附子酸性多糖提高免疫低下小鼠免疫功能的实验研究

目的观察附子酸性多糖对环磷酰胺所致免疫低下小鼠免疫功能的影响。方法采用植物化学方法得到附子酸性多糖,以灌胃和腹腔注射2种方式给药,观察免疫低下小鼠的胸腺、脾脏指数,腹腔巨噬细胞吞噬功能,血清溶血素,淋巴细胞转化率,自然杀伤细胞活性以及外周血白细胞计数等多项指标,与对照组比较评价附子酸性多糖对免疫低下小鼠细胞和体液免疫功能的影响。结果附子酸性多糖可显著提高正常小鼠和免疫低下小鼠的脾脏和胸腺指数,提高小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬功能和抗体产生能力,促进淋巴细胞增殖,增强自然杀伤细胞活性,并且可以显著提高白细胞数量(P<0.05或P<0.01)。腹腔注射较灌胃给药的效果更为明显(P<0.01)。结论附子酸性多糖可以显著提高免疫低下小鼠体液免疫和细胞免疫功能,并可减轻由于环磷酰胺引起的白细胞降低,具有减轻化疗药的毒副作用。且不同给药途径可影响其疗效。附子酸性多糖具有广阔的开发应用前景。

参芪扶正注射液对肺癌化疗后小鼠血清IL-2、INF-γ及免疫功能的影响

目的探讨参芪扶正注射液对肺癌小鼠化疗后免疫功能的影响。方法采用顺铂(DDP)3 mg/(kg.d)7 d连续腹腔注射建立肺癌小鼠化疗后动物模型。治疗组给予参芪扶正注射液40、80 mL/(kg.d)分别腹腔注射给药,连续7 d;对照组予生理盐水40 mL/(kg.d)。末次给药后24 h采用免疫器官重量法检测胸腺指数、脾脏指数,采用放射免疫法测定小鼠血清中IL-2和INF-γ的含量。结果治疗组小鼠胸腺、脾脏指数均高于对照组(P<0.05);治疗组小鼠血清IL-2和INF-γ水平显著高于对照组(P<0.05)。结论参芪扶正注射液可通过提高肺癌小鼠化疗后血清中IL-2和INF-γ的含量而提高机体免疫功能,临床上可试用参芪扶正注射液对肺癌化疗后免疫功能低下的患者进行治疗。

顺铂诱导三阴性乳腺癌4T1耐药小鼠模型的建立

目的建立一种耐药性稳定的三阴性乳腺癌4T1耐药小鼠模型,为研究体内肿瘤耐药机制和逆转药物的筛选奠定实验基础。方法采用顺铂(DDP)低剂量诱导及体内外交叉致瘤结合的方法建立三阴性乳腺癌耐药小鼠模型;MTT法检测细胞耐药特性;实时荧光定量PCR法分析耐药相关基因MDR1、BCRP、MMP7及GST-π表达差异;免疫组化分析耐药相关蛋白P-gp、BCRP、MMP7表达差异;蛋白印迹法检测磷酸化Akt(phosphorate-Akt,p-Akt)和总Akt(total-Akt,t-Akt)蛋白表达;小动物成像检测观察肿瘤生长情况。结果 MTT显示建立的三阴性乳腺癌耐药4T1小鼠模型的耐药指数为12.84;耐药小鼠肿瘤组织中MDR1、BCRP、MMP7、GST-π基因mRNA的表达量及P-gp、BCRP、MMP7蛋白的表达量均高于非耐药小鼠(P<0.01);Western blot显示,耐药小鼠肿瘤组织的p-Akt蛋白表达明显高于非耐药小鼠,t-Akt蛋白表达没有差异。非耐药小鼠与耐药小鼠肿瘤组织生长速度未见明显区别(P>0.05)。分别给予这两种模型小鼠相同剂量的DDP治疗后,耐药小鼠对DDP的敏感性明显低于非耐药小鼠(P<0.01)。结论初步建立了三阴性乳腺癌耐药4T1小鼠模型,为三阴性乳腺癌临床个体化治疗及耐药逆转研究等提供了良好的实验动物平台。

