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Loss-of-function mutations of microRNA-142-3p promote ASH1L expression to induce immune evasion and hepatocellular carcinoma progression
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作者 Xing-Hui Yu Yan Xie +8 位作者 Jian Yu Kun-Ning Zhang Zhou-Bo Guo Di Wang Zhao-Xian Li Wei-Qi Zhang Yu-Ying Tan Li Zhang Wen-Tao Jiang 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2025年第1期126-145,共20页
BACKGROUND Hepatocellular carcinoma(HCC)has been a pervasive malignancy throughout the world with elevated mortality.Efficient therapeutic targets are beneficial to treat and predict the disease.Currently,the exact mo... BACKGROUND Hepatocellular carcinoma(HCC)has been a pervasive malignancy throughout the world with elevated mortality.Efficient therapeutic targets are beneficial to treat and predict the disease.Currently,the exact molecular mechanisms leading to the progression of HCC are still unclear.Research has shown that the microRNA-142-3p level decreases in HCC,whereas bioinformatics analysis of the cancer genome atlas database shows the ASH1L expression increased among liver tumor tissues.In this paper,we will explore the effects and mechanisms of microRNA-142-3p and ASH1L affect the prognosis of HCC patients and HCC cell bioactivity,and the association between them.AIM To investigate the effects and mechanisms of microRNA-142-3p and ASH1L on the HCC cell bioactivity and prognosis of HCC patients.METHODS In this study,we grouped HCC patients according to their immunohistochemistry results of ASH1L with pathological tissues,and retrospectively analyzed the prognosis of HCC patients.Furthermore,explored the roles and mechanisms of microRNA-142-3p and ASH1L by cellular and animal experiments,which involved the following experimental methods:Immunohistochemical staining,western blot,quantitative real-time-polymerase chain reaction,flow cytometric analysis,tumor xenografts in nude mice,etc.The statistical methods involved in this study contained t-test,one-way analysis of variance,theχ^(2)test,the Kaplan-Meier approach and the log-rank test.RESULTS In this study,we found that HCC patients with high expression of ASH1L possess a more recurrence rate as well as a decreased overall survival rate.ASH1L promotes the tumorigenicity of HCC and microRNA-142-3p exhibits reduced expression in HCC tissues and interacts with ASH1L through targeting the ASH1L 3′untranslated region.Furthermore,microRNA-142-3p promotes apoptosis and inhibits proliferation,invasion,and migration of HCC cell lines in vitro via ASH1L.For the exploration mechanism,we found ASH1L may promote an immunosuppressive microenvironment in HCC and ASH1L affects the expression of the cell junction protein zonula occludens-1,which is potentially relevant to the immune system.CONCLUSION Loss function of microRNA-142-3p induces cancer progression and immune evasion through upregulation of ASH1L in HCC.Both microRNA-142-3p and ASH1L can feature as new biomarker for HCC in the future. 展开更多
关键词 Hepatocellular carcinoma microrna-142-3p ASH1L Immune evasion Tumor immune microenvironment Apoptosis
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雷公藤内酯醇通过调控miR-142-3p/HSP70通路抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭和迁移
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作者 王进军 崔鹏来 +4 位作者 程欣 钱梦悦 曾祥隽 徐子金 王怡帆 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期240-246,共7页
