外周血miRNA-126与miRNA-143表达对颅内动脉瘤介入术后患者复发的预测价值

目的:探讨外周血微小RNA-126(miRNA-126)、miRNA-143表达水平对颅内动脉瘤介入术后患者复发的预测价值。方法:选取113例行介入栓塞术治疗的颅内动脉瘤患者为研究对象,根据术后不同Raymond分级分为RaymondⅠ级组(n=88)、RaymondⅡ级组(n=13)和RaymondⅢ组(n=12);根据不同预后分为复发组(n=19)和未复发组(n=94)。比较不同分级患者、不同预后患者外周血miRNA-126、miRNA-143表达水平,分析其与Raymond分级的相关性及其对颅内动脉瘤患者介入栓塞术后复发的预测价值。结果:与RaymondⅠ级组相比,RaymondⅡ级组和RaymondⅢ级组患者miRNA-126表达水平均升高(P<0.05),miRNA-143表达水平均降低(P<0.05)。相关性分析显示,miRNA-126水平与Raymond分级正相关(r=0.364,P<0.05),miRNA-143水平与Raymond分级负相关(r=-0.347,P<0.05)。复发组患者外周血miRNA-126表达水平高于未复发组(P<0.05),miRNA-143表达水平低于未复发组(P<0.05)。ROC曲线分析显示,外周血miR-126、miR-143及其联合预测颅内动脉瘤患者介入栓塞术后复发的曲线下面积分别为0.767、0.826、0.968,联合检测预测的价值高于两者单独预测(P<0.05)。结论:外周血miRNA-126、miRNA-143联合检测能提高颅内动脉瘤介入术后复发的预测价值。

miR-210、miR-143在支气管哮喘患儿血清中的表达及与气道炎性反应的关系

目的分析miR-210、miR-143在支气管哮喘患儿血清中的表达及与气道炎性反应的关系。方法选取2020年1月—2022年7月廊坊市人民医院儿科收治的支气管哮喘患儿186例为支气管哮喘组,另收集同期体检健康儿童100例为健康对照组,qRT-PCR法检测血清miR-210、miR-143水平,Pearson法分析支气管哮喘患儿miR-210、miR-143水平与TNF-α、IL-4、IL-6、EOS、FeNO、IL-10、IL-12、IgE、IFN-γ间相关性;Logistic回归分析儿童发生支气管哮喘的影响因素。结果支气管哮喘患儿血清miR-210水平显著高于健康儿童,miR-143水平显著低于健康儿童(t=8.317,9.545,P均<0.001),轻度、中度、重度哮喘患儿血清miR-210水平依次升高,miR-143水平依次降低(F=7.566,19.914,P均<0.001)。支气管哮喘患儿FVC、FEV_1、VE、PEF、IL-10、IL-12、IgE、IFN-γ水平显著低于健康儿童,Raw、IL-4、IL-6、TNF-α、EOS、FeNO水平显著高于健康儿童(P<0.05)。Pearson法分析表明,血清miR-210与miR-143水平呈负相关(r=-0.362,P<0.001),血清miR-210水平与TNF-α、IL-4、IL-6、EOS、FeNO呈正相关(r=0.326、0.359、0.315、0.334、0.312,P均<0.001),与IL-10、IL-12、IgE、IFN-γ呈负相关(r=-0.406、-0.303、-0.317、-0.453,P均<0.001);miR-143水平与TNF-α、IL-4、IL-6、EOS、FeNO呈负相关(r=-0.336、-0.324,-0.323、-0.424、-0.397,P均<0.001),与IL-10、IL-12、IgE、IFN-γ呈正相关(0.338、0.338、0.327、0.467,P均<0.001);Logistic回归分析结果表明,miR-210、TNF-α、IL-4、IL-6、EOS、FeNO升高均为儿童发生支气管哮喘的危险因素[OR(95%CI)=1.025(1.015~1.035)、1.034(1.020~1.048)、1.136(1.059~1.219)、1.243(1.147~1.347)、1.349(1.151~1.581)、1.408(1.178~1.683)],而miR-143、IL-10、IL-12、IgE、IFN-γ升高均为其保护因素[OR(95%CI)=0.857(0.788~0.932)、0.932(0.900~0.965)、0.473(0.312~0.718)、0.671(0.549~0.820)、0.583(0.437~0.778)]。结论支气管哮喘患儿血清miR-210水平升高,miR-143水平降低,与患儿气道炎性反应的进展具有密切关系。

