不同疾病活动度炎症性肠病患者血清microRNA-146a-5p、microRNA-145水平的变化及与免疫调节的相关性

目的 探讨不同疾病活动度炎症性肠病(IBD)患者血清microRNA-146a-5p (miR-146a-5p)、microRNA-145(miR-145)水平的变化及与免疫调节的相关性。方法 选取2021年6月—2022年6月在西南医科大学附属中医医院就诊的88例IBD患者作为IBD组,其中溃疡性结肠炎(UC)43例,克罗恩病(CD)45例。另取同期该院86例健康体检者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测血清和肠黏膜组织miR-146a-5p、miR-145表达,流式细胞术检测Th1、Th2,酶联免疫吸附试验测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-12(IL-12)水平。Pearson法分析患者miR-146a-5p、miR-145表达与Th1/Th2的相关性。结果 与对照组比较,UC组和CD组miR-145相对表达量降低(P <0.05),Th1、Th1/Th2升高(P <0.05);与UC组比较,CD组miR-145相对表达量降低(P <0.05),Th1、Th1/Th2升高(P <0.05)。对照组、UC组、CD组miR-146a-5p都在固有层中表达。UC组和CD组miR-146a-5p表达水平高于对照组(P <0.05)。UC组和CD组TNF-α、IFN-γ、IL-4、IL-12水平高于对照组(P <0.05)。Pearson相关性分析结果表明,miR-146a-5p、miR-145表达与Th1/Th2均呈负相关(r=-0.424和-0.395,均P=0.000)。miR-146a-5p、miR-145诊断UC的曲线下面积(AUC)分别为0.850和0.794,敏感性分别为79.5%(95%CI:0.718,0.857)和74.4%(95%CI:0.696,0.822),特异性分别为94.3%(95%CI:0.982,0.896)和72.5%(95%CI:0.679,0.773)。miR-146a-5p、miR-145诊断CD的AUC分别为0.927(95%CI:0.875,0.977)和0.846(95%CI:0.803,0.902),敏感性分别为92.3%(95%CI:0.875,0.978)和71.9%(95%CI:0.668,0.773),特异性分别为94.3%(95%CI:0.991,0.892)和90.9%(95%CI:0.945,0.847)。miR-146a-5p、miR-145对CD的诊断效能较高。结论 不同疾病活动度IBD患者血清miR-146a-5p、miR-145表达与免疫调节呈负相关。

lncR FOXD2-AS1调控miR-145-5p对非小细胞肺癌细胞生物学特性的影响

目的 探讨长链非编码RNA(lncR)FOXD2-AS1调控微小RNA(miR)-145-5p对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、迁移、侵袭和上皮-间质转化(EMT)等生物学特性的影响。方法 体外培养人NSCLC细胞系A549、H1299、SK-MES-1及人正常肺支气管上皮细胞系16HBE,应用RT-qPCR检测各细胞系中lncR-FOXD2-AS1和miR-145-5p表达。选取lncR-FOXD2-AS1相对高表达的SK-MES-1作为敲低实验的研究对象,将SK-MES-1细胞按照转染处理的不同分为NC组(转染si-NC)和si-FOXD2-AS1组(转染si-FOXD2-AS1),转染后,RT-qPCR检测细胞中lncR-FOXD2-AS1、miR-145-5p表达,CCK-8法检测细胞增殖活性,Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力,Western blotting法检测细胞中E-cadherin、N-cadherin、Fibronectin蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证lncR-FOXD2-AS1和miR-145-5p的相互关系。结果 与16HBE细胞相比,lncR-FOXD2-AS1在NSCLC细胞系中高表达(P<0.05),miR-145-5p在NSCLC细胞系中低表达(P均<0.05)。与NC组比较,si-FOXD2-AS1组细胞miR-145-5p表达升高(P<0.05),0、24、48 h时OD值降低(P均<0.05),迁移及侵袭穿膜细胞数减少(P均<0.05),E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05),N-cadherin、Fibronectin蛋白表达降低(P均<0.05)。双荧光素酶实验证实miR-145-5p是lncR-FOXD2-AS1的靶基因。结论 lncR-FOXD2-AS1在NSCLC细胞系中表达升高,敲低lncR-FOXD2-AS1通过靶向调控miR-145-5p抑制NSCLC细胞的增殖、迁移、侵袭和EMT进程。

miRNA-145与胃癌相关性研究进展

胃癌是严重威胁人类生命健康的消化道恶性肿瘤之一,探索其发生发展机制具有重要意义。大量研究表明,microRNA(miRNAs)在多种癌症的生长、侵袭、转移、化疗耐药、诊断及预后中扮演重要角色。其中,miR-145及其所编码的miR-145-5p通过调节靶基因或信号传导参与胃癌的生物学过程,包括增殖、凋亡、迁移、侵袭、血管生成和治疗抗性等。文章对miR-145在胃癌中的作用及与其相关的治疗和化疗耐药进行综述,以期为胃癌的治疗提供新的思路。

