miRNA-7-EGFR/ERK通路用于卵巢癌治疗的研究进展

卵巢癌(OC)在女性生殖系统肿瘤中致死率最高,治疗多选择手术切除加辅助化疗,然而易出现耐药性,导致患者预后差。miRNA-7在卵巢癌细胞中低表达,通过靶向表皮生长因子受体(EGFR)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路发挥抗肿瘤作用。本综述介绍miRNA-7-EGFR/ERK通路在卵巢癌治疗中的作用,为卵巢癌的治疗提供新的思路。

miRNA-7在小鼠不同组织器官中表达的检测及其意义

目的采用Real-time PCR方法来检测miRNA-7在小鼠12种不同组织器官中的表达情况并探讨其意义。方法首先分别提取小鼠12种组织器官总RNA,用miRNA-7特异性引物逆转录为cDNA,采用Real-timePCR探针法检测miRNA-7在12种组织器官中的表达水平。结果成功应用Real-time PCR方法检测miRNA-7在小鼠12种组织器官中的表达水平,结果显示,miRNA-7在肺组织中的表达水平最高,而在淋巴结中的表达水平最低。此外,在小肠、脑、胸腺、脾脏中也存在miRNA-7的高表达。结论 miRNA-7在小鼠的肺、小肠、脑、胸腺、脾脏中呈较高水平的表达,提示该分子可能在上述器官的发育、分化、功能维持及相关疾病发生中具有重要作用,为后续深入研究miRNA-7的生物学功能提供了前期试验依据。

吉非替尼敏感性不同的非小细胞肺癌中miRNA-7表达的差异及临床意义

目的检测吉非替尼敏感性不同的非小细胞肺癌中miR-7的表达差异,并探讨其临床意义。方法采用吉非替尼(Gefitinib)药物大剂量冲击法诱导H827,建立耐吉非替尼肺癌细胞亚系H827-7/GR,有限稀释法将H827-7/GR细胞单克隆化,CCK-8法检测耐药前后细胞株及各单克隆细胞对吉非替尼的敏感性;RT-PCR方法检测H827、H827-7/GR和耐药单克隆细胞株以及其他对吉非替尼敏感性不同的肺癌细胞株A549、H358、H1299、H1650和H1975中miR-7的表达差异。结果 H827/GR耐药指数大于100;获得的6株耐药单克隆细胞株对吉非替尼的半生长抑制浓度(the half growth inhibition concentration,IC50)值不同;和吉非替尼敏感株H827相比,诱导的耐药细胞株H827/GR、耐药单克隆细胞株和吉非替尼耐药株A549、H358、H1299、H1650和H1975中miR-7的相对表达水平均降低(P<0.05)。结论在非小细胞肺癌中,耐药细胞中miR-7的相对表达水平均较敏感细胞系降低,提示miR-7的低表达可能与非小细胞肺癌耐药性相关,其可能是潜在的肺癌药物敏感性预测分子标志物。

miRNA-7对食管癌细胞TE-1化疗耐药的影响

目的探讨微小RNA-7(miRNA-7)过表达对食管癌细胞TE-1顺铂敏感性的影响及其可能机制。方法用Lipofectmin 2000法向食管癌细胞株TE-1转染组瞬时转染miRNA-7 mimic,向转染对照组瞬时转染mimicNegative Control,通过RT-PCR检测以上2组及空白对照组的miRNA-7以及表皮生长因子受体(EGFR)m RNA表达情况。Western blot法分别检测转染组与转染对照组总EGFR及细胞浆、细胞核内的EGFR蛋白表达。CCK-8检测转染组与转染对照组TE-1的顺铂半数抑制浓度(IC50)。免疫荧光共聚焦显微镜观察转染组与转染对照组EGFR的表达。结果转染组较转染对照组及空白对照组的mi RNA-7表达显著增高,EGFR m RNA表达下降(均P<0.001);转染组较转染对照组总EGFR降低,核内EGFR增高(均P<0.01),胞浆EGFR表达降低(P<0.05);CCK-8结果显示,TE-1中miRNA-7过表达后顺铂(48 h)IC50较转染对照组增高(P<0.01);免疫荧光示转染组较转染对照组核内EGFR增高且胞膜与胞浆EGFR表达减少。结论食管癌细胞TE-1中mi RNA-7过表达可通过EGFR核转位增多使顺铂产生耐药性。

