MicroRNA-27a-3p靶向调控SLC7A11抑制结直肠癌细胞铁死亡

目的:探究微小RNA-27a-3p(microRNA-27a-3p,miR-27a-3p)对结直肠癌细胞系HT-29和SW480铁死亡的调控及作用机制。方法:分别用0、2.5和5μmol/L Erastin处理结直肠癌细胞系HT-29和SW480,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各组细胞溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)mRNA表达水平,筛选Erastin的合适浓度;将HT-29和SW480细胞各分为siControl组、siSLC7A11-1组和siSLC7A11-2组,分别转染对照siRNA、siSLC7A11-1和siSLC7A11-2,与5μmol/L Erastin共培养0、24、48、72 h,检测不同时间点细胞增殖活性,并检测细胞内丙二醛水平。另将HT-29和SW480细胞各分为miR-NC组、miR-27a-3p组和anti-miR-27a-3p组,分别转染miR-NC、miR-27a-3模拟物和miR-27a-3p抑制物,采用qRT-PCR法检测SLC7A11 mRNA表达水平,采用荧光素酶报告基因实验检测SLC7A113′UTR序列(SLC7A11-WT)及突变序列(SLC7A11-Mut)荧光素酶活力;与5μmol/L Erastin共培养0、24、48、72 h,检测不同时间点细胞增殖活性,并检测细胞内丙二醛含量。结果:随Erastin浓度升高,结直肠癌HT-29和SW480细胞SLC7A11 mRNA表达水平显著升高(P均<0.01);在结直肠癌HT-29和SW480细胞中,与siControl组相比,siSLC7A11-1组和siSLC7A11-2组48 h和72 h细胞增殖活性显著增强(P<0.05),丙二醛含量显著下降(P<0.05);与miR-NC组相比,miR-27a-3p组细胞增殖活性显著增强(P<0.05),丙二醛水平和SLC7A11-WT荧光素酶活性显著下降(P<0.05或P<0.01),SLC7A11-Mut荧光素酶活性没有显著变化(P>0.05),anti-miR-27a-3p组细胞活力显著下降(P<0.01),丙二醛含量和SLC7A11-WT荧光素酶活性显著升高(P均<0.01),SLC7A11-Mut荧光素酶活性没有显著变化(P>0.05)。结论:miR-27a-3p可能通过靶向SLC7A11 mRNA 3′UTR,调控Erastin诱导的结直肠癌细胞铁死亡。

食管癌根治术患者血清microRNA-27a、microRNA-203a-3p表达及与预后的关系

目的 探究食管癌根治术患者术前血清microRNA-27a(miR-27a)、microRNA-203a-3p(miR-203a-3p)表达及与预后的关系。方法 选取2016年3月—2017年3月在南阳医学高等专科学校第一附属医院行食管癌根治术的123例食管癌患者作为研究组。另取同期该院健康体检人群64例作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测研究组术前和对照组体检时血清miR-27a、miR-203a-3p的表达。分析食管癌患者血清miR-27a、miR-203a-3p相对表达量与临床病理特征的关系。Kaplan-Meier生存曲线分析血清miR-27a、miR-203a-3p表达与患者预后的关系。单因素及多因素Cox回归分析食管癌患者预后的影响因素。结果 研究组血清miR-27a、miR-203a-3p相对表达量高于对照组(P <0.05)。肿瘤分期Ⅲ期、分化程度低分化、有淋巴结转移食管癌患者根治术前血清miR-27a、miR-203a-3p相对表达量高于肿瘤分期Ⅰ、Ⅱ期、分化程度高中分化、无淋巴结转移患者(P <0.05)。不同年龄、性别及肿瘤位置食管癌患者根治术前血清miR-27a、miR-203a-3p相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。miR-27a高表达组5年总生存率低于miR-27a低表达组(P <0.05)。miR-203a-3p高表达组5年总生存率低于miR-203a-3p低表达组(P <0.05)。单因素Cox回归分析结果显示:肿瘤分期[HR=1.730(95%CI:1.434,2.099)]、淋巴结转移[HR=1.602(95%CI:1.191,2.153)]、miR-27a[HR=2.041(95%CI:1.813,2.463)]、miR-203a-3p[HR=2.060(95%CI:1.921,2.279)]是食管癌患者预后的影响因素(P <0.05)。多因素Cox回归分析结果显示:肿瘤分期Ⅲ期[HR=1.973(95%CI:1.245,3.219)]、有淋巴结转移[HR=2.637(95%CI:1.158,6.008)]、miR-27a≥3.09[HR=2.484(95%CI:1.435,4.301)]、miR-203a-3p≥2.79[HR=1.660(95%CI:1.236,3.058)]是食管癌患者预后的独立影响因素(P <0.05)。结论 食管癌患者血清miR-27a、miR-203a-3p表达上调,两者表达与肿瘤TNM分期、分化程度及淋巴结转移有关,是食管癌根治术患者预后不良的独立危险因素。