外泌体传递微小RNA⁃145对冠状动脉粥样硬化性心脏病大鼠血小板活化及血管内皮功能的影响

目的探讨外泌体(Exo)传递微小RNA(miR)-145对冠状动脉粥样硬化性心脏病(CAHD,简称冠心病)模型大鼠血小板活化以及血管内皮功能的影响及分析。方法通过Real-time PCR检测miR-阴性对照(NC)和miR-145转染HEK239细胞的效果,并转染从转染miRNA-NC、miRNA-145的HEK239细胞中分离的Exo,透射电子显微镜下观察Exo形态并分析其径粒分布情况,Western blotting测定CD81、热休克蛋白70(HSP70)及肿瘤易感基因101(TSG101)蛋白表达;实验分为对照组、模型组、miR-NC Exo组、miR-145 Exo组,每组8只大鼠,处理结束后,动物超声诊断仪测定大鼠射血分数(EF)、短轴缩短率(FS)、左心室舒张末期内径(LVIDD)、左心室收缩末期内径(LVIDS),HE染色观察大鼠心肌组织与主动脉组织的病理改变,ELISA测定大鼠血清血小板活化因子(PAF)、β-血小板球蛋白(β-TG)、血小板膜糖蛋白Ⅱa/Ⅲb(GPⅡa/Ⅲb)、一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)和血管内皮生长因子(VEGF)的含量,免疫组织化学染色检测大鼠主动脉组织中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达。结果转染miR-145的HEK239细胞中miR-145相对表达量显著高于未转染及转染miR-NC的HEK239细胞(P<0.05),分离的颗粒物呈典型的杯状或盘状囊泡,直径大多分布在100 nm,CD81、HSP70及TSG101蛋白均高表达,且转染miR-NC的Exo中miR-145相对表达量显著低于转染miR-145的Exo(P<0.05)。与miR-NC Exo组比较,miR-145 Exo组大鼠EF、FS显著升高(P<0.05),LVIDD、LVIDS显著减小(P<0.05),心肌组织与主动脉组织病理变化改善效果更好,血清中PAF、β-TG、GPⅡa/Ⅲb、ET-1和VEGF含量显著降低(P<0.05),NO含量也显著升高(P<0.05),主动脉组织eNOS阳性表达率也显著增加(P<0.05)。结论Exo传递miR-145能够抑制冠心病模型大鼠血小板活化,改善血管内皮功能,对冠心病模型大鼠起到保护作用。

幽门螺杆菌相关胃癌中miR-145表达及临床意义

目的分析幽门螺杆菌(H.pylori,Hp)相关胃癌中miR-145的表达及临床意义。方法选取本院2019年6月—2022年12月接诊的86例胃癌患者,根据是否存在Hp感染将其分为两组,56例Hp阳性患者为观察组,30例Hp阴性患者为对照组。取患者癌组织及癌旁组织,检测miR-145表达,比较两组患者癌组织及癌旁组织中miR-145表达量,比较不同病理特征Hp阳性患者的miR-145表达量。抽取两组患者空腹静脉血5 mL,检测血清C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,绘制接受者操作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),比较CRP、TNF-α、miR-145对Hp阳性胃癌的诊断价值。Pearson分析miR-145与CRP、TNF-α的相关性。随访3年,比较存活组、死亡组miR-145表达量。采用Kaplan-Meier法进行生存分析,Graph Pad Prism 8.0绘制miR-145高表达组、低表达组生存曲线。结果观察组患者癌组织及癌旁组织中miR-145的表达量均显著低于对照组(P<0.05)。不同性别、年龄、肿瘤大小的Hp阳性胃癌患者miR-145表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05),远处转移、淋巴结转移、浸润深度T3~T4、Ⅲ~Ⅳ期Hp阳性胃癌患者miR-145表达量均显著低于无远处转移、无淋巴结转移、浸润深度T1~T2、Ⅰ~Ⅱ期患者(P<0.05)。观察组患者血清CRP、TNF-α水平均显著高于对照组(P<0.05)。miR-145与CRP、TNF-α的表达均呈负相关(r=-0.493,P<0.05;r=-0.482,P<0.05)。ROC曲线显示:miR-145的诊断灵敏度(90.24%)、特异度(89.28%)明显高于CRP(75.82%,76.28%)和TNF-α(77.37%,78.17%)(P<0.05)。随访3年,86例患者无脱落病例,中位生存时间30.52个月,3年生存率为58.14%。存活组患者癌组织及癌旁组织中miR-145表达量显著高于死亡组(P<0.05),miR-145高表达组患者生存率高于miR-145低表达组(P<0.05)。结论胃癌患者miR-145表达量较低,尤其是感染Hp的患者,miR-145表达量更低;Hp相关胃癌患者的临床病理特征、炎症反应与miR-145表达存在一定关系,临床可通过检测miR-145表达量评估疾病进程和炎症反应,提高诊断灵敏度、特异度;miR-145低表达可能影响Hp相关胃癌患者疾病转归与预后。

