-5p/HMGA1轴对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响

目的分析circLRP6调节miR-31-5p/高迁移率族蛋白A1(HMGA1)轴对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响。方法体外培养人肾小管上皮HK-2细胞,分为对照组、高糖组、高糖+si-NC组、高糖+si-circLRP6组、高糖+si-circLRP6+miR-NC组、高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor组、高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor+si-NC组、高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor+si-HMGA1组,对照组置于含5.5 mmol/L葡萄糖的DMEM培养基内培养,其余各组置于含25 mmol/L葡萄糖的DMEM培养基内培养,并通过Lipofectamine 2000将相应质粒转染至HK-2细胞内,实时定量PCR测定细胞circLRP6、miR-31-5p、HMGA1 mRNA水平,试剂盒测定细胞上清液白细胞介素-6(IL-6)水平、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平、乳酸脱氢酶(LDH)活性以及丙二醛(MDA)含量;流式细胞仪观察细胞凋亡;Western blotting测定细胞HMGA1、Bax、Bcl-2蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验分析miR-31-5p与circLRP6、HMGA1的靶向关系。结果与对照组相比,高糖组HK-2细胞circLRP6水平升高,细胞增殖抑制率、IL-6、TNF-α、LDH、MDA、细胞凋亡率、Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低(均P<0.05);与高糖组相比,高糖+si-circLRP6组HK-2细胞增殖抑制率、IL-6、TNF-α、LDH、MDA、细胞凋亡率、Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高(均P<0.05);与高糖+si-circLRP6组相比,高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor组HK-2细胞增殖抑制率、IL-6、TNF-α、LDH、MDA、细胞凋亡率、Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低(均P<0.05);与高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor组相比,高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor+si-HMGA1组HK-2细胞增殖抑制率、IL-6、TNF-α、LDH、MDA、细胞凋亡率、Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高(均P<0.05)。miR-31-5p与circLRP6、HMGA1均具有靶向关系。结论沉默circLRP6可能通过上调miR-31-5p,抑制HMGA1表达,对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤发挥保护作用。

血清miR-31在主动脉狭窄致心肌肥厚患者中的作用价值

目的探究血清microRNA-31(miR-31)在主动脉狭窄致心肌肥厚患者中的作用。方法选取2020年1月至2020年10月就诊于新疆医科大学第一附属医院的主动脉狭窄致心肌肥厚患者150例为观察组,并选取同期健康志愿者150例为对照组,比较两组患者miR-31、舒张末期左心室后壁厚度(LVPWTd)、室间隔舒张末期厚度(IVSTd)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室射血分数(LVEF)和左心室重量指数(LVMI)。同时对150例主动脉狭窄致心肌肥厚患者进行随访3年,观察其是否发生不良心血管事件,分析miR-31对不良心血管事件的预测价值。结果与对照组比较,观察组miR-31显著增加(1.25±0.26 vs.0.71±0.23,P<0.001)。血清miR-31与主动脉狭窄致心肌肥厚患者LVPWTd、IVSTd、LVEDD、LVMI均呈显著正相关(r=0.372、0.401、0.362和0.452,P<0.05),而与LVEF呈显著负相关(r=-0.317,P=0.010)。对150例主动脉狭窄致心肌肥厚患者随访3年发现,与未发生不良心血管事件的患者相比,发生不良心血管事件的患者血清miR-31显著增加(1.44±0.17 vs.1.21±0.26,P<0.001)。血清miR-31对主动脉狭窄致心肌肥厚患者不良心血管事件具有较好的预测价值,曲线下面积0.752(95%CI:0.668~0.837,P<0.001)。结论血清miR-31在主动脉狭窄致心肌肥厚患者中可能具有重要潜力,是主动脉狭窄致心肌肥厚的潜在生物学指标。

miR-31在气道慢性炎症性疾病中的研究进展

气道慢性炎症性疾病是一类由感染或变态反应引起的长期持续的呼吸系统疾病,这类疾病包括慢性阻塞性肺疾病(COPD)、哮喘和支气管扩张症等,这些疾病的发病机制不同,可能是遗传以及环境等多种因素相互作用的结果,其共同特点是慢性气道炎症导致的气道重构、气流受限和肺功能下降。在严重情况下,气道慢性炎症性疾病还可能导致呼吸衰竭和心脏疾病等并发症,对患者的健康和生活质量造成严重影响。

