急性髓系白血病患者血浆lncRNA SNHG16、miR-183-5p水平与病理特征和预后的关系

目的探讨急性髓系白血病(AML)患者血浆长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因16(lncRNASN⁃HG16)、微小RNA-183-5p(miR-183-5p)水平与病理特征和预后的关系。方法选取93例AML患者为AML组,选取同期40例体检中心查体健康者为对照组,采用qPCR法检测血浆lncRNASNHG16、miR-183-5p水平。采用Pearson相关法分析AML患者血浆lncRNASNHG16与miR-183-5p水平的相关性及与病理特征的关系。Kaplan-Meier法绘制不同血浆lncRNASNHG16、miR-183-5p水平AML患者生存曲线。结果AML组血浆lncRNASNHG16水平高于对照组,miR-183-5p水平低于对照组(P均<0.01)。Pearson相关性分析显示,AML患者血浆lncRNASNHG16与miR-183-5p水平呈负相关(r=-0.704,P<0.01)。不同白细胞计数、骨髓原始细胞比率、预后危险分层AML患者血浆lncRNASNHG16、miR-183-5p水平比较差异有统计学意义(P均<0.05)。中位随访25个月,3年总生存率为54.84%(51/93)。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,lncRNASNHG16高水平者3年总生存率低于lncRNASNHG16低水平者,miR-183-5p高水平者3年总生存率高于miR-183-5p低水平者(P均<0.05)。结论AML患者血浆lncRNASNHG16水平升高,miR-183-5p水平降低,二者水平与白细胞计数、骨髓原始细胞比率、预后危险分层和患者预后有关。

首发抑郁障碍患者治疗前后外周血单核细胞微小RNA-16表达的变化

目的:探讨首发抑郁障碍患者治疗前后外周血单核细胞(PBMC)微小(mi)RNA-16表达。方法:给予126例首发抑郁障碍患者(患者组)帕罗西汀单药治疗8周;分别于治疗前及治疗后1、2、4、8周进行汉密尔顿抑郁量表17项(HAMD-17)评分,以治疗8周后HAMD-17减分率将患者分为4个亚组(≥75%为A组;50%~74%为B组,25%~49%为C组,<25%为D组);同期采用密度梯度离心法分离外周血单核细胞,用RNA提取试剂盒提取总RNA,荧光定量聚合酶链(PCR)法检测miRNA-16表达量;比较患者组与30健康志愿者(对照组)及患者中不同亚组间PBMC miRNA-16表达水平。结果:治疗前后各时间点患者组PBMC miRNA-16表达明显高于对照组(P<0.05或P<0.01);随着治疗进行患者组PBMC miRNA-16表达逐渐下降(P均<0.01);各亚组间PBMC miRNA-16表达治疗前差异无统计学意义,治疗后呈现D组>C组>B组>A组,差异有统计学意义(P均<0.01);患者组PBMC miRNA-16表达水平与HAMD评分呈正相关(r=0.432,P=0.000)。结论:PBMC miRNA-16表达水平或许可作为诊断首发抑郁障碍及评估患者病情的生物标记物之一。

女性躯体形式障碍患者外周血中miR-16、miR-182表达与临床特征关系

目的:探究女性躯体形式障碍(SFD)患者外周血浆中miR 16、miR 182表达及与临床特征关系。方法:选取2017年3月-2018年12月本院诊治的女性SFD患者115例(病例组),同期女性健康体检者118例为对照组。实时荧光定量聚合酶链反应法检测两组血浆miR 16、miR 182表达水平;分析病例组miR 16、miR 182表达与临床特征关系;利用症状自评量表(SCL 90)均分检测病例组,分析发病危险因素。结果:病例组外周血浆miR 16(1.57±0.38)、miR 182(1.70±0.41)表达水平均高于对照组(1.02±0.30、1.09±0.33),且表达水平与抑郁、焦虑因子有关(均P<0.05);SCL 90均分病例组(2.84±0.65分)高于对照组(1.72±0.39分),miR 16、miR 182表达水平与SCL 90均分呈正相关(P<0.05);miR 16、miR 182、SCL 90均分均是影响女性发生SFD的危险因素(P<0.05)。结论:miR 16、miR 182在女性SFD患者外周血浆中均表达上调,有望成为诊断女性SFD的临床指标。

