微小RNA-451在小细胞性贫血及慢性感染贫血儿童血清中的表达及临床意义

目的 分析微小RNA-451(miR-451)在小细胞性贫血及慢性感染贫血儿童血清中的表达情况,探讨miR-451与红细胞相关参数的相关性及其对儿童贫血的诊断价值。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)分别检测小细胞性贫血组(n=80)、慢性感染贫血组(n=80)、健康对照组(n=80)儿童血清miR-451表达水平;采用Pearson相关分析法探讨血清miR-451与红细胞相关参数[红细胞分布宽度(RDW)、红细胞(RBC)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、血红蛋白(Hb)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞体积(MCV)]的相关性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析miR-451对小细胞性贫血、慢性感染贫血、贫血严重程度的诊断价值;采用多因素Logistic回归分析探讨儿童发生小细胞性贫血、慢性感染贫血的影响因素。结果 小细胞性贫血组、慢性感染贫血组儿童血清miR-451表达水平低于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);miR-451与RDW呈负相关(r=-0.388,P<0.05),与Hb、RBC、MCHC、MCH、MCV分别呈正相关(r=0.402、0.393、0.391、0.360、0.323,P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-451诊断小细胞性贫血、慢性感染贫血的曲线下面积分别为0.718、0.735,诊断价值高于红细胞相关参数RDW、Hb、RBC、MCHC、MCH、MCV,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,体质量指数、RDW、Hb、RBC、MCHC、MCH、MCV、miR-451均为儿童发生小细胞性贫血、慢性感染贫血的影响因素(P<0.05)。随着儿童贫血程度的加重,血清miR-451表达水平逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,血清miR-451水平对儿童贫血严重程度具有较高的诊断价值。结论 miR-451在小细胞性贫血、慢性感染贫血儿童血清中表达降低,且其表达水平与红细胞相关参数水平存在相关性,血清miR-451对小细胞性贫血、慢性感染贫血和贫血严重程度均具有较高的诊断价值。

微小核糖核酸-451a在人参养荣汤治疗鼻咽癌放射性黏膜损伤中的机制研究

目的:通过检测微小核糖核酸-451a(miR-451a)和富含半胱氨酸的分泌性酸性蛋白(SPARC)mRNA的表达,推断人参养荣汤治疗鼻咽癌(NPC)放射性黏膜损伤的疗效及作用机制。方法:选择2022年3月—2023年5月收治的鼻咽癌放射性口腔黏膜损伤患者30例作为观察组,选择同期健康者30例作为对照组。采用辨证论治拟人参养荣汤加减治疗,比较观察组治疗前后患者中医症候积分量表和口干程度、口咽疼痛程度、黏膜损伤程度。检测治疗前后患者血清miR-451a和SPARC mRNA表达水平。结果:人参养荣汤可以有效降低患者主症和次症严重程度、Ⅲ级和Ⅳ级口腔黏膜损伤程度、口咽疼痛程度以及口干程度,使患者血清中miR-451a表达下降,促进SPARC mRNA蛋白翻译增强(P<0.05)。治疗前后,miR-451a与中医症候积分均呈正相关(P<0.05)。结论:人参养荣汤对鼻咽癌放射性黏膜损伤具有一定的临床疗效,可降低miR-451a表达水平,升高SPARC mRNA表达水平;miR-451a抑制了SPARC mRNA的翻译,可为将来的中西医结合治疗提供理论依据。

