血清miR-98-5p、LncRNA XIST在急性呼吸窘迫综合征患儿中与疾病严重程度、预后的关系

目的:检测急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患儿血清中微小RNA(miR)-98-5p、长链非编码RNA(LncRNA)X染色体失活特异性转录因子(XIST)表达情况,并探究二者与疾病严重程度、预后的关系。方法:收集86例ARDS患儿为研究对象(研究组),同期健康体检儿童90名设为对照(对照组),参考柏林(2012年)ARDS病情严重程度诊断标准中动脉血氧分压/吸入氧浓度将ARDS患儿分为轻度组、中度组、重度组;另根据ARDS患儿28 d生存状况分为存活组和死亡组。实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测血清miR-98-5p、LncRNA XIST水平,绘制受试者工作特性(ROC)曲线分析血清中miR-98-5p、LncRNA XIST水平对ARDS患儿预后不良的预测价值;Kaplan-Meier生存曲线分析血清miR-98-5p、LncRNA XIST水平与ARDS患儿预后的关系;Pearson分析ARDS患儿血清中miR-98-5p与LncRNA XIST的相关性。结果:与对照组相比,研究组血清中miR-98-5p水平降低(P<0.01),LncRNA XIST水平升高(P<0.01)。与轻度组相比,中度组、重度组血清中miR-98-5p水平降低(P<0.05),LncRNA XIST水平升高(P<0.05);与中度组相比,重度组血清中miR-98-5p水平降低(P<0.05),LncRNA XIST水平升高(P<0.05)。与存活组相比,死亡组血清中miR-98-5p水平降低(P<0.01),LncRNA XIST水平升高(P<0.01)。ROC曲线显示,血清中miR-98-5p、LncRNA XIST水平预测ARDS患儿预后不良的ROC曲线下面积分别为0.771、0.764,截断值分别为0.54、1.97,其敏感性分别为76.1%、86.9%,特异性分别为73.7%、52.6%;血清中miR-98-5p联合LncRNA XIST预测ARDS患儿预后不良的ROC曲线下面积为0.888,其敏感性为77.6%、特异性为94.7%。miR-98-5p高表达者存活率35.14%高于低表达者12.24%(P<0.05),LncRNA XIST高表达存活率12.73%低于低表达者38.71%(P<0.01)。Pearson分析发现ARDS患儿血清中miR-98-5p与LncRNA XIST呈负相关关系(r=-0.411,P<0.05)。Starbase3.0预测发现LncRNA XIST与miR-98-5p存在结合位点。结论:ARDS患儿血清中miR-98-5p水平降低、LncRNA XIST水平升高,二者均与疾病严重程度、预后关系密切,且二者呈显著负相关,有望用于评估ARDS疾病严重程度、预后。

circPRMT5通过靶向miR-98-5p对膀胱癌细胞增殖、迁移侵袭的机制研究

目的探究circPRMT5通过靶向miR-98-5p对膀胱癌细胞增殖、迁移侵袭的机制研究。方法qRT-PCR检测永生化正常尿路上皮细胞SV-HUC-1和膀胱癌细胞(T24、J82、HT-1376)中circPRMT5、miR-98-5p和X染色体连锁的凋亡抑制蛋白(XIAP)mRNA相对表达水平。核糖核酸酶(RNase)R和放线菌素D的消化实验鉴定circPRMT5的环状结构。将T24细胞分为si-NC组、si-circPRMT5组、miR-NC组、miR-98-5p组、si-circPRMT5+anti-miR-NC组、si-circPRMT5+anti-miR-98-5p组。qRT-PCR检测circPRMT5和miR-98-5p表达水平;MTT、克隆实验检测细胞增殖水平;Transwell检测迁移、侵袭能力;Western Blot检测MMP2、MMP9、XIAP蛋白表达;双荧光素酶报告实验检测circPRMT5和miR-98-5p靶向关系。结果与永生化正常尿路上皮细胞SV-HUC-1相比,膀胱癌细胞T24、J82、HT-1376中circPRMT5、XIAP mRNA相对表达水平增加,miR-98-5p降低。circPRMT5比线性PRMT5稳定性更强。沉默circPRMT5或过表达miR-98-5p降低膀胱癌细胞存活率,减少克隆细胞数、迁移细胞数、侵袭细胞数,降低MMP2、MMP9、XIAP蛋白表达。circPRMT5靶向负调控miR-98-5p的表达,抑制miR-98-5p可部分回复沉默circPRMT5对膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭及XIAP mRNA和蛋白表达的作用。结论circPRMT5靶向负调控miR-98-5p抑制膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭能力。