中国首株副瘰疬分枝杆菌临床分离株的生物学特征和毒力研究

目的 对中国肺病患者体内首次分离到的1株副瘰疬分枝杆菌进行了生物学特征与毒力研究,以提高对该分枝杆菌的认识.方法 2013年对源于2007 2008年全国耐药基线调查的140株非结核分枝杆菌（NTM）,通过联合测定16S rRNA、16S～23S rRNA间隔区（ITS）和hs筇5基因序列进行菌种鉴定,分离到1株副瘰疬分枝杆菌.通过开展一系列标准生化试验,包括生长试验、硝酸还原酶测定、芳基硫酸酯酶测定、碲酸钠还原试验、吐温水解试验、尿素酶试验,以及在50 mg/ml对硝基苯甲酸（PNB）、10 mg/ml噻吩-2-羧酸肼（TCH）、5％ NaCl和麦康凯琼脂上进行生长试验,阐明其生物学特征.通过Alamar blue微量稀释法测定其对利福平、乙胺丁醇、异烟肼、阿米卡星、磺胺甲恶唑、氧氟沙星、对氨基水杨酸、利福喷丁、卷曲霉素、头孢西丁、亚胺培南、米诺环素、多西环素、克拉霉素、阿奇霉素、美罗培南、甲氧苄氨嘧啶、利福布汀、利奈唑胺、链霉素、丙硫异烟胺、莫西沙星和左氧氟沙星共23种抗生素的药物敏感性.为了研究副瘰疬分枝杆菌的毒力,通过尾静脉和腹腔注射两种途径感染C57BL/6小鼠,在小鼠感染后的第2、4、8周取肺脏和脾脏检测细菌载量和病理组织学变化,确定其对小鼠的致病性.结果 该株副瘰疬分枝杆菌在37℃生长旺盛,菌落光滑并呈半球形,呈黄至橘黄色.在体外对利福布丁、利福喷丁、克拉霉素、阿奇霉素、头孢西丁和莫西沙星敏感.在C57BL/6小鼠感染后的第2周,病理组织学结果显示小鼠肺组织出现局限性炎症反应,表现为外周支气管炎性渗出.在感染后的第4和第8周,肺组织表现为外周支气管炎性渗出伴有大量炎性细胞聚集,部分组织有肉芽肿生成,但无坏死.在小鼠感染的8周时间内,肺组织和脾组织中细菌载量呈逐渐上升趋势.结论 该副瘰疬分枝杆菌在体外对利福布汀、利福喷丁、克拉霉素、阿奇霉素、头孢西丁和莫西沙星敏感;可在小鼠体内感染扩增,并可引起小鼠肺组织病变.

活体成像动态观察黄芪多糖对裸鼠卵巢癌细胞休眠的维持作用

目的:利用活体成像技术观察黄芪多糖对裸鼠卵巢癌细胞休眠的维持作用。方法:选取建立成功的卵巢癌细胞休眠裸鼠模型30只随机分成3组:即对照组、黄芪多糖组、顺铂组,每组10只,连续给药14天;利用活体成像系统分别在给药前1天、给药后第7天、第14天监测各组裸鼠卵巢癌细胞休眠情况。结果:与对照组比较,黄芪多糖组给药后第7天、第14天,裸鼠体质量无明显变化;而顺铂组在给药后第7天、第14天,体质量明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。对照组裸鼠卵巢癌休眠细胞光子量随着时间而升高。与对照组比较,黄芪多糖组和顺铂组在给药第7天、第14天时,裸鼠肿瘤休眠细胞光子量明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:黄芪多糖具有较好的维持裸鼠卵巢癌细胞休眠的作用,活体成像技术可动态地观察肿瘤细胞休眠的情况,为黄芪多糖应用于临床提供理论依据。