长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因22调控微小RNA-27b-3p对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的探究长链非编码RNA(LncRNA)小核仁RNA宿主基因(SNHG)22调控微小RNA(miR)-27b-3p对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法收集52例OSCC患者的癌组织及癌旁组织标本,体外培养人正常口腔角质细胞HOK和3种人OSCC细胞(CAL-27、SCC-25和HSC-3),实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测癌组织、癌旁组织、HOK细胞和3种OSCC细胞中SNHG22、miR-27b-3p表达情况。对SCC-25细胞进行转染并将其分为Ctrl组(未进行转染)、si-SNHG22组、si-NC组、miR-27b-3p inhibitor组、inhibitor-NC组、si-SNHG22+inhibitor-NC组和si-SNHG22+miR-27b-3p inhibitor组,检测各组SCC-25细胞增殖情况[细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测增殖率、流式细胞术检测增殖指数(PI)];Transwell实验检测各组SCC-25细胞侵袭情况;划痕愈合实验检测各组SCC-25细胞迁移情况;双荧光素酶实验验证SNHG22与miR-27b-3p的靶向作用关系。结果与癌旁组织比较,OSCC癌组织中SNHG22表达显著升高,miR-27b-3p表达显著降低(P<0.05);与HOK细胞比较,CAL-27、SCC-25和HSC-3细胞中SNHG22表达显著升高,miR-27b-3p表达显著降低,且SCC-25细胞中SNHG22与miR-27b-3p的表达与HOK细胞差异最大(P<0.05)。与Ctrl组比较,si-SNHG22组SCC-25细胞增殖率、PI、侵袭数和划痕面积愈合率均显著减少(P<0.05),miR-27b-3p inhibitor组SCC-25细胞增殖率、PI、侵袭数和划痕面积愈合率均显著增加(P<0.05);与si-SNHG22组比较,si-SNHG22+miR-27b-3p inhibitor组SCC-25细胞增殖率、PI、侵袭数和划痕面积愈合率均显著增加(P<0.05)。双荧光素酶实验显示SNHG22与miR-27b-3p存在靶向作用关系。结论SNHG22在OSSC中高表达,miR-27b-3p在OSSC中低表达,SNHG22可能通过海绵化miR-27b-3p促进SCC-25细胞增殖、侵袭和迁移,SNHG22/miR-27b-3p轴可能是OSCC一个新的诊断和治疗靶点。

结直肠癌患者血清miRNA-21、miRNA-27b表达水平及其与预后的相关性分析

目的研究结直肠癌患者血清微小RNA(miRNA)-21、miRNA-27b表达水平及其与预后的相关性。方法选取2021年1-5月在该院接受治疗的结直肠癌患者60例作为观察组。另选取同期在该院参加体检的健康志愿者60例作为对照组。检测并对比两组血清miRNA-21及miRNA-27b表达水平,不同病理特征患者的血清miRNA-21及miRNA-27b表达水平,比较不同血清miRNA-21及miRNA-27b表达水平患者的生存预后。结果观察组血清miRNA-21及miRNA-27b表达水平明显高于对照组(P<0.05)。TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期及有淋巴结转移的患者血清miRNA-21及miRNA-27b表达水平分别较Ⅰ~Ⅱ期及无淋巴结转移者更低(P<0.05)。随访2年,miRNA-21高表达组平均生存时间(15.36±2.32)个月,miRNA-21低表达组平均生存时间(21.54±2.46)个月;miRNA-27b高表达组平均生存时间(16.11±3.20)个月,miRNA-27b低表达组平均生存时间(21.37±2.55)个月;miRNA-21高表达组及miRNA-27b高表达组的1、2年生存率均分别明显低于miRNA-21低表达组及miRNA-27b低表达组(P<0.05)。血清miRNA-21及miRNA-27b水平与患者的生存预后均呈负相关(P<0.05)。结论结直肠癌患者的血清miRNA-21及miRNA-27b均呈高表达,且二者表达与患者预后均呈负相关,可用于临床监测患者的病情及预后情况,值得重视。

