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TGFα/EGFR通路相关蛋白在B6-Co小鼠眼睑中的表达 被引量:2
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作者 缪进 李瑶 +2 位作者 刘春 宋鸿雁 邵义祥 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2015年第1期28-31,共4页
目的研究转化生长因子α(transforming growth factorα,TGFα)/表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)通路相关蛋白在B6-Co胎鼠眼睑中的表达情况,探讨B6-Co小鼠眼睑发育异常的原因。方法取胚胎16.5 d、17.5 d、18.... 目的研究转化生长因子α(transforming growth factorα,TGFα)/表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)通路相关蛋白在B6-Co胎鼠眼睑中的表达情况,探讨B6-Co小鼠眼睑发育异常的原因。方法取胚胎16.5 d、17.5 d、18.5 d的B6和B6-Co胎鼠头部,做冰冻切片,通过免疫荧光法检测各时间点TGFα在眼睑部位的原位表达情况;提取蛋白,采用Western blot法检测TGFα表达及EGFR、细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinase,ERK)磷酸化蛋白表达情况。结果免疫荧光检测结果示,TGF氉α主要表达于眼睑间质区,3个时间点B6-Co胎鼠眼睑中TGFα表达的荧光强度均高于同一时间点在B6胎鼠眼睑中的表达。Western blot检测结果示,3个时间点B6-Co胎鼠眼睑中TGFα、p-EGFR的表达与B6胎鼠相比,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。p-ERK在胚胎16.5 d和17.5 d时,B6-Co胎鼠眼睑中的表达量分别为3.79±0.32和3.77±0.16,均显著高于在相应时间点B6胎鼠眼睑中的表达量1.48±0.11和1.45±0.07,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 TGFα/EGFR通路的下游因子ERK可能是导致B6-Co小鼠眼睑异常发育的重要因子。 展开更多
关键词 b6-co小鼠 眼睑 转化生长因子Α 表皮生长因子受体 细胞外调节蛋白激酶
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B6-Co小鼠角膜病的细菌学因素探讨 被引量:4
2
作者 邵义祥 殷小敏 +2 位作者 王春中 蒋荧梅 管怀进 《实验动物与比较医学》 CAS 2008年第5期277-281,共5页
目的探讨B6-Co小鼠角膜浑浊形成的细菌学因素。方法以正常B6和B6-Co小鼠为研究对象,从不同日龄组的小鼠眼部取角膜分泌物或角膜刮片,分别接种到血平板和营养肉汤上,恒温培养24h。挑取菌落或肉汤管内的悬浮液涂片,革兰氏氏染色,镜检,记... 目的探讨B6-Co小鼠角膜浑浊形成的细菌学因素。方法以正常B6和B6-Co小鼠为研究对象,从不同日龄组的小鼠眼部取角膜分泌物或角膜刮片,分别接种到血平板和营养肉汤上,恒温培养24h。挑取菌落或肉汤管内的悬浮液涂片,革兰氏氏染色,镜检,记录结果。将纯化培养获得的细菌进行鉴定。结果正常B6小鼠与角膜浑浊小鼠存在角膜细菌学差异。结论B6-Co小鼠角膜混浊与微生物感染有关。 展开更多
关键词 角膜病 细菌学 发病机制 b6-co小鼠
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B6-Co突变系小鼠混浊角膜组织蛋白的二维凝胶电泳分析 被引量:1
3
作者 管程齐 蒋康伦 +2 位作者 吴刘成 凌雪萍 邵义祥 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2012年第46期8680-8684,共5页
背景:从蛋白质组学水平研究B6-Co突变系小鼠浑浊角膜与正常B6小鼠角膜组织的异同,有利于阐释人类角膜混浊的发生机制,开辟从表型驱动研究基因功能的新途径。目的:应用二维凝胶电泳分析技术比较分析B6和B6-Co小鼠的角膜蛋白质组学差异。... 背景:从蛋白质组学水平研究B6-Co突变系小鼠浑浊角膜与正常B6小鼠角膜组织的异同,有利于阐释人类角膜混浊的发生机制,开辟从表型驱动研究基因功能的新途径。目的:应用二维凝胶电泳分析技术比较分析B6和B6-Co小鼠的角膜蛋白质组学差异。方法:分别提取B6与B6-Co突变系小鼠角膜组织蛋白,将所获得的蛋白质样品进行二维凝胶电泳和凝胶染色,分析电泳图谱,比较正常角膜组织与混浊角膜组织的蛋白质异同。结果与结论:实验成功建立了对小鼠两种角膜组织蛋白的提取及二维凝胶电泳的基本方法和条件,二维凝胶电泳图谱清晰,通过比较分析发现B6-Co突变系小鼠混浊角膜蛋白质组中有13个蛋白质点显著下调,6个表达显著上调。B6小鼠和B6-Co突变系小鼠角膜蛋白质组有显著差异表达,提示由于基因的突变导致了相关信号通路的基因表达上调、下调或沉默。 展开更多
关键词 角膜混浊 b6-co小鼠 蛋白质组 二维凝胶电泳 组织构建 组织工程
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应用16S rDNA克隆文库法分析B6-Co小鼠角膜炎细菌组成 被引量:1