MiR-31-5p在癌症中的研究进展

MicroRNAs(mi RNAs)是一类长度约22个碱基的非编码RNA,通过与mRNA 3'-非翻译区域(3'-UTR)的特定靶位点结合,导致mRNA的降解或翻译抑制参与关键的生物学过程^([1])。大量研究表明,miRNAs在肿瘤组织或细胞中异常表达,可作为癌症诊断、治疗效果和预后评估的分子标志物。人类mi R-31基因位于9p21.3染色体上^([2])。miR-31基因转录后,形成的初级转录本(pri-miR-31)被Drosha复合物加工成具有茎环结构的前体RNA(pre-miR-31),pre-miR-31在Dicer的作用下,进一步裂解为miR-31-5p和miR-31-3p。

SATB2与miR-31、182对结直肠癌的靶向调控

目的探讨结直肠癌中靶向调控特定富含AT碱基DNA序列结合蛋白(SATB)2有关的miR-31和miR-182表达水平,并分析其与SATB2的关系。方法根据候选miRNAs的预测结果,构建SATB2基因3′UTR突变性和野生型的荧光素酶载体,与miRNA抑制物转染、报告基因检测和miRNA模拟物等技术手段相结合,检验候选miRNA是否对SATB2基因的表达具有靶向调控作用,确定miRNA对调控结直肠癌转移相关基因SATB2的靶效性。结果 miR-31和miR-182是靶向调控SATB2的候选基因。结直肠癌组织中miR-31和miR-182表达明显增高(P<0.05),与未转移比较,结直肠癌转移的miR-31和miR-182表达明显增高(P<0.05)。慢病毒感染结直肠癌细胞SW480得到稳定过表达。miR-31和miR-182的结直肠癌细胞株SW480/miR-31和SW480/miR-182的增殖能力明显高于对照SW480/Con(P<0.05)。SW480/miR-31和SW480/miR-182细胞形成的克隆较对照SW480/Con细胞明显多(P<0.05),SW480/miR-31,停留在G0/G1期的细胞减少,S期的细胞增多,G2/M期细胞增多,SW480/miR-182,G0/G1期的细胞减少,S期细胞增多,G2/M期细胞增多。与对照SW480/Con细胞比较,SW480/miR-31和SW480/miR-182的细胞内荧光素酶的活性明显降低(P<0.05)。SATB2基因转染后,miR-31和miR-182细胞体外增殖能力均明显降低(P<0.05)。SATB2基因转染后,SW480/miR-31和SW480/miR-182细胞进入G0/G1期,S期细胞减少,G2/M期细胞减少,SATB2基因转染后,miR-31和miR-182细胞运动能力明显降低(P<0.05)。与对照组比较,实验组裸鼠的瘤体积和瘤重量均明显增高(P<0.05)。与对照组比较,实验组裸鼠瘤的miR-31和miR-182表达均明显增高(P<0.05)。结论结直肠癌中靶向调控SATB2细胞的miR-31和miR-182在结直肠癌中的表达水平高低与癌细胞转移、克隆及预后相关,miR-31和miR-182能反向调控SATB2的表达。

miR-31通过激活NF-κB信号通路而促进结肠癌细胞增殖

微小RNA(microRNA)在肿瘤的发生发展中发挥重要作用。有研究表明,在结肠癌患者肿瘤组织中,miR-31表达水平增高。然而,定量PCR只能检测所在组织miR-31的整体表达水平,而无法观察miR-31在特定组织与特定细胞中的表达分布。目前,尚未见关于miR-31在结肠癌中原位表达的报道。本文从研究miR-31在结肠癌中的原位表达入手,进一步探究miR-31在结肠癌细胞中的功能及作用机制。原位杂交实验结果显示,miR-31在结肠癌肿瘤细胞中的原位表达明显升高;体外过表达或敲减miR-31证实,其可以促进结肠癌细胞增殖和集落形成;荧光定量PCR与Western印迹和双荧光素酶报告基因实验证实,在结肠癌细胞中,NF-κB通路的抑制因子丝氨酸/苏氨酸激酶40(STK40)是miR-31下游靶基因,miR-31靶向作用于STK40而激活NF-κB通路;反之,抑制NF-κB通路,miR-31的促增殖能力明显下降。上述结果提示,miR-31可能通过激活NF-κB信号通路而促进结肠癌的细胞增殖。