血清标志物联合miRNA-let-7对胶质母细胞瘤化疗效果及预后的评估价值

目的分析miRNA-let-7联合血清标志物对多形性胶质母细胞瘤(GBM)患者化疗效果和预后的预测效果。方法收集25例GBM患者临床资料。纳入同期20名健康志愿者作为对照组。收集患者空腹血清样本,通过实时定量PCR分析血清样本中let-7b、let-7d以及let-7e水平。结果与对照组相比,GBM组患者外周血中let-7b(192.50±18.71 vs.98.13±11.68,t=6.42,P<0.0001)、let-7d(82.97±14.14 vs.44.62±6.83,t=2.41,P<0.05)以及let-7e(139.60±14.62 vs.75.86±9.72,t=5.45,P<0.001)水平显著降低。let-7b、let-7e水平在≥60岁、肿瘤大小≥5 cm、非额颞叶病变、ECOG为2、仅接受活检的GBM患者中显著降低(P<0.05)。此外,Let-7b、Let-7e水平在不同治疗反应的GBM患者中差异有统计学意义(P<0.05)。let-7b和let-7e高表达GBM患者的OS显著高于let-7b和let-7e低表达患者(P<0.05)。结论血液样品中的let-7b、let-7e表达可用于监测GBM、预测患者对治疗的反应和预后。

子宫内膜癌组织中dMMR蛋白和miRNA Let-7表达水平及临床价值的研究

目的探讨子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)中微小RNA Let-7(miRNA Let-7)表达水平与DNA错配修复(DNA mismatch repair,dMMR)蛋白表达缺失的关系及意义。方法选取2016年5月~2022年12月在江苏省连云港市妇幼保健院行根治性手术切除的子宫内膜癌患者74例,分别用免疫组织化学法检测dMMR蛋白(包括MLH1,PMS2,MSH2,MSH6)的表达、实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miRNA Let-7的相对表达量,按照dMMR蛋白表达情况,将EC患者分为表达完整组(n=43)和表达缺失组(n=31),采用Logistic多因素回归分析与dMMR蛋白缺失相关的危险因素、绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评估相关因素的预测价值。结果74例EC病例中,miRNA Let-7的表达水平在肌层浸润<1/2组显著高于肌层浸润≥1/2组,差异具有统计学意义(t=1.79,P=0.04);dMMR蛋白表达的缺失率为41.89%,且年龄<55岁组和miRNA Let-7低表达组(<0.715)患者中的dMMR蛋白缺失率高于≥55岁组和miRNA Let-7高表达组(≥0.715),差异具有统计学意义(χ2=3.92,4.50,均P<0.05);Logistic多因素回归分析结果显示miRNA Let-7表达水平是发生dMMR表达缺失的独立危险因素(P=0.012);Spearman相关分析表明,miRNA Let-7的表达水平与dMMR蛋白缺失呈明显负相关(r=-0.247,P=0.034);ROC曲线分析结果显示,miRNA Let-7表达水平对于预测EC患者中发生dMMR蛋白的缺失具有一定的价值,其AUC为0.737,最佳临界值为0.77,敏感度和特异度分别为0.651,0.806。结论子宫内膜癌患者中miRNA Let-7的表达水平与dMMR蛋白缺失具有相关性,也是发生dMMR蛋白缺失的危险因素,有望为预测dMMR的表达缺失提供帮助。

黄芪总黄酮对特发性肺纤维化miRNA-21、let-7 d及TGF-β/smad信号干预作用

目的：研究黄芪总黄酮对BLM诱导的肺纤维化模型miRNA-21、let-7 d表达水平和TGF-β1/smad信号干预作用。方法：C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、黄芪总黄酮组。模型组及药物处理组小鼠气管内一次性滴注博莱霉素（10 mg/kg）,假手术组予等量生理盐水,造模后治疗组予黄芪总黄酮（43 mg/kg）灌胃,假手术组和模型组与等量生理盐水灌胃。第28天取材,进行HE、Masson染色分析肺组织形态及胶原蛋白表达水平,羟脯氨酸含量测定胶原蛋白含量,realtime-PCR分析miRNA-21、let-7 d表达变化,Western-Bloting检测TGF-β/smad信号及EMT相关蛋白表达。结果：BLM诱导肺纤维化miRNA-21明显上调,而let-7 d下调,在此过程中信号蛋白smad7表达增强mad3磷酸化水平减弱,EMT标记蛋白α-SMA表达增高而E-cadherin减少,黄芪总黄酮对上述改变具有逆转作用,但对let-7 d表达无影响。结论：黄芪总黄酮可通过抑制miRNA-21,增加smad7表达,使TGF-β1/smad激活能力下降,抑制肺纤维化EMT作用。