4
作者 宋鸿雁 仇保丰 +6 位作者 刘春 朱顺星 缪进 王生存 吴刘成 王旭 邵义祥 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2014年第12期1124-1127,共4页
目的鉴定B6-Co突变系小鼠角膜的病原菌组成,并与人类细菌性角膜炎病原菌组成进行比较分析。方法选取10 d龄B6小鼠和B6-Co小鼠各6只为实验动物,提取小鼠角膜组织刮取物细菌基因组DNA,通过PCR扩增构建16S rDNA克隆文库,采用随机测序法分析... 目的鉴定B6-Co突变系小鼠角膜的病原菌组成,并与人类细菌性角膜炎病原菌组成进行比较分析。方法选取10 d龄B6小鼠和B6-Co小鼠各6只为实验动物,提取小鼠角膜组织刮取物细菌基因组DNA,通过PCR扩增构建16S rDNA克隆文库,采用随机测序法分析B6-Co小鼠角膜细菌组成,B6小鼠作为对照。结果 B6-Co角膜混浊小鼠中共鉴定出20种细菌,隶属于15个属,包括葡萄球菌属、假单胞菌属、链球菌属、微球菌属、棒状杆菌属等。葡萄球菌属和假单胞菌属为优势群,葡萄球菌属丰度为19.7%~53.1%,假单胞菌属的丰度为17.4%~32.8%。其中葡萄球菌属主要是表皮葡萄球菌,丰度为13.8%~20.9%;缓慢葡萄球菌,丰度为14.0%~30.9%;金黄色葡萄球菌,丰度为7.4%~20.3%。此外,棒状杆菌和微球菌也比较常见。10 d龄B6小鼠未检测出细菌。结论 B6-Co突变系小鼠角膜细菌组成与人类角膜炎病原菌相似,是研究人类角膜炎诊断方法、发病机理及临床用药的很好的动物模型。 展开更多
关键词 细菌性角膜炎 16S r DNA克隆文库 细菌组成 b6-co小鼠
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不同胚期B6-Co小鼠眼睑组织中血清反应因子的表达变化
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作者 宋鸿雁 李瑶 +2 位作者 卢泽艳 吴刘成 邵义祥 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期691-694,共4页
背景 C57BL/6角膜混浊表型的突变系(B6-Co)小鼠具有出生眼睑闭合不全(EOB)表型,是研究眼睑发育机制的良好动物模型.探讨血清反应因子(SRF)与B6-Co小鼠EOB表型形成的关系可为人类先天性眼睑发育缺陷产生机制的研究提供理论依据.目... 背景 C57BL/6角膜混浊表型的突变系(B6-Co)小鼠具有出生眼睑闭合不全(EOB)表型,是研究眼睑发育机制的良好动物模型.探讨血清反应因子(SRF)与B6-Co小鼠EOB表型形成的关系可为人类先天性眼睑发育缺陷产生机制的研究提供理论依据.目的 检测SRF在B6-Co小鼠胚胎眼睑发育关键时期的表达.方法 采用肌内注射戊巴比妥钠安乐死术,分别剖取B6-Co母鼠以及表型正常B6母鼠体内胚胎期(E)16.5 d、E17.5 d和E18.5 d小鼠各9只,分离眼睑组织,分别采用实时定量PCR法和Western blot法检测小鼠眼睑组织中SRF mRNA及其蛋白的相对表达水平.取各胎龄的B6-Co小鼠和B6小鼠制作组织冰冻切片,利用免疫荧光技术检测并比较2种小鼠SRF在眼睑组织中的定位和表达强度.结果 B6-Co小鼠E16.5 d和E17.5 d眼睑组织中SRF mRNA的相对表达水平分别为0.41±0.06和0.24±0.17,明显低于B6小鼠的1.03±0.17和1.01±0.09,差异均有统计学意义(P=0.025、0.017);B6-Co小鼠E16.5 d和E17.5 d眼睑组织中SRF蛋白的表达水平分别为0.08±0.01和0.08±0.01,明显低于B6小鼠的0.12±0.03和0.13 ±0.02,差异均有统计学意义(P=0.036、0.024);而2种小鼠间E18.5 d时眼睑组织中SRF mRNA及其蛋白的表达量差异均无统计学意义(P=0.387、0.774).免疫荧光染色显示,SRF蛋白多表达于B6-Co小鼠和B6小鼠眼睑组织的角质层细胞,但B6-Co小鼠眼睑角质形成细胞中SRF蛋白表达的荧光强度明显弱于B6小鼠.结论 SRF在B6-Co小鼠眼睑组织中的表达量明显下调,SRF可能参与眼睑发育缺陷的发生过程. 展开更多
关键词 眼睑/生长和发育 形态发生学 基因突变 血清反应因子 眼部异常/遗传学 角质形成细胞 表型 b6-co小鼠
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B6-Co角膜病小鼠HSV检测 被引量:1
6
作者 刘春 殷小敏 +2 位作者 陈军 管怀进 邵义祥 《交通医学》 2009年第3期225-226,230,共3页
目的:探讨ENU诱导遗传性角膜病小鼠角膜混浊的病毒学因素。方法:取不同发育阶段的B6-Co小鼠48只(模型组)和正常B6小鼠16只(对照组)的角膜,提取DNA,运用PCR技术进行扩增,琼脂糖凝胶电泳对扩增产物进行HSV检测。结果:模型组的角膜中仅2只(... 目的:探讨ENU诱导遗传性角膜病小鼠角膜混浊的病毒学因素。方法:取不同发育阶段的B6-Co小鼠48只(模型组)和正常B6小鼠16只(对照组)的角膜,提取DNA,运用PCR技术进行扩增,琼脂糖凝胶电泳对扩增产物进行HSV检测。结果:模型组的角膜中仅2只(4.17%)检测到HSV-DNA。对照组的角膜中均未检测出HSV-DNA,模型组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:HSV与B6-Co小鼠角膜混浊不存在因果关系。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 单纯疱疹病毒 b6-co小鼠 角膜病