lncRNA HOXA11-AS和miR-98-5p在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)同源异形盒基因A11反义RNA(HOXA11-AS)和微小RNA-98-5p(miR-98-5p)在乳腺癌中的表达,并分析其与临床病理特征的关系。方法 回顾性选取2014年1月至2016年10月青岛大学附属青岛市中心医院(青岛市肿瘤医院)接收的120例乳腺癌患者作为研究对象。收集乳腺癌患者的临床病理资料,如年龄、肿瘤大小、TNM分期、病理分级、病理类型、孕激素受体(PR)表达、人类表皮生长因子受体2(HER-2)表达、雌激素受体(ER)表达、Ki-67表达等。采用实时荧光定量PCR法检测所有组织HOXA11-AS、miR-98-5p表达水平。比较HOXA11-AS、miR-98-5p在乳腺癌组织及乳腺癌各分子分型上的表达水平。采用Spearman法分析癌组织中HOXA11-AS与miR-98-5p的相关性。分析HOXA11-AS、miR-98-5p表达水平与乳腺癌临床病理特征关系。结果 癌组织中HOXA11-AS的水平为2.21±0.53,较癌旁组织(1.02±0.21)显著升高,而miR-98-5p水平为0.58±0.12,较癌旁组织(1.03±0.19)显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。HER-2阳性、Luminal A型、Luminal B型、Basal-like型的癌组织中HOXA11-AS表达水平较癌旁组织显著升高,miR-98-5p表达水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。以表达水平将乳腺癌患者分别分为HOXA11-AS高表达组(n=67)和HOXA11-AS低表达组(n=53),miR-98-5p低表达组(n=63)和miR-98-5p高表达组(n=57)。HOXA11-AS、miR-98-5p均与乳腺癌TNM分期、HER-2表达、Ki-67表达、ER表达、PR表达相关(P<0.05)。乳腺癌组织中HOXA11-AS与miR-98-5p表达水平呈负相关(r=-0.571,P<0.05)。Kaplan-Meier分析表明,HOXA11-AS低表达组的平均生存时间为(53.61±1.58)个月,高于HOXA11-AS高表达组[(42.11±2.14)个月],差异有统计学意义(P<0.05);miR-98-5p高表达组的平均生存时间为(52.65±1.62)个月,高于miR-98-5p低表达组[(42.25±2.23)个月],差异有统计学意义(P<0.05)。TNM分期、病理分级、病理类型、PR表达、HER-2表达、ER表达、Ki-67、HOXA11-AS、miR-98-5p是乳腺癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论 乳腺癌组织HOXA11-AS呈高表达、miR-98-5p呈低表达,HOXA11-AS、miR-98-5p与患者生存期密切相关,是影响乳腺癌预后的独立因素,可能成为新的乳腺癌治疗靶点。

PET/CT联合血清lncRNA THRIL、miR-98-5p检测对孤立性肺结节良恶性的诊断价值

目的 探究正电子发射断层扫描和计算机断层扫描(PET/CT)联合血清长链非编码RNA THRIL(lncRNA THRIL),微小RNA-98-5p(miR-98-5p)检测对孤立性肺结节(SPN)良恶性的鉴别诊断价值。方法 选取2022年5月至2023年5月在南阳市中心医院收治的115例SPN患者作为研究对象,根据病理检查结果将SPN患者分为良性组(75例)和恶性组(40例),比较两组血清lncRNA THRIL、miR-98-5p表达水平。Pearson法分析血清lncRNA THRIL与miR-98-5p的相关性。一致性Kappa检验比较PET/CT、血清lncRNA THRIL、miR-98-5p单独及联合诊断SPN恶性与病理结果的一致性。受试者工作特征(ROC)曲线分析PET/CT检查联合血清lncRNA THRIL、miR-98-5p水平对恶性SPN的诊断价值。结果 恶性组血清lncRNA THRIL水平比良性组高,miR-98-5p水平比良性组低(P<0.05)。Pearson分析显示,lncRNA THRIL与miR-98-5p表达呈负相关(r=-0.491,P<0.05),且lncRNA THRIL与miR-98-5p有靶向结合位点。PET/CT、血清lncRNA THRIL、miR-98-5p联合共诊断出38例恶性SPN患者,与病理诊断的一致性较高,Kappa值为0.729(P<0.05),联合诊断恶性SPN的特异度、灵敏度、阳性预测值、阴性预测值、准确性均最高,分别为90.67%、95.00%、84.44%、97.14%、92.17%。PET/CT、血清lncRNA THRIL、miR-98-5p联合诊断恶性SPN的曲线下面积(AUC)为0.921(95%CI:0.874~0.968),均优于各自单独检测(Z=2.235、2.478、2.444,P<0.05)。结论 PET/CT联合血清lncRNA THRIL、miR-98-5p检测可提高对恶性SPN诊断的灵敏度及准确性,对SPN良恶性的鉴别诊断具有一定的应用价值。