miRNA-7与肿瘤关系的研究进展

miRNA是内源性表达的多效性非编码小RNA，通过序列特异性与同源信使核糖核酸（mRNA）的3’非翻译区靶向相互作用，使mRNA裂解或抑制其蛋白翻译，进而抑制转录后的基因表达，作为基因表达的强力调控因子已经成为肿瘤领域的研究热门。

miRNA-7过表达对食管癌细胞TE-1顺铂敏感性的影响及机制研究

目的:探讨miRNA-7过表达对食管癌细胞TE-1顺铂敏感性的影响及其可能机制。方法:选择食管癌细胞株TE-1,采用Lipofectmin 2000瞬时转染TE-1细胞,转染对照组瞬时转染miRNA-7-Negative Control,转染组瞬时转染miRNA-7-mimic,未转染的食管癌细胞株TE-1为空白对照组。采用实时荧光PCR方法检测3组表皮生长因子受体(EGRF)mRNA、miRNA-7水平;分别采用Western blot法和CCK-8法检测转染组和转染对照组EGRF蛋白水平及对顺铂敏感性的变化。使用免疫荧光标记法,在聚焦显微镜下观察转染对照组及转染组EGFR分布情况。结果:转染对照组与空白对照组EGFR mRNA、及miRNA-7水平差异均无统计学意义(P>0.05);转染组miRNA-7基因表达水平高于转染对照组与空白对照组(P<0.05),转染组EGFR mRNA基因表达水平显著低于转染对照组与空白对照组(P<0.05);在顺铂浓度为16.66、33.33、66.66μmol/L时,转染对照组的细胞抑制率均高于转染组(P<0.05);转染后48 h,转染对照组浆蛋白及核蛋白中EGFR的表达水平高于转染组(P<0.05);转染对照组EGFR荧光定位主要分布在胞浆及胞膜中,细胞阳性率为100.0%;转染组主要表现为EGFR高表达,但是在胞浆及胞膜中表达水平降低,细胞核呈现出约95.0%的阳性。经Spearman秩相关分析结果提示,miRNA-7与EGFR表达之间呈负相关(r=-1.462,P<0.05)。结论:miRNA-7过表达会降低食管癌细胞TE-1对顺铂的敏感性,其机制可能与EGFR核转位增多有关。

益气活血化痰方作用于巨噬细胞外泌体miRNA-let-7-5p/TAB2信号通路抗动脉粥样硬化的实验研究

目的通过验证巨噬细胞外泌体miRNA-let-7-5p/TAB2的信号通路,探寻益气活血化痰方抗动脉粥样硬化(AS)的分子机制,为益气活血化痰方抗AS提供依据。方法小鼠巨噬细胞RAW 264.7培养与构建AS模型细胞并分组;巨噬细胞外泌体的提取;免疫印迹法(Western Blot)测定外泌体标记表达,评价外泌体的质量;提取总RNA,反转录,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测miRNA表达;双荧光素酶报告基因检测实验分析miRNA-let-7-5p与预测的靶向基因之间的结合关系;益气活血化痰方干预过的小鼠大动脉组织芯片进行比对,寻找差异性基因。结果①外泌体的鉴定:对照组(RAW264.7+磷酸缓冲盐溶液)与AS模型组细胞上清液中CD_(61)与CD_(81)几乎没有表达,而对照组(RAW264.7+磷酸缓冲盐溶液)与AS模型组提取的外泌体中CD_(61)与CD_(81)均高表达,表明外泌体提取成功。②外泌体微小RNA(miRNA)qPCR Array与生物信息学分析:检索3个与AS相关的数据库,有12个miRNA共存在于这3个数据库。③通过芯片分析这12个miRNA在外泌体中的表达,与对照组相比,外泌体组有4个miRNA(miRNA-885、miRNA-21、miRNA-451与miRNA-let-7-5p)表达异常。④外泌体与主动脉内皮细胞(HAEC)共培育后,RT-qPCR检测miRNA表达,与HAEC组相比,只有miRNA-let-7-5p在外泌体与HAEC共培养组中显著表达。⑤生物信息学分析差异miRNA-let-7-5p调控的靶向基因;应用双荧光素酶报告基因实验分析验证miRNA-let-7-5p与预测的靶向基因之间的结合关系,发现TAB2为miRNA-let-7-5p的靶基因。在HAEC中,过表达miRNA-let-7-5p抑制了TAB2的表达。通过查找益气活血化痰方干预过的小鼠大动脉组织芯片,发现miRNA-let-7-5p和TAB2均为差异性基因。结论益气活血化痰方可能通过作用于巨噬细胞外泌体miRNA-let-7-5p/TAB2的信号通路发挥抗AS作用。