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PCR法检测B6-Co小鼠混浊角膜的病原菌 被引量:1
7
作者 缪进 殷小敏 +1 位作者 管怀进 邵义祥 《交通医学》 2009年第6期597-598,601,共3页
目的:检测遗传性角膜病小鼠混浊角膜的病原菌及其种类。方法:取不同发育阶段的B6-Co小鼠36例(模型组)和正常B6小鼠10例(对照组)的角膜,分别提取DNA,运用聚合酶链反应(PCR)技术进行扩增,琼脂糖凝胶电泳对扩增产物进行检测。结果:36例模... 目的:检测遗传性角膜病小鼠混浊角膜的病原菌及其种类。方法:取不同发育阶段的B6-Co小鼠36例(模型组)和正常B6小鼠10例(对照组)的角膜,分别提取DNA,运用聚合酶链反应(PCR)技术进行扩增,琼脂糖凝胶电泳对扩增产物进行检测。结果:36例模型组的角膜,细菌PCR检测阳性21例,阳性率为58.33%。真菌PCR检测标本36例,7例阳性,阳性率为19.44%。结论:病原菌感染是引起B6-Co小鼠角膜病变的重要原因。 展开更多
关键词 聚合酶链反应(PCR) 病原菌 b6-co小鼠 角膜病
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B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞增殖、凋亡及迁移能力实验研究
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作者 景瑾 张海骏 +2 位作者 杜利莉 姬桂青 邵义祥 《实验动物与比较医学》 CAS 2019年第3期213-219,共7页
目的探讨B6-Co小鼠出生时眼睑闭合不全的形成机制。方法分离、培养并鉴定B6-Co小鼠及其背景品系C57BL/6J(B6)眼睑成纤维细胞,CCK8法检测B6-Co、 B6小鼠眼睑成纤维细胞的增殖水平,Annexin V-FITC法检测B6-Co、B6小鼠眼睑成纤维细胞的凋... 目的探讨B6-Co小鼠出生时眼睑闭合不全的形成机制。方法分离、培养并鉴定B6-Co小鼠及其背景品系C57BL/6J(B6)眼睑成纤维细胞,CCK8法检测B6-Co、 B6小鼠眼睑成纤维细胞的增殖水平,Annexin V-FITC法检测B6-Co、B6小鼠眼睑成纤维细胞的凋亡水平,Transwell检测B6-Co、B6小鼠眼睑成纤维细胞的迁移能力。结果成功培养出B6-Co、B6小鼠眼睑成纤维细胞,B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞的增殖能力和迁移能力极显著低于B6小鼠(P<0.01),B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞的凋亡水平极显著高于B6小鼠(P<0.01)。结论 B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞的增殖能力、凋亡水平及迁移能力均与B6小鼠有极显著差异。 展开更多
关键词 b6-co小鼠 成纤维细胞 细胞增殖 细胞凋亡 细胞迁移
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B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞生长曲线及HSP70表达研究 被引量:1
9
作者 姬桂青 邱天 +2 位作者 景瑾 朱顺星 邵义祥 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第4期99-106,共8页
目的探索B6-Co小鼠与正常C57BL/6小鼠眼睑成纤维细胞增殖能力与HSP70蛋白表达的差异。方法C57BL/6(B6)小鼠按雌雄小鼠2∶1的比例配种获取孕鼠;B6-Co小鼠按B6(雄)×B6-Co(雌)=1∶2或B6(雌)×B6-Co(雄)=2∶1比例配种获得孕鼠,取18... 目的探索B6-Co小鼠与正常C57BL/6小鼠眼睑成纤维细胞增殖能力与HSP70蛋白表达的差异。方法C57BL/6(B6)小鼠按雌雄小鼠2∶1的比例配种获取孕鼠;B6-Co小鼠按B6(雄)×B6-Co(雌)=1∶2或B6(雌)×B6-Co(雄)=2∶1比例配种获得孕鼠,取18.5 d的孕鼠腹中胚胎,再取胚胎眼睑组织培养小鼠眼睑成纤维细胞;用免疫荧光、HE染色鉴定原代细胞、观察成纤维细胞形态。根据血球计数板直接计数法观察两种细胞生长曲线的差异,用Real-time PCR和Western blot检测两种细胞中HSP70的表达量。体外构建HSP70基因siRNA干扰载体,Lipofectamin2000转染B6小鼠眼睑成纤维细胞;Real-time PCR和Western blot实验从mRNA和蛋白水平分别检测HSP70的相对表达量,测定其干扰效率;Transwell实验检测B6小鼠眼睑成纤维细胞的迁移能力。结果小鼠眼睑成纤维细胞生长曲线结果表明,B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞增殖速度慢于B6小鼠眼睑成纤维细胞(P<0.01)。B6-Co小鼠成纤维细胞中HSP70表达量远远低于B6小鼠成纤维细胞,具有显著性差异。B6小鼠眼睑成纤维细胞转染HSP70 siRNA干扰载体后,siRNA-HSP70-3干扰效率最强,mRNA和蛋白水平均被有效抑制,干扰效率高达70%(P<0.05);siRNA-HSP70组在迁移能力上亦显著低于对照组(P<0.05)。结论HSP70基因及蛋白表达下调影响B6-Co的成纤维细胞生长曲线,构建的siRNA-HSP70-3干扰载体能够有效抑制B6小鼠眼睑成纤维细胞中HSP70基因的表达,并显著抑制细胞迁移。HSP70可能参与成纤维细胞胚胎期发育的调控,是造成其EOB表型的重要原因之一。 展开更多
