microRNA-155在类风湿关节炎外周血中的表达及临床意义

目的通过研究micro RNA-155(mi R-155)在类风湿关节炎(RA)患者外周血的表达水平,分析mi R-155与疾病临床特征的相关性,探讨其在RA发病及疾病进展中的意义。方法抽取50例初发RA患者及36例健康对照组外周血分离PBMC(外周血单个核细胞),提取和纯化mi RNA,实时定量PCR检测mi R-155的表达,以小分子RNA U6作为内对照,对mi R-155的表达量进行相对定量分析。同时收集RA患者有关的临床参数,统计分析mi R-155的表达水平与RA合并临床参数的相关性。对RA活动组中,随机分为甲氨蝶呤(MTX)单药治疗组,肿瘤坏死因子(TNF)-α抑制剂单药治疗组,两组随访观察12周,收集患者治疗前后外周血。实时荧光定量PCR法检测RA患者治疗前后外周血mi R-155的表达水平变化。结果RA患者中PBMC中mi R-155的表达水平较健康对照组明显升高,(P<0.01);同时RA患者mi R-155的表达与患者活动度有关,与肺间质病变等无明显相关,RA患者TNF-α抑制剂单药治疗组中,mi R-155的表达较治疗前下降,而在甲氨蝶呤治疗组中无明显下降。结论 mi R-155在RA的PBMC中异常高表达,且与RA的活动度相关,提示mi R-155可能可作为RA诊断及RA活动的一个预测指标。mi R-155在RA的发病机制中可能参与了TNF-α的致炎过程。

补中益气汤通过miR-155/Ndfip1/Pten轴调控Th17细胞改善自身免疫性甲状腺炎的作用机制

目的:探讨补中益气汤通过微小RNA-155(miR-155)/Nedd4家族相互作用蛋白1(Ndfip1)/磷酸酯酶与张力蛋白同源物(Pten)轴调控辅助性T细胞17(Th17)改善自身免疫性甲状腺炎(AIT)的作用机制。方法:将100只SPF级8周龄NOD.H-2h4小鼠饲以高碘水(0.05%碘化钠)喂养,8周后制成AIT模型,按随机数字表法分为模型组、补中益气汤低、中、高剂量组(4.78、9.56、19.12 g·kg^(-1))、西药组(硒酵母片3.033×10^(-5) g·kg^(-1)),每组20只,另设20只空白组小鼠,空白组及模型组灌胃等体积蒸馏水。连续给药8周后,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠甲状腺组织miR-155-5p、Ndfip1、Pten、蛋白质酪氨酸激酶1(Jak1)、信号传导和转录激活因子3(Stat3)、维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)、白细胞介素-17(IL-17)mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠甲状腺组织Ndfip1、Pten、Jak1、Stat3、RORγt、IL-17蛋白的表达;免疫组化法检测小鼠甲状腺组织中Ndfip1、Pten蛋白表达;流式细胞术检测小鼠脾脏Th17细胞比例。结果:与空白组比较,模型组小鼠脾脏Th17细胞比例显著升高(P<0.01),miR-155-5p、Jak1、Stat3、RORγt、IL-17的表达显著升高(P<0.01),Ndfip1、Pten的表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,各给药组小鼠脾脏Th17细胞比例降低(P<0.05,P<0.01),miR-155-5p、Jak1、Stat3、RORγt、IL-17的表达明显减少(P<0.05,P<0.01),Ndfip1、Pten的表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论:补中益气汤可改善AIT小鼠自身免疫失常,其机制可能与通过miR-155调控Ndfip1/Pten轴进而调控Th17细胞分化有关。

无症状期HIV感染者外周血miR-155表达与T细胞亚群含量及病毒载量的关系

无症状期人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)感染者受多种T淋巴细胞共同影响并出现免疫功能缺陷,但CD4^+T淋巴细胞计数、病毒载量等评价指标限制临床病情评估,有研究证实外周血微小RNA--155(miR--155)在HIV感染中发挥着重要作用,可影响病理进展,而对miR--155在无症状期HIV感染患者外周血表达情况及其与T细胞亚群含量、病毒载量关系尚不明确,故探究miR--155异常表达并分析其病理机制,对临床诊治无症状期HIV感染具有重要意义。以2016年5月至2017年6月在福建省泉州市第一医院就诊的无症状期HIV感染患者42例为研究对象,作为研究组,选择同期本院体检健康者42例作为对照组。采集两组受试者外周血检测miR--155表达水平,以及T淋巴亚群CD3^+、CD4^+、CD8^+、CD4^+/CD8^+、病毒载量水平,并分析其相关性。结果显示研究组患者外周血中miR--155表达水平显著高于对照组(P<0.05);研究组患者外周血中CD3^+、CD4^+及CD4^+/CD8^+水平均显著低于对照组,CD8^+水平显著升高(P<0.05)。患者外周血miR--155随病毒载量增加而升高,CD3^+、CD4^+及CD4^+/CD8^+水平随病毒载量增加而降低,而CD8^+水平随病毒载量增加而升高。无症状期HIV感染者外周血miR--155水平与CD3^+、CD4^+及CD4^+/CD8^+水平呈负相关,与CD8^+水平和病毒载量呈正相关(P<0.05)。本研究提示miR--155在无症状期HIV感染者外周血中表达上调,与CD3^+、CD4^+及CD4^+/CD8^+水平呈负相关,与CD8^+水平和病毒载量呈正相关。

Anti-miRNA-155反义寡核苷酸(AMOs)对腹膜成纤维细胞(FB)增殖的影响

目的探讨anti-mi RNA-155反义寡核苷酸(AMOs)对腹膜成纤维细胞(FB)增殖的作用及可能机制。方法大鼠腹膜FB细胞分为:实验组(anti-mi RNA-155 AMOs 50nmol/L)、阴性对照组(错义链50nmol/L)和空白对照组(PBS)。采用Lipofec-tamine2000作为载体分别转染各组原代培养大鼠腹膜FB细胞,应用real time PCR方法测定转染后mi RNA155水平,CCK8法检测转染后腹膜FB细胞增殖,transwell法检测转染后腹膜FB细胞迁移程度,Western blot检测转染后腹膜FB细胞NF-κB p65与PCNA水平。结果转染48 h后,实验组腹膜FB细胞的mi RNA-155水平,增殖和迁移比例明显低于阴性对照组和空白对照组(<0.01),NF-κB p65、PCNA蛋白表达水平下调(<0.05)。结论 mi RNA-155增加NF-κB p65表达的同时,促进腹膜FB细胞的增殖和迁移。