血清miR-145、P53抗体在龙贝逍遥散治疗乳腺癌效果及预后评估中的检测价值研究

【目的】探析血清微小核糖核酸-145(miR-145)、P53抗体在龙贝逍遥散治疗乳腺癌效果及预后评估中的检测价值。【方法】选取2020年1月~2021年1月北京航天总医院收治的90例乳腺癌患者作为研究对象,采用随机数字表法将患者随机分为观察组和对照组,每组各45例,2组患者均接受个性化综合治疗,观察组在此基础上联合龙贝逍遥散治疗,疗程为3个月。采用实时荧光定量(PCR)法检测血清miR-145表达水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清P53抗体表达水平。比较2组患者治疗前后的血清miR-145、P53抗体表达水平差异,采用Logistic回归分析法探析血清miR-145、P53抗体与观察组患者预后不良的关系,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析血清miR-145、P53抗体在观察组预后不良预测中的应用价值。【结果】(1)治疗后,2组患者的血清miR-145检测值均呈上升趋势(P<0.05),P53抗体检测值均呈下降趋势(P<0.05),且观察组的血清miR-145检测值明显高于对照组,P53抗体检测值明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)观察组预后良好组的血清miR-145检测值明显高于预后不良组,血清P53抗体检测值明显低于预后不良组,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)Logistic回归分析结果显示,miR-145高表达是观察组患者预后不良的保护因素,P53抗体高表达是观察组患者预后不良的危险因素(P<0.05)。(4)血清miR-145、P53抗体联合预测观察组患者预后情况的曲线下面积(AUC)最大(0.877,95%CI:0.769~0.985),其灵敏度、特异度分别为93.75%、93.10%,差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】血清miR-145在乳腺癌预后不良中呈低表达,血清P53抗体在乳腺癌预后不良中呈高表达;龙贝逍遥散在乳腺癌患者中可达到较理想的治疗效果,有利于提升血清miR-145表达水平、降低血清P53抗体表达水平。

lncRNA-UCA1、miR-145-5p在妊娠期糖尿病孕妇胎盘及脐血中的表达及意义

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)尿路上皮癌胚抗原1(lncRNA-UCA1)、微小RNA-145-5p(miR-145-5p)在妊娠期糖尿病(GDM)孕妇胎盘组织、脐血中的表达水平及二者与胰岛素抵抗(IR)、新生儿体重的关系。方法选取2019年3月至2021年7月该院收治的86例由口服葡萄糖耐量试验(OGTT)确定为GDM的孕妇作为GDM组,另选取同期86例经OGTT判定为正常糖耐量(NGT)的孕妇为对照组。比较对照组和GDM组胎盘组织、脐血中lncRNA-UCA1、miR-145-5p表达水平及IR相关指标及新生儿体重,分析GDM孕妇胎盘组织、脐血lncRNA-UCA1、miR-145-5p表达水平与稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、新生儿体重,以及胎盘组织、脐血lncRNA-UCA1表达水平与miR-145-5p的相关性。结果GDM组孕妇胎盘组织、脐血中lncRNA-UCA1表达水平低于对照组(P<0.05),miR-145-5p表达水平及空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FBG)、HOMA-IR均高于对照组(P<0.05)。GDM孕妇胎盘组织、脐血lncRNA-UCA1表达水平与HOMA-IR、新生儿体重呈负相关(P<0.05),miR-145-5p表达水平与HOMA-IR、新生儿体重呈正相关(P<0.05),GDM孕妇胎盘组织、脐血lncRNA-UCA1表达水平与miR-145-5p呈负相关(P<0.05)。结论GDM孕妇胎盘、脐血中lncRNA-UCA1表达水平较低,miR-145-5p表达水平较高,二者均与IR、新生儿体重密切相关。