关键词 眼睑成纤维细胞 HSP70 C57bL/6 b6-co 迁移
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B6-Co小鼠Ankrd55和Ddx4突变候选基因克隆及测序
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作者 李瑶 吴刘成 +3 位作者 卢泽艳 郑良凤 葛良玉 邵义祥 《实验动物与比较医学》 CAS 2012年第5期371-375,共5页
目的对B6-Co小鼠Ankrd55和Ddx4基因进行克隆测序分析,寻找是否存在突变位点。方法以小鼠Ankrd55和Ddx4基因的mRNA序列设计引物,以mRNA为模板,采用RT-PCR和PCR技术分段进行目的基因扩增,将目的片段连接在T载体上,转化至感受态细胞... 目的对B6-Co小鼠Ankrd55和Ddx4基因进行克隆测序分析,寻找是否存在突变位点。方法以小鼠Ankrd55和Ddx4基因的mRNA序列设计引物,以mRNA为模板,采用RT-PCR和PCR技术分段进行目的基因扩增,将目的片段连接在T载体上,转化至感受态细胞,筛选阳性克隆,提取质粒DNA分子,电泳检测,EcoRE酶切释放目的片段,测序、分析、比对。结果Ddx4基因位于小鼠13号染色体第113412349的碱基由c转换成A,导致编码氨基酸的密码子改变,产物脯氨酸(P)变成谷氨酰胺(Q)。结论Ddx4基因发生单碱基突变,表明该突变可能与B6-co小鼠的EOB表型相关,但是有待于进一步研究。 展开更多
关键词 b6-co小鼠 角膜混浊 PCR体外扩增:基因克隆
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B6-Co小鼠感染角膜中TLR4/9的表达及意义
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作者 郑良凤 彭晓清 +2 位作者 王旭 蒋荧梅 吴刘成 《交通医学》 2019年第5期441-444,F0003,共5页
目的:研究TLR4和TLR9在B6-Co小鼠感染角膜中的表达水平及意义。方法:采用Trizol法提取小鼠角膜RNA,实时荧光PCR检测目的基因mRNA表达水平;取小鼠眼球作冰冻切片,进行TLR4/9免疫荧光染色。结果:B6-Co小鼠角膜组织中TLR4/9 mRNA的表达在... 目的:研究TLR4和TLR9在B6-Co小鼠感染角膜中的表达水平及意义。方法:采用Trizol法提取小鼠角膜RNA,实时荧光PCR检测目的基因mRNA表达水平;取小鼠眼球作冰冻切片,进行TLR4/9免疫荧光染色。结果:B6-Co小鼠角膜组织中TLR4/9 mRNA的表达在不同周龄阶段均高于B6小鼠,随着小鼠周龄的增加呈上升趋势,第4周和第8周TLR4表达、第8周和第16周TLR9表达与B6小鼠的差异,均有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光显示B6-Co小鼠角膜上皮层中TLR4/9蛋白表达高于B6小鼠,在第8周荧光信号最强。结论:TLR4/9在B6-Co小鼠感染角膜中的表达上调,提示TLR4/9在角膜感染免疫应答中发挥作用。 展开更多
关键词 b6-co小鼠 角膜感染 Toll样受体4/9 实时荧光PCR 免疫荧光染色
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Hspa5和E-cadherin在B6-Co小鼠胚胎后期眼睑中的表达研究
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作者 蒋荧梅 吴刘成 +2 位作者 丁宸云 崔亚茹 邵义祥 《交通医学》 2017年第4期307-310,共4页
目的:检测遗传性角膜混浊突变系小鼠(B6-Co)与B6小鼠在胚胎后期眼睑组织中Hspa5、E-cadherin基因及蛋白的表达变化,探讨两者与B6-Co小鼠EOB表型形成的内在联系。方法:取B6、B6-Co胚胎期16.5天(E16.5d)、E18.5d小鼠眼睑,用Realtime PCR法... 目的:检测遗传性角膜混浊突变系小鼠(B6-Co)与B6小鼠在胚胎后期眼睑组织中Hspa5、E-cadherin基因及蛋白的表达变化,探讨两者与B6-Co小鼠EOB表型形成的内在联系。方法:取B6、B6-Co胚胎期16.5天(E16.5d)、E18.5d小鼠眼睑,用Realtime PCR法和Western Blot法检测眼睑中Hspa5、E-cadherin的m RNA和蛋白表达情况。结果:E16.5d,B6-Co小鼠眼睑中Hspa5表达显著降低,E-cadherin表达显著升高;E18.5d,B6-Co小鼠Hspa5表达显著升高,E-cadherin表达显著降低。结论:Hspa5、E-cadherin的基因和蛋白在B6-Co突变系小鼠眼睑中的表达出现明显异常,提示B6-Co小鼠胚胎发育后期Hspa5、E-cadherin表达变化与EOB表型的形成有密切关联。 展开更多
关键词 遗传性角膜混浊突变系小鼠 出生时眼睛开放表型 热休克蛋白a5 E-钙粘蛋白
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MEKK1在B6-Co小鼠胚胎发育过程中的表达