16S rDNA序列技术分析鉴定颗粒污泥中的微生物

采用16S rDNA序列分析技术对降解五氯酚的微氧颗粒污泥形成过程中真细菌和古细菌的种群多样性和动态变化进行了研究.通过对DGGE主要条带进行序列比对,发现颗粒污泥中真细菌和古细菌都与不可培养的微生物相似性高,微氧颗粒污泥中同时存在好氧菌、微氧菌和厌氧菌.通过比较不同菌的相对数量变化发现五氯酚驯化后的颗粒污泥中产生了一系列对五氯酚降解有利的优势细菌和古菌,如Proteobacteria、Sphingomonas、Methanogenic bacteri-um等.

微小核糖核酸-16与肝细胞癌临床病理特征、预后的关系及对肝癌细胞侵袭转移的影响

目的分析微小核糖核酸(micro RNA,miR)-16与肝细胞癌临床病理特征、预后的关系,并探讨其对肝癌细胞侵袭转移的影响。方法选取2014年1月至2016年1月于北京市顺义区医院诊治的88例肝细胞癌患者为研究对象,采用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测患者肝癌组织和癌旁正常组织中miR-16的相对表达水平,以肝癌组织miR-16相对表达量的平均数为分界点,大于或等于该值者为miR-16高表达组,低于该值者为miR-16低表达组,并分析两组患者肿瘤直径、Edmondson分级、包膜受侵、门脉受侵及肝内转移情况及TNM分期的差异。对所有研究对象随访3年,记录患者无进展生存期(progression-free-survival,PFS)和总生存期(overall survival,OS),采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线并分析miR-16低表达组和miR-16高表达组生存率的差异,用Cox回归模型探讨影响肝细胞癌预后的独立危险因素。采用miR-16过表达质粒和空载质粒转染肝癌细胞系Huh-7,建立miR-16过表达组和阴性对照组,同时设立空白对照组(未给予干预措施);用Transwell实验检测miR-16在体外肝癌细胞侵袭转移中的作用。结果 miR-16在肝癌组织和癌旁正常组织中相对表达量分别为0.86±0.19和1.85±0.47,差异有统计学意义(t=4.009,P=0.016)。miR-16低表达组包膜受侵、门脉受侵、肝内转移及TNMⅢ期发生率分别为76.7%(23/30)、53.3%(16/30)、56.7%(17/30)、66.7%(20/30);miR-16高表达组上述指标分别为43.1%(25/58)、43.1%(17/58)、31.0%(18/58)、37.9%(22/58),差异均有统计学意义(χ2值分别为8.954、4.869、5.423、6.544,P值分别为0.003、0.027、0.020、0.011)。miR-16低表达组肿瘤直径≤5 cm比例为40.0%(12/30),EdmondsonⅠ~Ⅱ级比例为46.7%(14/30);miR-16高表达组上述指标分别为55.2%(32/58)、63.8%(37/58),差异无统计学意义(χ2值分别为1.821、2.380,P值分别为0.177、0.123)。随访3年,miR-16低表达组和高表达组患者PFS分别为(22.90±2.17)个月和(29.47±1.24)个月,差异有统计学意义(t=18.094,P <0.001);miR-16低表达组和高表达组患者OS分别为(24.87±2.01)个月和(31.00±1.03)个月,差异有统计学意义(t=18.966,P <0.001)。miR-16低表达组和miR-16高表达组无进展生存率[33.33%(10/30)vs 58.62%(34/58)]和总生存率[40.00%(12/30)vs 65.52%(38/58)]的差异有统计学意义(χ2=6.888,P=0.009;χ2=7.046,P=0.008)。Cox回归分析表明,门脉受侵、肝内转移及TNMⅢ期是影响肝癌预后的独立危险因素(HR=1.837,95%CI:1.627~2.345;HR=1.378,95%CI:1.132~1.534;HR=1.869,95%CI:1.705~2.432)。空白对照组、阴性对照组和miR-16过表达组穿透生物膜细胞数分别为(85.67±6.03)个、(86.67±3.51)个和(21.00±3.61)个,组间差异有统计学意义(F=63.874,P <0.001),其中miR-16过表达组显著少于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(t=15.938,P <0.001;t=22.590,P <0.001),空白对照组和阴性对照组间差异无统计学意义(t=0.248,P=0.816)。结论 miR-16在肝癌细胞中低表达,高miR-16相对表达水平可抑制肝癌细胞的侵袭和转移,有利于患者预后,其中门脉受侵、肝内转移及TNMⅢ期是影响肝细胞癌预后的独立危险因素。

