肺癌组织中miR-30c侧翼区的单核苷酸多态性对其成熟进程的影响

目的研究不同细胞和肺癌组织中miR-30c侧翼区单核苷酸多态性rs928508（A／G）对初级miR．30c（pri—miR-30c）、前体miR-30c（pre—miR-30c）、成熟miR-30c的表达水平以及miR-30e成熟进程的影响。方法构建含有不同基因型miR-30c侧翼区的报告基因表达载体pG13-promoter—miR-30e—A和pGL3-promoter—miR-30c—G，分别与内参质粒pRL—SV40共转染于人肺癌A549细胞、人胚肾293A细胞和中国仓鼠卵巢细胞（CHO细胞）后，进行荧光素酶活性分析。采用Taqman基因分型技术对50例肺癌组织进行基因分型，以实时定量PCR法检测不同基因型组织标本中pri—miR-30c、pre—miR-30c、成熟miR-30c以及miR-30c宿主基因核转录因子Y（NFYC）的转录水平。结果在A549、293A和CHO细胞中，pG13-promoter—miR-30c—A组荧光素酶的活性与pGL3-promoter—miR-30c—G组比较，差异均无统计学意义（均P〉0．05）。荩因分型的结果昆示，50例肺癌组织中，AA基因型17例，AG基因型21例，GG基因型12例。在rs928508AG／GG基因型肺癌组织中，pre—miR-30c和成熟miR-30c的相对表达水平分别为1．306±0．878和0．384±0．227，均显著低于rs928508AA基因型组织的表达水平（分别为2．103±1．173和0．588±0．307，P=0．009和P=0．011）。而pri-miR-30c和NFYC基凶在各基因型肺癌组织中的相对表达量差异均无统计学意义（P=0．335和P=0．393）。结论在肺癌组织中，miR-30c侧翼Ⅸ的单核苷酸多态性rs928508（A／G）可以影响pri-miR-30c→pre-miR-30c→成熟miR-30c的转化进程，但不能影响pri—miR-30c合成的转录进程。