lncRNA CRNDE通过调控miR-451对乳头状甲状腺癌细胞恶性行为的影响

目的探讨长链非编码RNA结直肠肿瘤差异表达基因(lncRNA CRNDE)对乳头状甲状腺癌(PTC)恶性进展中的生物学功能及其潜在调节机制。方法收集2019年7月至2021年1月在江苏大学附属人民医院行甲状腺切除手术的30例PTC患者的癌和癌旁组织标本,另外选择人甲状腺癌细胞系(TPC-1和BCPAP)和人甲状腺正常细胞(Nthy-ori 3-1)作为靶细胞。实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测PTC癌和癌旁组织及细胞系中lncRNA CRNDE和微小RNA(miR)-451的表达。将TPC-1和BCPAP细胞随机分为对照(Ctrl)组,lncRNA CRNDE过表达(lncRNA CRNDE-OE)组和lncRNA CRNDE敲除(lncRNA CRNDE-siRNA)组。CCK-8法检测细胞增殖活性;Transwell法检测细胞侵袭和迁移;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测N-钙黏蛋白(N-cadherin),波形蛋白(Vimentin)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白表达;荧光素酶报告实验分析lncRNA CRNDE与miR-451基因的靶向关系。结果与癌旁组织相比,癌组织中lncRNA CRNDE表达增多,miR-451表达降低(P<0.001);与Nthy-ori 3-1细胞相比,TPC-1和BCPCP细胞中lncRNA CRNDE表达上调,miR-451表达下调(P<0.001)。与Ctrl组相比,lncRNA CRNDE-OE组BCPAP和TPC-1细胞存活率,侵袭率和迁移率均升高,细胞凋亡率降低,E-cadherin蛋白表达减少,N-cadherin和Vimentin蛋白表达升高,miR-451表达降低(P<0.01);而lncRNA CRNDE-siRNA组细胞存活率,侵袭率和迁移率均降低,细胞凋亡率升高,E-cadherin蛋白表达增多,N-cadherin和Vimentin蛋白表达降低(P<0.01);双荧光素酶报告实验显示,lncRNA CRNDE与miR-451具有明显的靶向关系。结论PTC癌组织中lncRNA CRNDE高表达,可能通过靶向抑制miR-451表达促进PTC细胞增殖、迁移、侵袭和上皮-间充质转化发生,并抑制细胞凋亡。

microRNA在肌少-骨质疏松症中的作用机制研究进展

microRNA在肌、骨代谢疾病中的作用已成为当前研究热点。本文对microRNA在肌少-骨质疏松症中的作用机制研究进行总结。首先,本文介绍microRNA的生物发生过程和基因调控机制。其次,本文分别介绍相关microRNA亚型在骨骼肌和骨骼重建中的作用。在microRNA对骨骼肌作用机制方面,归纳了5个方面:(1)调节转录因子MyoD的活化和表达;(2)调节其他肌肉特异性转录因子的表达;(3)影响肌肉细胞的增殖和分化;(4)影响肌肉细胞表型;(5)microRNA的协同作用。并从促进成骨和抑制破骨两方面说明microRNA影响骨重塑的作用机制。还对具有肌骨共生的microRNA进行了总结归纳。最后对相关研究中存在的问题与不足进行总结和展望,对肌少-骨质疏松症的防治具有积极意义。