微RNA-145-5p对胃腺癌细胞增殖和细胞周期的影响及机制

目的探讨微RNA(miR)-145-5p对胃腺癌细胞增殖、细胞周期的影响及可能的调控机制。方法从癌症基因组图谱数据库中下载在胃腺癌中差异表达miRNA数据,对其进行差异分析并结合文献确定要研究的目标miRNA。利用TargetScan和Starbase数据库对miR-145-5p的下游信使RNA(mRNA)进行靶向预测并进行相关性分析。将对数生长期人胃腺癌细胞分为mimic NC组(转染mimic NC)、miR-145-5p mimic组(转染miR-145-5p mimic)、Inhibitor NC组(转染Inhibitor NC)、miR-145-5p Inhibitor组(转染miR-145-5p Inhibitor)、mimic NC+oe-NC组(同时转染mimic NC和oe-NC)、miR-145-5p mimic+oe-NC组(同时转染miR-145-5p mimic和oe-NC)、miR-145-5p mimic+oe-淋巴特异性解旋酶(HELLS)组(同时转染miR-145-5p mimic和oe-HELLS)。采用实时荧光定量反转录聚合酶链式反应检测人胃黏膜细胞和人胃腺癌细胞中miR-145-5p和HELLS mRNA的表达水平;细胞计数试剂盒-8和克隆形成实验检测胃癌细胞SGC-7901、BGC-823的增殖能力;流式细胞术检测胃癌细胞SGC-7901、BGC-823的周期分布情况;双荧光素酶报告实验验证miR-145-5p与HELLS的靶向关系;Western blot法检测HELLS蛋白的表达水平。结果生物信息学分析结果显示,胃腺癌组织中miR-145-5p的表达量显著低于正常胃组织,HELLS的表达量显著高于正常胃组织(P<0.05);HELLS与miR-145-5p呈显著负相关(r=-0.470,P<0.05)。人胃腺癌细胞中miR-145-5p的相对表达量显著低于人胃黏膜细胞,HELLS mRNA相对表达量显著高于人胃黏膜细胞(P<0.05)。转染后0、24 h时,mimic NC组与miR-145-5p mimic组SGC-7901细胞增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05);转染后48、72、96 h时,miR-145-5p mimic组SGC-7901细胞增殖能力显著低于mimic NC组(P<0.05)。转染后0、24 h时,Inhibitor NC组与miR-145-5p Inhibitor组BGC-823细胞增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05);转染后48、72、96 h时,miR-145-5p Inhibitor组BGC-823细胞增殖能力显著高于Inhibitor NC组(P<0.05)。miR-145-5p mimic组细胞克隆数显著少于mimic NC组(P<0.05),miR-145-5p Inhibitor组细胞克隆数显著多于Inhibitor NC组(P<0.05)。mimic NC+oe-NC组、miR-145-5p mimic+oe-HELLS组SGC-7901细胞克隆数显著多于miR-145-5p mimic+oe-NC组(P<0.05)。miR-145-5p mimic组G_(0)+G_(1)期SGC-7901细胞所占比例显著高于mimic NC组,S期和G_(2)+M期细胞所占比例显著低于mimic NC组(P<0.05)。miR-145-5p Inhibitor组G_(0)+G_(1)期BGC-823细胞所占比例显著低于Inhibitor NC组,S期和G_(2)+M期细胞所占比例显著高于Inhibitor NC组(P<0.05)。miR-145-5p mimic+oe-NC组G_(0)+G_(1)期SGC-7901细胞所占比例显著高于mimic NC+oe-NC组,S期和G_(2)+M期细胞所占比例显著低于mimic NC+oe-NC组(P<0.05)。miR-145-5p mimic+oe-HELLS组G_(0)+G_(1)期SGC-7901细胞所占比例显著低于miR-145-5p mimic+oe-NC组,S期和G_(2)+M期细胞所占比例显著高于miR-145-5p mimic+oe-NC组(P<0.05)。WT-HELLS+miR-145-5p mimic组细胞的荧光素酶活性显著低于WT-HELLS+mimic NC组(P<0.05),MUT-HELLS+miR-145-5p mimic组与MUT-HELLS+mimic NC组细胞中荧光素酶活性比较差异无统计学意义(P>0.05)。miR-145-5p mimic组细胞中HELLS蛋白相对表达量显著低于mimic NC组(P<0.05)。mimic NC+oe-NC组、miR-145-5p mimic+oe-HELLS组细胞中HELLS蛋白相对表达量显著高于miR-145-5p mimic+oe-NC组(P<0.05)。结论miR-145-5p在胃腺癌中呈显著低表达。过表达miR-145-5p能够抑制胃腺癌细胞的增殖,同时将胃腺癌细胞阻滞在G_(0)和G_(1)期。miR-145-5p可能是通过靶向HELLS mRNA来抑制HELLS蛋白的表达和胃腺癌细胞的增殖。