目的:探究雷公藤内酯醇(TP)通过miR-142-3p/HSP70信号通路对人乳腺癌MCF-7细胞恶性生物学行为的影响。方法:常规培养MCF-7细胞,将其分为6组:对照组、TP组、miR-142-3p inhibitor组、TP+inhibitor组、miR-142-3p mimic组和TP+mimic组,用... 目的:探究雷公藤内酯醇(TP)通过miR-142-3p/HSP70信号通路对人乳腺癌MCF-7细胞恶性生物学行为的影响。方法:常规培养MCF-7细胞,将其分为6组:对照组、TP组、miR-142-3p inhibitor组、TP+inhibitor组、miR-142-3p mimic组和TP+mimic组,用转染试剂将相应的核酸或质粒转染MCF-7细胞。qPCR法、EdU细胞增殖实验、Transwell小室实验、细胞划痕实验、WB法分别检测转染后各组MCF-7细胞中miR-142-3p和HSP70 mRNA的表达,MCF-7细胞的增殖、侵袭、迁移能力和HSP70蛋白表达水平。结果:TP或miR-142-3p过表达能显著促进MCF-7细胞中miR-142-3p和HSP70的表达,敲减miR-142-3p则可明显抑制MCF-7细胞中miR-142-3p和HSP70的表达,TP可逆转由敲减miR-142-3p对MCF-7细胞中miR-142-3p和HSP70表达的影响;TP、过表达miR-142-3p均可明显抑制MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.05),敲减miR-142-3p则均可促进MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.05),TP可逆转由敲减miR-142-3p对MCF-7细胞恶性生物学行为的影响(均P<0.05)。结论:TP可通过调控miR-142-3p/HSP70信号通路,进而抑制MCF-7细胞的增殖、侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 乳腺癌 雷公藤内酯醇 MCF-70细胞 增殖 侵袭 迁移 miR-142-3p/HSp70信号通路
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miR-142-3p通过调控Hmgb1抑制雨蛙素诱导的大鼠胰腺外分泌细胞系AR42J凋亡 被引量:1
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作者 苏拾香 王语阳 +4 位作者 覃宗帅 黄桂香 徐键 岑兰英 覃月秋 《基础医学与临床》 2024年第1期23-30,共8页
目的探讨miR-142-3p调控Hmgb1对大鼠胰腺外分泌细胞系AR42J凋亡的影响。方法将AR42J细胞分为空白组(blank)、急性胰腺炎模型组(AP,100 nmol/L雨蛙素作用24 h),再分别用miR-142-3p mimics、mimics NC、miR-142-3p inhibitor和inhibitor N... 目的探讨miR-142-3p调控Hmgb1对大鼠胰腺外分泌细胞系AR42J凋亡的影响。方法将AR42J细胞分为空白组(blank)、急性胰腺炎模型组(AP,100 nmol/L雨蛙素作用24 h),再分别用miR-142-3p mimics、mimics NC、miR-142-3p inhibitor和inhibitor NC转染模型组细胞,记为miR-142-3p mimics组、mimics NC组、miR-142-3p inhibitor组和inhibitor NC组。用RT-qPCR检测细胞中miR-142-3p表达;Western blot检测HMGB1、caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达;Hoechst染色测定细胞凋亡;流式细胞测量术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告基因实验明确miR-142-3p和Hmgb1的靶向关系。结果与空白组相比,AP组中miR-142-3p表达水平显著下调(P<0.01),HMGB1、caspase-3蛋白表达量上调(P<0.05),Bax蛋白表达量显著上调(P<0.01),Bcl-2蛋白表达量显著降低(P<0.01),细胞凋亡率显著升高(P<0.01);与mimics NC组相比,miR-142-3p mimics组miR-142-3p水平显著上调(P<0.01),HMGB1、caspase-3、Bax蛋白表达量显著下调(P<0.01),Bcl-2蛋白表达量上调(P<0.05),细胞凋亡率显著降低(P<0.01);与inhibitor NC组相比,miR-142-3p inhibitor组miR-142-3p表达水平下调(P<0.05),HMGB1、caspase-3、Bax蛋白表达量显著上调(P<0.01),Bcl-2蛋白表达量降低(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.01),差异均有统计学意义。双荧光素酶报告基因实验显示Hmgb1为miR-142-3p的靶基因。结论1)miR-142-3p在模型组细胞中低表达。2)miR-142-3p可靶向抑制Hmgb1表达进而抑制AR42J细胞凋亡。 展开更多
关键词 miR-142-3p 凋亡 急性胰腺炎 高迁移率族蛋白B1
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椎间盘退变程度与髓核中miRNA-142-3p、混合谱系激酶3及白细胞介素1β的相关性 被引量:4
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作者 周树良 徐良 +2 位作者 钱学峰 曾金才 朱立帆 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第2期165-171,共7页
背景:研究表明,miRNA水平与椎间盘细胞的凋亡和增殖、细胞外基质代谢和炎症反应密切相关,而miR-142-3p在椎间盘退变中的具体作用尚不清楚。目的:探讨人腰椎间盘髓核组织中miRNA-142-3p、混合谱系激酶3、白细胞介素1β表达与椎间盘退变... 背景:研究表明,miRNA水平与椎间盘细胞的凋亡和增殖、细胞外基质代谢和炎症反应密切相关,而miR-142-3p在椎间盘退变中的具体作用尚不清楚。目的:探讨人腰椎间盘髓核组织中miRNA-142-3p、混合谱系激酶3、白细胞介素1β表达与椎间盘退变程度的相关性。方法:选择2020年1月至2022年3月在苏州市第九人民医院因腰椎间盘退行性疾病而行手术的患者82例,术前均行MRI检查,根据Videman分级标准将患者分为轻度退变组(n=36)、中度退变组(n=26)和重度退变组(n=20),获取82份髓核组织标本,检测各组髓核组织中miRNA-142-3p、混合谱系激酶3、白细胞介素1β、Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原的基因表达,以及混合谱系激酶3、白细胞介素1β、Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原的蛋白表达,采用Spearman相关系数法评估miRNA-142-3p、混合谱系激酶3、白细胞介素β表达与腰椎间盘退变程度的相关性。采用随机数字表法将30只成年SD大鼠分为假手术组(仅穿刺皮肤与肌肉后处死)、轻度退变组(穿刺Co7/8椎间盘1周后处死)与重度退变组(穿刺Co7/8椎间盘2周后处死),每组10只,检测各组髓核组织中混合谱系激酶3、白细胞介素1β的蛋白表达,以及miRNA-142-3p、混合谱系激酶3、白细胞介素1β的基因表达。结果与结论:①人髓核组织:miRNA-142-3p的表达由高到低的顺序为轻度退变组>中度退变组>重度退变组(P<0.05),混合谱系激酶3、白细胞介素1β基因与蛋白表达由低到高的顺序为:轻度退变组<中度退变组<重度退变组(P<0.05),Ⅰ型胶原基因与蛋白表达由低到高的顺序为:轻度退变组<中度退变组<重度退变组(P<0.05),Ⅱ型胶原基因与蛋白表达由高到低的顺序为:轻度退变组>中度退变组>重度退变组的趋势(P<0.05);Spearman相关分析显示,椎间盘退变程度与miRNA-142-3p表达呈负相关(P<0.05),与混合谱系激酶3、白细胞介素1β表达呈正相关(P<0.05);②大鼠髓核组织:与假手术组比较,轻度退变组髓核组织中混合谱系激酶3、白细胞介素1β基因与蛋白表达升高(P<0.05),miRNA-142-3p表达降低(P<0.05);与轻度退变组比较,重度退变组髓核组织中混合谱系激酶3、白细胞介素1β基因与蛋白表达升高(P<0.05),miRNA-142-3p表达降低(P<0.05);③结果表明,人腰椎间盘退变程度与髓核组织中miRNA-142-3p表达呈负相关,与混合谱系激酶3和白细胞介素1β表达呈正相关。 展开更多