系统性红斑狼疮患者外周血细胞miR-31的表达

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血细胞微小RNA(miR-31)的表达及其临床意义。方法以36例SLE患者和23名健康对照者作为研究对象,采集外周静脉ACD抗凝血,Real-TimePCR检测miR-31表达。分析SLE患者疾病活动指数(SLEDAI)、肾脏受累程度指标(Renal-SLEDAI积分)及临床用药与外周血细胞miR-31表达的相关性。结果 SLE患者的外周血细胞miR-31表达显著低于健康对照者,差异有统计学意义(P<0.001)。SLE患者的外周血细胞miR-31表达与SLEDAI积分和Renal-SLEDAI积分呈显著负相关(r=-0.330,P=0.043;r=-0.337,P=0.044),与临床用药情况无显著相关性(P>0.05)。结论 SLE患者外周血细胞miR-31表达水平与疾病活动及肾脏损害程度相关,作为重要生物标志物有可能为SLE的早期诊断、治疗和预后评估提供一定的依据。

鼻咽癌患者外周血中循环miR-31-5p表达及临床意义

目的探讨miR-31-5p在鼻咽癌患者外周血中的表达及临床意义。方法应用荧光定量PCR检测55例鼻咽癌患者和55例健康人外周血miR-31-5p相对表达量,分析两者之间的表达差异,探讨其与鼻咽癌患者临床病理特征以及放疗的关系。结果 miR-31-5p在鼻咽癌患者外周血中的表达水平明显低于健康人(P <0.01);鼻咽癌患者外周血miR-31-5p的表达水平与肿瘤T分期、局部有无淋巴转移、临床分期相关,但与性别、年龄及是否发生远处转移不相关。同时,放疗抵抗组miR-31-5p表达水平较放疗敏感组下降(P <0.01)。结论 miR-31-5p的低表达与鼻咽癌的发展及放疗有关,它可能成为鼻咽癌新的肿瘤标志物和治疗靶点。

miR-31-5p通过调控TNS1抑制乳腺癌细胞生物学行为及放疗抵抗的分子机制

目的:探讨miR-31-5p/张力蛋白1基因(tension protein 1,TNS1)分子轴对乳腺癌细胞生物学行为的影响及其放疗抵抗的分子机制。方法:收集2017年7月至2017年12月南阳市中心医院肿瘤放疗科收治的、经手术切除的21例乳腺癌患者癌及癌旁组织标本,以及乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231和SKBR-3,采用qPCR法检测癌组织和癌细胞系中miR-31-5p的表达水平。通过6 MV-X射线照射MCF-7细胞,构建放疗抵抗细胞株MCF-7R。随后,采用克隆形成实验、Transwell小室法和Annexin V/PI染色流式细胞术检测过表达/敲降miR-31-5p对MCF-7和MCF-7R细胞放疗敏感性的影响;用双荧光素酶报告基因验证miR-31-5p与TNS1的靶向关系。结果:乳腺癌组织、细胞系和MCF-7R细胞中miR-31-5p表达水平显著低于癌旁组织、人正常乳腺上皮细胞MCF-10A和MCF-7细胞(均P<0.01)。过表达miR-31-5p显著抑制MCF-7R细胞的侵袭并促进细胞凋亡(均P<0.01),沉默miR-31-5p在MCF-7细胞中结果相反。双荧光素酶报告基因法证实TNS1是miR-31-5p靶基因。过表达miR-31-5p通过靶向下调TNS1显著抑制MCF-7R细胞侵袭能力并促进细胞凋亡(均P<0.01),沉默miR-31-5p通过上调TNS1显著促进MCF-7细胞侵袭和抑制细胞凋亡(均P<0.01),从而上调MCF-7R对放射治疗的敏感性。结论:miR-31-5p/TNS1分子轴与乳腺癌放疗抵抗存在调控关系,且过表达miR-31-5p可逆转MCF-7R细胞对放疗抵抗作用。