微RNA-27、脂蛋白(a)、糖化白蛋白与糖尿病血管并发症的相关性分析

目的研究微RNA-27(miR-27)、脂蛋白(a)[LP(a)]、糖化白蛋白(GA)与糖尿病血管并发症(DVC)的相关性。方法前瞻性选取2020年2月至2022年2月于沧州市人民医院治疗的2型糖尿病(T2DM)患者100例,按照并发症情况分别纳入无糖尿病并发症组(n=25)、糖尿病下肢血管病变组(n=35)及糖尿病肾病组(n=40)。纳入本院体检中心同时期健康体检者20名为对照组。比较4组临床资料;血清总胆固醇、甘油三酯、HDL-C、LDL-C、FPG、HbA1c等常规生化指标;血清LP(a)、GA、miR-27等指标水平;导致DVC发生的影响因素;分析DVC患者临床资料及总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、空腹血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)、LP(a)、GA、miR-27等指标与DVC的相关性。结果无糖尿病并发症组、糖尿病下肢血管病变组、糖尿病肾病组的体重指数、总胆固醇、甘油三酯、HDL-C、LDL-C、FPG、HbA1c、LP(a)、GA、miR-27均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。糖尿病下肢血管病变组、糖尿病肾病组的T2DM病程、总胆固醇、甘油三酯、HDL-C、LDL-C、FPG、HbA1c、LP(a)、GA、miR-27均高于无糖尿病并发症组,糖尿病肾病组的T2DM病程、总胆固醇、甘油三酯、HDL-C、LDL-C、FPG、HbA1c、LP(a)、GA、miR-27均高于糖尿病下肢血管病变组,差异均有统计学意义(P<0.05)。T2DM病程、LP(a)、GA、miR-27为导致DVC发生的独立危险因素(OR=1.723,95%CI:1.559~2.318;OR=1.978,95%CI:1.658~2.574;OR=1.916,95%CI:1.620~2.539;OR=1.660,95%CI:1.549~2.214;P<0.05)。经Pearson相关分析,T2DM病程及LP(a)、GA、miR-27水平与DVC正相关(r=0.865、0.773、0.806、0.957,P<0.05)。结论T2DM病程、LP(a)、GA、miR-27水平与DVC正相关。

miR-27b-3p联合miR-215对早期胃癌内镜黏膜下剥离术后复发的预测效能

目的探讨微小RNA(miR)-27b-3p联合miR-215对早期胃癌内镜黏膜下剥离术(ESD)后复发的预测效能。方法2021年1月~2022年2月医院收治的早期胃癌病人122例,所有病人均接受ESD术,随访10~15个月,平均(12.57±1.83)个月,根据早期胃癌病人ESD术后是否复发分为复发组与非复发组。对比两组miR-27b-3p、miR-215相对表达量及临床资料,分析早期胃癌病人ESD术后复发的影响因素,分析miR-27b-3p、miR-215相对表达量及二者联合对早期胃癌病人ESD术后复发的预测价值。结果随访10~15个月,平均(12.57±1.83)个月,122例病人失访3例,随访率为97.54%,其中12例复发,剩余107例均未复发。复发组miR-27b-3p低于非复发组(P<0.05),复发组miR-215相对表达量高于非复发组(P<0.05)。复发组病变大小≥3 cm、浸润深度为SM2~SM3例数占比高于非复发组(P<0.05),复发组R0切除例数占比低于非复发组(P<0.05)。Logistic多因素回归分析结果显示病变大小≥3 cm、浸润深度为SM2~SM3、miR-27b-3p相对表达量、miR-215相对表达量为早期胃癌病人ESD术后复发的影响因素(P<0.05)。miR-27b-3p、miR-215相对表达量及二者联合预测早期胃癌病人ESD术后复发的曲线下面积(AUC)AUC分别为0.783、0.845、0.935。结论miR-27b-3p、miR-215可用于预测早期胃癌病人ESD术后复发风险,二者联合具有更高的预测价值。

基于JAK2/STAT3信号通路探究调控miRNA-27a对肺结核大鼠的干预效果

目的分析基于蛋白酪氨酸激酶2(janus kinase 2,JAK2)/信号转导因子和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)信号通路探究调控微RNA(microRNA,miRNA)-27a对肺结核大鼠的干预效果。方法选取50只雄性SPF级Wistar大鼠,采用随机数字表法选取10只大鼠作为对照组,另外40只建立肺结核模型,将建模成功的30只大鼠分为模型组(n=10)、沉默组(n=10)、过表达组(n=10)。对照组和模型组大鼠注射生理盐水,沉默组大鼠尾静脉注射10μl miRNA-27a沉默慢病毒悬液,过表达组大鼠尾静脉注射10μl miRNA-27a过表达慢病毒悬液。比较miRNA-27a表达量、结核分枝杆菌菌落数、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达水平,以及JAK2、STAT3 mRNA、JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3表达量水平。结果与对照组相比,模型组miRNA-27a表达量降低,结核分枝杆菌菌落数、IFN-γ、IL-6、COX-2、TNF-α、JAK2、STAT3 mRNA、JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3表达量升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与沉默组相比,过表达组miRNA-27a表达量升高,结核分枝杆菌菌落数、IFN-γ、IL-6、COX-2、TNF-α、JAK2、STAT3 mRNA、JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3表达量降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论上调miRNA-27a表达,可改善肺结核大鼠体内菌落水平,使大鼠肺损伤减轻,其机制可能抑制JAK2/STAT3信号通路相关。