环状RNA_0032131靶向微小RNA-145-5p调控类风湿关节炎滑膜成纤维细胞的增殖、迁移和侵袭

目的探讨环状RNA_003213(hsa_circ_003213)靶向微小RNA-145-5p(miR-145-5p)对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RA-FLSs)增殖、迁移和侵袭的影响。方法检测RA患者和健康体检者外周血、RA-FLSs、人正常滑膜成纤维细胞中hsa_circ_0032131和miR-145-5p的水平。将RA-FLSs分为对照(NC)组、si-NC组、si-hsa_circ_0032131组、miR-NC组、miR-145-5p组、anti-miR-NC+si-hsa_circ_0032131组、anti-miR-145-5p+si-hsa_circ_0032131组、pcDNA组、pcDNA-hsa_circ_0032131组。采用CCK-8和Transwell法检测RA-FLSs活力、迁移和侵袭数。通过双荧光素酶报告实验确定hsa_circ_0032131与miR-145-5p的靶向关系。结果与健康体检者相比,RA患者外周血中hsa_circ_0032131表达增加,miR-145-5p表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与人正常滑膜成纤维细胞相比,RA-FLSs中hsa_circ_0032131表达增加,miR-145-5p表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与NC组比较,si-hsa_circ_0032131组RA-FLSs的活力和迁移、侵袭数目降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-145-5p组RA-FLSs的活力和迁移、侵袭数目降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与anti-miR-NC+si-hsa_circ_0032131组比较,anti-miR-145-5p+si-hsa_circ_0032131组RA-FLSs的活力和迁移、侵袭数目增高,差异有统计学意义(P<0.05)。与pcDNA组比较,pcDNA-hsa_circ_0032131组RA-FLSs中miR-145-5p水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-145-5p是hsa_circ_0032131的直接靶点。结论敲低hsa_circ_0032131通过上调miR-145-5p抑制RA-FLSs的增殖、迁移和侵袭。

急性脊髓损伤患者外周血miR-124-3p、miR-145-5p水平及意义

目的探讨急性脊髓损伤(SCI)患者外周血微小RNA-124-3p(miR-124-3p)和微小RNA-145-5p(miR-145-5p)的水平及意义。方法选择2018年1月至2023年1月该院收治的112例急性SCI患者作为SCI组,选择同期在该院体检的102例体检健康受试者作为对照组。根据美国脊髓损伤学会评分(ASIA)分级,将SCI患者分为脊髓不完全损伤组(78例)和脊髓完全损伤组(34例),根据预后情况将患者分为预后良好组和预后不良组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测所有研究对象外周血miR-124-3p和miR-145-5p水平;通过受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-124-3p、miR-145-5p水平对SCI患者预后不良的预测价值;采用多因素Logistic回归分析影响SCI患者预后不良的因素。结果与对照组相比,SCI组miR-124-3p水平降低、miR-145-5p水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与脊髓不完全损伤组相比,脊髓完全损伤组miR-124-3p水平降低,miR-145-5p水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与预后良好组相比,预后不良组miR-124-3p水平降低、miR-145-5p水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。miR-124-3p、miR-145-5p联合检测预测SCI患者预后不良的曲线下面积(AUC)优于miR-124-3p、miR-145-5p单项预测的AUC(Z=2.143,P=0.032;Z=2.952,P=0.003)。miR-145-5p水平升高是SCI患者预后不良的独立危险因素(P<0.05),miR-124-3p水平升高是SCI患者预后不良的保护因素(P<0.05)。结论SCI患者外周血miR-124-3p水平降低、miR-145-5p水平升高,其变化与脊髓损伤程度有关,且对患者预后有一定的预测价值。