老年性白内障患者泪液中miR-223和miR-143-3p水平表达与术后干眼症的相关性研究

目的探究老年性白内障患者术后干眼与泪液中miR-223,miR-143-3p水平表达的相关性。方法选取2022年5月~2023年2月于贵港东晖医院眼科行白内障术的92例老年性白内障患者作为研究对象,根据术后7天内有无发生干眼将其分为干眼症组(n=42)和无干眼症组(n=50),另选取同期体检的92例健康者作为健康对照组。采用Pearson法分析泪液miR-223,miR-143-3p表达水平与干眼诊断指标:泪膜破裂时间(break-up time,BUT)、角膜荧光素染色(corneal fluorescein staining,FL)评分和泪液分泌试验(schirmers test,SIt)的相关性;采用多因素Logistic回归分析影响白内障术后干眼发生的相关因素;采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析泪液miR-223和miR-143-3p对白内障术后干眼的预测价值。结果无干眼症组患者BUT(12.27±1.69s)及SIt(9.17±1.66mm)高于干眼症组(8.95±1.02s,4.36±0.97mm),FL(0.74±0.11分)则低于干眼症组(2.52±0.37分),差异具有统计学意义(t=11.136,16.546,32.386,均P<0.05)。干眼症组患者泪液miR-223(0.87±0.08)表达水平低于健康对照组(1.02±0.03)和无干眼症组(0.92±0.13),泪液miR-143-3p(1.37±0.32)表达水平高于健康对照组和无干眼症组(1.01±0.02,1.15±0.26),差异具有统计学意义(t=15.772,2.170;10.793,3.638,均P<0.05)。泪液中miR-223表达水平与BUT,SIt呈正相关(r=0.587,0.503,均P<0.001),与FL呈负相关(r=-0.442,P<0.001),miR-143-3p与BUT,SIt呈负相关(r=-0.714,-0.549,均P<0.001),与FL呈正相关(r=0.667,P<0.001)。干眼症组有角结膜疾病史、手术切口长度≥3 mm的患者所占比例高于无干眼症组(χ2=12.583,6.505,均P<0.05),且干眼症组患者泪液miR-223表达水平低于无干眼症组,miR-143-3p表达水平则高于无干眼症组,差异具有统计学意义(t=2.170,3.638,均P<0.05)。角结膜疾病史(OR=1.982)、手术切口长度(OR=2.036)及miR-143-3p(OR=1.653)为白内障患者术后发生干眼的危险因素,miR-223(OR=0.574)则为保护因素(P<0.05);泪液miR-223和miR-143-3p单独检测预测白内障术后干眼发生的曲线下面积(area under the cure,AUC)分别为0.692,0.719,而二者联合检测的AUC为0.880,二者联合检测优于miR-223和miR-143-3p各自单独检测(Z=3.869,3.810,均P<0.001)。结论老年性白内障术后干眼的发生与泪液中miR-223和miR-143-3p表达水平有关。