microRNA在肌少-骨质疏松症中的作用机制研究进展

microRNA在肌、骨代谢疾病中的作用已成为当前研究热点。本文对microRNA在肌少-骨质疏松症中的作用机制研究进行总结。首先,本文介绍microRNA的生物发生过程和基因调控机制。其次,本文分别介绍相关microRNA亚型在骨骼肌和骨骼重建中的作用。在microRNA对骨骼肌作用机制方面,归纳了5个方面:(1)调节转录因子MyoD的活化和表达;(2)调节其他肌肉特异性转录因子的表达;(3)影响肌肉细胞的增殖和分化;(4)影响肌肉细胞表型;(5)microRNA的协同作用。并从促进成骨和抑制破骨两方面说明microRNA影响骨重塑的作用机制。还对具有肌骨共生的microRNA进行了总结归纳。最后对相关研究中存在的问题与不足进行总结和展望,对肌少-骨质疏松症的防治具有积极意义。

血清miR-22 miR-98-5p表达与非小细胞肺癌三维适形放疗疗效的关系研究

目的:观察非小细胞肺癌(nonsmalcellungcancer,NSCLC)实施三维适形放疗后不同疗效情况患者机体微小RNA(microRNA,miR)-22、miR-98-5p表达水平差异,并分析其表达水平与疗效间的关联性。方法:纳入2020年1月至2024年1月本院收治的104例NSCLC患者,所有患者接受三维适形放疗,完成放疗后通过实时荧光定量PCR法测定患者机体miR-22、miR-98-5p表达水平,采用单因素方差分析不同疗效患者miR-22、miR-98-5p表达水平差异,采用Logistic多因素回归模型分析影响放疗疗效的相关因素,绘制受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC)分析miR-22、miR-98-5p表达水平对放疗有效性的评估效能。结果:不同疗效患者miR-22、miR-98-5p表达水平比较差异有统计学意义(P<0.05),其中SD组与PD组miR-22表达水平比较差异有统计学意义(P<0.05),CR组、PR组与SD组、PD组miR-22、miR-98-5p表达水平比较差异有统计学意义(P<0.05),CR组与PR组miR-22、miR-98-5p表达水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。单因素分析发现不同病理类型、TNM分期、分化程度及miR-98-5p、miR-22表达水平与放疗的疗效有关,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归模型分析发现,TNM分期(OR=3.360,95%CI:1.229~9.184)、分化程度(OR=2.779,95%CI:1.066~7.246)及miR-98-5p(OR=2.085,95%CI:1.147~3.792)、miR-22表达水平(OR=0.590,95%CI:0.368~0.946)是评估放疗疗效的影响因素(P<0.05)。ROC曲线表明:miR-98-5p、miR-22评估放疗有效性的曲线下面积(AUC)分别为0.798、0.800,敏感度分别为0.589、0.630,特异度分别为0.871、0.839,而miR-98-5p+miR-22评估放疗有效性的AUC为0.895,明显高于单项指标(P<0.05),敏感度为0.726,特异度为0.935。结论:在NSCLC实施三维适形放疗后不同疗效患者血清miR-98-5p、miR-22表达水平存在一定的差异,与放疗有效性明显相关,并对疗效有一定的评估价值。

miR-98-5p和DNMT3A在溃疡性结肠炎患者和动物模型中的表达及作用机制

目的:探讨微小RNA-98-5p(miR-98-5p)和DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)在溃疡性结肠炎(UC)患者和动物模型中的表达及作用机制。方法:选取2021年1月-2022年12月100例UC患者作为观察组,另选取100名健康受试者作为对照组,检测血清miR-98-5p、DNMT3A mRNA及蛋白表达水平,分析miR-98-5p、DNMT3A mRNA与UC临床病理特征的关系;建立UC大鼠模型,大鼠随机分为空白组(CT组)、模型组(UC组)、miR-98-5p对照组(antagomiR-NC组)、miR-98-5p抑制剂组(antagomiR-98-5p组),ELISA测定血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量,HE染色观察结肠组织病理学变化,RT-qPCR和Western blot检测结肠组织miR-98-5p、DNMT3A mRNA及蛋白表达水平。结果:与对照组比较,UC患者血清miR-98-5p表达升高,DNMT3A mRNA、DNMT3A表达降低,miR-98-5p、DNMT3A mRNA表达水平与病情分级、黏液脓血便、黏膜急慢性炎症和不典型增生有关(P<0.05);与CT组比较,UC组大鼠结肠黏膜层缺损,可见大量炎性细胞浸润,血清IL-1β、IL-6、TNF-α以及结肠组织miR-98-5p表达升高,DNMT3A mRNA及蛋白表达降低(P<0.05);与antagomiR-NC组比较,antagomiR-98-5p组黏膜层缺损部分和炎症细胞浸润减少,结构较清晰,血清IL-1β、IL-6、TNF-α以及结肠组织miR-98-5p表达降低,DNMT3A mRNA及蛋白表达升高(P<0.05);miR-98-5p与DNMT3A有靶向结合位点。结论:UC患者血清和模型大鼠结肠组织miR-98-5p表达升高,DNMT3A表达降低,下调miR-98-5p的表达能够促进DNMT3A的表达,改善UC症状。