子宫内膜癌组织中miR-145-5p、IGF2BP1 mRNA表达变化及与患者预后的关系

目的探讨子宫内膜癌(EC)组织中微小RNA-145-5p(miR-145-5p)、胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1(IGF2BP1)mRNA表达变化及与患者预后的关系。方法选取2018年5月—2021年5月于南通市肿瘤医院行手术切除的EC组织及对应癌旁组织标本115例份,采用实时荧光定量PCR法检测EC组织及癌旁组织中miR-145-5p、IGF2BP1 mRNA表达,Pearson相关法分析miR-145-5p与IGF2BP1 mRNA表达的相关性。根据EC组织中miR-145-5p、IGF2BP1 mRNA表达的中位数将患者分为高/低表达组,Kaplan-Meier法绘制高/低miR-145-5p、IGF2BP1 mRNA表达的EC患者生存曲线;多因素Cox回归分析影响EC患者预后的因素。结果与癌旁组织比较,EC组织中miR-145-5p表达降低,IGF2BP1 mRNA表达升高(t分别为-22.201、19.038,P均<0.05)。miR-145-5p与IGF2BP1 mRNA表达呈负相关(r=-0.748,P<0.05)。EC组织中miR-145-5p、IGF2BP1 mRNA表达与组织分化程度、国际妇产科联盟(FIGO)分期和淋巴结转移有关(P均<0.05)。115例EC患者3年总生存率为67.83%(78/115)。miR-145-5p高表达组3年总生存率高于miR-145-5p低表达组,IGF2BP1 mRNA高表达组3年总生存率低于IGF2BP1mRNA低表达组(χ^(2)分别为13.484、11.755,P均<0.05)。EC患者死亡的独立危险因素为组织分化程度低分化、FIGO分期Ⅲ期、有淋巴结转移、IGF2BP1 mRNA表达≥1.53(OR分别为5.434、6.092、4.327、5.339,95%CI分别为1.735~17.021、1.930~19.225、1.424~13.154、1.515~18.811),独立保护因素为miR-145-5p表达≥0.74(OR=0.298,95%CI:1.515~18.811)。结论EC组织中miR-145-5p低表达,IGF2BP1 mRNA高表达,与组织分化程度、FIGO分期、淋巴结转移和患者预后有关。

miR-145联合TGF-β1检测在NSCLC中的临床价值研究

目的检测微小核糖核酸145(microRNA 145,miR-145)、转化生长因子-β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达并研究其临床价值。方法选取2020年1月至2021年1月杭州市中医院诊治的92例NSCLC患者(NSCLC组)及45例肺部良性疾病患者(对照组)为研究对象。检测并比较两组患者的miR-145、TGF-β1表达差异。采用受试者操作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线)分析miR-145联合TGF-β1预测NSCLC预后不良的敏感度及特异性。多因素Cox回归分析探讨NSCLC患者预后的危险因素。Kaplan-Meier模型分析miR-145、TGF-β1与生存期的关系。结果与NSCLC组癌旁正常组织和对照组活检组织比较,NSCLC组肿瘤组织的miR-145表达显著降低(P<0.001),TGF-β1表达显著升高(P<0.001)。T分期T_(3)~T_(4)、区域淋巴结N_(2)+N_(3)、有远处转移及TNM分期Ⅲ~Ⅳ期NSCLC患者的miR-145表达低于T分期T_(1)~T_(2)、区域淋巴结N0+N1、无远处转移及TNM分期Ⅰ~Ⅱ期患者,TGF-β1高于T分期T_(1)~T_(2)、区域淋巴结N0+N1、无远处转移及TNM分期Ⅰ~Ⅱ期患者,差异有统计学意义(P<0.001)。miR-145联合TGF-β1预测NSCLC患者预后不良的敏感度、特异性高于miR-145、TGF-β1、T分期、区域淋巴结、远处转移及TNM分期(P<0.05)。NSCLC组中miR-145≤0.61且TGF-β1≥0.85患者的中位生存期显著低于其他患者(miR-145>0.61或TGF-β1<0.85)[中位生存期(29.37±5.51)个月vs.(34.34±6.09)个月,Log Rank=16.478,P<0.001]。结论NSCLC患者miR-145表达显著降低而TGF-β1显著升高,在NSCLC病情及预后评估中具有一定的临床价值。miR-145及TGF-β1联合检测可显著提高预测NSCLC预后不良的敏感度及特异性。