重症急性胰腺炎病人外周血微RNA-143-3p、环氧合酶-2表达水平与辅助性T细胞17/调节性T细胞平衡的关系

目的探究重症急性胰腺炎(SAP)病人血清微RNA-143-3p(miR-143-3p)、环氧合酶-2(COX-2)表达水平与辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的关系。方法选取2017年12月至2020年9月榆林市第一医院诊治的103例急性胰腺炎(AP)病人进行研究,按APACHEⅡ评分将其分为SAP组(45例)和轻症急性胰腺炎(MAP)组(58例),另选取同期55例体检健康者为健康组。比较各组血清miR-143-3p、维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)mRNA、COX-2 mRNA、叉头/翼状螺旋转录因子3(Foxp3)mRNA、Th17、Treg、Th17/Treg水平;分析SAP病人血清miR-143-3p、COX-2 mRNA表达水平与外周血Th17、Treg、Th17/Treg、RORγt mRNA、Foxp3 mRNA的相关性;分析SAP发生的影响因素。结果MAP组、SAP组病人血清miR-143-3p(0.70±0.23、0.42±0.14比1.04±0.35)、Foxp3 mRNA表达水平(0.56±0.19、0.31±0.11比1.03±0.34)及Treg细胞百分比[(6.13±2.04)%、(2.73±0.90)%比(8.74±2.91)%]低于健康组(P<0.05),COX-2 mRNA(1.68±0.48、2.37±0.54比1.01±0.34)、RORγt mRNA表达水平(1.72±0.57、2.44±0.81比1.05±0.35)及Th17细胞百分比[(3.87±1.29)%、(6.71±2.34)%比(1.99±0.66)%]、Th17/Treg(0.63±0.21、2.46±0.82比0.23±0.08)高于健康组(P<0.05);SAP组病人血清miR-143-3p、Foxp3 mRNA表达水平及Treg细胞百分比低于MAP组(P<0.05),COX-2 mRNA、RORγt mRNA表达水平及Th17细胞百分比、Th17/Treg高于MAP组(P<0.05);SAP病人血清miR-143-3p表达水平与Th17、RORγt mRNA、Th17/Treg及血清COX-2 mRNA表达水平与Treg、Foxp3 mRNA呈负相关(P<0.05),血清miR-143-3p表达水平与Treg、Foxp3 mRNA及血清COX-2 mRNA表达水平与Th17、RORγt mRNA、Th17/Treg呈正相关(P<0.05);SAP病人血清miR-143-3p表达水平与COX-2 mRNA呈负相关(P<0.05);miR-143-3p是影响SAP发生的保护因素(P<0.05),COX-2 mRNA、Th17/Treg是影响SAP发生的危险因素(P<0.05)。结论SAP病人血清miR-143-3p表达水平较低,COX-2 mRNA表达水平较高,二者均与Th17/Treg平衡相关,miR-143-3p可能为治疗SAP的新靶点。

自身免疫性肝炎患者血清miR431-5-p和miR143-3-p表达与病情严重程度的关系研究

目的 分析自身免疫性肝炎(AIH)患者血清微小RNA(miRNA)miR-431-5p和miR-143-3p表达与患者病情严重程度的关系。方法 选取东莞市人民医院2021年1月至2023年6月收治的118例AIH患者(AIH组),根据不同分期分为活动期(62例)、缓解期(56例),并根据不同病情严重程度分为轻度(36例)、中度(47例)、重度(35例)。另选取同期118例体检健康志愿者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(q-PCR)检测血清中miR-431-5p和miR-143-3p表达水平;采用Pearson相关性分析血清miR-431-5p、miR-143-3p相对表达水平与临床资料的相关性分析;采用多因素Logistic回归分析影响AIH患者病情严重程度的因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-431-5p、miR-143-3p对AIH患者病情严重程度的诊断价值。结果 AIH组血清miR-431-5p、miR-143-3p相对表达水平低于对照组(P<0.05)。轻度、中度、重度患者血清miR-431-5p、miR-143-3p相对表达水平依次降低(P<0.05)。活动期患者总胆红素(TB)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)高于缓解期患者(P<0.05),血清miR-431-5p、miR-143-3p相对表达水平低于缓解期患者(P<0.05)。经Pearson相关性分析显示,血清miR-431-5p、miR-143-3p与TB、ALT、AST水平呈负相关(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,血清miR-431-5p、miR-143-3p相对表达水平为影响AIH患者病情严重程度的保护因素(P<0.05)。血清miR-431-5p、miR-143-3p联合诊断AIH患者病情严重程度的曲线下面积优于二者单独诊断(P<0.05)。结论 AIH患者血清中miR-431-5p、miR-143-3p均呈低表达,且与病情严重程度密切相关,二者联合检测对AIH患者病情严重程度有一定的诊断价值。