miR-98-5p通过STAT3通路抑制骨关节炎的发展

目的探究miR-98-5p调节骨关节炎(OA)发生发展的可能分子机制。方法①将大鼠软骨细胞分为对照组、白介素-1β(IL-1β)组、NC-agomir组、miR-98-5p-agomir组、NC-antagomir组和miR-98-5p-antagomir组。对照组软骨细胞采用正常DMEM培养基培养,其他组细胞在转染成功后在添加10 ng/mL IL-1β的培养基中继续培养24 h。采用MTT法和TUNEL法检测软骨细胞增殖和凋亡水平。采用RT-qPCR检测miR-98-5p、STAT3、Bcl-2、Bax、IL-1β、IL-6和TNF-α的转录水平。采用ELISA法检测细胞培养上清液中的IL-1β、IL-6和TNF-α蛋白水平。采用Western blot检测Bcl-2、Bax、p-STAT3和STAT3蛋白水平。②采用前交叉韧带切断加内侧半月板部分切除法建立OA大鼠模型。OA模型大鼠分为OA组、NC-agomir+OA组和miR-98-5p-agomir+OA组,每组12只;另取12只健康大鼠为假手术组。假手术组和OA组大鼠关节腔内注射40μL生理盐水,NC-agomir+OA组和miR-98-5p-agomir+OA组大鼠关节腔内分别注射40μL的NC-agomir和miR-98-5p-agomir(1 nmol/μL),每周注射1次,共4周。采用番红O-固绿染色观察大鼠软骨退变。采用TUNEL染色观察软骨细胞凋亡。采用RT-qPCR检测软骨组织中miR-98-5p、STAT3、Bcl-2、Bax、IL-1β、IL-6和TNF-α的转录水平。采用ELISA法检测软骨组织中IL-1β、IL-6和TNF-α蛋白水平。采用Western blot检测软骨组织中Bcl-2、Bax、p-STAT3和STAT3蛋白水平。结果①与IL-1β组和NC-agomir组比较,miR-98-5p-agomir组相对细胞活力、Bcl-2 mRNA和蛋白水平和miR-98-5p水平均升高(P<0.05),TUNEL阳性率,Bax、IL-1β、IL-6、TNF-α、STAT3 mRNA和蛋白水平,p-STAT3蛋白水平和p-STAT3/STAT3比值均降低(P<0.05)。与IL-1β组和NC-antagomir组比较,miR-98-5p-antagomir组相对细胞活力、Bcl-2 mRNA和蛋白水平、以及miR-98-5p水平均降低(P<0.05),TUNEL阳性率,Bax、IL-1β、IL-6、TNF-α、STAT3的mRNA和蛋白水平,p-STAT3蛋白水平以及p-STAT3/STAT3比值均升高(P<0.05)。②与OA组和NC-agomir+OA组比较,miR-98-5p-agomir+OA组OARSI评分,TUNEL阳性率,Bax、IL-1β、IL-6、TNF-α、STAT3 mRNA和蛋白水平,p-STAT3蛋白水平和p-STAT3/STAT3比值均降低(P<0.05),Bcl-2 mRNA和蛋白水平、以及miR-98-5p水平均升高(P<0.05)。结论上调miR-98-5p可能通过降低STAT3的活性抑制OA中的炎症反应和细胞凋亡,从而抑制OA的发展。