子宫肌瘤患者子宫组织中miR-590、miR-16表达及意义

目的:检测子宫肌瘤患者子宫组织中微小RNA(miR-590、miR-16)表达水平,分析其与子宫肌瘤发生的关系及临床意义。方法:选择2016年1月—2018年12月本院收治的子宫肌瘤患者64例为子宫肌瘤组,因子宫脱垂行子宫切除术患者64例为正常子宫肌层组。采用qRT-PCR法检测入组患者子宫组织中miR-590、miR-16表达水平,logistic回归分析miR-590、miR-16与子宫肌瘤患者激素水平关系及子宫肌瘤发生危险因素。结果:子宫肌瘤组miR-590(0.52±0.14)、miR-16(0.46±0.11)表达水平均低于正常子宫肌层组(1.03±0.31、1.01±0.27),血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)水平均高于正常子宫肌层组(均P<0.05)。miR-590、miR-16表达水平分别与E2、P水平呈负相关,E2及P水平升高、miR-590及miR-16低表达是子宫肌瘤发生的危险因素(均P<0.05)。结论:子宫肌瘤患者子宫组织中miR-590、miR-16低表达,且与血清E2、P水平呈负相关,可能与子宫肌瘤发生发展有关。

lncRNA SLC16A1-AS1调节miR-532-3p/TAGLN2信号通路对脑胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响

目的探讨长链非编码RNA溶质载体家族16成员1反义RNA 1(lncRNA SLC16A1-AS1)调节微小RNA-532-3p(miR-532-3p)/肌动蛋白结合蛋白2(TAGLN2)信号通路对脑胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法实时荧光定量PCR检测胶质瘤细胞中lncRNA SLC16A1-AS1表达水平,筛选最佳干预细胞系;通过荧光原位杂交实验、下拉实验、双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA SLC16A1-AS1、TAGLN2与miR-532-3p的靶向调控关系。①将U251细胞分为小干扰RNA阴性对照(si-NC)组、si-SLC16A1-AS1组、si-SLC16A1-AS1+NC inhibitor组、si-SLC16A1-AS1+miR-532-3p inhibitor组、miR-NC组、miR-532-3p mimics组、miR-532-3p mimics+pcDNA组、miR-532-3p mimics+TAGLN2组:检测U251细胞的增殖、迁移和侵袭变化;Western blot检测TAGLN2、E-钙黏附蛋白、波形蛋白表达水平。②小鼠体内肿瘤形成实验:验证lncRNA SLC16A1-AS1对胶质瘤生长的影响。结果lncRNA SLC16A1-AS1在胶质瘤细胞中表达水平升高(P<0.05);U251细胞FISH实验、下拉实验、双荧光素酶基因实验证实lncRNA SLC16A1-AS1,TAGLN2与miR-532-3p存在靶向调控关系;抑制lncRNA SLC16A1-AS1表达或过表达miR-532-3p可显著抑制U251细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化(P<0.05);抑制miR-532-3p表达或过表达TAGLN2可逆转抑制lncRNA SLC16A1-AS1表达或过表达miR-532-3p对U251细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化的抑制作用(P<0.05)。小鼠体内实验显示,抑制lncRNA SLC16A1-AS1表达可显著抑制移植瘤的生长(P<0.05)。结论lncRNA SLC16A1-AS1在胶质瘤细胞中表达水平上调,抑制lncRNA SLC16A1-AS1表达可通过调节miR-532-3p/TAGLN2信号通路,进而抑制胶质瘤的恶性进展。