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作者 郑良凤 王胜洁 +3 位作者 吴刘成 刘春 李瑶 邵义祥 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第1期1-4,211,共5页
为了检测MEKK1在B6-Co小鼠胚胎眼睑发育关键时期的表达,探讨其在该突变系小鼠EOB(出生时眼睛睁开)表型形成过程中的作用,试验剖取E16.5和E18.5小鼠,剪取整个头部,用4%多聚甲醛固定脱水,制作冰冻切片,通过免疫荧光技术检测MEKK1在小鼠胚... 为了检测MEKK1在B6-Co小鼠胚胎眼睑发育关键时期的表达,探讨其在该突变系小鼠EOB(出生时眼睛睁开)表型形成过程中的作用,试验剖取E16.5和E18.5小鼠,剪取整个头部,用4%多聚甲醛固定脱水,制作冰冻切片,通过免疫荧光技术检测MEKK1在小鼠胚胎眼睑部位的表达;剪取胎鼠皮肤,提取蛋白,以GAPDH为内参,通过Western-blot检测MEKK1在B6-Co小鼠胚胎中的表达情况。结果表明:与B6小鼠相比较,MEKK1在B6-Co小鼠胚胎眼睑发育关键时期的表达差异不显著;但游离C端在E16.5小鼠的表达明显要高于E18.5的表达,差异显著。说明MEKK1对促进小鼠眼睑融合起到了重要作用。 展开更多
关键词 b6-co小鼠 EOb 眼睑发育 MEKK1 表达水平
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NF-κB活化在IL-1β诱导的小鼠肾小球系膜细胞表达IL-6中的作用 被引量:3
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作者 许韩师 叶任高 +4 位作者 杨琼琼 孙林 杨念生 李幼姬 曾丽霞 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期428-430,共3页
目的 :研究NF -κB在rhIL - 1β刺激引起的体外培养的鼠肾小球系膜细胞表达IL - 6中的作用。 方法 :NF -κΒ活性检测采用电泳迁移率改变法 (EMSA) ,IL - 6mRNA表达采用逆转录 /聚合酶链反应 (RT/PR)检测 ,培养上清IL - 6蛋白含量采用EL... 目的 :研究NF -κB在rhIL - 1β刺激引起的体外培养的鼠肾小球系膜细胞表达IL - 6中的作用。 方法 :NF -κΒ活性检测采用电泳迁移率改变法 (EMSA) ,IL - 6mRNA表达采用逆转录 /聚合酶链反应 (RT/PR)检测 ,培养上清IL - 6蛋白含量采用ELISA检测。结果 :rhIL - 1β刺激肾小球系膜细胞时 ,在上调IL - 6蛋白和基因表达的同时亦激活NF -κB ,而且这种上调作用可被NF -κB特异性抑制剂PDTC所阻抑。结论 :IL - 1β诱导鼠肾小球系膜细胞表达IL - 6是通过NF -κB调控 ,NF 展开更多
关键词 白细胞介素1 白细胞介素6 NF-Kb 肾小球肾炎 小鼠 肾小球系膜细胞
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β-淀粉样肽损伤后小鼠脑单胺氧化酶B、白细胞介素6的变化及中药的干预作用 被引量:3
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作者 张孟仁 郭赛珊 +1 位作者 左萍萍 杨楠 《中国康复理论与实践》 CSCD 2005年第5期327-328,i001,共3页
目的观察β-淀粉样肽(Aβ)25-35致痴呆小鼠模型脑单胺氧化酶B(MAO-B)、白细胞介素-6(IL-6)的改变及中药脑复聪的干预作用.方法脑室内注射Aβ25-35造成痴呆模型小鼠,用Morris水迷宫测空间学习记忆功能;用比色法测MAO-B活性;免疫组化检测I... 目的观察β-淀粉样肽(Aβ)25-35致痴呆小鼠模型脑单胺氧化酶B(MAO-B)、白细胞介素-6(IL-6)的改变及中药脑复聪的干预作用.方法脑室内注射Aβ25-35造成痴呆模型小鼠,用Morris水迷宫测空间学习记忆功能;用比色法测MAO-B活性;免疫组化检测IL-6.结果模型小鼠的Morris水迷宫潜伏期(81.3±13.4)s,比对照组(34.2±10.9)s延长(P<0.05);大脑皮层和海马的MAO-B活性(120.12±10.15)、(83.60±5.29)均较对照组(93.09±10.54)、(50.39±9.16)升高(P<0.05~0.01),海马齿状回有大量IL-6免疫荧光阳性细胞.经脑复聪治疗后,水迷宫潜伏期(43.7±12.7)s缩短(P<0.05);海马的MAO-B活性(47.11±6.57)回降(P<0.01);IL-6免疫阳性神经细胞减少.结论抑制海马MAO-B的过度激活,减少自由基的产生,减少氧化应激反应,抑制小胶质细胞产生炎性因子IL-6,缓解Aβ的损伤作用,阻断AD发病的重要环节,是中药脑复聪治疗AD的重要机理之一. 展开更多
关键词 Β-淀粉样肽 痴呆 单胺氧化酶b(MAO-b) 白细胞介紊-6(IL-6) 脑复聪 小鼠
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Plasma Accumulations of Vitamin B6 from an Oral Dose in a New Reversible Model for Mouse Gut Injury and Regeneration