高血压合并焦虑病人血清微RNA-451a、胰岛素样生长因子-1受体表达水平与焦虑程度的关系

目的探讨高血压合并焦虑病人血清微RNA-451a(miR-451a)、胰岛素样生长因子-1受体(IGF1R)表达水平与焦虑程度的关系。方法选取2020年2月至2022年1月在汉中市中心医院进行治疗的高血压病人160例,根据临床诊断和汉密尔顿焦虑量表(HAMA)评估将病人分为高血压组60例、高血压合并轻度焦虑情绪组48例、高血压合并中度焦虑情绪组32例和高血压合并重度焦虑情绪组20例,收集整理所有病例的临床基础资料。采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-451a表达水平、ELISA法检测血清IGF1R表达水平;比较分析高血压病人和高血压合并焦虑情绪病人的临床病理特征;采用Pearson法分析HAMA评分与血清miR-451a、IGF1R表达水平的相关性;采用logistic回归分析高血压合并焦虑的影响因素。结果高血压组、轻度焦虑、中度焦虑和重度焦虑组病人血清miR-451a水平依次降低(0.88±0.30,0.59±0.14,0.48±0.11,0.38±0.09),IGF1R水平依次升高[(2.14±0.60)μg/L,(2.66±0.62)μg/L,(3.08±0.66)μg/L,(3.51±0.74)μg/L];血清miR-451a水平与HAMA评分呈负相关(r=−0.50,P<0.05),血清IGF1R水平与HAMA评分呈正相关(r=0.43,P<0.05);高血压合并焦虑组收缩压[(142.26±18.51)mmHg,(135.29±17.84)mmHg]、舒张压[(84.25±11.30)mmHg,(78.23±10.25)mmHg]、C-反应蛋白[(4.47±0.96)mg/L,(4.16±0.91)mg/L]、IL-6水平[(36.95±6.31)μg/L,(27.48±5.49)μg/L]显著高于高血压组,IL-10水平[(12.34±3.26)ng/L,(16.24±3.91)ng/L]显著低于高血压组(P<0.05);多因素logistic回归分析结果显示,收缩压[OR 95%CI=1.33(1.06,1.67)]、舒张压[OR 95%CI=1.20(1.00,1.45)]、IL-6[OR 95%CI=1.89(1.22,2.93)]、IL-10[OR 95%CI=0.38(0.17,2.93)]、miR-451a[OR 95%CI=0.01(0.00,0.47)]、IGF1R[OR 95%CI=7.62(1.21,48.03)]水平为高血压合并焦虑的影响因素(P<0.05)。结论高血压合并焦虑病人血清中miR-451a低表达,IGF1R高表达,且与病人焦虑程度密切相关。

血清微小RNA-184、微小RNA-451a表达对Ⅰ~ⅡA期非小细胞肺癌根治术后复发转移的预测价值

目的探讨血清微小核糖核酸(miRNA)-184、miR-451a表达对Ⅰ~ⅡA期非小细胞肺癌(NSCLC)根治术后复发转移的预测价值。方法选取2020年1月—2021年10月在本院行根治性切除术的203例Ⅰ~ⅡA期NSCLC患者为NSCLC组,随访2年根据复发转移情况分为复发转移组30例和无复发转移组173例;另选取同期87名体检健康志愿者为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测血清miR-184、miR-451a表达。采用多因素Logistic回归模型分析影响Ⅰ~ⅡA期NSCLC根治术后复发转移的因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-184、miR-451a表达对复发转移的预测价值。结果与对照组比较,NSCLC组血清miR-184、miR-451a表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。随访2年,203例Ⅰ~ⅡA期NSCLC患者术后复发转移率为14.78%(30/203)。与无复发转移组比较,复发转移组血清miR-184、miR-451a表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Ⅰ~ⅡA期NSCLC根治术后复发转移的独立危险因素为ⅡA期、低分化、术后辅助化疗,独立保护因素为miR-184升高、miR-451a升高(P<0.05)。血清miR-184、miR-451a表达联合预测Ⅰ~ⅡA期NSCLC根治术后复发转移的曲线下面积为0.868,大于血清miR-184、miR-451a表达单独预测的0.784、0.781,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Ⅰ~ⅡA期NSCLC患者血清miR-184、miR-451a呈低表达,与根治术后复发转移密切相关,血清miR-184、miR-451a联合检测对Ⅰ~ⅡA期NSCLC根治术后复发转移有较高的预测价值。