SVA及α-干扰素对PK-15细胞microRNA转录谱影响的分析

为探究猪塞内卡病毒A(SVA)感染、干扰素(IFN-α)处理对猪肾细胞(PK-15)微RNA(microRNA,miRNA)转录谱的影响,本研究分别构建SVA感染的PK-15(PK-15/SVA)、IFN-α处理的PK-15(PK-15/IFN),SVA感染再经IFN-α处理的PK-15细胞(PK-15/SVA/IFN),通过荧光定量PCR(qPCR)分别检测各组细胞中SVA VP1及IFN-αmRNA的转录水平。结果显示,与PK-15相比,PK-15/SVA及PK-15/SVA/IFN细胞中SVA VP1基因的转录水平极显著升高(P<0.001),PK-15/SVA/IFN中IFN-α的转录水平显著或极显著升高(P<0.05、P<0.01)。通过转录组测序技术(RNA-Seq)分析各组细胞miRNA的转录谱,采用Spss软件统计各组细胞中转录差异miRNA的数量;利用基于负二项分布的DESeq2筛选各组细胞中转录显著差异miRNA;采用miRanda、PITA和RNAhybrid 3个软件预测各组细胞转录显著差异miRNA的靶基因,通过miREvo和mirdeep2软件预测各组细胞中的新miRNA并通过与猪miRNA序列比对得到已知miRNA;分别采用GO功能和KEGG富集分析各组细胞转录显著差异miRNA涉及的生物学功能及信号通路。统计分析结果显示,与PK-15相比,PK-15/IFN、PK-15/SVA和PK-15/SVA/IFN中均存在转录显著差异miRNA,且在SVA感染后细胞中转录的miRNA数量增多,IFN-α刺激则会减少细胞中转录的miRNA数量,SVA感染后再经IFN-α处理则转录的miRNA数量又有所降低。筛选结果显示,与PK-15相比,PK-15/SVA中有167种转录显著差异miRNA,其中94种转录显著上调,73种转录显著下调;与PK-15相比,PK-15/IFN中有98种转录显著差异miRNA,其中55种转录显著上调,43种转录显著下调。预测结果显示,共有290种转录显著差异miRNA有对应靶基因,且共预测到292种新miRNA和345种已知miRNA。选取6种转录显著差异miRNA采用Graphpad prism6.0进行miRNA-mRNA的互作网络展示。结果显示,miR-221-5p的靶基因显著多于其他miRNA,且其靶基因主要与癌症、病毒感染的治疗及宿主的免疫反应有关。GO功能结果显示,在经IFN-α处理或SVA感染后,转录显著差异miRNA的靶基因主要富集于细胞组分和生物过程等功能。KEGG分析结果显示,与PK-15相比,PK-15/SVA和PK-15/IFN细胞中转录显著差异miRNA的靶基因主要富集于Rap1和NF-κB信号通路;与PK-15/IFN相比,PK-15/SVA/IFN细胞中转录显著差异miRNA的靶基因主要富集于PI3K-Akt、NF-κB和肿瘤坏死因子(TNF)等抗病毒免疫相关信号通路;与PK-15/SVA相比,PK-15/SVA/IFN细胞中转录显著差异miRNA的靶基因主要富集于Rap1、NF-κB、TNF和MAPK信号通路。16种转录显著差异miRNA的qPCR结果与RNA-Seq结果一致。综上所述,本研究首次证实IFN-α处理、SVA感染均显著影响PK-15细胞miRNA转录谱,前者促进miRNA的转录,后者则抑制miRNA的转录。其中转录显著差异miRNA的靶基因与宿主抗病毒及肿瘤免疫均等信号通路密切相关,该结果为阐明SVA感染宿主细胞后非编码RNA转录谱变化的分子机制研究奠定基础。

非小细胞肺癌患者瘤组织LncRNA LINC00460、miR-98-5p的水平及临床意义

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者瘤组织长链非编码RNA(lncRNA)LINC00460、microRNA-98-5p(miR-98-5p)表达及临床意义。方法 选取2017年1月至2018年12月57例NSCLC患者病例资料进行回顾性研究。术中留取癌组织和癌旁组织(距肿瘤边缘2 cm),比较癌组织及癌旁组织miR-98-5p、LncRNA LINC00460表达,分析癌组织miR-98-5p、LncRNA LINC00460表达与病理特征的相关性,比较不同预后患者miR-98-5p、LncRNA LINC00460表达,logistic回归分析癌组织miR-98-5p、LncRNA LINC00460表达与预后的关系,并比较癌组织miR-98-5p、LncRNA LINC00460表达不同患者总生存率,列线图分析miR-98-5p、LncRNA LINC00460对患者预后评估价值。结果 癌组织miR-98-5p表达低于癌旁组织,LncRNA LINC00460表达高于癌旁组织(P<0.05)。NSCLC患者癌组织miR-98-5p、LncRNA LINC00460表达与临床分期、分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05)。死亡者癌组织miR-98-5p表达较存活者低,LncRNA LINC00460表达较存活者高(P<0.05)。Logistic回归分析显示,癌组织LncRNA LINC00460高表达、miR-98-5p低表达是NSCLC患者预后死亡的独立危险因素(P<0.05)。癌组织LncRNA LINC00460高表达者总生存率低于低表达者,miR-98-5p高表达者总生存率高于低表达者(P<0.05)。构建miR-98-5p、LncRNA LINC00460评估患者预后的列线图预测模型与实际病死风险吻合度较高(χ^(2)=6.902,P=0.547)。结论 NSCLC患者癌组织LncRNA LINC00460异常高表达,miR-98-5p异常低表达,且异常表达程度与患者预后关系密切,可为临床评估预后提供参考。