利用基因芯片法探索人前列腺癌细胞PC-3M在裸鼠体内淋巴道转移相关基因

背静与目的:前列腺癌是欧美国家最常见的一种男性恶性肿瘤,近年来在我国该病也有明显上升趋势。目前认为肿瘤转移是由于一部分肿瘤细胞在肿瘤生长过程中发生基因水平的变化而改变性质变成“转移克隆的细胞”,这部分细胞能突破机体防御系统最终到达远处组织器官形成转移灶。本实验旨在探索人前列腺癌细胞PC-3M在裸鼠体内淋巴道转移的相关基因,为进一步研究前列腺癌淋巴道转移机制打下一定的基础。方法:将PC-3M细胞原位接种于裸鼠体内两个月后分别从原发灶和淋巴结转移灶分离肿瘤细胞,通过体外侵袭和粘附实验,比较两者体外侵袭和粘附能力的差异,并应用基因芯片技术,检测两细胞在转移相关基因丰度水平上的差异。结果:淋巴结转移灶分离的肿瘤细胞的体外侵袭及粘附能力显著高于原发灶内分离的肿瘤细胞,大约分别为后者的2.5倍和1.5倍;而且前者在一些转移相关基因丰度水平上明显高于后者,这些基因按其编码产物的属性和功能可划分为:①编码降解细胞外基质(ECM)的蛋白水解酶包括组织蛋白酶、基质金属蛋白酶;②编码转录因子家族成员;③编码参与肿瘤细胞异质性粘附的分子;④编码细胞表面受体。结论:原发灶内的前列腺癌细胞和淋巴结转移灶内的肿瘤细胞在侵袭和粘附能力上存在显著差异,经鉴定的差异表达分子可能在前列腺癌细胞由原发灶迁移到远处组织器官的转移过程中发挥重要作用。

人源性的小细胞肺癌异种移植动物模型及耐药模型的建立

背景与目的小细胞肺癌(small cell lung cancer, SCLC)是细胞分化程度低,恶性程度高,生长速度快,早期容易发生转移的恶性肿瘤。目前SCLC患者的临床治疗以化疗为主,但是在治疗6个月-9个月后极易发生获得性耐药而复发。因此,构建有效的临床前SCLC动物模型具有重要的临床价值。人源性肿瘤异种移植动物模型(patient-derived xenotransplantation, PDX)能够较好地保留原发肿瘤的特性,是比较理想的临床前动物模型。本研究旨在构建中国人来源的SCLC PDX动物模型,并诱导构建化疗耐药的PDX模型,为研究SCLC耐药机制及个体化治疗提供实验模型。方法取临床SCLC患者的新鲜手术切除标本或穿刺标本,移植至重度免疫缺陷小鼠NOD-PrkdcscidIL2rgtm1/Bcgen(B-NSGTM)皮下,HE染色及免疫组化对比移植肿瘤组织与患者肿瘤组织的病理学一致性。给予可稳定传代的每一代PDX模型小鼠腹腔注射8个周期的化疗药物(顺铂8 mg/kg+依托泊苷5mg/kg),定期监测荷瘤小鼠体质量和肿瘤体积,对长至1,000 mm^3大小的肿瘤进行传代移植。结果本研究收集并移植9例SCLC肿瘤标本,成功构建可多次传代SCLC PDX模型3例并成功诱导其耐药模型,模型较好地保留了原发肿瘤的特征。结论成功构建了SCLC PDX模型及其耐药模型,建模成功率为33%。为后续研究人的SCLC耐药机制、临床药物筛选以及个体化治疗提供了实验平台。

聚合人脐带血血红蛋白氧载体增强仑伐替尼对肝癌移植瘤裸鼠疗效的初步实验

目的探讨输注聚合人脐带血血红蛋白氧载体(PolyCHb)增强肝癌荷瘤裸鼠对仑伐替尼治疗敏感性的作用机制。方法建立Hep3B肝癌细胞系裸鼠皮下移植瘤模型,将18只荷瘤小鼠随机均分为对照组:生理盐水灌胃90 mg·kg -1·d^(-1);单药组:仑伐替尼灌胃10 mg·kg^(-1)·d^(-1);增敏组:仑伐替尼灌胃10 mg·kg^(-1)·d^(-1),PolyCHb尾静脉注射600 mg·kg^(-1),2次/周;3组均连续给药28 d,定时测量肿瘤体积、绘制肿瘤生长曲线,在29 d处死裸鼠,剥瘤称取肿瘤重量并做苏木精-伊红染色法(HE)切片评价各组肿瘤的病理形态学;免疫组化(IHC)法测定各组肿瘤组织中缺氧诱导因子(HIF-1α)、CD34、血管内皮生长因子(VEGF)、CD44、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、葡萄糖转运蛋白1 (GLUT-1)的表达量;二氢乙锭法测定各组肿瘤组织中活性氧(ROS)的含量。结果 29 d(给药28 d结束后24 h),对照组、单药组及增敏组分别为肝癌荷瘤裸鼠肿瘤体积(mm3):2 076.46±350.25 vs 1 035.96±84.16 vs 892.66±104.46(P<0.05);肿瘤重量(g):1.61±0.52 vs 0.45±0.10 vs 0.34±0.13(P<0.05);IHC评分(分):HIF-1α分别为75±23 vs 45±18 vs 18±11,VEGF分别为52±8 vs 67±16 vs 35±4,CD34分别为40±7 vs 50±13 vs 28±7,CD44分别为37±15 vs 30±7 vs 15±3,GLUT-1分别为74±41 vs 51±30 vs 14±18,MMP-9分别为51±7 vs 62±20 vs 33±3(均为P<0.05);HE切片染色评价:增敏组的肿瘤恶性程度明显低于单药组和对照组;肿瘤组织的ROS含量评价:增敏组较单药组、对照组有所提高。结论 PolyCHb的氧合作用,降低了裸鼠肝癌移植瘤模型中HIF-1α及其下游通路相关分子的表达,在一定时间内延缓了肿瘤生长,提升增强了仑伐替尼的疗效。