关键词 腰椎间盘 髓核组织 miRNA-142-3p 混合谱系激酶3 白细胞介素1Β 相关性
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血清miR-142-3p、HMGB1水平与急性胰腺炎患者病情及预后的关系
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作者 邱国军 牟伟纲 高丽 《山东医药》 CAS 2024年第28期7-11,共5页
目的探讨急性胰腺炎(AP)患者血清微小核糖核酸-142-3p(miR-142-3p)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平与病情及预后的关系。方法选取AP患者253例(AP组),健康体检者100名(对照组),根据病情将AP患者分为轻症组73例、中度重症组99例、重症组81... 目的探讨急性胰腺炎(AP)患者血清微小核糖核酸-142-3p(miR-142-3p)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平与病情及预后的关系。方法选取AP患者253例(AP组),健康体检者100名(对照组),根据病情将AP患者分为轻症组73例、中度重症组99例、重症组81例,根据预后将AP患者分为死亡组25例、存活组228例。分别于AP组入院时、对照组体检时用实时荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-142-3p,用酶联免疫吸附法检测血清HMGB1;通过TargetScan数据库预测miR-142-3p与HMGB1的结合位点;Pearson相关法分析AP患者血清miR-142-3p、HMGB1表达的相关性;收集AP患者预后相关资料,多因素Logistic回归分析血清miR-142-3p、HMGB1对预后的影响;受试者工作特征曲线分析血清miR-142-3p、HMGB1水平对AP患者死亡的预测价值。结果与对照组比较,AP组血清miR-142-3p水平低,HMGB1水平高(P均<0.05)。miR-142-3p与HMGB1存在结合位点。AP患者血清miR-142-3p水平与HMGB1水平呈负相关(r=-0.732,P<0.05)。轻症组、中度重症组、重症组血清miR-142-3p水平依次降低(P均<0.05),HMGB1水平依次升高(P均<0.05)。AP患者预后的独立危险因素为重症AP、ICU停留时间长、HMGB1水平升高,独立保护因素为miR-142-3p水平升高(P均<0.05)。血清miR-142-3p联合HMGB1预测AP患者预后的曲线下面积为0.900,大于二者单独预测的曲线下面积(P均<0.05)。结论血清miR-142-3p、HMGB1水平变化与AP患者病情和预后有关,二者联合对AP患者预后的预测价值较高。 展开更多
关键词 急性胰腺炎 微小核糖核酸-142-3p 高迁移率族蛋白B1 病情 预后
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lncRNA PSMA3-AS1调节miR-142-3p/HMGA2轴对卵巢癌恶性进展的影响
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作者 萨日胡 赵得雄 孙文萍 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第8期1401-1409,共9页
目的:探讨lncRNA PSMA3-AS1通过调节miR-142-3p/HMGA2轴对卵巢癌恶性进展的影响及其机制。方法:选择2019年3月至2022年7月期间在本院确诊的53例卵巢癌患者作为研究对象,收集患者卵巢癌组织及癌旁组织。体外培养人正常卵巢细胞HOSEpiC和... 目的:探讨lncRNA PSMA3-AS1通过调节miR-142-3p/HMGA2轴对卵巢癌恶性进展的影响及其机制。方法:选择2019年3月至2022年7月期间在本院确诊的53例卵巢癌患者作为研究对象,收集患者卵巢癌组织及癌旁组织。体外培养人正常卵巢细胞HOSEpiC和卵巢癌细胞系SKOV3、OVCAR3、A2780、COV362,RT-qPCR检测卵巢癌细胞中lncRNA PSMA3-AS1表达,筛选最佳干预细胞系。双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA PSMA3-AS1、HMGA2与miR-142-3p的靶向关系;将SKOV3细胞分为si-NC组、si-PSMA3-AS1组、si-PSMA3-AS1+anti-miR-NC组、si-PSMA3-AS1+anti-miR-142-3p组、miR-NC组、miR-142-3p mimics组、miR-142-3p mimics+pcDNA组、miR-142-3p mimics+HMGA2组,检测细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭;Western blot检测Ki67、Cyclin D1、Bcl-2、cleaved caspase 3、HMGA2蛋白表达;小鼠移植瘤实验验证lncRNA PSMA3-AS1对卵巢癌肿瘤生长的影响。结果:与癌旁组织比较,卵巢癌组织中lncRNA PSMA3-AS1和HMGA2表达升高,miR-142-3p表达降低(P<0.05);lncRNA PSMA3-AS1和HMGA2在SKOV3细胞中表达水平最高,miR-142-3p在SKOV3细胞中表达水平最低;下拉实验和双荧光素酶报告显示,lncRNA PSMA3-AS1、HMGA2与miR-142-3p存在靶向关系;敲低lncRNA PSMA3-AS1或过表达miR-142-3p后,细胞OD值、细胞克隆数、划痕愈合率、细胞侵袭数及Ki67、Cyclin D1、Bcl-2、HMGA2表达显著降低,细胞凋亡率、cleaved caspase 3表达显著增加(P<0.05);抑制miR-142-3p表达或过表达HMGA2可逆转敲低lncRNA PSMA3-AS1或过表达miR-142-3p对卵巢癌细胞恶性行为的抑制作用;体内实验表明,敲低lncRNA PSMA3-AS1表达可抑制小鼠肿瘤生长。结论:lncRNA PSMA3-AS1在卵巢癌中高表达,敲低lncRNA PSMA3-AS1可调节miR-142-3p/HMGA2轴抑制卵巢癌恶性发展。 展开更多
关键词 lncRNA pSMA3-AS1 miR-142-3p/HMGA2 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭
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MiR-142-3p Regulates ILC1s by Targeting HMGB1 via the NF-κB Pathway in a Mouse Model of Early Pregnancy Loss 被引量:1