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作者 Pilar Jiménez Damián Cordoba-Diaz +5 位作者 Patricia Cabrero Mónica Aracil Manuel J. Gayoso Manuel Garrosa Manuel Cordoba-Diaz Tomás Girbés 《Food and Nutrition Sciences》 2013年第9期908-917,共10页
Chemically based rodent models are used to assess the positive effects promoted by foods and gut microbiota on gut health. Lectins with enzymatic activity, such as type 2 ribosome-inactivating proteins, might also pro... Chemically based rodent models are used to assess the positive effects promoted by foods and gut microbiota on gut health. Lectins with enzymatic activity, such as type 2 ribosome-inactivating proteins, might also prove useful for exploring these issues. Sub-lethal doses of the lectin nigrin from Sambucus nigra L. to mice promoted reversible derangement of gut epithelium by induction of apoptosis of transit amplifying cells of the small intestine crypts in a time-dependent course. The present work seeks to study vitamin B6 accumulation in plasma from an oral bolus in a mouse nigrin model. 24 h after sub-lethal nigrin b treatment, there was clear body weight reduction associated to a notable increase in Evan’s blue stain accumulation in excised small intestine, an increase in myeloperoxidase activity, and a near 50% reduction in plasma accumulation of vitamin B6. Histological analysis of small intestine sections of nigrin b-treated animals also revealed significant derangement of intestinal crypts. Seventy two hours after nigrin b treatment, stain uptake decreased and vitamin B6 accumulation was almost restored despite villi derangement. Large intestine crypts were scarcely or not at all affected. Eight days after nigrin b treatment, vitamin B6 uptake and intestinal crypt structure had fully recovered. The nigrin b mice model supports the view that, under these conditions, the carrier-mediated vitamin B6 uptake component of the small intestine crypts is probably the most active when the vitamin is administered orally as a bolus. The findings provide insights into the suitability of the present mice model for nutritional or drug absorption studies in conditions of partially altered or injured intestinal mucosa. 展开更多
关键词 VITAMIN b6 Nigrin b Ribosome-Inactivating Protein SAMbUCUS RICIN INTESTINES mice MODEL
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Involvement of A5/A7 noradrenergic neurons and B2 serotonergic neurons in nociceptive processing:a fiber photometry study