阿尔茨海默病患者血清miR-98-5p和miR-142-5p水平变化及其意义

目的探讨阿尔茨海默病(AD)患者血清微小RNA-98-5p(miR-98-5p)、微小RNA-142-5p(miR-142-5p)水平变化及其临床意义。方法选择AD患者103例(观察组)、体检健康的志愿者50例(对照组),采集两组清晨空腹外周静脉血,离心留取血清,采用RT-qPCR法检测血清miR-98-5p、miR-142-5p,采用ELISA法检测血清Aβ1-40、Aβ1-42,同期采用简易精神状态检查量表(MMSE)评分评估认知功能。采用Pearson/Spearman相关分析法分析AD患者血清miR-98-5p、miR-142-5p水平与血清Aβ1-40、Aβ1-42水平和MMSE评分的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-98-5p、miR-142-5p水平对AD的诊断价值。结果观察组血清miR-98-5p、miR-142-5p水平均显著高于对照组(t/Z分别为7.557、5.827,P均<0.01)。观察组血清Aβ1-40水平显著高于对照组(Z=7.519,P<0.01),血清Aβ1-42水平和MMSE评分均显著低于对照组(t/Z分别为5.218、9.616,P均<0.01)。Pearson/Spearman相关分析显示,AD患者血清miR-98-5p、miR-142-5p水平与血清Aβ1-40水平均呈正相关关系(r分别为0.594、0.562,P均<0.05),与血清Aβ1-42水平均呈负相关关系(r分别为-0.517、-0.574,P均<0.05),与MMSE评分亦呈负相关关系(r分别为-0.618、-0.624,P均<0.05)。ROC曲线分析显示,血清miR-98-5p、miR-142-5p水平单独和联合诊断AD的曲线下面积分别为0.782、0.791、0.887,血清miR-98-5p、miR-142-5p水平联合诊断AD的曲线下面积高于血清miR-98-5p、miR-142-5p水平单独(Z分别为3.409、3.661,P均<0.05)。结论AD患者血清miR-98-5p、miR-142-5p水平显著升高,其水平升高与Aβ沉积和认知功能降低密切相关;miR-98-5p、miR-142-5p有可能成为诊断AD的血清生物标志物。

MicroRNA-98通过下调EZH2表达抑制结直肠癌细胞的活力与侵袭能力

目的:探讨微小RNA-98(mi R-98)与Zeste基因增强子同源物2(EZH2)之间的靶向关系,及其对结直肠癌细胞活力和侵袭能力的影响。方法:Target Scan软件预测EZH2和mi R-98之间的靶向结合,双萤光素酶报告基因实验验证mi R-98与EZH2之间的靶向关系。用mi R-98 mimic和mi R-98 inhibitor分别转染人结直肠癌SW480细胞和SW620细胞,Western blot检测EZH2的蛋白表达; MMT法检测细胞活力; Transwell法检测细胞的侵袭能力。转染EZH2过表达质粒检测其对细胞活力和侵袭的影响。结果:mi R-98能够靶向调节EZH2并负向调节SW480细胞和SW620细胞中EZH2的蛋白表达。在SW480细胞和SW620细胞中,过表达mi R-98显著下调细胞活力和侵袭能力,而抑制mi R-98表达显著促进细胞生长和侵袭。过表达EZH2也可促进SW480细胞和SW620细胞的生长和侵袭。结论:mi R-98通过下调EZH2表达抑制SW480细胞和SW620细胞的活力和侵袭。本研究为结直肠癌的治疗提供了新的靶点和方向。

非小细胞肺癌组织长链非编码RNA LINC00265、microRNA-98-5p的表达及其临床意义

目的探究长链非编码RNA(lncRNA)LINC00265、microRNA-98-5p(miR-98-5p)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其临床意义。方法选取2016年1月—2017年12月乐山市人民医院收治的97例NSCLC患者的癌组织、相应癌旁正常组织进行研究。利用实时荧光定量聚合酶链反应测定癌组织及癌旁正常组织lncRNA LINC00265、miR-98-5p相对表达量;分析癌组织lncRNA LINC00265、miR-98-5p与患者临床病理特征及预后的关系;采用Pearson法分析癌组织lncRNA LINC00265与miR-98-5p的相关性;Cox回归分析影响NSCLC患者预后的因素。结果NSCLC患者癌组织lncRNA LINC00265相对表达量高于癌旁正常组织(P<0.05),miR-98-5p相对表达量低于癌旁正常组织(P<0.05)。有无淋巴结转移、不同临床分期和分化程度患者癌组织的lncRNA LINC00265和miR-98-5p表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。癌组织lncRNA LINC00265与miR-98-5p呈负相关(r=-0.580,P=0.000)。lncRNA LINC00265高表达、miR-98-5p低表达NSCLC患者36个月总生存时间、无病生存期较短(P<0.05)。淋巴结转移[HR^(^)=2.152(95%CI:1.431,3.235)]、临床分期[HR^(^)=2.136(95%CI:1.429,3.192)]、lncRNA LINC00265[HR^(^)=2.533(95%CI:1.552,4.135)]是NSCLC患者死亡的独立危险因素(P<0.05),而miR-98-5p[HR^(^)=0.618(95%CI:0.506,0.755)]是NSCLC患者死亡的独立保护因素(P<0.05)。结论NSCLC患者癌组织lncRNA LINC00265相对表达量升高,miR-98-5p相对表达量降低,其可能共同调控NSCLC的发生、发展,检测其相对表达量有利于判定NSCLC患者的预后。