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作者 Xiang-li PANG Jie LI +2 位作者 Jing WANG Si-si YAN Jing YANG 《Current Medical Science》 SCIE CAS 2024年第1期195-211,共17页
Objective Innate lymphoid cells(ILCs)are a class of newly discovered immunocytes.Group 1 ILCs(ILC1s)are identified in the decidua of humans and mice.High mobility group box 1(HMGB1)is predicted to be one of the target... Objective Innate lymphoid cells(ILCs)are a class of newly discovered immunocytes.Group 1 ILCs(ILC1s)are identified in the decidua of humans and mice.High mobility group box 1(HMGB1)is predicted to be one of the target genes of miR-142-3p,which is closely related to pregnancy-related diseases.Furthermore,miR-142-3p and HMGB1 are involved in regulating the NF-κB signaling pathway.This study aimed to examine the regulatory effect of miR-142-3p on ILC1s and the underlying mechanism involving HMGB1 and the NF-κB signaling pathway.Methods Mouse models of normal pregnancy and abortion were constructed,and the alterations of ILC1s,miR-142-3p,ILC1 transcription factor(T-bet),and pro-inflammatory cytokines of ILC1s(TNF-α,IFN-γand IL-2)were detected in mice from different groups.The targeting regulation of HMGB1 by miR-142-3p in ILC1s,and the expression of HMGB1 in normal pregnant mice and abortive mice were investigated.In addition,the regulatory effects of miR-142-3p and HMGB1 on ILC1s were detected in vitro by CCK-8,Annexin-V/PI,ELISA,and RT-PCR,respectively.Furthermore,changes of the NF-κB signaling pathway in ILC1s were examined in the different groups.For the in vivo studies,miR-142-3p-Agomir was injected in the uterus of abortive mice to evaluate the abortion rate and alterations of ILC1s at the maternal-fetal interface,and further detect the expression of HMGB1,pro-inflammatory cytokines,and the NF-κB signaling pathway.Results The number of ILC1s was significantly increased,the level of HMGB1 was significantly upregulated,and that of miR-142-3p was considerably downregulated in the abortive mice as compared with the normal pregnant mice(all P<0.05).In addition,miR-142-3p was found to drastically inhibit the activation of the NF-κB signaling pathway(P<0.05).The number of ILC1s and the levels of pro-inflammatory cytokines were significantly downregulated and the activation of the NF-κB signaling pathway was inhibited in the miR-142-3p Agomir group(all P<0.05).Conclusion miR-142-3p can regulate ILC1s by targeting HMGB1 via the NF-κB signaling pathway,and attenuate the inflammation at the maternal-fetal interface in abortive mice. 展开更多
关键词 maternal-fetal interface group 1 innate lymphoid cells(ILCis) high mobility group box 1(HMGB1) miR-142-3p ABORTION
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血清miR-142-3p和miR-493-5p水平在原发性肝癌早期诊断及病情评估中的应用价值
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作者 王会哲 卢双动 +2 位作者 王谦 刘龙艳 汪明泉 《肝脏》 2024年第10期1205-1208,1213,共5页
目的探讨血清微小RNA(miR)-142-3p和miR-493-5p的表达水平在原发性肝癌(PHC)早期诊断及病情评估中的应用价值。方法选取2020年6月—2023年8月期间保定市第二中心医院收治的86例PHC患者(PHC组),并选取同期50例自身免疫性肝炎患者(良性组)... 目的探讨血清微小RNA(miR)-142-3p和miR-493-5p的表达水平在原发性肝癌(PHC)早期诊断及病情评估中的应用价值。方法选取2020年6月—2023年8月期间保定市第二中心医院收治的86例PHC患者(PHC组),并选取同期50例自身免疫性肝炎患者(良性组),另选取同期健康体检者86例作为对照组。实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测血清miR-142-3p和miR-493-5p表达水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-142-3p和miR-493-5p对PHC早期诊断及病情评估的价值。结果PHC组血清中miR-142-3p(0.79±0.21)、miR-493-5p表达水平(0.83±0.22)显著低于良性组[(0.89±0.11)、(0.92±0.10)]和对照组[(1.01±0.12)、(1.02±0.13)],差异有统计学意义(P<0.05);PHC患者血清中miR-142-3p、miR-493-5p水平在肿瘤直径≥3 cm显著低于<3 cm、有门静脉血管侵犯显著低于无门静脉血管侵犯、有远处转移显著低于无远处转移,差异具有统计学意义(P<0.05);Ⅲ期和Ⅳ期PHC患者血清中miR-142-3p[(0.76±0.06)、(0.67±0.05)]、miR-493-5p表达水平[(0.81±0.09)、(0.70±0.06)]显著低于Ⅰ~Ⅱ期[(0.89±0.09)、(0.93±0.11)],差异具有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析发现,血清miR-142-3p和miR-493-5p对PHC早期诊断的ROC结果显示,血清miR-142-3p和miR-493-5p联合对PHC早期诊断的AUC为0.910显著高于二者单独诊断(Z=3.184、2.739,均P<0.05)。血清miR-142-3p和miR-493-5p联合对病情评估的AUC为0.940显著高于二者单独评估(Z=1.994、2.470,均P<0.05)。结论miR-142-3p和miR-493-5p在PHC患者血清中均呈低表达,可作为诊断PHC及病情评估的血清标志物,两者联合检测能够显著提高PHC诊断及病情评估效能。 展开更多