老年食管癌患者血清miR-451、miR-21表达水平及其对新辅助化疗预后的影响

目的分析血清miR-451、miR-21与老年食管癌(EC)患者新辅助化疗预后的关系。方法选取辽宁省人民医院2015年6月~2021年1月收治的117例老年EC患者进行前瞻性研究,患者均接受2个周期的TP新辅助化疗,化疗结束后随访1个月,依据实体瘤疗效评价标准评估预后,其中病灶稳定和进展者为预后不良组,病灶全部缓解和部分缓解者为预后良好组。新辅助化疗前检测血清miR-451、miR-21水平,采集患者相关基线资料,比较预后不良组和预后良好组患者的一般资料,以差异有统计学意义的指标作为自变量,以预后情况为因变量,进行多因素logistic回归分析;采用ROC曲线分析血清miR-451、miR-21对老年EC患者新辅助化疗预后的预测价值。结果117例老年EC患者新辅助化疗2个周期后43例预后不良,预后不良组TNM分期Ⅲ期比例、淋巴结转移比例及血清癌胚抗原(CEA)、鳞状上皮细胞癌抗原(SCC)、miR-451、miR-21水平高于预后良好组,差异均有统计学意义(P<0.05);logistic回归分析结果显示,TNM高分期、淋巴结转移及血清CEA、SCC、miR-451、miR-21是老年EC患者新辅助化疗预后不良的危险因素(P<0.05);绘制ROC曲线发现,血清miR-451、miR-21单独及联合检测预测老年EC患者新辅助化疗预后不良风险的AUC均>0.80,均有一定预测价值。结论老年EC患者新辅助化疗预后不良可能受miR-451、miR-21升高影响。

SVA及α-干扰素对PK-15细胞microRNA转录谱影响的分析

为探究猪塞内卡病毒A(SVA)感染、干扰素(IFN-α)处理对猪肾细胞(PK-15)微RNA(microRNA,miRNA)转录谱的影响,本研究分别构建SVA感染的PK-15(PK-15/SVA)、IFN-α处理的PK-15(PK-15/IFN),SVA感染再经IFN-α处理的PK-15细胞(PK-15/SVA/IFN),通过荧光定量PCR(qPCR)分别检测各组细胞中SVA VP1及IFN-αmRNA的转录水平。结果显示,与PK-15相比,PK-15/SVA及PK-15/SVA/IFN细胞中SVA VP1基因的转录水平极显著升高(P<0.001),PK-15/SVA/IFN中IFN-α的转录水平显著或极显著升高(P<0.05、P<0.01)。通过转录组测序技术(RNA-Seq)分析各组细胞miRNA的转录谱,采用Spss软件统计各组细胞中转录差异miRNA的数量;利用基于负二项分布的DESeq2筛选各组细胞中转录显著差异miRNA;采用miRanda、PITA和RNAhybrid 3个软件预测各组细胞转录显著差异miRNA的靶基因,通过miREvo和mirdeep2软件预测各组细胞中的新miRNA并通过与猪miRNA序列比对得到已知miRNA;分别采用GO功能和KEGG富集分析各组细胞转录显著差异miRNA涉及的生物学功能及信号通路。统计分析结果显示,与PK-15相比,PK-15/IFN、PK-15/SVA和PK-15/SVA/IFN中均存在转录显著差异miRNA,且在SVA感染后细胞中转录的miRNA数量增多,IFN-α刺激则会减少细胞中转录的miRNA数量,SVA感染后再经IFN-α处理则转录的miRNA数量又有所降低。筛选结果显示,与PK-15相比,PK-15/SVA中有167种转录显著差异miRNA,其中94种转录显著上调,73种转录显著下调;与PK-15相比,PK-15/IFN中有98种转录显著差异miRNA,其中55种转录显著上调,43种转录显著下调。预测结果显示,共有290种转录显著差异miRNA有对应靶基因,且共预测到292种新miRNA和345种已知miRNA。选取6种转录显著差异miRNA采用Graphpad prism6.0进行miRNA-mRNA的互作网络展示。结果显示,miR-221-5p的靶基因显著多于其他miRNA,且其靶基因主要与癌症、病毒感染的治疗及宿主的免疫反应有关。GO功能结果显示,在经IFN-α处理或SVA感染后,转录显著差异miRNA的靶基因主要富集于细胞组分和生物过程等功能。KEGG分析结果显示,与PK-15相比,PK-15/SVA和PK-15/IFN细胞中转录显著差异miRNA的靶基因主要富集于Rap1和NF-κB信号通路;与PK-15/IFN相比,PK-15/SVA/IFN细胞中转录显著差异miRNA的靶基因主要富集于PI3K-Akt、NF-κB和肿瘤坏死因子(TNF)等抗病毒免疫相关信号通路;与PK-15/SVA相比,PK-15/SVA/IFN细胞中转录显著差异miRNA的靶基因主要富集于Rap1、NF-κB、TNF和MAPK信号通路。16种转录显著差异miRNA的qPCR结果与RNA-Seq结果一致。综上所述,本研究首次证实IFN-α处理、SVA感染均显著影响PK-15细胞miRNA转录谱,前者促进miRNA的转录,后者则抑制miRNA的转录。其中转录显著差异miRNA的靶基因与宿主抗病毒及肿瘤免疫均等信号通路密切相关,该结果为阐明SVA感染宿主细胞后非编码RNA转录谱变化的分子机制研究奠定基础。