MicroRNA-27a对U251胶质瘤细胞的影响

目的探讨microRNA-27a(miR-27a)对U251胶质瘤细胞的影响。方法采用体外瞬时转染的方法过表达或抑制U251细胞中的miR-27a,MTT方法检测细胞的增殖情况,Transwell侵袭试验测定U251胶质瘤细胞的侵袭能力,Real-time PCR方法测定U251细胞中miR-27a和PPARγ的含量。结果抑制miR-27a可降低U251胶质瘤细胞增殖能力,减弱U251胶质瘤细胞侵袭能力,增加PPARγ的含量;过表达miR-27a促进U251胶质瘤细胞增殖能力,提高U251胶质瘤细胞侵袭能力,减少PPARγ的含量。结论抑制miR-27a有利于降低U251胶质瘤细胞的增殖能力和侵袭能力。

乳腺癌患者血清GP73、miR-27a水平的变化及其与临床病理、化疗疗效的相关性

目的 分析乳腺癌患者血清高尔基体蛋白73 (GP73)、微小RNA-27a (miR-27a)水平变化及其与临床病理特征、化疗疗效的相关性。方法 选取2021年10月至2023年1月南阳市中心医院收治的80例乳腺癌患者作为研究组,另选取同期健康女性志愿者80例作为对照组。比较两组受检者以及研究组不同临床病理特征患者的血清GP73、miR-27a水平,并比较研究组不同化疗疗效患者化疗前后的血清GP73、miR-27a水平及变化值(△GP73、△miR-27a),采用Spearman相关法分析化疗前血清GP73、miR-27a水平与临床病理特征相关性,以及△GP73、△miR-27a与化疗疗效的相关性。结果 研究组患者的血清GP73、miR-27a水平分别为(121.35±40.12) ng/L、0.71±0.20,明显高于对照组的(47.68±15.29) ng/L、0.21±0.07,差异均有统计学意义(P<0.05);研究组患者中,不同临床分期、分化程度、肿瘤直径、淋巴结转移患者血清GP73、miR-27a水平比较差异均有统计学意义(P<0.05);经Spearman相关法分析结果显示,研究组血清GP73、miR-27a水平与乳腺癌临床分期、肿瘤直径、淋巴结转移呈正相关(P<0.05),与分化程度呈负相关(P<0.05);无效者化疗前后的血清GP73、miR-27a水平明显高于有效者,差异均有统计学意义(P<0.05);无效者△GP73、△miR-27a分别为13.52±3.16、0.07±0.02,明显低于有效者的21.31±5.42、0.12±0.03,差异均有统计学意义(P<0.05);经Spearman相关法分析结果显示,△GP73、△miR-27a与化疗疗效呈正相关(r=0.658、0.714,P<0.05)。结论 血清GP73、miR-27a水平与乳腺癌临床病理特征、化疗疗效密切相关,可以作为评估病情进展及化疗疗效的潜在指标。

丹参酮ⅡA通过调控miR-27a抑制肝星状细胞活化的机制研究

目的探讨丹参酮ⅡA(TⅡA)通过调控微小RNA-27a(miR-27a)抑制人肝星状细胞(LX2细胞)活化的机制。方法使用10μg/L转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导LX2细胞活化;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测miR-27a的表达;瞬时转染miR-27a的模拟物和抑制剂增强或抑制miR-27a的表达,细胞计数(CCK-8)法检测细胞增殖情况,Western blot法检测胶原蛋白Iα2(COL1A2)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、磷酸化糖原合成酶激酶3β(P-GSK3β)、分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)的表达;用不同浓度的TⅡA干预LX2细胞,CCK-8法检测细胞增殖情况,RT-qPCR检测miR-27a的表达,Western blot法检测COL1A2、α-SMA、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)、P-GSK3β、SFRP1和细胞周期蛋白D1(CCND1)的表达。结果miR-27a在TGF-β1干预的LX2细胞中表达增加(P<0.05)。LX2细胞中miR-27a被敲低48 h和72 h后,细胞增殖显著被抑制(P<0.05),抑制miR-27a表达减少了LX2细胞中COL1A2、α-SMA和P-GSK3β蛋白的表达,却增加了SFRP1蛋白的表达(P<0.05),过表达miR-27a则呈现相反的结果(P<0.05)。TⅡA能抑制LX2细胞的增殖,其显著降低了miR-27a的表达,且下调了COL1A2、α-SMA、P-GSK3β、CCND1蛋白的表达并上调了SFRP1蛋白的表达(P<0.05)。结论miR-27a在活化的LX2细胞中表达升高,并能促进LX2细胞的增殖和活化。TⅡA通过下调miR-27a抑制Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路激活,进而抑制LX2细胞活化。