miRNA-126和K-Ras及MMP-7在胃癌中的表达及其相关性分析

目的通过检测miRNA-126和预测靶基因K-Ras及MMP-7在胃癌组织中的表达情况,探索miRNA-126在胃癌发生中的作用。为miRNA-126/K-Ras、MMP-7通路研究提供新的理论依据。方法收集2015年3月—2015年12月内蒙古医科大学附属医院收治并确诊的胃癌患者的癌组织和正常组织,共50例。利用免疫组化染色技术检测K-Ras及MMP-7在胃癌组织和正常组织中的表达水平;利用real-time PCR技术检测miRNA-126在胃癌组织和正常组织中的表达水平。结果K-Ras和MMP-7在胃癌组织中高表达;miRNA-126在胃癌组织中低表达;K-Ras和MMP-7在胃癌组织中的表达呈正相关,K-Ras及MMP-7分别表达阳性时,miRNA-126的表达量均偏低。结论K-Ras和MMP-7是胃癌的致癌因子,miRNA-126是胃癌的抑癌因子,K-Ras和MMP-7是miRNA-126的靶基因,且miRNA-126存在抑制K-Ras和MMP-7的作用,miRNA-126/K-Ras、MMP-7通路有望成为胃癌研究和治疗的新方向。

上调miRNA-27a-3p对乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响

目的:探讨上调miRNA-27a-3p(miR-27a-3p)对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法:将miR-27a-3p模拟物转染至MCF-7细胞中,以转染模拟物对照的细胞为阴性对照,以不转染的细胞为空白对照。通过qRT-PCR检测miR-27a-3p的表达,CCK-8实验检测细胞增殖情况,Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力,Western blot检测细胞中PCNA、MMP-2、MMP-9蛋白的表达。结果:与空白对照组和阴性对照组相比,模拟物组MCF-7细胞中miR-27a-3p表达水平,细胞增殖、侵袭和迁移能力,PCNA、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平均升高(P <0. 05)。结论:上调miR-27a-3p能够提高MCF-7细胞的增殖、侵袭和迁移能力,其机制可能与促进PCNA、MMP-2和MMP-9蛋白表达有关。

格列美脲下调miRNA-214表达抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖作用的研究

目的探讨格列美脲通过下调miRNA-214表达抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖的作用机制。方法体外培养人乳腺癌细胞MCF-7,分为空白对照组和格列美脲低、中、高剂量组,在不同剂量格列美脲染毒48 h后,用噻唑蓝(MTT)法测定格列美脲对人乳腺癌细胞MCF-7细胞增殖的影响;实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)法检测miRNA-214,Bax,Bcl-2和Caspase-3 m RNA相对表达量;流式细胞术检测MCF-7细胞凋亡率。结果随着格列美脲剂量的增加,MCF-7细胞增殖率降低,在20μg/m L时降到54.22%,与0μg/m L比较,差异有统计学意义(F=8.52,P<0.05);与空白对照组比较,格列美脲各剂量组MCF-7细胞中miRNA-214 m RNA相对表达量均降低,Caspase-3,Bax,Bcl-2 m RNA相对表达量均增加,Bax/Bcl-2均增高,差异均有统计学意义(F=12.20,20.41,6.31,4.42,6.12,P<0.05);与空白对照组比较,格列美脲各剂量组MCF-7细胞凋亡率均增高,其中格列美脲中、高剂量组比较,差异有统计学意义(F=8.35,P<0.05)。结论格列美脲能抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖,且呈浓度依赖性;格列美脲通过下调miRNA-214的水平,启动细胞凋亡程序,诱导了MCF-7细胞的凋亡。

20(S)-原人参二醇通过调控miRNA-19b诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡的观察