MicroRNA-98对A549/DDP细胞顺铂耐药性的影响

目的探讨MicroRNA-98(miR-98)对肺腺癌耐顺铂细胞系A549/DDP顺铂耐药性的影响。方法利用MicroRNA(miRNA)芯片及生物信息学筛选出miR-98。将miR-98质粒载体瞬时转染至A549/DDP细胞;MTT检测细胞药物敏感性的改变。结果在A549/DDP细胞中miR-98表达水平下调。转染miR-98的A549/DDP细胞生长抑制率明显增高。结论miR-98能够增加肺腺癌耐药细胞株A549/DDP对顺铂的药物敏感性。

miR-98-5p靶向HIF1AN对LPS诱导的支气管上皮细胞凋亡及炎症因子的影响

目的:探讨miR-98-5p对LPS诱导的支气管上皮细胞凋亡、炎症因子的影响及对HIF1AN的调控作用。方法:体外培养人支气管上皮细胞16-HBE,LPS刺激细胞建立细胞损伤模型(LPS组),分别将miR-NC、miR-98-5p mimics、si-NC、si-HIF1AN、pcDNA-NC、pcDNA-HIF1AN、miR-98-5p mimics与pcDNA-NC、miR-98-5p mimics与pcDNA-HIF1AN转染至16-HBE细胞后进行LPS处理(miR-NC+LPS组、miR-98-5p+LPS组、si-NC+LPS组、si-HIF1AN+LPS组、pcDNA-NC+LPS组、pcDNAHIF1AN+LPS组、miR-98-5p+pcDNA-NC+LPS组、miR-98-5p+pcDNA-HIF1AN+LPS组);qRT-PCR与Western blot分别检测miR-98-5p、HIF1AN表达;流式细胞术检测细胞凋亡率;ELISA检测TNF-α、IL-6、IL-1α水平;双荧光素酶报告实验检测miR-98-5p、HIF1AN的靶向关系;Western blot检测Cleaved-caspase-3、HIF1AN、BNIP3蛋白表达。结果:转染miR-98-5p mimics或si-HIF1AN可明显降低LPS诱导的16-HBE细胞凋亡率、Cleaved-caspase-3蛋白表达及TNF-α、IL-6、IL-1α水平(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实miR-98-5p可靶向结合HIF1AN;共转染miR-98-5p mimics与pcDNA-HIF1AN可明显提高细胞凋亡率、Cleaved-caspase-3、BNIP3蛋白表达及TNF-α、IL-6、IL-1α水平(P<0.05)。结论:miR-98-5p过表达可通过下调HIF1AN表达抑制LPS诱导的支气管上皮细胞凋亡及炎症因子释放进而减轻细胞损伤。

基于miRNA155-5p介导的MAPK/NF-κB通路探讨尿石素A的抗炎机制

目的以脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激RAW264.7炎症细胞模型为研究对象,基于miRNA155-5p调控的TLR4/MAPK/NF-κB通路探讨尿石素A(urolithin A,Uro A)的抗炎机制。方法通过转染过表达miR-155-5p-mimics及miR-NC至LPS诱导的RAW264.7细胞中,RT-qPCR法检测各组细胞miR-15-5p、p38 MAPK、JNK和ERK的mRNA表达。MTT法检测Uro A对细胞活力的影响;Griess法检测细胞上清液NO的含量;ELISA法检测细胞上清液PGE 2、IL-6、IL-1β和TNF-α的表达水平;Western blot法检测iNOS、COX-2、TLR4以及MAPK/NF-κB通路相关蛋白的表达水平。结果与miR-NC组比较,miRNA155-5p过表达组p38 MAPK、JNK和ERK mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。与模型组比较,Uro A能明显抑制LPS诱导的miRNA155-5p、NO、PGE 2和TNF-α、IL-1β、IL-6(P<0.01),降低iNOS、COX-2蛋白表达水平(P<0.01),且呈浓度依赖性;此外,Uro A明显抑制TLR4蛋白的表达水平以及p38 MAPK、JNK、NF-κB p65、IκBα蛋白的磷酸化水平(P<0.05),并呈浓度依赖性;但对ERK1/2蛋白磷酸化没有显示出明显的抑制作用。结论Uro A能够明显抑制LPS诱导的炎症反应,机制与miRNA155-5p介导的TLR4/MAPK/NF-κB信号通路有关。

microRNAs在帕金森病发病机制中作用研究进展

帕金森病(Parkinson’s disease)发病机制复杂,多种机制已被证明与帕金森病的病理生理机制有关,如α-突触核蛋白的积累、氧化应激、异常细胞凋亡和神经炎症等。微小RNA(MicroRNA,miRNA)是一种由内源性基因编码的非编码单链RNA分子。在过去的十年里,许多研究报道了miRNA在一系列重要的生命过程中发挥作用。此外,大量的动物模型实验和临床研究也发现了miRNA在帕金森病中的失调,并证明miRNA通过不同的途径在帕金森病的发生发展中发挥了重要作用。本文综述了一些参与帕金森病发生发展的重要miRNAs。