糖尿病肾病患者血清microRNA-21含量及其与氧化应激指标的相关性

目的分析糖尿病肾病(DN)患者血清micro RNA-21(mi R-21)含量及其与氧化应激指标的相关性。方法选择在该院接受治疗的DN患者82例作为观察组,根据病情严重程度分为轻度DN组(47例)、中重度DN组(35例),另取同期体检健康人60例作为对照组。检测各组患者的血清mi R-21含量,超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、晚期蛋白氧化产物(AOPP)等氧化应激指标水平,进一步分析两者之间的相关性。结果 1早期DN组、中晚期DN组患者血清mi R-21含量低于对照组,中晚期DN组患者血清mi R-21含量低于早期DN组;2早期DN组、中晚期DN组患者血清SOD、MDA、AOPP水平高于对照组,中晚期DN组患者血清SOD、MDA、AOPP水平高于早期DN组;3血清mi R-21含量与SOD、MDA、AOPP等氧化应激指标水平呈负相关。结论 DN患者的血清mi R-21含量降低,且与患者的氧化应激指标水平相关,有望成为诊断及指导疾病治疗的有效指标之一。

红景天苷通过micro RNA-370改善2型糖尿病小鼠糖代谢的作用机制

目的观察红景天苷改善2型糖尿病小鼠血糖作用,探讨红景天苷改善2型糖尿病小鼠糖代谢紊乱的分子机制。方法采用高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病小鼠模型,检测血糖相关指标、血清和肝脏micro RNA-370表达,以及肝组织糖异生关键酶(PEPCK/G6Pase)蛋白表达水平,观察红景天苷对2型糖尿病小鼠糖代谢紊乱的改善作用。分离培养小鼠原代肝细胞,采用瞬时转染技术将micro RNA-370沉默或过表达,观察micro RNA-370对糖代谢的影响及红景天苷调节糖代谢的分子机制。结果与模型对照组比较,红景天苷各剂量组小鼠血糖相关指标均明显改善(P<0.05);血清和肝组织micro RNA-370表达水平以及肝组织PEPCK/G6Pase蛋白相对表达水平均不同程度降低,且呈剂量依赖性,中、大剂量组降低较明显(P<0.05),小剂量组有降低趋势,但差异无统计学意义。细胞实验中,与空白对照组比较,红景天苷组和micro RNA抑制剂组PEPCK/G6Pase表达均被抑制(P<0.05),micro RNA-370激动剂组PEPCK/G6Pase表达明显促进(P<0.05),红景天苷与micro RNA-370激动剂联用能逆转micro RNA-370激动剂所致PEPCK/G6Pase蛋白表达增高(P<0.05)。结论红景天苷能明显改善2型糖尿病小鼠糖代谢紊乱,且该作用至少部分通过抑制micro RNA-370实现。

彩色多普勒超声联合血清微RNA-187、微RNA-143水平检测在胆囊癌早期诊断中的价值

目的:探讨彩色多普勒超声联合血清微RNA-187、微RNA-143水平检测在胆囊癌早期诊断中的价值。方法:选取2015年1月至2020年1月本院收治的90例胆囊癌患者(病例组)、90例胆囊良性病变患者(良性组)、90例正常人(健康组),均行彩色多普勒超声检查,并采用实时定量PCR方法检测血清微RNA-187、微RNA-143表达水平,分析三者联合诊断胆囊癌的效能。结果:彩色多普勒超声检出胆囊癌57例(63.33%),漏误诊33例(36.67%);病例组随着临床分期升高血清微RNA-187表达增加,微RNA-143表达下降(P<0.05),病例组的血清微RNA-187表达高于良性组、健康组(P<0.05);良性组微RNA-187表达水平高于健康组(P<0.05);病例组的血清微RNA-143表达低于良性组、健康组(P<0.05);良性组微RNA-143表达水平低于健康组(P<0.05);超声和血清微RNA-187、微RNA-143联合诊断对直径≤10 mm的胆囊癌诊断符合率高于单独超声检查(P<0.05);ROC分析结果显示,彩色多普勒超声联合血清微RNA-187、微RNA-143诊断胆囊癌的曲线下面积(AUC)为0.946,灵敏度、特异度分别为90.00%、 92.86%。结论:彩色多普勒超声能够显示胆囊壁、胆囊腔内的病变情况及胆囊与周围组织器官的关系,血清微RNA-187在胆囊癌患者中呈高表达,微RNA-143呈低表达,三者联合可进一步提高胆囊癌的早期诊断效能。