microRNA-451在食管癌患者血清中的表达和疗效评估中的作用

目的探讨microRNA-451(miR-451)在食管癌患者血清中的表达水平及其对早期诊断及非手术治疗疗效的判断价值。方法采用实时荧光定量PCR方法检测50例食管癌患者放疗前、后及20例健康对照者血清中miR-451的相对表达量,分析其与临床病理参数及近期疗效的关系。结果食管癌患者血清中miR-451的表达水平明显高于健康对照者(P<0.05),miR-451的ROC曲线下面积(area under the curve,AUC)值取0.911(95%CI=0.844~0.977)时,对食管癌诊断的灵敏度和特异度分别为88%和85%。miR-451的表达水平与食管癌患者的临床分期和淋巴结转移有关。食管癌患者放疗后miR-451表达水平下降(P<0.05),且miR-451的表达水平动态变化与食管癌治疗疗效一致,有效患者miR-451表达水平下降明显高于无效患者(P<0.05)。结论血清miR-451可能对食管癌的早期诊断及非手术治疗疗效的判断有一定的参考价值。

microRNA-451和辅助性T淋巴细胞17亚群在病毒性心肌炎小鼠中的变化及意义

目的通过观察microRNA-451(miR-451)及辅助性T淋巴细胞17(Th17)亚群在病毒性心肌炎小鼠中的变化,进一步探讨其在病毒性心肌炎小鼠发病过程中的作用及意义。方法实验组注射柯萨奇病毒B3病毒液0.1 mL建立Balb/c病毒性心肌炎小鼠模型,对照组注射等量磷酸盐缓冲液。在注射后第0、7、14和28天流式细胞法检测小鼠脾脏Th17亚群比例(Th17/CD4+),荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测心肌组织中miR-451的表达量。结果实验组7 d亚组小鼠脾Th17/CD4+高于0 d亚组,28 d亚组最高,与对照组相应时点亚组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。实验组7 d亚组小鼠心肌miR-451的表达量低于0 d亚组,14 d亚组小鼠心肌miR-451的表达量最低,28 d亚组心肌miR-451的表达量较14 d亚组增高。除0 d组外,实验组各亚组miR-451表达水平均较对照组各相应时点明显降低(均P<0.05)。miR-451的表达与Th17亚群比例无相关(r=-0.26,P>0.05)。结论 miR-451和Th17参与了病毒性心肌炎的发病过程。miR-451参与病毒性心肌炎小鼠的发病过程并不依赖于Th17的变化。

microRNA-144～451基因簇促进红系分化

目的 探索microRNA-144～451基因簇在红系分化过程中的功能及调控机制.方法 用real-time PCR法检测microRNA-144和microRNA-451的表达;用ChIP结合real-time PCR的方法检测GATA-1和EKLF在microRNA-144～451基因簇上游的结合及调控;使用microRNA-144和microRNA-451模拟物转染K562细胞,并用联苯胺染色和real-time PCR方法检测K562细胞向红系分化;用Western blot方法检测红系分化抑制因子GATA-2表达.结果 microRNA-144和microRNA-451在K562细胞红系分化过程中呈现表达逐渐上升趋势;转录因子GATA-I和EKLF可以结合在microRNA-144 ～ 451基因簇并激活microRNA-144或microRNA-451的表达;在K562细胞中过表达microRNA-144或microRNA-451均可促进hemin诱导的红系分化;另一方面,microRNA-144和microRNA-451可以通过抑制GATA-2的表达促进细胞向红系分化.结论 microRNA-144～ 451基因簇在红系分化过程中受到GATA-1和EKLF的激活调控,同时通过抑制GATA-2的表达促进红系发育成熟.