“扶Ⅱ号”抑制癌细胞转移的研究

以蕲蛇、地龙等鲜动物药组方的抗癌制剂──扶Ⅱ号，对小鼠宫颈癌，肺转移率、转移程度及淋巴细胞转移率均有明显的抑制作用，对肺腺癌的转移程度亦有明显的抑制作用。

聚合人脐带血红蛋白氧载体增强乳腺癌裸鼠皮下移植瘤化疗敏感性的初步研究

目的探讨聚合人脐带血红蛋白氧载体(PolyCHb)对人乳腺癌MCF-7细胞裸鼠皮下移植瘤化疗敏感性的影响及其机制。方法收集处于指数生长期的MCF-7细胞,制成密^度为5×10^(7)个/mL的悬浮细胞,按0.2 mL/只接种于18只BALB/c-nu裸鼠右肢皮下,建立裸鼠移植瘤模型,待肿瘤体积达到100 mm^(3)左右时,随机均分为化疗组:多柔比星(DOX)5 mg·kg^(-1),1次/周;化疗+PolyCHb治疗组:除给药(DOX)(同化疗组)外,PolyCHb 600 mg·kg^(-1),3次/周;对照组:生理盐水90 mg·kg^(-1),1次/周;均为经尾静脉连续注射4周。自注射当天(d0)起,每3 d 1次测量各组裸鼠肿瘤体积,据此绘制其各自(组)肿瘤生长曲线。38 d结束肿瘤生长观察,剥瘤并称取瘤重,计算抑瘤率;HE染色观察肿瘤组织病理变化,免疫组化检测肿瘤组织中HIF-1α表达,采用TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡情况,荧光染色测定各组肿瘤组织活性氧(ROS)的含量。结果化疗+PolyCHb组、化疗组和对照组至d38时的肿瘤体积(mm^(3))分别为:196.35±103.45 vs 316.29±62.88 vs 519.42±177.33(P<0.05);化疗+PolyCHb组与化疗组抑瘤率(%)分别为62.20 vs 39.11;HE染色和TUNEL检测:化疗+PolyCHb组肿瘤组织生长区域细胞坏死和凋亡增多;免疫组化:化疗+PolyCHb组HIF-1α表达水平降低;荧光染色:化疗+PolyCHb组[活性氧(ROS)]含量增多。结论PolyCHb增加了乳腺癌裸鼠皮下移植瘤化疗的敏感性,其作用机制可能与其提高肿瘤组织内ROS含量,促进肿瘤细胞的凋亡有关。

三叶青黄酮干预荷肺癌小鼠MDSCs生成及相关因子表达的研究

目的:探讨三叶青黄酮对荷Lewis肺癌小鼠髓系来源的抑制细胞(MDSCs)、前列腺素2(PGE2)、环氧合酶-2(COX-2)的作用及其调节荷瘤鼠免疫功能、逆转肿瘤免疫逃逸的可能机制。方法:将40只C57BL/6小鼠分为模型组、塞来昔布组及三叶青黄酮高、中、低剂量组(以下简称高、中、低剂量组),每组8只。建立荷Lewis肺癌小鼠模型,模型制备成功24 h后,高、中、低剂量组分别灌胃浓度为100 mg/mL、50 mg/mL、25 mg/mL的三叶青黄酮溶液,塞来昔布组灌胃浓度为100 mg/mL的塞来昔布溶液,模型组灌胃0.9%生理盐水。14 d后处死各组小鼠计算抑瘤率,流式细胞仪检测各组小鼠脾单个核细胞MDSCs的含量,酶联免疫吸附法测定外周血中COX-2、PGE2含量。结果:与模型组比较,其余各组肿瘤体积、瘤重均较小(P<0.05),外周血中COX-2、PGE2含量及脾细胞中MDSCs比例均下降(P<0.05)。与塞来昔布组比较,低剂量组第8天、第12天、第14天肿瘤体积均较大(P<0.05),瘤重较大(P<0.05),外周血中COX-2、PGE2含量较高(P<0.05);中剂量组第8天时肿瘤体积较大(P<0.05),外周血中PGE2含量较高(P<0.05);高剂量组第14天时肿瘤体积较小(P<0.05);低、中剂量组抑瘤率较低(P<0.05),MDSCs比例较高(P<0.05)。结论:三叶青黄酮具有抑瘤作用,且该作用与其下调MDSCs、COX-2、PGE2有关。