微小RNA-27a-5p对抑郁症大鼠桡骨骨折愈合的影响

目的 探讨微小RNA (miR)-27a-5p对抑郁症大鼠桡骨骨折愈合的影响。方法 将SD大鼠随机分为骨折对照组、骨折+抑郁组、miR-27a-5p agomir(激活剂)阴性对照组、miR-27a-5p agomir组、miR-27a-5p antagomir(抑制剂)阴性对照组、miR-27a-5p antagomir组,除骨折对照组外,其余各组大鼠均通过慢性温和不可预知应激刺激建立抑郁模型。所有大鼠均折断前右肢桡骨中段制备骨折模型,并以miR-27a-5p激活剂及抑制剂进行干预分组后,以强迫游泳实验与蔗糖水消耗实验检测各组大鼠抑郁症状。检测各组大鼠骨折段骨痂量和骨微结构;检测各组大鼠血清炎性因子白细胞介素(IL)-2、IL-6及核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、骨保护素(OPG)水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)实验检测各组大鼠骨痂组织miR-27a-5p、IL-2 mRNA表达。体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC),随机分为对照组、miR-27a-5p mimics(模拟物)组、miR-27a-5p mimics阴性对照组、miR-27a-5p inhibitor(抑制剂)组、miR-27a-5p inhibitor阴性对照组。诱导各组细胞成骨分化并以miR-27a-5p模拟物及抑制剂分组干预后,以碱性磷酸酶(ALP)染色检测各组细胞成骨分化;以qRT-PCR实验检测各组细胞miR-27a-5p、IL-2 mRNA表达。以双荧光素酶报告基因实验检测大鼠BMSC中miR-27a-5p对IL-2的靶向调节作用。结果 与骨折对照组相比,骨折+抑郁组大鼠强迫游泳不动时间延长,血清IL-2、IL-6及RANKL水平、骨痂组织IL-2 mRNA表达升高,蔗糖水消耗量、骨痂量、骨体积分数、骨小梁厚度、骨小梁数量减少,血清OPG水平、骨痂组织miR-27a-5p表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与骨折+抑郁组相比,miR-27a-5p agomir组大鼠强迫游泳不动时间缩短,血清IL-2、IL-6及RANKL水平、骨痂组织IL-2 mRNA表达降低,蔗糖水消耗量、骨痂量、骨体积分数、骨小梁厚度、骨小梁数量增加,血清OPG水平、骨痂组织miR-27a-5p表达升高,差异有统计学意义(P<0.05), miR-27a-5p antagomir组大鼠各指标变化趋势与miR-27a-5p agomir组相反,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,miR-27a-5p mimics组细胞ALP阳性细胞相对比例、miR-27a-5p表达升高,IL-2 mRNA表达降低,差异有统计学意义(P<0.05), miR-27a-5p inhibitor组细胞各指标变化趋势与miR-27a-5p mimics组相反,差异有统计学意义(P<0.05)。大鼠BMSC中miR-27a-5p可靶向下调IL-2表达。结论 miR-27a-5p可通过减轻炎症缓解抑郁症大鼠抑郁症状,并促进其桡骨骨折愈合,其分子机制是miR-27a-5p可靶向下调大鼠BMSC中IL-2表达。

食管癌组织中ErbB3、miR-27a表达情况及与临床预后的关系

目的探究食管癌组织中Erb-B2受体酪氨酸激酶3(ErbB3)、微RNA-27a(miR-27a)表达情况及与临床预后的关系。方法回顾性选取2019年6月至2023年6月杨凌示范区医院病理科收治的120例食管癌患者作为研究对象。根据格拉斯哥预后评分(GPS)将患者分为预后良好组(97例)和预后不良组(23例)。选取50例同期体检的健康人员作为对照组。比较预后良好组和预后不良组一般资料,食管癌患者和对照组ErbB3、miR-27a表达水平。采用logistic回归分析食管癌患者预后的影响因素并构建列线图。采用Spearman相关性分析ErbB3、miR-27a与预后的相关性。采用受试者操作特征曲线(ROC)分析ErbB3、miR-27a对食管癌患者预后的预测效能。采用独立样本t检验、单因素方差分析和χ^(2)检验。结果预后良好组男55例,女42例;年龄47~68岁。预后不良组男14例,女9例;年龄45~66岁。预后不良组肿瘤分期Ⅲ期、淋巴结转移人数占比均高于预后良好组,低分化程度人数占比低于预后良好组(均P<0.05)。预后不良组ErbB3[(1.59±0.45)]、miR-27a[(2.59±0.95)]表达水平均高于预后良好组[(1.28±0.37)、(1.84±0.52)]和对照组[(0.72±0.28)(0.85±0.33)],且预后良好组均高于对照组(均P<0.05)。logistic回归分析显示,肿瘤分期、分化程度、淋巴结转移、ErbB3和miR-27a表达水平均是食管癌患者预后的影响因素(均P<0.05)。Spearman相关性分析显示,食管癌患者ErbB3、miR-27a表达水平均与GPS呈正相关(r=0.294、0.282,P=0.001、0.002)。ROC分析结果表明,ErbB3、miR-27a联合预测的曲线下面积(AUC)大于ErbB3、miR-27a单独预测(0.873比0.715、0.715)。结论食管癌组织中ErbB3、miR-27a表达水平对食管癌患者预后有良好评估价值。