MicroRNA-451通过靶向RAB14抑制鼻咽癌细胞的生长、侵袭和迁移能力

目的:探讨mi R-451对鼻咽癌细胞增殖、侵袭和转移能力的影响。方法:选取正常鼻咽上皮细胞株NP69及4株鼻咽癌细胞株CNE-1、CNE-2、5-8F、6-10B,荧光定量PCR检测mi R-451的表达量。选取鼻咽癌细胞株CNE-1和CNE-2,分别转染mi R-451 mimics和阴性对照后,采用MTT法检测鼻咽癌细胞的增殖能力,划痕实验检测其侵袭能力,transwell迁移实验检测其迁移能力。通过生物信息学方法预测mi R-451的靶基因。结果:与正常鼻咽上皮细胞相比,mi R-451在鼻咽癌细胞株中的表达量明显降低。鼻咽癌细胞过表达mi R-451后,其增殖、侵袭和迁移能力均受到抑制。通过靶基因预测数据库预测RAB14为mi R-451的靶基因,并通过荧光素酶报告基因实验、RT-PCR、Western blot实验验证了这一结果。将RAB14低表达后,也在一定程度上抑制了鼻咽癌的增殖、侵袭和转移能力。结论:mi R-451通过靶向RAB14抑制了鼻咽癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力。

结直肠癌中microRNA-451部分逆转MDR1/P-gp途径介导的多药耐药

目的研究microRNA-451在结直肠癌组织与细胞中的表达及其在MDR1/P-gp途径介导的多药耐药中的作用。方法收集68例新鲜结直肠癌及癌旁组织,RT-q PCR检测其miR-451表达情况,Western blot检测P-gp蛋白是否表达,并分析其关系;RT-q PCR检测结直肠癌耐奥沙利铂细胞HCT116/L、耐阿霉素细胞Lo Vo/adr及对应亲本细胞中miR-451的表达;利用脂质体将miR-451 mimics(模拟物)、NC RNAs转染2组耐药细胞,RT-q PCR和Western blot分别检测转染后其MDR1 mRNA和P-gp的表达;MTT检测转染细胞在不同浓度奥沙利铂、阿霉素下的增殖并计算其半数抑制浓度(IC50);流式细胞术进一步比较NC转染组和mimics转染组耐药细胞在同一浓度奥沙利铂、阿霉素下凋亡率。结果相对于癌旁组织,miR-451在结直肠癌组织中低表达,其表达下调与P-gp阳性表达存在相关性(r=-0.404,P=0.002);与亲本细胞相比,miR-451在2组耐药细胞中表达明显降低(P<0.01);mimics转染组细胞MDR1 mRNA、P-gp相对表达量明显下降,IC50及凋亡率与NC组均有显著差异(P<0.05)。结论 miR-451在结直肠癌中通过MDR1/P-gp途径参与多药耐药,耐药细胞转染miR-451mimics后,可部分逆转耐药。

microRNA-451在弥漫性大B细胞淋巴瘤患者血浆中的表达及意义

目的探讨microRNA-451(miR-451)在弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large B lymphoma,DLBCL)患者血浆中的表达水平及其临床意义。方法利用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RTPCR)方法检测27例DLBCL患者和27例健康体检者血浆中miR-451的表达水平,并统计分析DLBCL患者血浆中miR-451表达水平与临床病理参数之间的关系。结果 miR-451在DLBCL患者血浆中表达水平明显低于正常对照组[(0.41±0.15)vs.(0.64±0.21)],二者差异具有统计学意义(P<0.01);DLBCL患者血浆中miR-451表达水平在不同性别、年龄、血清LDH水平及原发部位之间差异无统计学意义(P>0.05),而与Ann Arbor分期及IPI评分明显相关(P<0.05)。结论 DLBCL患者血浆中miR-451表达水平降低,可能参与了DLBCL的病理过程。