杠板归对流感病毒感染鼠的防护作用研究

目的:评价中药杠板归体内抗流感病毒的药效。方法:120只BABL/c小鼠适应性饲养7天后随机分成6组,每组20只,分别为正常组、病毒对照组、利巴韦林组、杠板归高剂量组、杠板归中剂量组、杠板归低剂量组。乙醚麻醉小鼠,以10LD_(50)流感病毒40μL滴鼻感染小鼠,1h后开始给药,正常组和病毒对照组灌胃生理盐水0.1mL/d,利巴韦林组灌胃利巴韦林100mg/(kg·d),杠板归高、中、低各剂量组分别灌胃杠板归水煎液20g/(kg·d)、10g/(kg·d)、5g/(kg·d)。连续给药7天,每天记录体质量变化以及感染小鼠死亡情况。第8天,眼球取血,检测血清中免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白G亚型1b(IgG1b)、免疫球蛋白G亚型2a(IgG2a)、白细胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;摘取肺组织,称肺重,进行病理检测。结果:与正常组比较,病毒对照组小鼠肺指数、IL-1、TNF-α、IgA、IgG、IgG1b、IgG2a水平显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与病毒对照组比较,利巴韦林组和杠板归中剂量组小鼠肺指数显著降低;利巴韦林组、杠板归中剂量组、杠板归低剂量组小鼠炎症因子IL-1和TNF-α水平显著降低;利巴韦林组和杠板归中剂量组小鼠IgA、IgG、IgG1b、IgG2a水平显著升高,杠板归低剂量组小鼠IgA水平显著升高;差异均有统计学意义(P<0.05)。与利巴韦林组比较,杠板归中剂量组小鼠肺指数、炎症因子IL-1、IgA水平较高,TNF-α水平较低;杠板归低剂量组小鼠肺指数、炎症因子IL-1水平较高,IgG1b水平较低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:有效剂量的中药杠板归能够提高流感病毒感染鼠的抗体水平,降低炎症因子含量以及肺指数,减轻肺部炎症,表现出较好的抗病毒作用。

三叶青黄酮干预荷癌小鼠Treg细胞生成及其CD152表达的研究

目的:研究三叶青黄酮对荷Lewis肺癌模型小鼠脾脏Treg细胞生成及其CD152表达的影响。方法:将小鼠随机分为非造模组、生理盐水组、塞来昔布组、三叶青黄酮高、中、低剂量组,除非造模组外,其它各组皮下接种法建立Lewis肺癌小鼠模型,接种24 h后开始灌胃给药,每天1次,非造模组不灌胃。分别于给药14、23天后,处死半数动物,取脾脏,分离单个核细胞,流式细胞术测定脾脏单个核细胞中Treg细胞比例及CD152表达。结果:第23天时,与生理盐水组比较,塞来昔布组、三叶青黄酮高、中剂量组小鼠的瘤体明显减小,差异均有统计学意义(P<0.01)。三叶青黄酮各剂量组间瘤体比较存在差异(P<0.05),瘤体大小依次为:三叶青黄酮高剂量组<三叶青黄酮中剂量组<三叶青黄酮低剂量组;塞来昔布组抑瘤效果与中剂量组相近(P>0.05)。与非造模组比较,其它各组小鼠Treg细胞比例和CD152的表达均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。第23天时,与生理盐水组比较,各给药组小鼠Treg细胞比例和CD152的表达均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。三叶青黄酮各剂量组间Treg细胞比例比较存在差异(P<0.01),Treg细胞比例依次为:三叶青黄酮高剂量组<三叶青黄酮中剂量组<三叶青黄酮低剂量组;塞来昔布组Treg比例与中剂量组相近(P>0.05)。塞来昔布组下调CD152表达效果最佳,与三叶青黄酮中、低剂量组比较有显著差异(P<0.05),三叶青黄酮各剂量组间无明显差异(P>0.05)。结论:三叶青黄酮的抑瘤效果可能与下调Treg细胞比例和CD152表达有关,逆转免疫抑制。