高血压并发冠状动脉粥样硬化性心脏病患者血清miR-27a-3p和HOXC6水平表达与冠状动脉病变的相关性研究

目的探讨高血压并发冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者血清微小核糖核酸-27a-3p(miR-27a-3p)和同源异型盒C6(homeobox C6,HOXC6)水平表达与冠状动脉病变的相关性,为高血压并发冠心病的防治提供一定参考。方法选取北大荒集团总医院2021年6月~2023年6月接诊的246例高血压患者为研究对象,其中129例高血压并发冠心病患者作为并发组,117例单纯高血压患者作为未并发组。采用实时荧光定量PCR(quantitative real timePCR,qRT-PCR)检测血清miR-27a-3p和HOXC6表达水平;运用Spearman法分析高血压并发冠心病患者血清miR-27a-3p和HOXC6水平与冠状动脉病变的相关性;多因素Logistic回归分析高血压并发冠心病的影响因素;受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清miR-27a-3p,HOXC6水平对高血压并发冠心病的预测价值。结果并发组高血压病程(6.69±1.35年)、总胆固醇(total cholesterol,TC)(5.96±0.86mmol/L)、低密度脂蛋白-胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)(3.36±0.51mmol/L)均显著高于未并发组(5.87±1.32年,5.42±0.67mmol/L,2.98±0.48mmol/L),并发组血清miR-27a-3p(1.35±0.34),HOXC6(1.29±0.33)水平均显著高于未并发组(1.06±0.23,1.03±0.25),差异具有统计学意义(t=4.808,5.454,6.001,7.755,6.911,均P<0.05);轻度组、中度组、重度组患者血清miR-27a-3p(0.54±0.13,1.19±0.31,2.18±0.55)和HOXC6(0.47±0.12,1.12±0.31,2.13±0.52)表达水平逐渐升高,差异具有统计学意义(F=191.026,191.026,均P<0.05)。高血压并发冠心病患者血清miR-27a-3p,HOXC6与SYNTAX评分具呈正相关性(r=0.563,0.517,均P<0.05);血清miR-27a-3p[OR(95%CI:1.627(1.177~2.248)]、HOXC6[OR(95%CI):1.715(1.069~2.750)]是影响高血压并发冠心病的独立危险因素(P<0.05);血清miR-27a-3p和HOXC6联合预测高血压并发冠心病的AUC为0.896(95%CI:0.851~0.931),优于各自单独诊断(Z=2.133,2.815,均P<0.05)。结论高血压并发冠心病患者血清miR-27a-3p,HOXC6水平均显著升高,且与冠状动脉病变密切相关,二者联合对高血压并发冠心病具有较高的预测价值。

microRNA-27b与结直肠癌患者血管生成拟态的相关性分析

目的探讨microRNA-27b与结直肠癌患者血管生成拟态的相关性。方法收集我院与合作中心2018年1月至2020年1月收治的结直肠癌患者100例作为观察组,同期收集100例健康成人作为对照组。比较两组人群血清microRNA-27b,同时分析结直肠癌患者microRNA-27b与结直肠癌患者血管生成拟态、微血管密度、淋巴管密度等病理特征的相关性。结果与对照组比较,观察组患者microRNA-27b相对表达量显著降低(0.87±0.20 vs.1.55±0.28,P=0.000)。与无血管生成拟态的结直肠癌患者相比,有血管生成拟态的结直肠癌患者microRNA-27b水平更低(0.62±0.24 vs.1.38±0.28,P=0.000)。多因素Logistics回归分析显示,血清MicroRNA-27b相对表达量<1.0、淋巴结转移、肿瘤直径≥5 cm是结直肠癌患者血管生成拟态的危险因素(P<0.05)。结论microRNA-27b在结直肠癌患者中降低,与血管生成拟态形成有关。