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作者 Shunpei Moriya Akira Yamashita +6 位作者 Daiki Masukawa Junichi Sakaguchi Yoko Ikoma Yoshimune Sameshima Yuki Kambe Akihiro Yamanaka Tomoyuki Kuwaki 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2022年第4期881-886,共6页
In the central nervous system,the A6 noradrenaline(NA)and the B3 serotonin(5-HT)cell groups are well-recognized players in the descending antinociceptive system,while other NA/5-HT cell groups are not well characteriz... In the central nervous system,the A6 noradrenaline(NA)and the B3 serotonin(5-HT)cell groups are well-recognized players in the descending antinociceptive system,while other NA/5-HT cell groups are not well characterized.A5/A7 NA and B25-HT cells project to the spinal horn and form descending pathways.We recorded G-Ca MP6 green fluorescence signal intensities in the A5/A7 NA and the B25-HT cell groups of awake mice in response to acute tail pinch stimuli,acute heat stimuli,and in the context of a non-noxious control test,using fiber photometry with a calcium imaging system.We first introduced G-Ca MP6 in the A5/A7 NA or B25-HT neuronal soma,using transgenic mice carrying the tetracycline-controlled transactivator transgene under the control of either a dopamineβ-hydroxylase or a tryptophan hydroxylase-2 promoters and by the site-specific injection of adeno-associated virus(AAV-Tet O(3 G)-G-Ca MP6).After confirming the specific expression patterns of G-Ca MP6,we recorded G-Ca MP6 green fluorescence signals in these sites in awake mice in response to acute nociceptive stimuli.G-Ca MP6 fluorescence intensity in the A5,A7,and B2 cell groups was rapidly increased in response to acute nociceptive stimuli and soon after,it returned to baseline fluorescence intensity.This was not observed in the non-noxious control test.The results indicate that acute nociceptive stimuli rapidly increase the activities of A5/A7 NA or B25-HT neurons but the non-noxious stimuli do not.The present study suggests that A5/A7 NA or B25-HT neurons play important roles in nociceptive processing in the central nervous system.We suggest that A5/A7/B2 neurons may be new therapeutic targets.All performed procedures were approved by the Institutional Animal Use Committee of Kagoshima University(MD17105)on February 22,2018. 展开更多
关键词 A5 NA neurons A7 NA neurons b25-HT neurons DbH-tTA mice fiber photometry G-CaMP6 mCherry monoaminergic signaling nociception TPH-t TA mice