关键词 微小RNA-142-3p 微小RNA-493-5p 原发性肝癌 诊断 病情
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朊病毒病生物标记microRNA-142-3p可视化快速检测
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作者 张腾龙 薄乐 +6 位作者 英那 郝文丽 武智勇 王雄 孟轲音 万家余 陈志宝 《黑龙江八一农垦大学学报》 2016年第1期64-67,共4页
为了更快捷、方便的检测朊病毒病,根据已有报道确定micro RNA-144-3p作为朊病毒病的生物标记,通过mi RBase数据库公布的micro RNA-142-3p的核酸序列,设计特异性标记有生物素的俘获探针和标记有FAM的检测探针,从而建立了纳米金偶联核酸... 为了更快捷、方便的检测朊病毒病,根据已有报道确定micro RNA-144-3p作为朊病毒病的生物标记,通过mi RBase数据库公布的micro RNA-142-3p的核酸序列,设计特异性标记有生物素的俘获探针和标记有FAM的检测探针,从而建立了纳米金偶联核酸试纸条的高效,快捷,可视化检测方法。结果表明:该检测方法具有良好的特异性和较高的灵敏度(0.005 nmol·L-1)。该检测试纸条的建立在朊病毒病预防,控制,诊断过程中具有一定实际意义。 展开更多
关键词 朊病毒 microrna-142-3p 生物标记 可视化 检测
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microRNA-142-3p对TET2基因的调控及其对卵巢癌细胞SKOV3增殖的影响 被引量:3
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作者 张秦 张贺峰 曹琴英 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2016年第10期721-725,共5页
目的:研究miR-142-3p慢病毒载体对TET2的调控作用及其对SKOV3细胞增殖作用的影响。方法:构建pSicoR-miR-142-3p及pMIR-Report-TET2过表达载体,包装重组慢病毒,应用实时荧光定量PCR、Western blot及双荧光素酶报告基因系统检测方法验证mi... 目的:研究miR-142-3p慢病毒载体对TET2的调控作用及其对SKOV3细胞增殖作用的影响。方法:构建pSicoR-miR-142-3p及pMIR-Report-TET2过表达载体,包装重组慢病毒,应用实时荧光定量PCR、Western blot及双荧光素酶报告基因系统检测方法验证miR-142-3p与TET2的靶向作用关系,应用MTT法检测miR-142-3p慢病毒颗粒对SKOV3细胞增殖的影响。结果:成功构建了pSicoR-miR-142-3p和pMIR-Report-TET2重组质粒,以及可携带miR-142-3p的慢病毒颗粒。miR-142-3p过表达明显抑制TET2蛋白及mRNA表达水平(P<0.05);抑制miR-142-3p表达则明显上调TET2蛋白及mRNA表达水平(P<0.05);MTT试验证实,miR-142-3p可显著抑制SKOV3细胞增殖。结论:过表达miR-142-3p可有效抑制SKOV3细胞中TET2 mRNA和蛋白水平表达,并抑制SKOV3细胞增殖。 展开更多
关键词 MiRNA-142-3p 卵巢癌 TET2 SKOV3
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Graves病患者外周血单个核细胞中microRNA-142-3p的表达水平及其意义 被引量:2
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作者 胡婷 裴晓艳 +2 位作者 于磊 徐二琴 金国玺 《医学研究杂志》 2019年第10期148-151,147,共5页
目的比较微小RNA-142-3p(microRNA-142-3p,miR-142-3p)在Graves病(Graves′disease,GD)患者和正常健康对照者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中的表达水平变化,探讨miR-142-3p在Graves病发生、发展中的可能... 目的比较微小RNA-142-3p(microRNA-142-3p,miR-142-3p)在Graves病(Graves′disease,GD)患者和正常健康对照者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中的表达水平变化,探讨miR-142-3p在Graves病发生、发展中的可能作用和机制。方法用密度梯度离心法分别提取37例Graves病患者与15例正常健康志愿者的PBMC,用RT-qPCR分别检测两组PBMC中miR-142-3p的表达水平。分析miR-142-3p水平与TT 3、TT 4和TRAb的相关性。结果miR-142-3p在GD患者PBMC中表达水平(0.378±0.199)较正常健康对照组(1.104±0.421)明显下调,差异有统计学意义(P=0.003)。miR-142-3p与TRAb、TT 4、TT 3呈负相关(r=-0.364,P=0.027;r=-0.437,P=0.007;r=-0.337,P=0.042)。同时,通过分析受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线发现:miR-142-3p对Graves病有一定的诊断价值,ROC曲线下面积(AUC)=0.917(95%CI:0.806~1.028)。结论miR-142-3p表达下调与Graves病相关,在疾病的发生、发展中可能起到重要作用。 展开更多
关键词 miR-142-3p GRAVES病 pBMC
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miR-142-3p在结直肠癌组织与细胞中的表达及对细胞增殖影响研究 被引量:10
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作者 朱文侠 杨玲 +5 位作者 成钧 杨彦玲 韩振奎 韩继明 黄广智 王航辉 《陕西医学杂志》 CAS 2018年第3期282-286,共5页