miR-27a和miR-128在种植体周围炎患者龈沟液中的水平及其与骨吸收的关系

目的探讨微小RNA(miR)-27a和miR-128在种植体周围炎患者龈沟液中的水平及其与骨吸收的关系。方法将2018年1月至2021年12月于上海长征医院口腔科完成牙种植修复术的患者136例纳入研究,根据种植牙状况分为健康种植体患者66例(健康组)和种植体周围炎患者70例(炎症组)。另外,选取同期进行牙龈健康检查的志愿者70例作为对照组。收集所有纳入研究者探诊深度(PD)、龈沟出血指数(SBI)、龈沟液量、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-4水平的数据。采用口腔锥形束CT(CBCT)进行骨吸收测定。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测龈沟液中miR-27a和miR-128水平。采用Pearson相关法分析种植体周围炎患者龈沟液中miR-27a和miR-128水平及二者与炎症因子、骨吸收量的相关性。结果与对照组相比,炎症组和健康组龈沟液中PD、SBI、龈沟液量、骨吸收量,TNF-α、IL-6、miR-128水平升高,IL-4、miR-27a水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与健康组相比,炎症组龈沟液中PD、SBI、龈沟液量、骨吸收量、TNF-α、IL-6、miR-128水平升高,IL-4、miR-27a水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,种植体周围炎患者龈沟液中miR-27a和miR-128水平呈负相关(r=-0.365,P=0.002)。种植体周围炎患者龈沟液中miR-27a水平与PD、SBI、骨吸收量、TNF-α、IL-6水平呈负相关(P<0.05),与IL-4水平呈正相关(P<0.05);miR-128水平与PD、SBI、骨吸收量、TNF-α、IL-6水平呈正相关(P<0.05),与IL-4水平呈负相关(P<0.05)。结论miR-128在种植体周围炎患者龈沟液中呈高水平,miR-27a呈低水平,二者与骨吸收相关。

白藜芦醇单用或与miR-27b激动剂联合应用对脑出血大鼠脑组织继发性病理损伤的防治作用观察

目的观察白藜芦醇(Res)单用或与miR-27b激动剂联合应用对脑出血(ICH)大鼠脑组织继发性病理损伤的防治作用。方法将180只雄性SD大鼠随机分为假手术组、ICH组、Res组、Res+miR-27b agomir组、NC组,每组36只。ICH组、Res组、Res+miR-27b agomir组以及NC组大鼠采用胶原酶注射尾状核法制备ICH模型。Res组、Res+miR-27b agomir组、NC组大鼠在造模前连续7 d腹腔注射Res,假手术组及ICH组采注射等体积DMSO。Res+miR-27b agomir组大鼠在造模前3 d将miR-27b激动剂miR-27b agomir注入大鼠右侧脑室,NC组大鼠注射agomir阴性对照试剂,假手术组、ICH组、Res组注射等量生理盐水。各组大鼠造模成功后继续喂养24 h,使用mNSS评分量表评估神经功能。各组大鼠处死后取脑组织,采用TUNEL法测算脑组织神经细胞凋亡率,采用ELISA法检测大鼠脑组织炎症因子、氧化应激相关因子,采用qRT-PCR法检测大鼠脑组织中miR-27b、核因子相关因子2(Nrf2)mRNA,采用Western Blotting法检测大鼠脑组织中Nrf2/ARE信号通路相关蛋白Nrf2、血红素加氧酶(HO-1)、醌氧化还原酶1(Nqo1)。结果假手术组大鼠mNSS评分、脑组织神经细胞凋亡率和TNF-α、IL-1β、MDA表达水平均低于其余各组(P均<0.05),SOD活力均高于其余各组(P均<0.05);ICH组大鼠mNSS评分、脑组织神经细胞凋亡率和TNF-α、IL-1β、MDA表达水平均高于其余各组(P均<0.05),SOD活力均低于其余各组(P均<0.05);且Res+miR-27b agomir组大鼠mNSS评分、脑组织神经细胞凋亡率和TNF-α、IL-1β、MDA表达水平均高于Res组和NC组(P均<0.05),SOD活力均低于Res组和NC组(P均<0.05)。与假手术组相比,ICH组、Res组、Res+miR-27b agomir组、NC组大鼠脑组织中miR-27b相对表达量均降低,Nrf2mRNA和蛋白、HO-1蛋白、NQO1蛋白相对表达量均升高(P均<0.05);与ICH组相比,Res组、Res+miR-27b agomir组、NC组大鼠脑组织中miR-27b相对表达量均降低,Nrf2 mRNA和蛋白、HO-1蛋白、NQO1蛋白相对表达量均升高(P均<0.05);与Res+miR-27b agomir组相比,Res组、NC组大鼠脑组织中miR-27b相对表达量均降低,Nrf2 mRNA和蛋白、HO-1蛋白、NQO1蛋白相对表达量均升高(P均<0.05)。结论Res单用或联合miR-27b激动剂可对ICH大鼠脑组织继发性病理损伤起防治作用,其防治作用可能与激活Nrf2/ARE信号通路有关。