MicroRNA-126和血管内皮生长因子在胚胎停育绒毛组织中的表达及相关性研究

目的通过分析孕早期胚胎停育与正常胚胎绒毛组织中microRNA-126(miR-126)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达差异,探讨其在早期胚胎停育中的相关性。方法收集孕早期胚胎停育和正常胚胎绒毛组织各28例作为胚胎停育组和对照组,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组miR-126和VEGF mRNA表达水平的变化。结果 1两组绒毛组织中均有miR-126表达,胚胎停育组绒毛组织中miR-126的表达高于对照组,但差异无统计学意义。2胚胎停育组绒毛组织中VEGF的表达低于对照组,差异有统计学意义。3胚胎停育组绒毛组织中miR-126与VEGF的表达呈负相关;对照组绒毛组织中miR-126与VEGF的表达呈正相关。结论 1胚胎停育绒毛组织中VEGF的表达低于正常胚胎。2VEGF的表达变化与胚胎停育的发生有一定的相关性。

microRNA-133a拮抗苯肾上腺素诱导的小鼠心肌肥大

目的利用心肌细胞肥大体外模型研究mi R-133a抗心肌肥大的作用机制。方法构建mi R-133a腺病毒表达载体,导入293细胞并收获高表达mi R-133a的病毒;取12只出生1~3 d内的小鼠心脏,采用酶消化及梯度离心法获得心肌细胞,分为对照组和模型组,模型组加入苯肾上腺素（PE）诱导;将高表达mi R-133a的腺病毒感染模型组的心肌细胞,观察细胞面积的变化,RTPCR检测Acta1、Actc1、Actb、Myh6、Myh7、BNP基因的表达。结果模型组心肌细胞加入PE培养后,较对照组面积增大3倍以上,Acta1等基因表达显著增高;肥大后模型组的心肌细胞采用mi R-133a病毒感染后较未加入mi R-133a病毒的模型组的心肌细胞的面积缩小,Acta1等基因表达显著降低。结论 mi R-133a是心肌肥大的重要调节因子,有拮抗心肌肥大的作用。

microRNA-155在类风湿关节炎外周血中的表达及临床意义

目的通过研究micro RNA-155(mi R-155)在类风湿关节炎(RA)患者外周血的表达水平,分析mi R-155与疾病临床特征的相关性,探讨其在RA发病及疾病进展中的意义。方法抽取50例初发RA患者及36例健康对照组外周血分离PBMC(外周血单个核细胞),提取和纯化mi RNA,实时定量PCR检测mi R-155的表达,以小分子RNA U6作为内对照,对mi R-155的表达量进行相对定量分析。同时收集RA患者有关的临床参数,统计分析mi R-155的表达水平与RA合并临床参数的相关性。对RA活动组中,随机分为甲氨蝶呤(MTX)单药治疗组,肿瘤坏死因子(TNF)-α抑制剂单药治疗组,两组随访观察12周,收集患者治疗前后外周血。实时荧光定量PCR法检测RA患者治疗前后外周血mi R-155的表达水平变化。结果RA患者中PBMC中mi R-155的表达水平较健康对照组明显升高,(P<0.01);同时RA患者mi R-155的表达与患者活动度有关,与肺间质病变等无明显相关,RA患者TNF-α抑制剂单药治疗组中,mi R-155的表达较治疗前下降,而在甲氨蝶呤治疗组中无明显下降。结论 mi R-155在RA的PBMC中异常高表达,且与RA的活动度相关,提示mi R-155可能可作为RA诊断及RA活动的一个预测指标。mi R-155在RA的发病机制中可能参与了TNF-α的致炎过程。