MicroRNA-451在红系分化中的表达水平及与血液疾病的相关性研究

目的:探讨microRNA-451(miR-451)在红系分化过程及临床血液疾病中的表达水平以及与该疾病的相关性。方法:通过细胞培养、流式细胞检测、磁珠分选和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法分析miR-451在小鼠造血干细胞(胚胎肝来源)向红系定向分化过程中的表达情况;通过细胞培养和qRT-PCR法分析miR-451在小鼠红系白血病细胞(MEL)向红系定向分化过程中的表达情况;采用qRT-PCR法检测小鼠外周血中miR-451表达水平,并通过mRNA芯片分析小鼠14.5 d的胚胎肝细胞中miR-451的表达水平;通过流式细胞仪分选野生型(WT)小鼠和β地中海贫血(β-thal)小鼠骨髓有核红细胞,并采用qRT-PCR法检测两种小鼠骨髓有核红细胞中miR-451和红系相关基因的表达水平;采用qRT-PCR法检测临床血液疾病患者外周血中miR-451的表达水平。结果:在小鼠造血干细胞(胚胎肝来源)和MEL细胞向红系定向分化过程中,miR-451的表达水平均逐步升高;与WT小鼠相比,β-thal小鼠外周血、14.5 d胚胎肝细胞以及骨髓有核红细胞中miR-451表达水平均显著增高(P<0.05),且β-thal小鼠骨髓有核红细胞中多种红系分化基因水平均下降(P<0.05);与健康对照组相比,β地中海贫血患者(携带者)和缺铁性贫血患者外周血中miR-451表达水平增高(P<0.05),再生障碍性贫血患者和骨髓增生异常综合征患者外周血中miR-451表达水平降低(P<0.05)。结论:在红系细胞分化过程中,miR-451表达水平逐渐升高;多种血液疾病患者外周血miR-451的表达水平与正常对照组比较有明显差异,有望成为临床血液疾病的辅助诊断指标。

CYFRA21-1、CyclinE、miRNA-451在膀胱癌中的表达及意义

目的探讨细胞角蛋白19抗原21-1(CYFRA21-1)、细胞周期蛋白E(CyclinE)、微小RNA-451(miRNA-451)在膀胱癌中的表达及意义。方法选取郑州大学附属郑州中心医院2021年1月至2023年1月收治的60例膀胱癌患者作为膀胱癌组,选取同期60例泌尿系良性疾病患者作为良性疾病组,60例健康体检者作为对照组。比较三组研究对象CYFRA21-1、CyclinE、miRNA-451水平,比较不同临床特征膀胱癌患者CYFRA21-1、CyclinE、miRNA-451水平,ROC曲线分析CYFRA21-1、CyclinE、miRNA-451单独及联合检测诊断膀胱癌的价值。结果膀胱癌组CYFRA21-1、CyclinE水平高于良性疾病组和对照组,良性疾病组高于对照组;膀胱癌组miRNA-451低于良性疾病组和对照组,良性疾病组低于对照组;不同肿瘤分期膀胱癌患者CYFRA21-1、CyclinE、miRNA-451水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。CYFRA21-1、CyclinE、miRNA-451联合检测诊断膀胱癌的AUC值高于单项检测,差异有统计学意义(ZCYFRA21-1~联合检测=3.400,ZCyclinE~联合检测=3.581,ZmiRNA-451~联合检测=3.279,P<0.05)。结论膀胱癌患者中CYFRA21-1、CyclinE呈高表达,miRNA-451呈低表达,其表达与肿瘤分期有关,CYFRA21-1、CyclinE、miRNA-451联合检测有助于早期诊断膀胱癌。