糖尿病肾病患者血清microRNA-21含量及其与氧化应激指标的相关性

目的分析糖尿病肾病(DN)患者血清micro RNA-21(mi R-21)含量及其与氧化应激指标的相关性。方法选择在该院接受治疗的DN患者82例作为观察组,根据病情严重程度分为轻度DN组(47例)、中重度DN组(35例),另取同期体检健康人60例作为对照组。检测各组患者的血清mi R-21含量,超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、晚期蛋白氧化产物(AOPP)等氧化应激指标水平,进一步分析两者之间的相关性。结果 1早期DN组、中晚期DN组患者血清mi R-21含量低于对照组,中晚期DN组患者血清mi R-21含量低于早期DN组;2早期DN组、中晚期DN组患者血清SOD、MDA、AOPP水平高于对照组,中晚期DN组患者血清SOD、MDA、AOPP水平高于早期DN组;3血清mi R-21含量与SOD、MDA、AOPP等氧化应激指标水平呈负相关。结论 DN患者的血清mi R-21含量降低,且与患者的氧化应激指标水平相关,有望成为诊断及指导疾病治疗的有效指标之一。

红景天苷通过micro RNA-370改善2型糖尿病小鼠糖代谢的作用机制

目的观察红景天苷改善2型糖尿病小鼠血糖作用,探讨红景天苷改善2型糖尿病小鼠糖代谢紊乱的分子机制。方法采用高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病小鼠模型,检测血糖相关指标、血清和肝脏micro RNA-370表达,以及肝组织糖异生关键酶(PEPCK/G6Pase)蛋白表达水平,观察红景天苷对2型糖尿病小鼠糖代谢紊乱的改善作用。分离培养小鼠原代肝细胞,采用瞬时转染技术将micro RNA-370沉默或过表达,观察micro RNA-370对糖代谢的影响及红景天苷调节糖代谢的分子机制。结果与模型对照组比较,红景天苷各剂量组小鼠血糖相关指标均明显改善(P<0.05);血清和肝组织micro RNA-370表达水平以及肝组织PEPCK/G6Pase蛋白相对表达水平均不同程度降低,且呈剂量依赖性,中、大剂量组降低较明显(P<0.05),小剂量组有降低趋势,但差异无统计学意义。细胞实验中,与空白对照组比较,红景天苷组和micro RNA抑制剂组PEPCK/G6Pase表达均被抑制(P<0.05),micro RNA-370激动剂组PEPCK/G6Pase表达明显促进(P<0.05),红景天苷与micro RNA-370激动剂联用能逆转micro RNA-370激动剂所致PEPCK/G6Pase蛋白表达增高(P<0.05)。结论红景天苷能明显改善2型糖尿病小鼠糖代谢紊乱,且该作用至少部分通过抑制micro RNA-370实现。

MicroRNA-126和血管内皮生长因子在胚胎停育绒毛组织中的表达及相关性研究

目的通过分析孕早期胚胎停育与正常胚胎绒毛组织中microRNA-126(miR-126)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达差异,探讨其在早期胚胎停育中的相关性。方法收集孕早期胚胎停育和正常胚胎绒毛组织各28例作为胚胎停育组和对照组,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组miR-126和VEGF mRNA表达水平的变化。结果 1两组绒毛组织中均有miR-126表达,胚胎停育组绒毛组织中miR-126的表达高于对照组,但差异无统计学意义。2胚胎停育组绒毛组织中VEGF的表达低于对照组,差异有统计学意义。3胚胎停育组绒毛组织中miR-126与VEGF的表达呈负相关;对照组绒毛组织中miR-126与VEGF的表达呈正相关。结论 1胚胎停育绒毛组织中VEGF的表达低于正常胚胎。2VEGF的表达变化与胚胎停育的发生有一定的相关性。

microRNA-133a拮抗苯肾上腺素诱导的小鼠心肌肥大

目的利用心肌细胞肥大体外模型研究mi R-133a抗心肌肥大的作用机制。方法构建mi R-133a腺病毒表达载体,导入293细胞并收获高表达mi R-133a的病毒;取12只出生1~3 d内的小鼠心脏,采用酶消化及梯度离心法获得心肌细胞,分为对照组和模型组,模型组加入苯肾上腺素（PE）诱导;将高表达mi R-133a的腺病毒感染模型组的心肌细胞,观察细胞面积的变化,RTPCR检测Acta1、Actc1、Actb、Myh6、Myh7、BNP基因的表达。结果模型组心肌细胞加入PE培养后,较对照组面积增大3倍以上,Acta1等基因表达显著增高;肥大后模型组的心肌细胞采用mi R-133a病毒感染后较未加入mi R-133a病毒的模型组的心肌细胞的面积缩小,Acta1等基因表达显著降低。结论 mi R-133a是心肌肥大的重要调节因子,有拮抗心肌肥大的作用。