结直肠癌组织和结肠癌细胞中miR-31的表达及功能

目的:研究结直肠癌组织和结肠癌细胞中miR-31的表达及与临床病理指标间的关系,并探讨其功能。方法:采用实时荧光定量PCR法检测98例结直肠癌组织和对应正常黏膜组织中miR-31的表达,并分析其和临床病理指标之间的关系。利用anti-miR-31转染特异性抑制结肠癌细胞HCT-116中miR-31的表达,并分析转染前后细胞增殖、细胞周期及迁移能力的变化。结果:结直肠癌组织中miR-31的表达是正常黏膜组织中的15倍(P=0.001);miR-31的表达和结直肠癌患者TNM分期及肿瘤局部浸润有关(t=2.261和2.296,P<0.05)。anti-miR-31转染能特异性抑制HCT-116p53+/+和HCT-116p53-/-细胞中miR-31的表达(P<0.05),转染后2种HCT-116细胞的增殖及细胞周期均无变化(P均>0.05),但细胞迁移能力降低(t=3.007和12.948,P<0.05)。结论:miR-31在结直肠癌组织中高表达,可能参与结直肠癌的发生发展;降低结肠癌细胞中miR-31的表达可降低其迁移能力。

miR-31对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡及炎症因子表达的影响

目的:探讨miR-31靶向IL-34对骨关节炎(OA)软骨细胞增殖、凋亡及炎症因子分泌的影响和分子机制。方法:采用10 ng/L的IL-1β处理软骨细胞构建OA细胞模型。荧光定量PCR(RT-qPCR)检测软骨细胞中miR-31和IL-34 mRNA的表达;MTT实验检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测P21和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达;ELISA法检测TNF-α和IL-6的表达。将miR-31模拟物转染软骨细胞,IL-1β处理后,采用上述方法检测细胞的存活、凋亡以及炎症因子表达情况。双荧光素酶报告基因实验验证miR-31对IL-34的靶向调控作用。将miR-31模拟物和IL-34过表达载体共转染软骨细胞,IL-1β处理后,采用上述方法检测细胞的存活、凋亡以及炎症因子表达情况。结果:IL-1β处理后,软骨细胞中miR-31的表达显著降低,IL-34 mRNA的表达显著升高,细胞存活率显著降低,凋亡率显著升高,P21和Caspase-3蛋白的表达显著升高,TNF-α和IL-6的表达显著升高(P<0.05);过表达miR-31后,IL-1β处理的软骨细胞存活率显著升高,凋亡率显著降低,P21和Caspase-3蛋白的表达显著降低,TNF-α和IL-6的表达显著降低(P<0.05)。miR-31靶向IL-34并负调控其表达。与过表达miR-31比较,同时过表达miR-31和IL-34后IL-1β处理的软骨细胞存活率显著降低,凋亡率显著升高,P21和Caspase-3蛋白的表达显著升高,TNF-α和IL-6的表达显著升高(P<0.05)。结论:miR-31通过靶向IL-34可促进OA软骨细胞增殖,抑制细胞凋亡和炎症因子分泌。

miR-31在结直肠癌患者血清中的表达及对结肠癌HCT116细胞增殖及凋亡的影响

背景与目的:micro RNA与肿瘤关系密切,血清mi RNAs可以作为筛选和监测结直肠癌的有效指标。该研究旨在检测结直肠癌患者血清中mi R-31的表达水平,并分析mi R-31对结肠癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法:收集40例结直肠癌患者和35例健康人群作为对照,采用实时荧光定量聚合酶链反应(realtime fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR),检测其血清mi R-31的表达水平,并分析结直肠癌患者血清mi R-31的表达水平与临床病理特征之间的关系。采用脂质体转染将mi R-31模拟物(mi R-31 mimics)和抑制剂(mi R-31 inhibitor)转染到HCT116细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡及周期改变。结果:结直肠癌患者血清中mi R-31的表达显著高于健康对照组,mi R-31表达与结直肠癌分化程度有关。转染mi R-31mimics组HCT116细胞生长增快,而转染mi R-31抑制剂后细胞增殖能力明显降低(P<0.01);同时mi R-31mimics组细胞凋亡所占比例较mi R-31抑制剂组和阴性对照组(mi R-control,NC)明显减少,尤其是晚期凋亡细胞减少为著;转染mi R-31抑制剂组,G_1期细胞较mi R-31 mimics组和NC组明显增多。结论:mi R-31在结直肠癌患者血清中表达显著上调,mi R-31可能通过促进结肠癌细胞增殖、抑制细胞凋亡而参与了结直肠癌的发展进程,有望成为结直肠癌诊断的标志物。