目的:观察微小RNA-142-3p在结直肠癌组织与细胞中的表达,及其对人结直肠癌细胞增殖的影响。方法:通过组织原位杂交的方法,检测miR142-3p在结直肠癌患者组织中的表达。通过Realtime-PCR检测结直肠癌细胞系中的miR142-3p表达。构建pSlienc... 目的:观察微小RNA-142-3p在结直肠癌组织与细胞中的表达,及其对人结直肠癌细胞增殖的影响。方法:通过组织原位杂交的方法,检测miR142-3p在结直肠癌患者组织中的表达。通过Realtime-PCR检测结直肠癌细胞系中的miR142-3p表达。构建pSliencer 4.1-CMV-miR142-3p过表达载体,并转染结直肠癌细胞Caco2,通过Realtime PCR检测重组质粒pSilencer4.1-CMVmiR142-3p载体在结直肠癌细胞系的表达情况。通过Western Blot检测细胞周期相关蛋白CyclinD1的表达变化。结果:miR142-3p主要定位于细胞的胞浆,在癌组织和癌旁组织中miR142-3p的表达存在差异。miR142-3p结直肠癌细胞系中呈低表达。在结直肠癌细胞系中过表达miR142-3p可下调细胞周期相关蛋白CyclinD1,抑制细胞增殖。结论:miR142-3p抑制结直肠癌Caco2细胞的增殖,下调细胞周期相关蛋白CyclinD1,有望成为结直肠癌诊断和治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤/病理生理学 @微小分子142-3p 增殖
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自身免疫性甲状腺炎甲状腺组织和外周血单个核细胞中微小RNA-142-3p、微小RNA-150表达及临床意义 被引量:4
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作者 王征 张浩 +3 位作者 李伟汉 翟晓建 宋春峰 郭满 《安徽医药》 CAS 2021年第8期1642-1646,共5页
目的探讨甲状腺组织和外周血单个核细胞中微小RNA-142-3p(miR-142-3p)、微小RNA-150(miR-150)在桥本甲状腺炎(HT)中的表达水平及临床意义。方法选取2017年3月至2019年6月南阳市中心医院行甲状腺手术切除并经病理确诊为HT病人87例为HT组... 目的探讨甲状腺组织和外周血单个核细胞中微小RNA-142-3p(miR-142-3p)、微小RNA-150(miR-150)在桥本甲状腺炎(HT)中的表达水平及临床意义。方法选取2017年3月至2019年6月南阳市中心医院行甲状腺手术切除并经病理确诊为HT病人87例为HT组;同期选取南阳市中心医院行甲状腺腺瘤切除术的非癌病人73例为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测两组甲状腺组织和外周血单个核细胞中miR-142-3p、miR-150表达水平;分析HF病人miR-142-3p、miR-150水平与甲状腺功能参数及相关细胞因子相关性。结果HT组甲状腺组织和外周血单个核细胞中miR-142-3p[(1.54±0.32)、(2.25±0.54)]比[(1.00±0.23)、(1.00±0.24)]、miR-150[(2.21±0.43)、(3.78±1.14)]比[(1.00±0.16)、(1.00±0.19)]表达水平均显著高于对照组(P<0.05);两组甲状腺功能参数及相关细胞因子水平比较,均差异有统计学意义,HT组促甲状腺激素(TSH)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、白细胞介素17(IL-17)、白细胞介素6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)、转化生长因子β1(TGF-β1)水平显著高于对照组(P<0.05),游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)水平显著低于对照组(P<0.05);HT病人甲状腺组织和外周血单个核细胞中miR-142-3p、miR-150水平呈正相关,且与TSH、TPOAb、IL-17、IL-6、IFN-γ、TGF-β1呈正相关,与FT3、FT4呈负相关(P<0.05)。结论甲状腺组织和外周血单个核细胞中miR-142-3p、miR-150水平的变化与HT有关。miR-142-3p、miR-150对评价HT的早期危险性、降低患病率有重要意义。 展开更多
关键词 甲状腺炎 自身免疫性 甲状腺组织 外周血单个核细胞 微小RNA-142-3p 微小RNA-150
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miR-142-3p靶向调控mll-af4融合基因的实验研究 被引量:4
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作者 窦立萍 李永辉 +2 位作者 徐诚望 王莉莉 于力 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第6期1595-1599,共5页
本研究探讨mll-af4融合基因的表观遗传学调控机制,以筛选靶向调控mll-af4融合基因的microRNA。利用Targetscan在线分析软件预测特异性靶向mllaf4基因3′端非翻译区域(3′-untranslated region,3′UTR)的microRNA,采用PCR方法从1例健康供... 本研究探讨mll-af4融合基因的表观遗传学调控机制,以筛选靶向调控mll-af4融合基因的microRNA。利用Targetscan在线分析软件预测特异性靶向mllaf4基因3′端非翻译区域(3′-untranslated region,3′UTR)的microRNA,采用PCR方法从1例健康供者DNA中扩增mll-af4基因3′UTR序列,插入经EcoRI和PstI双酶切的荧光素酶报告载体pGL3-M,采用脂质体SuperFect包裹荧光素酶重组质粒及microRNA表达质粒转染293T细胞,应用双荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性。miR-142-3p mimics以脂质体Hiperfect转染至RS4;11细胞,选用实时定量PCR及Western blot检测mll-af4 mRNA及蛋白的表达。结果表明,成功构建了含有1935bp、2104bp和1371bp的mll-af4基因3′UTR序列的荧光素酶报告重组质粒pGL3-AF4-3′UTR,并通过酶切及基因测序方法鉴定得到证实。荧光素酶报告实验提示,miR-142组荧光素酶活性明显低于对照组。RS4;11细胞中过表达miR-142-3p可以明显下调MLL-AF4融合蛋白及mRNA表达。结论:miR-142-3p通过靶向结合mll-af4基因3′UTR的结合位点特异调控mll-af4基因表达。 展开更多
关键词 microrna 白血病 mll-af4融合基因 miR-142-3p
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微小RNA-142-3p靶向Rictor诱导动脉粥样硬化相关的内皮细胞凋亡 被引量:3
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作者 肖丽 刘萍 秦冰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1928-1937,共10页