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神经调节素B受体激动剂对孕鼠孕龄的影响及机制 被引量:1
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作者 张卫社 郭海燕 +3 位作者 谢庆生 伍招娣 吴新华 梁清华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期474-477,共4页
目的观察神经调节素B受体激动剂(NMBR)对孕鼠孕龄的影响并探讨其影响机制。方法建立孕龄准确的孕鼠模型,随机分组,每组10只。妊娠18 d 2、6:00 pm分别腹腔注射NMB(30、90、150μg.kg-1)、缩宫素(50 mIU.kg-1)及等体积的溶剂,连续2 d,观... 目的观察神经调节素B受体激动剂(NMBR)对孕鼠孕龄的影响并探讨其影响机制。方法建立孕龄准确的孕鼠模型,随机分组,每组10只。妊娠18 d 2、6:00 pm分别腹腔注射NMB(30、90、150μg.kg-1)、缩宫素(50 mIU.kg-1)及等体积的溶剂,连续2 d,观察孕鼠孕龄及分娩间隔。妊娠18 d 6、8、10、12:00 am分别给予上述处理,末次给药后4 h取孕鼠子宫平滑肌组织,用NoShift转录因子分析法检测NF-κB P65的DNA结合活性,用半定量RT-PCR和Westernblot检测HSP70及IL-6 mRNA和蛋白表达。结果150μg.kg-1NMBR组孕龄明显短于对照组和低剂量组(P<0.05);且NF-κB P65 DNA结合活性、HSP70及IL-6 mRNA表达水平明显高于对照组(P<0.05)。结论NMBR激动剂可能通过子宫平滑肌NF-κB P65—HSP70/IL-6通路缩短孕鼠的孕龄。 展开更多
关键词 神经调节素b受体 核因子Κb 白介素-6 热休克蛋白70 小鼠 孕龄 子宫平滑肌
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角膜混浊小鼠突变候选基因Map3k1克隆与序列分析 被引量:4
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作者 吴刘成 刘春 +2 位作者 蒋荧梅 王生存 邵义祥 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第4期1-5,共5页
对具有角膜混浊表型的B6-Co突变系小鼠突变候选基因Map3k1进行克隆及测序分析,寻找该突变系小鼠Map3k1基因的突变位点。以小鼠Map3k1基因的mRNA、全长及上游5 kb序列设计引物,分别以基因组DNA和mRNA为模板,采用PCR和RT-PCR技术分段扩增... 对具有角膜混浊表型的B6-Co突变系小鼠突变候选基因Map3k1进行克隆及测序分析,寻找该突变系小鼠Map3k1基因的突变位点。以小鼠Map3k1基因的mRNA、全长及上游5 kb序列设计引物,分别以基因组DNA和mRNA为模板,采用PCR和RT-PCR技术分段扩增目的基因,将目的片段连接在T载体上,转化至感受态细胞,筛选阳性克隆,质粒DNA分子提取,电泳检测,EcoRⅠ酶切释放目的片段,送上海生工生物工程技术服务有限公司测序。成功扩增出Map3k1基因的20个外显子和上游调控序列,B6-Co小鼠测序结果与基因组数据库序列比对,该基因位于13号染色体第112 559 574的碱基由T突变为A,编码的蛋白质第314氨基酸由亮氨酸变为谷氨酸,但是该基因的表达调控及蛋白质剪切机制仍有待深入研究。 展开更多
关键词 b6-co突变系小鼠 Map3k1基因 PCR扩增 序列分析
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纤维母细胞生长因子10基因在角膜混浊小鼠中的克隆测序与表达研究 被引量:1
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作者 吴刘成 张柳柳 +4 位作者 李瑶 王胜洁 季韧 倪尧尉 邵义祥 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第36期4421-4423,共3页
目的研究纤维细胞生长因子10(Fgf10)基因在角膜混浊小鼠(B6-Co)中的克隆测序及表达。方法正常小鼠(C57BL/6,B6)和B6-Co小鼠交配,取胚胎16.5dB6和B6-Co小鼠皮肤组织,提取总RNA并逆转录,采用逆转录聚合酶链反应(PCR)技术分段扩增目的基因... 目的研究纤维细胞生长因子10(Fgf10)基因在角膜混浊小鼠(B6-Co)中的克隆测序及表达。方法正常小鼠(C57BL/6,B6)和B6-Co小鼠交配,取胚胎16.5dB6和B6-Co小鼠皮肤组织,提取总RNA并逆转录,采用逆转录聚合酶链反应(PCR)技术分段扩增目的基因,连接T载体,转化感受态细胞,筛选阳性克隆,并测序分析;采用实时荧光PCR的方法进一步检测该基因在B6-Co小鼠中的表达。结果测序发现在Fgf10基因第三外显子1 914bp和1 915bp之间插入了碱基A;实时荧光PCR结果显示Fgf10在B6-Co小鼠中的表达明显下降(P<0.05)。结论 Fgf10与B6-Co小鼠出生时眼睑开放(EOB)表型有关,其表达调控机制有待进一步研究。 展开更多
关键词 b6-co小鼠 角膜混浊 纤维细胞生长因子10 基因表达 突变
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