miR-31基因家族的分子进化与靶基因预测

运用生物信息学方法从miRBase数据库中搜索动物物种miR-31基因家族成员的成熟序列,分析其分子进化特征并预测作用靶基因。结果表明,在49个动物物种中获得63条miR-31基因同源序列;miR-31家族成员大部分位于基因间隔区,少数位于内含子区;miR-31不仅存在于常染色体上,而且部分位于性染色体上。miR-31成熟序列长度在21～24 nt之间,序列同源性较高,部分位点在进化过程中发生了碱基突变和缺失。系统进化树显示,miR-31家族成员可分为2个分支。预测到哺乳动物miR-31拥有20个共同候选靶基因,与细胞生长发育、新陈代谢、信号转导、跨膜运输以及转录调控等过程密切相关。研究结果为深入理解miR-31基因家族的生物学功能奠定基础,也为后续研究提供理论依据。

miR-126、miR-31在运动神经元与神经干细胞分化所得胆碱能神经元间表达情况的比较

目的了解运动神经元和神经干细胞诱导分化所得胆碱能神经元间miR-126和miR-31的差异表达情况,并以此来探讨两种细胞之间的差异。方法应用ABI公司的TaqMan MicroRNA Assays real-time PCR技术,观察miR-126和miR-31在运动神经元与神经干细胞分化所得胆碱能神经元中的表达情况。结果 miR-126在神经干细胞分化所得胆碱能神经元中的表达是在运动神经元中的0.002倍(P<0.05)。miR-31在神经干细胞分化所得胆碱能神经元中的表达是在运动神经元中的56.444倍(P<0.05)。结论 miR-126和miR-31在运动神经元与神经干细胞分化所得胆碱能神经元中的表达存在差异,对二者预测靶基因参与的生物学过程分析,暗示两种细胞可能在信号传导和发育上存在有差别。

miR-31-5p通过靶向抑制胰岛素降解酶发挥促进动脉粥样硬化作用

目的探讨miR-31-5p是否通过靶向抑制胰岛素降解酶(IDE)发挥促进动脉粥样硬化作用。方法应用生物信息学和双荧光素酶技术筛选并验证miR-31-5p与IDE 3’UTR靶向结合情况。miR-31-5p mimic和inhibitor转染THP-1巨噬细胞及THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞;采用miR-31-5p agomir处理高脂饮食的ApoE^(-/-)小鼠;Western blot检测IDE蛋白表达;ELISA检测ApoE^(-/-)小鼠血浆脂质水平;油红O染色检测小鼠肝脏脂质蓄积及主动脉粥样硬化斑块病变。结果 miR-31-5p靶向结合IDE 3’UTR并引起转录抑制;miR-31-5p可下调THP-1细胞、小鼠肝脏和主动脉组织中IDE蛋白表达(P<0.05),同时引起泡沫细胞和小鼠血清中脂质含量增加(P<0.05),小鼠主动脉窦和主动脉树病变面积明显增加(P<0.05)。结论 miR-31-5p可通过靶向抑制IDE发挥促进动脉粥样硬化作用。

miR-31在肺癌患者血清和单个核细胞中的表达水平及临床意义

目的：探讨miR-31在肺癌患者血清和单个核细胞中的表达水平及临床意义。方法：选择确诊为肺癌的91例患者为研究对象．以同期在我院门诊体检处100例体检者为对照，应用RT—qPCR技术检测两组人群血清及单个核细胞中miR-31的表达水平．分析miR-31与肺癌病理指标的关系。结果：与对照组血清miR．31表达水平（0．59±0.36）相比，肺癌组血清miR-31表达水平（1．17±0．54）升高，肺癌组单个核淋巴细胞miR-31表达水平（3．41±0．79）较对照组（4．54±0．53）降低，差异具统计学意义（P〈0．05）；肺癌组低、中、高血清miR．31表达水平依次为（1．13±O．28）、（1．39±0．34）、（1．07±0．38），分化程度不同肺癌患者miR-31表达差异具统计学意义（P〈O．05），中分化最高，而单个核细胞中miR．31表达水平无统计学差异（P〉O．05）；I-Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期肺癌患者血清及单个核细胞miR-31表达水平分别为（1．15±0．27）、（1．40±0．36）及（3．50±0．39）、（3．37±0．55），不同分期血清／单个核细胞miR．31相比，差异具统计学意义（P〈0．05）；有、无淋巴结转移肺癌患者血清及单个核细胞miR．31表达水平分别为（0．98±0．22）、（1．23±0．41）及（3．35±0．37）、（3．52±0．51），两者相比，差异具统计学意义（P〈0．05）。结论：这些研究结果表明，miR-31可能在肺癌发生发展及转移中起重要作用。