目的:探讨微小RNA-142-3p(miR-142-3p)对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)进程中人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)凋亡的影响及作用机制。方法:HAECs经氧化型低密度脂蛋白(oxi⁃dized low-density lipoprotein,o... 目的:探讨微小RNA-142-3p(miR-142-3p)对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)进程中人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)凋亡的影响及作用机制。方法:HAECs经氧化型低密度脂蛋白(oxi⁃dized low-density lipoprotein,ox-LDL)作用后,采用RT-qPCR检测miR-142-3p的表达水平。Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术(flow cytometry,FCM)和caspase-3活性检测试剂盒检测细胞凋亡。使用TargetScan等生物信息学软件预测miR-142-3p的潜在靶基因,双萤光素酶报告基因实验验证miR-142-3p与Rictor mRNA 3′-UTR直接靶向结合。结果:在ox-LDL诱导HAECs凋亡过程中miR-142-3p表达显著上调(P<0.05,P<0.01)。过表达miR-142-3p促进HAECs凋亡,相反,抑制miR-142-3p的表达水平可以部分程度缓解ox-LDL介导的内皮细胞(endothelial cells,ECs)凋亡。进一步研究发现,Rictor为miR-142-3p的下游靶基因,沉默Rictor基因抑制了miR-142-3p抑制物(miR-142-3p inhibitor)的抗凋亡作用。Akt/eNOS信号通路参与了miR-142-3p对ECs凋亡的调控。结论:抑制miR-142-3p表达可促进靶基因Rictor表达并激活Akt/eNOS信号通路从而发挥抗凋亡的内皮保护作用。 展开更多
关键词 微小RNA-142-3p 人主动脉内皮细胞 细胞凋亡 RICTOR 动脉粥样硬化
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调控类风湿关节炎PBMC中miR-142-3p的表达对ADAM17表达及成纤维样滑膜细胞活性的影响 被引量:6
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作者 吴洁 马玲 +4 位作者 付冬冬 杨学华 吕书龙 范文强 王培山 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2020年第6期844-848,共5页
目的:探讨类风湿关节炎(RA)外周血单个核细胞(PBMC)中微小RNA-142-3p(miR-142-3p)的表达对RA成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖和凋亡的影响。方法:采用生物信息学预测和双荧光素酶报告实验分析miR-142-3p和解聚素金属蛋白酶17(ADAM17)的靶向... 目的:探讨类风湿关节炎(RA)外周血单个核细胞(PBMC)中微小RNA-142-3p(miR-142-3p)的表达对RA成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖和凋亡的影响。方法:采用生物信息学预测和双荧光素酶报告实验分析miR-142-3p和解聚素金属蛋白酶17(ADAM17)的靶向关系。分别采用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测人正常PBMC和RA-PBMC中miR-142-3p和ADAM17蛋白的表达。利用miR-142-3p模拟物或抑制物转染调控RA-PBMC中miR-142-3p的表达,观察低表达miR-142-3p,及过表达ADAM17和miR-142-3p的RA-PBMC对RA-FLS增殖和凋亡的影响。RA-FLS增殖的检测采用MTT法,RA-FLS凋亡的检测采用Annexin V-FITC和PI双染法。结果:ADAM17和miR-142-3p存在靶向关系。与正常PBMC相比,RA-PBMC中miR-142-3p表达上调,ADAM17蛋白表达下调(P<0.05)。低表达miR-142-3p的RA-PBMC和过表达ADAM17的RA-PBMC均可增强RA-FLS增殖活性,减少其凋亡(P<0.05)。过表达miR-142-3p的RA-PBMC可降低RA-FLS的增殖活性,促进其凋亡(P<0.05)。过表达ADAM17和过表达miR-142-3p的作用可以相互拮抗(P<0.05)。结论:调控RA-PBMC中miR-142-3p的表达可以通过调控ADAM17而影响RA-FLS的增殖和凋亡。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 成纤维样滑膜细胞 miR-142-3p ADAM17 细胞增殖 细胞凋亡
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MiR-142-5p通过靶向IGF2BP3调控多柔比星诱导的肝癌细胞凋亡 被引量:6
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作者 胡烨 许小青 +5 位作者 王冰晶 徐贺楠 侯晋 罗晓玲 梁安民 曹雪涛 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期581-587,共7页
目的:探讨miR-142-5p对多柔比星诱导的原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:收集广西医科大学附属肿瘤医院88例HCC患者手术切除的癌组织及癌旁组织(距癌灶组织边缘2~5 cm)标本。采用实时荧... 目的:探讨miR-142-5p对多柔比星诱导的原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:收集广西医科大学附属肿瘤医院88例HCC患者手术切除的癌组织及癌旁组织(距癌灶组织边缘2~5 cm)标本。采用实时荧光定量PCR检测人HCC组织和癌旁组织、人正常肝细胞以及HCC细胞系中miR-142-5p的表达量。向HCC细胞SMMC-7721中转染miR-142-5p mimics,流式细胞术检测过表达miR-142-5p后SMMC-7721细胞在多柔比星(doxorubicin)(1μg/ml)诱导下凋亡的变化;生物信息学方法预测miR-142-5p可靶向结合胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3(insulin-like growth factor 2 mRNA-binding protein 3,IGF2BP3)基因,并采用荧光素酶报告基因实验进行验证。采用实时荧光定量PCR及Western blotting检测过表达miR-142-5p的SMMC-7721细胞中IGF2BP3的mRNA及蛋白表达情况。结果:与癌旁组织和正常肝细胞相比,HCC组织(-6.91±2.61 vs-11.59±2.59,P<0.01)和多种HCC细胞系中miR-142-5p呈明显低表达(均P<0.01);过表达miR-142-5p可显著促进多柔比星诱导的HCC细胞SMMC-7721的凋亡[(49.40±3.47)%vs(19.50±1.74)%,P<0.01];过表达miR-142-5p可明显降低HCC细胞中IGF2BP3的mRNA及蛋白表达水平(P<0.01),敲减IGF2BP3表达可进一步促进多柔比星诱导的SMMC-7721细胞的凋亡(P<0.01)。荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-142-5p能够抑制IGF2BP3的3'UTR荧光素酶报告基因的活性。结论:miR-142-5p在HCC组织标本和体外培养细胞系中的表达水平均显著降低,转染miR-142-5p mimics后能够促进多柔比星诱导的HCC细胞的凋亡,其机制可能与miR-142-5p靶向作用IGF2BP3从而促进HCC细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 肝细胞癌 miR-142-5p 多柔比星 凋亡 胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3基因
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miR-142-3p表达对卵巢癌SKOV3细胞生长和转移的影响 被引量:4