非甾体消炎药抑制小鼠胃癌转移潜能的研究

目的:观察非甾体消炎药(nonsteroidal antiinflammatory drugs,NSAIDs)抑制小鼠胃癌转移潜能的效应,探讨其作用机制。方法:建立人胃癌细胞SGC7901裸鼠种植瘤模型,将30只小鼠随机分为3组:对照组、观察1组、观察2组,每组10只。对照组给予阿拉伯树胶,观察1组给予舒林酸,观察2组给予塞来昔布。采用免疫组化两步法和Western Blot检测CD44v6、ICAM-1、E-cadherin、FGF-1和VEGF的蛋白表达水平,用RT-PCR检测VEGF的mRNA水平。结果:观察1、2组CD44v6、ICAM-1、FGF-1和VEGF蛋白表达水平均明显低于对照组(P均<0.05),观察1、2组E-cadherin蛋白表达水平与对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。观察1、2组和对照组VEGF的mRNA水平分别为(30.9±14.4)%、(25.6±16.2)%、(46.5±28.7)%,观察1、2组VEGF的mRNA水平均明显低于对照组(P均<0.05)。结论:NSAIDs在体内具有显著抗胃癌效应,并可能通过调节某些肿瘤转移相关因子表达来抑制胃癌转移。

香菇多糖联合云芝糖肽对Lewis肺癌小鼠免疫调节与抗肿瘤作用的研究

目的:探讨香菇多糖(Lentinan,LNT)和云芝糖肽(Polysaccharopeptide,PSP)联合使用对免疫抑制小鼠和肺癌小鼠的免疫调节作用和抗肿瘤活性。方法:以Lewis肺癌细胞建立肺癌小鼠模型,随机分为空白组(B1组)、生理盐水组(N1组)、PSP+LNT组(C1组)和阿霉素(Adriamycin,ADM)组(A1组);以多柔比星KM小鼠建立免疫抑制模型,随机分为空白组(B2组)、生理盐水组(N2组)和PSP+LNT组(C2组);2模型中B1组和B2组小鼠不行肺癌细胞和ADM注射,2模型中N1组与N2组、C1与C2组在建模后连续20天分别通过灌胃法注入生理盐水0.2 mL和PSP+LNT的混合溶液0.2 mL,A1组小鼠连续3天腹膜内注射4 mg/(kg·d) ADM。采用自动血细胞分析仪对外周血白细胞(WBC)进行计数;比较各组小鼠胸腺指数、脾脏指数和抑瘤作用;采用流式细胞术测定外周血中CD4^+和CD8^+T淋巴细胞,并计算其比值;用微量样本多指标流式蛋白定量方法 (CBA)和小鼠Th1/Th2/Th17细胞因子CBA分析试剂盒测定小鼠血清中白细胞介素-2 (Interleukin-2,IL-2)、肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor,TNF)、干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-4 (Interleukin-4,IL-4)、白细胞介素-6 (Interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-10 (Interleukin-10,IL-10)和白细胞介素-17A (Interleukin-17A,IL-17A)的含量。结果:肺癌模型中,与B1组比较,N1组外周WBC数量、胸腺指数、脾脏指数、CD4^+/CD8^+T比值、TNF、IFN-γ、IL-2和IL-17A均显著降低(P <0.05),血清中IL-10的含量增高(P <0.05);与N1组比较,C1组外周WBC数量、胸腺指数、脾脏指数、CD4^+/CD8^+T比值、TNF、IFN-γ、IL-2和IL-17A均显著提高(P <0.05),血清中IL-10的含量降低(P <0.05),平均肿瘤重量较低(P <0.05);而A1组外周WBC数量、胸腺指数、脾脏指数、CD4^+/CD8^+T比值、TNF、IFN-γ、IL-2和IL-17A明显降低(P <0.05),2组平均肿瘤重量没有差别。免疫抑制模型中,与B2组比较,N2组外周WBC数量、胸腺指数、脾脏指数、CD4^+/CD8^+T比值、TNF、IFN-γ、IL-2和IL-17A均显著降低(P <0.05),血清中IL-10的含量增高(P <0.05);与N2组比较,C2组外周WBC数量、胸腺指数、脾脏指数、CD4^+/CD8^+T比值、TNF、IFN-γ、IL-2和IL-17A均显著提高(P <0.05),血清中IL-10的含量降低(P <0.05)。结论:LNT和PSP联合使用对Lewis肺癌小鼠有免疫促进作用和抗肿瘤作用。