血清microRNA-375在非小细胞肺癌中的表达水平及其临床意义

目的：探讨micro RNA-375（mi R-375）在非小细胞肺癌（non small-cell lung cancer,NSCLC）患者血清中的表达水平及临床意义。方法：采用实时荧光定量PCR方法检测82例非小细胞肺癌患者和对照组100例健康人血清的mi R-375的表达水平,分析其与临床病理参数之间的关系。结果：NSCLC组血清mi R-375表达水平显著低于对照组,并且其表达与临床分期和淋巴结转移有关（P〈0.05）。血清mi R-375在ROC曲线下面积（area under the ROC curve,AUC）为0.905（95%CI：0.860~0.950）。当血清mi R-375临界值取0.995时,对NSCLC诊断的灵敏度为92.0%,特异度为78.0%。结论：血清mi R-375可能作为一种新型NSCLC诊断的分子标志物和潜在的基因靶向治疗靶点。

microRNA-21通过促进成纤维细胞的增殖和分化调节心肌梗死后的心脏重塑

目的探讨小鼠心肌梗死模型中microRNA-21(miR-21)对心脏成纤维细胞增殖和分化的影响。方法利用左前降支结扎法构建小鼠心肌梗死模型(心肌梗死组),以心电图及病理改变作为建模成功的观察指标。采用荧光定量PCR检测各组心肌组织miR-21的表达。利用miR-21的模拟物(miR-21 mimic)转染小鼠成纤维细胞(miR-21 mimic组),使其在细胞中呈过表达状态,然后标记5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU),通过荧光显微镜观察成纤维细胞的增殖情况,蛋白质印迹法检测成纤维细胞α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和小鼠Smad同源物7(Smad7)的表达,并与随机对照组及空白对照组比较。结果与假手术组比较,心肌梗死组梗死交界区的miR-21的表达量明显上调[(6.043±0.231)×10-4vs(1.620±0.451)×10-4,P<0.01],miR-21 mimic组成纤维细胞miR-21基因表达较随机对照组和空白对照组显著上调[(4.839±0.705)×10-4vs(1.143±0.064)×10-4vs(1.017±0.201)×10-4,P<0.01],miR-21mimic组成纤维细胞EdU染色阳性率较随机对照组和空白对照组显著增加[(27.892±1.645)%vs(12.553±1.227)%vs(13.946±1.550)%,P<0.01];同时,miR-21 mimic组成纤维细胞Smad7蛋白的表达明显下调,而α-SMA的表达显著上调。结论心肌梗死后,上调的miR-21可以通过调节转化生长因子(TGF)-β信号通路中Smad7的表达促进成纤维细胞的增殖和分化,进而调节心梗后的心脏重塑。

MicroRNA-146a与风湿性疾病

MicroRNAs（miRNAs）是一类短小（20～24nt）的非编码RNA,通过对基因表达的转录后调节参与很多生物学过程。越来越多的研究证明,miRNAs尤其miRNA-146a在免疫和自身免疫中发挥着重要作用。本文将miRNA-146a在风湿性疾病中的生物学功能及研究进展作一综述。

抑制microRNA-21表达降低HCT-116细胞侵袭转移能力的实验研究

目的:探讨抑制人结肠癌细胞HCT-116 micro RNA-21表达降低结肠癌细胞侵袭转移能力作用机制。方法:应用表达反义micro RNA-21的质粒mi RZip21转染HCT-116细胞,检测micro RNA-21的变化,Target Scan和Pic Tar等工具筛选与侵袭转移相关的靶基因,实时定量PCR方法检测转染前后靶基因m RNA的变化,Western blot检测靶基因蛋白表达变化,平皿划痕和Transwell实验观察抑制micro RNA-21与否HCT-116细胞转移和侵袭能力。结果:筛选出4种与侵袭转移相关的micro RNA-21靶基因:TIMP-3,RECK,BMPRⅡ和PCDH17;mi RZip21质粒转染HCT-116后,micro-RNA 21表达水平下降约40%,靶基因TIMP-3和RECK的m RNA及靶蛋白表达上升明显,有统计学意义(P<0.05);平皿划痕和Transwell实验结果表明抑制micro RNA-21后,HCT-116细胞转移侵袭能力明显减弱,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:抑制micro RNA-21的表达能够减弱HCT-116细胞的侵袭和转移能力。