ZEB1-3′UTR促进乳腺癌细胞MCF-7迁移机制的研究

对与ZEB1-3′UTR结合的microR-NAs进行生物信息学分析。结果表明,与对照组相比,过表达ZEB1-3′UTR后MCF-7细胞迁移能力显著增强。采用RNA22、Microrna、Targetscan数据库筛选出与ZEB1-3′UTR结合的microRNAs,三个数据库公共预测的microRNAs有9个,分别是miR-429、miR-200b、miR-200c、miR-494、miR-873、miR-381、miR-300、miR-431和miR-342,其中miR-429、miR-200b、miR-200c、miR-342在乳腺癌中高表达。以上研究表明,ZEB1-3′UTR能够竞争性结合肿瘤细胞表达的内源性microRNAs,促进了MCF-7细胞迁移。

circBPTF靶向miR-98-5p对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响及其机制

目的 探讨circ溴结构域PDH指转录因子(BPTF)对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响及分子机制。方法 肾小管上皮细胞分为对照组(Con)、高糖组(HG)、HG+si-NC组、HG+si-circBPTF组、HG+miR-NC组、HG+miR-98-5p组、HG+si-circBPTF+anti-miR-NC组、HG+si-circBPTF+anti-miR-98-5p组。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circBPTF和miR-98-5p表达;流式细胞术检测细胞凋亡;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6水平;双荧光素酶报告实验证实circBPTF和miR-98-5p的靶向关系。结果 与Con组比较,HG组肾小管上皮细胞中circBPTF表达、IL-6、TNF-α水平和凋亡率升高,miR-98-5p表达水平降低(P<0.05)。与HG+si-NC组或HG+miR-NC组比较,HG+si-circBPTF组和HG+miR-98-5p组IL-6,TNF-α水平降低,细胞凋亡率降低(P<0.05)。circBPTF靶向调控miR-98-5p;下调miR-98-5p逆转了抑制circBPTF表达对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的保护作用。结论 抑制circBPTF表达通过靶向上调miR-98-5p对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤起保护作用。

桂辐98-296补种延长宿根蔗年限模式农艺性状及经济效益分析

利用桂辐98-296(GF296)甘蔗种茎直接补种桂糖44号的第3年宿根蔗,探究延长宿根2年的可行性,为进一步推广甘蔗种茎直接补种延长宿根年限新技术提供依据。选取完成砍收的桂糖44号(GT44)第2年宿根蔗地块作为试验地,利用桂辐98-296种茎对其缺株断垄蔗畦进行直接补种,调查种茎直接补种延长1年宿根年限(即GT44宿根蔗第3年)的混合群体1 (简称“混1”)[GF296种茎直接补种的新植+GT44延长第1年宿根(简称“宿根1”)]和补种延长2年宿根年限(即GT44宿根蔗第3年)的混合群体2 (简称“混2”)[GF296种茎直接补种后第1年宿根蔗+GT44延长第2年宿根蔗(简称“宿根2”)],以及其对应年份的不补种群体为对照CK1、CK2,调查上述群体的农艺性状指标和经济效益。实验结果表明,补种后第1年混1群体中,GF296出苗率86.25%、成茎率81.43%,达到了生产上的正常水平;GT44宿根1发株率与CK1相当;混1群体的蔗茎产量为87.79 t/hm^(2),比CK1增产22.52 t/hm^(2),增幅达34.50%,差异达极显著水平;混1群体比CK1增收7114.10元/hm^(2),制糖企业增收15950.00元/hm^(2)。混2群体中,GF296宿根蔗的发株率高达226.56%,而GT44宿根蔗2与CK2的发株率分别为68.91%、65.51%,两者也基本处于同一水平;混2群体的蔗茎产量为91.85 t/hm^(2),比CK2增产50.29t/hm^(2),增幅达121.01%,差异亦达极显著水平;混2与CK2经济效益比较,蔗农纯增收20116.00元/hm^(2),制糖企业增效39614.00元/hm^(2)。GF296种茎直接补种GT44宿根蔗,从农艺性状的表现是可行的,能有效延长了2年宿根年限,从经济效益而言是划算的,适宜大面积推广。