微小RNA-145-5p靶向Toll样受体4参与动脉粥样硬化泡沫细胞炎症和氧化应激反应

目的 探讨微小RNA-145-5p(miR-145-5p)对动脉粥样硬化细胞模型中炎性反应和氧化应激过程的调控作用。方法 体外构建人单核细胞白血病细胞源性泡沫细胞,分为模型组和对照组,采用定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞内miR-145-5p相对表达。采用TargetScan数据库预测miR-145-5p与Toll样受体4(TLR4)的靶向关系。将293T细胞分为野生型+模拟物(mimic)组(转染TLR4野生型质粒+miR-145-5p模拟物)、野生型+mimic NC组(转染TLR4野生型质粒+miR-145-5p模拟物阴性对照)、突变型+mimic组(转染TLR4突变型质粒+miR-145-5p模拟物)、突变型+mimic NC组(转染TLR4突变型质粒+miR-145-5p模拟物阴性对照),采用双荧光素酶实验验证miR-145-5p与TLR4的靶向关系。体外诱导泡沫细胞,分为mimic组(转染miR-145-5p模拟物)、mimic NC组(转染模拟物阴性对照)、抑制物(inhibitor)组(转染miR-145-5p抑制物)、inhibitor NC组(转染抑制物阴性对照),采用qRT-PCR、Western blot检测TLR4 mRNA及蛋白表达,酶联免疫吸附检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)1β和IL-6表达,生化相关试剂盒测定活性氧、丙二醛和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果 与对照组比较,模型组miR-145-5p表达明显降低(0.29±0.01 vs 1.00±0.08,t=11.180,P<0.01)。双荧光素酶实验显示,miR-145-5p mimic组荧光素酶活性较mimic NC组显著降低,差异有统计学意义(t=8.612,P<0.01)。与mimic NC组比较,mimic组TLR4 mRNA及蛋白、TNF-α、IL-1β、IL-6、活性氧、丙二醛含量明显降低,miR-145-5p表达、SOD活性明显升高(P<0.05,P<0.01)。与inhibitor NC组比较,inhibitor组TLR4 mRNA及蛋白、TNF-α、IL-1β、IL-6、活性氧、丙二醛含量明显升高,miR-145-5p表达、SOD活性明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论 miR-145-5p通过靶向TLR4抑制动脉粥样硬化细胞模型中的炎症和氧化应激反应。

MicroRNA-145对骨肉瘤细胞增殖及凋亡的影响

背景与目的:MicroRNA145(miRNA145)是microRNA家族中的重要一员,已被证实在多种肿瘤细胞中呈现低表达,并认为miRNA 145作为一种抑癌基因可以影响肿瘤细胞的生长和侵袭能力,但其在骨肉瘤中的作用未见相关报道。该研究旨在探讨miRNA145对骨肉瘤细胞增殖、细胞周期以及凋亡的影响。方法:用脂质体法将miRNA145真核表达质粒瞬时转染入人骨肉瘤细胞(MG63),实验设置空白对照组、空载体转染组和miRNA145质粒转染组3组,转染后荧光显微镜下观察转染效率,实时定量RT-PCR检测各组细胞miRNA145的表达,MTT增殖实验检测各组细胞的增殖情况,流式细胞仪检测各组细胞周期及细胞凋亡率。结果:转染后miRNA145质粒转染组细胞增殖速度明显下降,细胞周期停止在G1期之前,凋亡率增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:miRNA145可以有效地抑制骨肉瘤细胞的增殖,促进细胞凋亡。