糖尿病肾病患者尿液miR-16-5p的表达水平及其意义

目的通过检测糖尿病肾病(DKD)患者尿液miR-16-5p的表达水平,探讨尿液miR-16-5p的表达变化与DKD病情的关系。方法收集合并DKD的2型糖尿病患者107例(病例组)和健康体检者32例(对照组)的临床资料,采用实时荧光定量PCR方法检测尿液miR-16-5p表达水平,进行比较,并运用受试者工作曲线(ROC曲线)分析尿液miR-16-5p表达水平诊断DKD的价值;彩超测量肾脏最大横切面面积及各级血管阻力指数;分析尿液miR-16-5p与空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(Hb Alc)、尿白蛋白/尿肌酐比值(UACR)及肾脏超声指标的相关性。结果DKD病例组尿液miR-16-5p的相对表达水平(0.52±0.26)明显低于对照组(1.00±0.23)(P<0.01);尿液miR-16-5p水平对于DKD的诊断ROC曲线下面积为0.920,取0.780为诊断界点,诊断的灵敏度和特异度分别为85.8%和90.9%;病例组尿液miR-16-5p的表达水平与FPG、Hb Alc、UACR均呈负相关(r分别为-0.77、-0.56、-0.61,P均<0.01),与肾脏最大横切面面积呈正相关(r=0.74,P<0.01),与肾主动脉、肾锥体间叶间动脉、肾窦部段动脉阻力指数均呈负相关(r分别为-0.83、-0.80、-0.79,P均<0.01)。结论糖尿病肾病患者尿液miR-16-5p表达明显下调,其下调与病情密切相关,对疾病有重要的诊断价值,可能是糖尿病肾病的重要生物学标志。

miR-146b-5p对胶质瘤TJ905细胞生长的抑制作用及其机制探讨

目的:在TJ905胶质母细胞瘤细胞系中观察miR-146b-5p对MMP16的调控作用及其对细胞侵袭、迁移、增殖和凋亡的影响。方法:分别用无义序列表达质粒(对照组)和miR-146b-5p表达质粒(P-miR-146b-5p组)转染TJ905细胞,用qRT-PCR和Western blot检测两组细胞miR-146b-5p的表达水平及MMP16 mRNA和蛋白的表达水平,用体外迁移侵袭实验及流式细胞术检测转染细胞迁移、侵袭、细胞周期分布和凋亡水平,并分析这些变化的相互关系。结果:与对照组相比,p-miR-146b-5p组MMP16 mRNA和蛋白表达量明显降低,二者间呈正相关且均与miR-146b-5p表达量呈负相关。p-miR-146b-5p组侵袭和迁移细胞数均明显低于对照组,并均与同组MMP16蛋白表达量呈正相关;而凋亡水平明显高于对照组,并与同组miR-146b-5p表达量呈正相关,但两组细胞周期时相分布无显著性差异。结论:miR-146b-5p是胶质瘤的抑瘤miRNA;补充外源性miR-146b-5p可促进胶质瘤细胞凋亡,并通过抑制靶基因MMP16表达阻止其侵袭迁移;提示miR-146b-5p在恶性胶质瘤基因治疗方面具有重要的潜在应用价值。