MicroRNA-21对结直肠癌诊断价值的Meta分析

目的应用Meta分析评价血液(血清、血浆)及粪便标本中micro RNA-21(mi R-21)表达用于结直肠癌诊断的临床价值。方法联合应用Cochrane library、Pub Med、EMbase、Google学术、CNKI等检索micro RNA-21用于结直肠癌诊断的文献,按PRISMA声明的标准筛选文献以及进行QUADAS-2质量评价后,用固定效应模型或随机效应模型合并得到汇总的灵敏度(SEN)、特异度(SPE)、阳性似然比(PLR)、阴性似然比(NLR)和诊断优势比(DOR),受试者工作特征曲线(SROC)及曲线下面积(AUC)用于评价整体诊断效能。结果最终纳入14篇文献,包括1199例结直肠癌患者和784例正常对照者。Meta分析结果显示:血清mi R-21的汇总DOR、SEN和SPE分别为13.97(95%CI:8.56-22.81)、0.73(95%CI:0.69-0.77)、0.83(95%CI:0.76-0.89);血浆mi R-21的汇总DOR、SEN和SPE分别为8.03(95%CI:3.30-19.52)、0.67(95%CI:0.60-0.73)、0.76(95%CI:0.69-0.81);粪便mi R-21的汇总DOR、SEN和SPE分别为4.78(95%CI:1.46-15.69)、0.31(95%CI:0.27-0.36)、0.88(95%CI:0.84-0.91)。除此之外,血清、血浆和粪便mi R-21诊断结直肠癌的AUC分别为0.8701、0.8295和0.6991。结论血液标本mi R-21用于结直肠癌诊断具有良好的灵敏度和特异度,且血清标本的检测结果优于血浆标本;粪便mi R-21诊断结直肠癌灵敏度较差但特异性好。

胃癌组织中microRNA-224阳性表达与患者预后相关性分析

目的:探讨micro RNA-224于胃癌组织中的阳性表达与患者临床病理特征及预后的相关性。方法:应用原位杂交技术检测micro RNA-224在50例石蜡固定癌旁非肿瘤胃黏膜组织及112例石蜡胃肿瘤组织切片中的表达情况,分析其与肿瘤患者各病理参数及预后的相关性。原位杂交按照原位杂交试剂盒的说明书进行。结果:micro RNA-224在胃癌组织中阳性表达率49.1%(55/112),癌旁非肿瘤胃黏膜组织中阴性表达。其阳性表达与TNM分期、淋巴结转移、远处转移及浸润深度存在相关性(P<0.05),而与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤的部位、分化程度、Lauren分型无关(P>0.05)。micro RNA-224阴性表达比阳性表达者5年生存率高,差异有统计学意义(P<0.001)。经COX多因素分析显示:micro RNA-224的表达是影响胃癌患者预后的独立因素之一(P<0.05)。结论:micro RNA-224在肿瘤组织中阳性表达与TNM分期、淋巴结转移、远处转移及浸润深度密切相关,是影响胃癌患者预后的独立因素之一。

非酒精性脂肪性肝病患者血清微小RNA-143、Toll样受体2水平变化及其临床意义

目的:检测微小RNA-143(miR-143)、Toll样受体2(TLR2)在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者血清中表达情况,探讨miR-143、TLR2与NAFLD患者肝纤维化的相关性。方法:选择2019年1月至2020年7月在本院治疗的NAFLD患者121例,根据NFS评分将患者分为非进展性肝纤维化组(NFS≤0.676分,简称非进展组)68例和进展性肝纤维化组(NFS>0.676分,简称进展组)53例。选择同期健康体检人员100例作为对照组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清miR-143水平;酶联免疫吸附法检测血清TLR2水平。同时检测其他血清因子水平,Pearson法分析肝纤维化NFS评分与患者miR-143、TLR2及相关指标的相关性。结果:进展组和非进展组患者体重指数(BMI)及血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、糖化血红蛋白(HbA1c)、TLR2水平较对照组人员显著升高,而miR-143、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);与非进展组比较,进展组患者血清TLR2水平升高,miR-143表达水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);相关性分析显示肝纤维化患者NFS评分与TLR2、ALT、AST、TC、TG、LDL-C、HbA1c呈正相关,与miR-143、HDL-C呈负相关(均P<0.05)。结论:在NAFLD患者血清中miR-143呈低表达,TLR2呈高表达,两者水平与肝纤维化有关,可作为预测NAFLD患者肝纤维化潜在的标志物。