目的:研究20(S)-原人参二醇[20(S)-PPD]通过调控miRNA-19b的表达诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡以及相关作用的机制。方法:采用MTT比色法检测30、40、50、60、70、80μmol/L 20(S)-PPD处理48 h对MCF-7细胞存活率的影响;real-time PCR检测30、50、80μmol/L 20(S)-PPD处理MCF-7细胞48 h后miRNA-19b相对表达量的变化;DNA甲基化转移酶(DNMT)活性检测试剂盒检测30、50、80μmol/L 20(S)-PPD处理MCF-7细胞48 h对DNMT活性的影响。将MCF-7细胞分成瞬时转染miRNA阴性对照模拟物+空白培养液组、瞬时转染miRNA-19b模拟物+20(S)-PPD组、瞬时转染miRNA-19b模拟物+空白培养液组、瞬时转染miRNA阴性对照模拟物+20(S)-PPD组,real-time PCR检测4组细胞miRNA-19b表达量的变化,Western blot检测4组细胞中TNFα蛋白表达量的变化,流式细胞术检测4组细胞的凋亡率。结果:20(S)-PPD可剂量依赖性地降低MCF-7细胞的存活率。随着20(S)-PPD剂量的升高,miRNA-19b的表达量降低(P<0.05)。80μmol/L的20(S)-PPD可增强DNMT活性(P<0.05)。转染miRNA-19b模拟物后,miRNA-19b的表达量上升,TNFα蛋白的表达受到抑制,细胞凋亡率降低;而加入65μmol/L 20(S)-PPD后,miRNA-19b的表达下调,TNFα蛋白的表达上调,细胞凋亡率升高(P<0.05)。结论:20(S)-PPD可能通过甲基化作用抑制miRNA-19b的表达,进而促进TNFα的表达,诱导MCF-7细胞凋亡。

格列美脲通过下调miRNA-34a表达抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖的作用研究

目的:研究微小RNA-34(microRNA-34,miRNA-34a)在格列美脲抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖过程中的作用机制。方法:体外培养人乳腺癌细胞MCF-7,用不同剂量(500,1 000,2 000 nmol·L-1)格列美脲染毒48 h后,采用MTT法测定格列美脲对人乳腺癌细胞MCF-7细胞增殖的影响,RT-PCR检测miRNA-34a、Bax、Bcl-2和caspase-3 mRNA的相对表达量,流式细胞术检测人乳腺癌细胞MCF-7的细胞凋亡率。结果:随着格列美脲剂量的增加,人乳腺癌细胞MCF-7增殖率和miRNA-34a mRNA水平显著降低,caspase-3 mRNA、Bax、Bcl-2、Bax/Bcl-2水平和细胞凋亡率显著升高,与空白组比较差异有统计学意义(P<0.05);且剂量-效应关系明显(P<0.05)。结论:格列美脲对人乳腺癌细胞MCF-7增殖具有抑制作用,其机制可能是通过调低miRNA-34a的表达水平,促进Bax、Bcl-2和caspase-3高表达,启动了细胞凋亡程序,导致了人乳腺癌细胞MCF-7细胞凋亡。

miRNA-27a在人乳腺癌MCF-7/ADR细胞株中的表达及其对细胞耐药的影响

目的探讨miRNA-27a对人乳腺癌多柔比星耐药细胞株MCF-7/Adriamycin(MCF-7/ADR)的影响及其可能的作用机制。方法采用real-time PCR(RT-PCR)检测miRNA-27a和P-glycoprotein(P-gp)在乳腺癌细胞株MCF-7及MCF-7/ADR中mRNA表达。将miRNA-27a模拟物(mimics)转染到MCF-7/ADR细胞中,RT-PCR检测转染后miRNA-27a和P-gp的mRNA表达水平。Western blot法检测miRNA-27a模拟物转染后P-gp蛋白表达水平。细胞划痕实验检测转染0、24、48和72 h后细胞的迁移能力。结果miRNA-27a在MCF-7/ADR细胞中表达量低于MCF-7细胞,差异具有统计学意义(P<0.05)。上调miRNA-27a抑制MCF-7/ADR细胞中P-gp mRNA及蛋白的表达以及细胞的迁移能力,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论miRNA-27a可通过抑制P-gp的表达水平逆转MCF-7/ADR细胞对多柔比星的耐药性。