参灵颐肝汤对对乙酰氨基酚所致肝损伤小鼠的治疗及作用机制研究

目的观察参灵颐肝汤对对乙酰氨基酚(APAP)所致肝损伤小鼠的治疗效果,并探讨作用机制。方法将50只ICR小鼠按照随机数字表法分为空白对照组、模型组、乙酰半胱氨酸组、参灵颐肝汤组、两药联用组,每组10只。空白对照组予0.9%氯化钠注射液0.13 mL/10 g灌胃,其余4组予25 mg/mL APAP溶液0.13 mL/10 g灌胃,每2 d 1次,连续2周,建立急性肝损伤模型。造模后,空白对照组、模型组予0.9%氯化钠注射液0.2 mL/10 g灌胃,乙酰半胱氨酸组予10 mg/mL的乙酰半胱氨酸溶液0.1 mL/10 g腹腔注射,参灵颐肝汤组予3.5 g/mL的参灵颐肝汤0.2 mL/10 g灌胃,两药联用组予3.5 g/mL的参灵颐肝汤0.2 mL/10 g灌胃联合10 mg/mL的乙酰半胱氨酸溶液0.1 mL/10 g腹腔注射,每日1次,连续2周。检测各组小鼠血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TBiL)水平;检测肝脏匀浆液上清白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平。取肝脏右叶进行苏木精-伊红(HE)染色,观察肝组织的病理改变情况。结果与空白对照组比较,模型组、乙酰半胱氨酸组小鼠血清AST、ALT、TBiL水平均升高(P<0.05),参灵颐肝汤组小鼠血清AST、ALT水平均升高(P<0.05),两药联用组小鼠血清AST水平升高(P<0.05)。与模型组比较,乙酰半胱氨酸组、两药联用组小鼠血清AST、ALT、TBiL水平均降低(P<0.05),参灵颐肝汤组小鼠血清AST、TBiL水平均降低(P<0.05)。与乙酰半胱氨酸组比较,参灵颐肝汤组、两药联用组小鼠血清AST、TBiL水平均降低(P<0.05)。与参灵颐肝汤组比较,两药联用组小鼠血清ALT水平降低(P<0.05)。与空白对照组比较,模型组、乙酰半胱氨酸组小鼠肝组织IL-6、MDA水平均升高(P<0.05),SOD水平均降低(P<0.05);参灵颐肝汤组、两药联用组小鼠肝组织SOD水平均降低(P<0.05)。与模型组比较,乙酰半胱氨酸组小鼠肝组织IL-6、TNF-α、MDA水平均降低(P<0.05),SOD水平升高(P<0.05);参灵颐肝汤组、两药联用组小鼠肝组织IL-6、MDA水平均降低(P<0.05)。与乙酰半胱氨酸组比较,参灵颐肝汤组小鼠肝组织MDA水平降低(P<0.05),两药联用组小鼠肝组织IL-6、MDA水平均降低(P<0.05)。与参灵颐肝汤组比较,两药联用组小鼠肝组织IL-6水平降低(P<0.05)。空白对照组小鼠肝细胞核排列规整,可以清晰地看到肝小叶结构;模型组小鼠肝细胞的结构遭到破坏,肝细胞出现不同程度坏死、变性,肝索紊乱并伴有明显的炎症细胞浸润;与模型组比较,乙酰半胱氨酸组、参灵颐肝汤组、两药联用组肝组织结构均有不同程度的改善,乙酰半胱氨酸组、参灵颐肝汤组有少量炎性浸润,细胞坏死的现象减轻,两药联用组细胞排列比较整齐,未见大面积炎性浸润及坏死,与空白对照组最为相似。结论参灵颐肝汤可显著降低APAP所致肝损伤小鼠体内AST、TBiL、IL-6、MDA水平,且可改善肝脏病理变化,但对ALT、TNF-α、SOD指标无明显改善作用,考虑其作用机制可能与抗炎、抗氧化和抑制细胞凋亡有关。