微小RNA-143诱导胃癌细胞株BGC-823凋亡机制的探讨

目的探讨微小RNA-143(miRNA-143)诱导胃癌细胞BGC-823产生凋亡的机制。方法生物信息学预测B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,bcl-2)3'非编码区(untranslation region,UTR)是否存在miRNA-143的结合位点;荧光定量及免疫印迹方法检测胃癌细胞株(BGC-823)及正常胃黏膜细胞株(GES-1)中Bcl-2 mRNA及其蛋白含量;荧光素酶报告基因法验证结合位点;化学法合成miRNA-143-mimics、inhibitor及NC序列并转染BGC-823细胞,转染后48 h收集细胞、蛋白质印迹法检测细胞内Bcl-2蛋白含量;实时定量PCR检测转染后不同时间点BGC-823细胞内miRNA-143含量变化,同时流式法检测BGC-823细胞凋亡。结果与GES-1细胞比较,BGC-823细胞中Bcl-2蛋白含量及miRNA-143含量差异有统计学意义(P<0.01);miRNA-143-mimics、miRNA-143-inhibitor与野生型荧光素酶报告基因共转染组可以明显抑制或者增强荧光素酶活性,转染后48 h,组间酶活性差异有统计学意义(P<0.05),miRNA-143-mimics和miRNA-143-inhibitor转染对突变型荧光素酶报告基因活性无明显影响,差异无统计学意义(P>0.05);BGC-823细胞转染miRNA-143-mimics和miRNA-143-inhibitor能够明显抑制或者促进细胞内Bcl-2蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.05);miRNA-143-mimics和miRNA-143-inhibitor转染细胞能够明显引起细胞内miRNA-143含量的改变,转染后48 h,miRNA-143-mimics转染组细胞内miRNA-143含量明显上升,miRNA-143-inhibitor转染组细胞内miRNA-143含量明显下降,差异有统计学意义(P<0.05),阴性对照转染对照组和转染对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);细胞凋亡检测结果表明,miRNA-143表达量的升高能够明显引起BGC-823细胞的凋亡,基因干预组与转染对照组相比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 miRNA-143通过抑制Bcl-2基因表达,可引起胃癌细胞株BGC-823细胞产生凋亡。

MicroRNA-599对静脉曲张中血管平滑肌细胞去分化的影响及其机制研究

目的研究micro RNA-599(miR-599)在曲张静脉中的表达,探讨miR-599是否通过下调血小板源性生长因子B(PDGF-BB),抑制曲张静脉中血管平滑肌细胞(VSMCs)去分化。方法收集大隐静脉移植术患者中曲张静脉和正常静脉标本,通过实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测42例曲张静脉组织及39例正常静脉组织中miR-599、miR-200、miR-145、miR-146b、miR-155的表达;Western blot检测两组标本中SMactin、SM-22、SM-MCH、OPN的表达;在细胞实验中,转染miR-599mimic和miR-NC至离体培养的VSMCs中,Western blot检测VSMCs中SM-actin、SM-22、SM-MCH、OPN、PDGF-BB的表达,噻唑蓝法测细胞增殖、划痕实验观察细胞迁移,利用荧光素酶试验验证PDGF是miR-599的靶基因。结果相比于正常静脉组织,miR-599在曲张静脉中的表达降低(F=73.012,P=0.001)。两组miR-146b、miR-200、miR-30、miR-155的表达量比较,差异无统计学意义。相比于正常静脉组织,曲张静脉组织中SM-actin、SM-22、SM-MCH的表达降低(P<0.05),OPN的表达升高(F=56.414,P=0.009);在细胞实验中,相比于对照组,miR-599组VSMCs中SM-actin、SM-22、SM-MCH的表达升高(P<0.05),OPN的表达降低(F=27.353,P=0.022),细胞增殖减少(F=37.824,P=0.016),迁移减少(F=69.365,P=0.001),PDGF表达量减少(F=55.345,P=0.004)。荧光素酶试验结果显示,miR-599能够降低PDGF-3'-UTR质粒的荧光素活性(F=21.429,P=0.036)。结论在曲张静脉组织中,miR-599低表达。在VSMCs中,miR-599可以通过下调PDGF-BB而抑制VSMCs去分化。