食管癌组织miR-16-5p和FASN表达水平及临床意义

目的探索微小RNA-16-5p(miR-16-5p)、脂肪酸合成酶(FASN)在食管癌组织中的表达水平及临床意义。方法选取2017年2月-2020年1月上海健康医学院附属崇明医院收治的104例食管癌患者为研究对象,术中收集其癌组织与癌旁组织并采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定组织miR-16-5p、FASN表达量;免疫组化法检测组织中FASN蛋白表达情况;TargetScanHuman网站预测miR-16-5p与FASN的靶向关系;Pearson法分析食管癌患者癌组织miR-16-5p与FASN水平的相关性;采用双荧光素酶报告实验验证miR-16-5p与FASN的靶向关系。依据miR-16-5p、FASN表达量平均值将食管癌患者分为miR-16-5p高表达组(≥0.82,n=53)与miR-16-5p低表达组(<0.82,n=51),FASN高表达组(≥1.23,n=55)与FASN低表达组(<1.23,n=49),采用Kaplan-Meier生存曲线分析食管癌组织miR-16-5p、FASN表达情况与患者生存率之间的关系;采用Cox回归分析食管癌患者预后不良的危险因素。结果食管癌组织中miR-16-5p表达水平(0.82±0.14)低于癌旁组织(0.98±0.11),FASN表达(1.23±0.10)高于癌旁组织(1.01±0.09),差异均有统计学意义(t=9.164、16.676,P均<0.001);FASN蛋白在食管癌组织中阳性表达率为61.54%(64/104),明显高于癌旁组织的17.31%(18/104),差异有统计学意义(χ^(2)=42.599,P<0.05)。TargetScanHuman网站预测miR-16-5p与FASN存在结合位点;食管癌患者癌组织中miR-16-5p与FASN表达水平成负相关(r=-0.584,P<0.01),双荧光素酶报告实验证实miR-16-5p与FASN存在靶向关系(F=144.623,P<0.001)。食管癌组织miR-16-5p、FASN表达均与肿瘤直径(χ^(2)=5.525、3.905,P=0.019、0.048)、浸润深度(χ^(2)=8.255、7.638,P=0.004、0.006)、TNM分期(χ^(2)=8.792、8.521,P=0.003、0.004)、淋巴结转移(χ^(2)=8.054、9.697,P=0.005、0.002)、组织分化程度(χ^(2)=4.695、4.579,P=0.030、0.032)有关。miR-16-5p高表达组食管癌患者3年生存率(73.58%)高于miR-16-5p低表达组(43.14%),FASN高表达组食管癌患者3年生存率(45.45%)低于FASN低表达组(73.47%),差异均有统计学意义(χ^(2)=9.935、8.386,P=0.002、0.004)。多因素Cox回归分析表示,深层浸润(HR=2.116,P=0.033)、TNM分期为Ⅲ/Ⅳ期(HR=2.885,P=0.032)、淋巴结转移(HR=3.207,P=0.027)、FASN高表达(HR=4.104,P=0.006)均是食管癌患者预后不良的危险因素,miR-16-5p高表达是食管癌预后的保护因素(HR=0.559,P=0.012)。结论食管癌组织中miR-16-5p表达水平下调、FASN表达水平上调,二者均与食管癌患者临床病理特征及预后紧密相关。

微生物燃料电池降解苯酚过程中微电场对阴极微生物多样性的影响

[背景]苯酚废水作为一种毒性强、难降解的废水而备受关注。目前,微生物燃料电池(microbial fuel cell,MFC)已经广泛用于苯酚废水的降解,MFC的产电效果和苯酚的降解效率与反应器内的微生物群落有着密切关系。[目的]为了提高MFC的产电效果及对有害物质的降解能力,需要对MFC中苯酚的降解和微生物群落结构进行探索。[方法]分别在开路和闭路情况下,利用高效液相色谱(HPLC)测试MFC对苯酚的去除率;利用16S rRNA基因高通量测序技术分析阴极室中微生物群落的变化。[结果]与开路控制相比,闭路情况下苯酚的去除效率有了显著提升。并且阴极微生物的物种多样性增多,尽管整体的物种丰度减少了,但一些产电菌和降解菌的丰度明显增加,例如门水平上的变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)和纲水平上的γ-变形菌纲(Gammaproteobacteria)。[结论]微电场的存在促进了一些功能微生物的生长,对苯酚的降解和MFC的产电产生了积极影响。