长链非编码RNA NORAD和微小RNA⁃199a⁃3p在食管鳞癌病人血清中的表达及其临床意义

目的探讨长链非编码RNA NORAD(LncRNA NORAD)、微小RNA⁃199a⁃3p(miR⁃199a⁃3p)在食管鳞癌病人血清中的表达,分析其对食管鳞癌的诊断价值。方法2018年1月~2022年12月间我院收治的食管鳞癌病人286例(食管鳞癌组),记录其临床病理特征,同期纳入健康体检者204例(对照组)。采用实时荧光定量PCR(qRT⁃PCR)法检测血清LncRNA NORAD、miR⁃199a⁃3p表达水平;采用Pearson相关性分析血清LncRNA NORAD与miR⁃199a⁃3p表达水平的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清LncRNA NORAD、miR⁃199a⁃3p表达水平对食管鳞癌的诊断价值。结果食管鳞癌组血清LncRNA NORAD表达水平高于对照组,miR⁃199a⁃3p表达水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。食管鳞癌病人血清LncRNA NORAD与miR⁃199a⁃3p表达水平呈负相关(r=-0.649,P<0.05)。有淋巴结转移、TNM分期为T3~T4期、低分化的食管鳞癌病人LncRNA NORAD高表达、miR⁃199a⁃3p低表达比例高于无淋巴结转移、TNM分期为T1~T2期、中/高分化的食管鳞癌病人,差异有统计学意义(P<0.05)。LncRNA NORAD、miR⁃199a⁃3p单独及二者联合诊断食管鳞癌的AUC分别为0.817、0.796、0.854。结论食管鳞癌病人血清LncRNA NORAD高表达,miR⁃199a⁃3p低表达,二者表达水平可作为食管鳞癌的辅助诊断指标之一。

miR-199a在妊娠糖尿病中的表达及参与胰岛素抵抗的作用机制研究

目的探究微小RNA(miR)-199a在妊娠糖尿病(GDM)中的表达及调控沉默信息调节因子1(SIRT1)/叉头盒转录因子O1(FOXO1)通路参与胰岛素抵抗(IR)的机制。方法GDM孕妇56例为GDM组,正常孕妇60例为正常孕妇组,实时荧光定量PCR(qPCR)检测2组胎盘中miR-199a水平;计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);Pearson相关分析miR-199a与HOMA-IR的相关性。体外培养人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo并建立IR模型。miR-199a功能验证:细胞依处理方式不同分为模型组、miRNA inhibitor NC组、miR-199a inhibitor组、miRNA mimic NC组、miR-199a mimic组;qPCR检测各组细胞中miR-199a表达情况,蒽酮法检测细胞内葡萄糖吸收量,试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,Western blot检测SIRT1、FOXO1、乙酰化(Ac)-FOXO1蛋白水平,双荧光素酶报告基因实验鉴定miR-199a与SIRT1的靶向关系。结果与正常孕妇组比较,GDM组胎盘中miR-199a、HOMA-IR水平升高(P<0.05);GDM组miR-199a水平与HOMA-IR呈正相关(P<0.05)。棕榈酸、胰岛素共同作用细胞24 h成功建立IR模型。与模型组和miRNA inhibitor NC组比较,miR-199a inhibitor组miR-199a、MDA水平降低,葡萄糖吸收量、SOD水平、SIRT1蛋白水平升高(P<0.05)。与模型组和miRNA mimic NC组比较,miR-199a mimic组miR-199a和Ac-FOXO1蛋白表达升高、MDA水平升高,葡萄糖吸收量、SIRT1蛋白水平降低(P<0.05)。Tarbase数据库分析显示,miR-199a与SIRT1存在互补的结合位点,并经双荧光素酶实验证实。结论GDM患者胎盘中miR-199a高表达,升高的miR-199a可通过靶向下调SIRT1而促进FOXO1乙酰化,导致IR。

参附注射液调控大鼠心肌肥大模型microRNA-199a-5p的表达机制

目的:研究参附注射液对大鼠心肌肥大模型micro RNA-199a-5p的调控机制。方法:60只健康SD大鼠分成3组,模型组和参附注射液组行腹主动脉缩窄术建立心肌肥大模型,假手术组腹主动脉不作缩窄。参附注射液组腹腔注射参附注射液6.0m L·kg^(-1)·d^(-1);模型组和假手术组均腹腔注射0.9%氯化钠溶液6.0m L·kg^(-1)·d^(-1),连续12周。采用Realtime RT-PCR方法检测大鼠心肌micro RNA-199a-5p的表达。利用生物信息学方法分析micro RNA-199a-5p的候选靶基因,并用Western blot方法检测靶基因HSP70的蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠心肌micro RNA-199a-5p上调(P<0.05);参附注射液组大鼠心肌micro RNA-199a-5p表达量较模型组下调(P<0.05);参附注射液组HSP70蛋白表达较假手术组和模型组显著增加(P<0.01)。结论:micro RNA-199a-5p在心肌肥大中可能发挥重要作用,参附注射液可能通过抑制micro RNA-199a-5p的上调,增加HSP70的蛋白表达水平,抑制心肌肥大大鼠心室重构,从而改善大鼠心功能。

miR-199a和lncRNA SNHG12在宫颈癌中的表达水平、相关性及临床意义

目的研究微小RNA 199a (miR-199a)和长链非编码RNA小核宿主基因12 (lncRNA SNHG12)在宫颈癌中的表达水平、相关性及临床意义.方法选取2012年6月-2014年12月该院病理存档的220例宫颈组织标本及病理资料为研究对象,其中宫颈炎75例(对照组),宫颈上皮内瘤变(CIN) 71例(CIN组),宫颈癌74例(CC组).采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各宫颈组织中miR-199a和lncRNA SNHG12表达,并分析其与宫颈癌临床病理参数的关系;采用Pearson法分析宫颈癌组织中二者表达关系;采用Kaplan-Meier生存曲线法分析宫颈癌患者5年生存率;采用COX分析影响宫颈癌患者预后的危险因素.结果对照组、CIN组、CC组患者宫颈组织中miR-199a表达水平依次降低,lncRNA SNHG12表达水平依次升高(均P>0.05).miR-199a、lncRNA SNHG12表达水平与宫颈癌患者病理类型、FIGO分期、淋巴结转移有关(均P<0.05),与患者年龄、分化程度、浸润深度无关(均P>0.05).宫颈癌患者癌组织中miR-199a、lncRNA SNHG12表达水平呈负相关(r=-0.518,P<0.05).miR-199a低表达组宫颈癌患者5年生存率为9.52%,显著低于miR-199a高表达组(75.47%),差异有统计学意义(x2=35.09,P<0.05);lncRNA SNHG12高表达组宫颈癌患者5年生存率为21.74%,显著低于lncRNA SNHG12低表达组(72.00%),差异有统计学意义(x2=17.45,P<0.05).COX多因素分析显示,miR-199a、lncRNA SNHG12表达水平及淋巴结转移是影响宫颈癌患者预后的独立危险因素(均P>0.05).结论宫颈癌组织中miR-199a低表达,lncRNA SNHG12高表达,二者呈负相关,且与宫颈癌患者5年生存率及预后有关,是影响宫颈癌患者预后的独立危险因素,有潜力成为监测宫颈癌病情发展及预后评估的有效指标.