MicroRNA-7基因敲减小鼠模型的鉴定

目的鉴定miR-7基因敲减小鼠模型,为进一步研究miR-7的生物学功能奠定基础。方法常规剪取7只miR-7基因敲减(miR-7 knock down,miR-7KD)小鼠的脚趾和尾巴,分别用来提取基因组DNA和总RNA;剪取1只WT(wild-type,WT)小鼠的尾巴,提取其总RNA;将提取的两组小鼠的总RNA逆转录成c DNA;分别以基因组DNA和c DNA为模板,用特异性引物PCR技术扩增目的基因增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)片段;提取WT和miR-7KD小鼠7个不同组织器官的总RNA,利用Real-time PCR探针法检测各组织器官中miR-7成熟体的表达水平;HE染色观察miR-7KD小鼠心脏、肺脏以及结肠的形态学结构改变。结果 PCR结果显示,模型小鼠的脚趾基因组DNA和尾巴c DNA中均能扩增出载体目的基因EGFP片段;Real-time PCR结果显示,miR-7KD小鼠心脏、肝脏和脾脏等组织器官miR-7成熟体的表达水平较WT小鼠均显著下调(P<0.05);HE染色结果显示,miR-7KD小鼠心脏、肺脏以及结肠形态学结构发生了明显的病理性改变。结论成功鉴定了miR-7基因敲减小鼠模型,为后续深入探讨该分子的生物学功能提供重要实验基础。

微小RNA-7过表达对人肺癌细胞体内外转移的影响

目的探讨过表达miR-7对人肺癌细胞体内外转移的影响。方法将真核表达载体pcDNA3.1(-)-pri-miR-7(命名为p-miR-7)体外瞬时转染人肺癌95D细胞后,划痕法检测细胞的体外迁移情况;侵袭实验检测细胞侵袭能力的改变;建立人肺癌裸鼠体内转移模型,HE染色观察过表达miR-7对肺部肿瘤转移的影响;免疫荧光技术检测肿瘤转移相关蛋白Sema4C蛋白的表达。结果过表达miR-7可显著抑制人肺癌细胞的体外迁移和侵袭能力(P<0.05);与对照组相比,过表达miR-7组未观察到明显的肺部肿瘤细胞转移灶(P<0.05);免疫荧光结果显示,过表达miR-7组中,肿瘤细胞内Sema4C蛋白表达量显著降低(P<0.05)。结论过表达miR-7可以显著抑制人肺癌细胞体外及体内的转移能力,提示miR-7有望成为肺癌后续基因治疗的新靶点。

Let-7 miRNA家族与胃癌的研究进展

胃癌发病率较高,对人们的健康造成了严重威胁。其早期临床症状并不典型且诊断率低,患者出现明显临床症状时多数已发展为进展期或晚期,此时手术效果及预后不理想。早期胃癌的治疗主要以手术根治为主,而进展期胃癌还需要联合化疗等方式进行后续治疗,但由于化疗药物多耐药,导致预后不佳。miRNA广泛参与了细胞的一系列重要生理活动,包括细胞的增殖、凋亡、发育、分化和代谢等,与胃癌及各类肿瘤的发生发展和预后密不可分。Let-7 miRNA家族是第2个被发现的miRNA。研究发现其在胃癌及各类肿瘤中低表达,但其调控机制尚不清楚。因此,明确Let-7 miRNA家族与胃癌的关系对胃癌的诊断治疗及预后有着十分重要的作用。

miRNA-191对人乳腺癌细胞增殖、侵袭的影响

目的探讨miR-191在人乳腺癌细胞中的表达情况,研究其对乳腺癌细胞的增殖、侵袭的影响。方法 real-time PCR检测乳腺癌细胞[MDA-MB-231(雌激素受体阴性,ER-)、MCF-7(雌激素受体阳性,ER+)]和正常乳腺上皮细胞(HBL-100)中miR-191表达水平的差异;利用Lipofectamine2000将miR-191抑制体瞬时转染乳腺癌MCF-7,并用real-time PCR检测转染效果;分别用CCK-8法检测MCF-7细胞增殖,流式细胞术检测MCF-7细胞的细胞周期,Transwell法检测MCF-7细胞的侵袭能力。结果与正常乳腺细胞相比,miR-191在乳腺癌细胞中高表达(P<0.01),且在ER(+)乳腺癌细胞MCF-7中的表达水平高于ER(-)乳腺癌细胞MDA-MB-231(P<0.01),转染miR-191抑制体后,MCF-7细胞增殖能力(0.65±0.04)较阴性对照组(1.18±0.05)明显受到抑制(F=122.238,P<0.01),侵袭能力(56.67±2.58)较阴性对照组(82.5±5.79)减弱(F=18.734,P<0.01),G0/G1期的细胞比例(73.39±1.10)%较阴性对照组(69.28±2.11)%增加(F=61.060,P<0.01),S期细胞比例(20.9±1.17)%较阴性对照组(25.48±1.19)%减少(F=46.937,P<0.01)。结论 miR-191在人乳腺癌细胞中,特别是ER(+)乳腺癌中高表达,转染miR-191抑制体后,MCF-7细胞增殖、侵袭能力明显受到抑制。