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作者 陆晓云 张斌 佟芳 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期817-821,共5页
目的探讨miR-142-3p表达对卵巢癌SKOV3细胞生长和转移的影响。方法收集40例卵巢癌患者标本,同时收集20例相应的癌旁组织。利用荧光定量PCR方法检测各组织中miR-142-3p表达水平。用脂质体作为载体将miR-142-3p模拟物转染至SKOV3细胞,应... 目的探讨miR-142-3p表达对卵巢癌SKOV3细胞生长和转移的影响。方法收集40例卵巢癌患者标本,同时收集20例相应的癌旁组织。利用荧光定量PCR方法检测各组织中miR-142-3p表达水平。用脂质体作为载体将miR-142-3p模拟物转染至SKOV3细胞,应用实时PCR和Western blotting方法检测正常与与转染的SKOV3细胞HMGA2 mRNA及蛋白表达情况。结果miR-142-3p在卵巢癌组织中表达水平明显高于癌旁组织(P<0.01)。过表达miR-142-3p能够抑制HMGA2 mRNA和蛋白表达(P<0.05)。过表达miR-142-3p显著抑制SKOV3细胞生长和转移。结论miR-142-3p表达增加能够抑制SKOV3细胞中HMGA2 mRNA和蛋白表达,并抑制SKOV3细胞的生长和转移。 展开更多
关键词 miR-142-3p 卵巢癌 SKOV3细胞 生长 转移
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miR-142-3p通过调控S1PR3影响膀胱癌干细胞的干性 被引量:3
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作者 戚敏俊 吴小鹏 +1 位作者 周忠兴 蒋晓东 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第13期2028-2034,共7页
背景:研究发现miR-142-3p低表达于多种肿瘤组织和细胞系中,并且有研究发现TUG1/miR-142/ZEB2轴可抑制膀胱癌增殖并诱导其凋亡。目的:观察miR-142-3p在膀胱癌干细胞中的表达水平,探讨其对S1PR3的靶向调控作用及对膀胱癌干细胞干性的影响... 背景:研究发现miR-142-3p低表达于多种肿瘤组织和细胞系中,并且有研究发现TUG1/miR-142/ZEB2轴可抑制膀胱癌增殖并诱导其凋亡。目的:观察miR-142-3p在膀胱癌干细胞中的表达水平,探讨其对S1PR3的靶向调控作用及对膀胱癌干细胞干性的影响。方法:从新鲜人膀胱癌组织中分离培养原代膀胱癌细胞,采用流式细胞仪筛选出CD44^+细胞与CD44^-细胞,Western-blot检测2种细胞中Nanog、Oct4蛋白的表达,qRT-PCR检测2种细胞中miR-142-3p基因的表达。将miR-142-3p mimic(实验组)、miR对照质粒(对照组)分别转染至CD44^+细胞,48 h后,采用MTS实验检测细胞增殖能力,软琼脂克隆实验检测细胞克隆形成能力,Transwell小室实验检测各组细胞转移能力,Western-blot检测细胞中pPi3k和pAkt蛋白表达,qRT-PCR检测细胞中S1PR3基因表达。将稳定转染的2种细胞分别注射至裸鼠(购自北京维通利华实验动物技术有限公司)右侧腋下,4周后检测肿瘤体积。将S1PR3-突变型+miR-142-3p mimic、S1PR3-突变型+miR对照质粒、S1PR3-野生型+miR-142-3p mimic、S1PR3-野生型+miR对照质粒分别转染至CD44^+细胞,48h后检测各组荧光素酶活性。结果与结论:①CD44^+细胞中miR-142-3p基因表达显著低于CD44-细胞(P <0.05);CD44^+细胞中Nanog、Oct4蛋白表达显著高于CD44^-细胞,证实CD44^+细胞为膀胱癌干细胞;②实验组膀胱癌干细胞的增殖能力、克隆形成能力及转移能力明显低于对照组(P <0.05);③实验组膀胱癌干细胞中pPi3k和pAkt蛋白表达弱于对照组,S1PR3基因表达低于对照组(P <0.05);④实验组裸鼠体内肿瘤体积小于对照组(P <0.05);⑤与相比,S1PR3-突变型+miR-142-3p mimic组荧光素酶活性显著低于S1PR3-突变型+miR对照质粒组(P <0.05),S1PR3-野生型+miR对照质粒组和S1PR3-野生型+miR-142-3p mimic组荧光素酶活性无差异(P> 0.05);⑥结果表明,miR-142-3p在膀胱癌干细胞中低表达,其可能通过负调控S1PR3下调PI3K/AKT信号通路来抑制膀胱癌干细胞的干性。 展开更多
关键词 膀胱癌干细胞 干细胞 miR-142-3p miRNA S1pR3 膀胱癌 细胞转移能力 膀胱肿瘤 肿瘤干细胞 微RNAS 组织工程
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蟛蜞菊内酯通过调控miR-142-3p表达对肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞损伤的保护作用及其机制研究 被引量:5
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作者 郑大炜 代岩 +5 位作者 郭娜 党强 路尧 张鹏 孙辉 王春侠 《中国实验诊断学》 2021年第12期1831-1836,共6页
目的探讨蟛蜞菊内酯(WEL)对肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞损伤的作用及分子机制。方法将肺泡上皮细胞A549分为对照组、感染组、感染组+蟛蜞菊内酯低、中、高浓度(WEL-L、M、H)组、感染组+miR-NC组、感染组+miR-142-3p组、感染组+WEL+ant... 目的探讨蟛蜞菊内酯(WEL)对肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞损伤的作用及分子机制。方法将肺泡上皮细胞A549分为对照组、感染组、感染组+蟛蜞菊内酯低、中、高浓度(WEL-L、M、H)组、感染组+miR-NC组、感染组+miR-142-3p组、感染组+WEL+anti-miR-NC组、感染组+WEL+anti-miR-142-3p组。酶联免疫吸附法(ELISA)检测IL-6、IL-10水平;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹(Western blot)法检测蛋白表达;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-142-3p表达水平。结果肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞中IL-10水平降低,IL-6水平升高,细胞凋亡率升高,Bcl-2表达水平降低,Bax表达水平升高,miR-142-3p表达水平降低(P<0.05)。不同浓度蟛蜞菊内酯处理及过表达miR-142-3p后,IL-10水平升高,IL-6水平降低,细胞凋亡率降低,Bcl-2表达水平升高,Bax表达水平降低,miR-142-3p表达水平升高,且呈浓度依赖性(P<0.05)。抑制miR-142-3p表达逆转了蟛蜞菊内酯对肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞损伤的作用。结论蟛蜞菊内酯可能通过上调miR-142-3p对肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞损伤起保护作用。 展开更多
关键词 蟛蜞菊内酯 miR-142-3p 肺炎链球菌 肺泡上皮细胞 凋亡 炎症反应
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