基于miRNA155-5p介导的MAPK/NF-κB通路探讨尿石素A的抗炎机制

目的以脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激RAW264.7炎症细胞模型为研究对象,基于miRNA155-5p调控的TLR4/MAPK/NF-κB通路探讨尿石素A(urolithin A,Uro A)的抗炎机制。方法通过转染过表达miR-155-5p-mimics及miR-NC至LPS诱导的RAW264.7细胞中,RT-qPCR法检测各组细胞miR-15-5p、p38 MAPK、JNK和ERK的mRNA表达。MTT法检测Uro A对细胞活力的影响;Griess法检测细胞上清液NO的含量;ELISA法检测细胞上清液PGE 2、IL-6、IL-1β和TNF-α的表达水平;Western blot法检测iNOS、COX-2、TLR4以及MAPK/NF-κB通路相关蛋白的表达水平。结果与miR-NC组比较,miRNA155-5p过表达组p38 MAPK、JNK和ERK mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。与模型组比较,Uro A能明显抑制LPS诱导的miRNA155-5p、NO、PGE 2和TNF-α、IL-1β、IL-6(P<0.01),降低iNOS、COX-2蛋白表达水平(P<0.01),且呈浓度依赖性;此外,Uro A明显抑制TLR4蛋白的表达水平以及p38 MAPK、JNK、NF-κB p65、IκBα蛋白的磷酸化水平(P<0.05),并呈浓度依赖性;但对ERK1/2蛋白磷酸化没有显示出明显的抑制作用。结论Uro A能够明显抑制LPS诱导的炎症反应,机制与miRNA155-5p介导的TLR4/MAPK/NF-κB信号通路有关。

microRNA-451在食管癌患者血清中的表达和在疗效评估中的作用

食管癌是一种常见的消化道恶性肿瘤,由于临床上没有准确的早期诊断食管癌的标志物,导致许多患者被确诊为食管癌时已经处于食管癌晚期。为了探析食管癌患者血清和疗效评估中microRNA-451表达的价值,文章选择2015年5月—2017年5月食管癌患者50例,选取同期30例健康者作为对照组,检测两组血清中microRNA-451水平。结果显示,淋巴结转移、临床分期更高的食管癌患者血清microRNA-451表达更高;食管癌患者血清microRNA-451水平要高于健康者;食管癌治疗有效患者血清microRNA-451下降幅度要大于治疗无效的患者。由此得出食管癌患者血清中microRNA-451水平较健康者有明显异常,可用于食管癌的早期诊断以及治疗效果的评价。

microRNAs在帕金森病发病机制中作用研究进展

帕金森病(Parkinson’s disease)发病机制复杂,多种机制已被证明与帕金森病的病理生理机制有关,如α-突触核蛋白的积累、氧化应激、异常细胞凋亡和神经炎症等。微小RNA(MicroRNA,miRNA)是一种由内源性基因编码的非编码单链RNA分子。在过去的十年里,许多研究报道了miRNA在一系列重要的生命过程中发挥作用。此外,大量的动物模型实验和临床研究也发现了miRNA在帕金森病中的失调,并证明miRNA通过不同的途径在帕金森病的发生发展中发挥了重要作用。本文综述了一些参与帕金森病发生发展的重要miRNAs。

ZEB1-3′UTR促进乳腺癌细胞MCF-7迁移机制的研究

对与ZEB1-3′UTR结合的microR-NAs进行生物信息学分析。结果表明,与对照组相比,过表达ZEB1-3′UTR后MCF-7细胞迁移能力显著增强。采用RNA22、Microrna、Targetscan数据库筛选出与ZEB1-3′UTR结合的microRNAs,三个数据库公共预测的microRNAs有9个,分别是miR-429、miR-200b、miR-200c、miR-494、miR-873、miR-381、miR-300、miR-431和miR-342,其中miR-429、miR-200b、miR-200c、miR-342在乳腺癌中高表达。以上研究表明,ZEB1-3′UTR能够竞争性结合肿瘤细胞表达的内源性microRNAs,促进了MCF-7细胞迁移。