舒芬太尼通过上调microRNA-145促进自噬和改善缺血再灌注诱导的急性肾损伤

目的:舒芬太尼对缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)引起的心肌和肝损伤具有良好的保护作用,但其对肾的保护作用尚不清楚。本研究旨在探讨舒芬太尼是否可以预防IR引起的急性肾损伤(acute kidney injury,AKI),并确定其疗效是否与miR-145介导的自噬有关。方法:40只大鼠随机分为5组(每组8只):假手术组、IR组、舒芬太尼组、舒芬太尼+miR-145抑制剂对照组(舒芬太尼+anti-NC组)和舒芬太尼+miR-145抑制剂组(舒芬太尼+antimiR-145组)。除假手术组外,其余组均建立了由IR诱导的大鼠AKI模型。舒芬太尼组、舒芬太尼+anti-NC组和舒芬太尼+anti-miR-145组在IR处理前30 min通过股静脉注射舒芬太尼(剂量为1μg/kg),后两组大鼠在舒芬太尼预处理前通过尾静脉注射miR-145抑制剂对照或anti-miR-145(剂量为80 mg/kg)。评估大鼠肾的结构和功能,并测量自噬相关蛋白的蛋白水平、氧化应激水平和细胞凋亡水平。结果:与IR组相比,舒芬太尼组改善了肾结构和功能,并且血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、肌酐(creatinine,Cr)、尿肾损伤分子1(kidney injury molecule 1,KIM-1)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase related lipid transporter,NGAL)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6和ROS水平均显著降低(均P<0.05)。此外,与IR组相比,舒芬太尼组肾组织肌球蛋白样BCL2结合蛋白(coiled-coil, myosin-like BCL2 interacting protein,Beclin-1)和微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)水平均显著增加(均P<0.05),并且肾组织中的细胞凋亡显著减少(P<0.05)。与舒芬太尼+anti-NC组相比,舒芬太尼+anti-miR-145组BUN、Cr、KIM-1、NGAL、TNF-α、IL-1β、IL-6和ROS水平均显著增加(均P<0.05),肾组织Beclin-1和LC3水平均显著降低(均P<0.05),并且肾组织中的细胞凋亡显著增加(P<0.05)。结论:舒芬太尼可预防IR引起的AKI,其作用机制与上调miR-145介导的自噬有关。

低表达的microRNA-145对c-Myc表达的影响

目的:探讨microRNA(miR)-145是否通过调控c-Myc参与肝癌行为的调控.方法:实时定量PCR检测肝组织及细胞系miR-145表达水平;检测不同肝组织c-Myc的mRNA和蛋白表达量;通过转染上调miR-145在HepG2细胞表达后,检测转染前后空白组、实验组、阴性对照组HepG2中c-Myc的mRNA和蛋白表达量;应用流式细胞仪检测转染前后各组HepG2的凋亡情况.结果:miR-145mRNA在正常肝组织中表达明显高于癌旁和肝癌组织(0.878±0.146vs0.265±0.084,0.271±0.096,均P<0.05);癌旁和肝癌组织中miR-145mRNA的表达量差别无统计学意义.miR-145mRNA在LO-2中的表达明显高于HepG2(0.755±0.185vs0.471±0.074,P<0.05).c-Myc mRNA和蛋白在癌旁和肝癌中表达均高于正常肝组织(mRNA:0.136±0.071,0.451±0.026vs0.029±0.023;蛋白:0.301±0.022,0.445±0.018vs0.137±0.011,均P<0.05),且在肝癌组织中表达量较癌旁组织中明显升高(P<0.05).转染miR-145mim-i c s后空白组、实验组、阴性对照组c-M y cmRNA表达差异无统计学意义;而相对于空白组和阴性对照组,实验组c-Myc蛋白表达量表达明显下降(0.146±0.011vs0.366±0.014,0.350±0.013,均P<0.05),空白组和阴性对照组之间差异无统计学意义.流式细胞术检测发现,在HepG2中上调miR-145的表达后,细胞的凋亡明显增多,实验组与空白组和阴性对照组之间有明显差异(3.000±0.100vs1.167±0.153,0.933±0.208,均P<0.05).结论:miR-145反向调节c-Myc的表达;表达下调的miR-145丧失对c-Myc的抑制可能是肝癌发生的重要机制;miR-145能够作为抑癌基因促进细胞凋亡.

MicroRNA-145在原发性膝关节骨关节炎软骨中的表达及意义

目的明确microRNA-145(miR-145)在骨关节炎(OA)组织中的表达水平及miR-145对软骨细胞胶原蛋白表达的作用。方法收集20例膝关节OA患者的膝关节软骨和10例正常患者的膝关节软骨,根据改良的Mankin评分标准对OA关节软骨进行分组。使用RT-PCR方法检测miR-145在关节炎组织及TNF-α处理的软骨细胞中的表达,软骨细胞中X型胶原、RANK、MMP13、ALP的蛋白表达用Western blot检测。结果 miR-145在原发性OA和正常膝关节软骨中均能检测到表达,RT-PCR结果表明,miR-145的表达在不同退变程度的OA软骨组织及软骨细胞中有表达差异,而且随着OA退变程度的提高,miR-145在软骨细胞及软骨组织中的表达呈下降趋势,在重度退变的OA软骨中,上述差异与正常及轻度退变软骨有统计学意义(P<0.05)。将miR-145转染至培养的软骨细胞,Western blot对软骨细胞进行检测分析,MMP13、X型胶原纤维蛋白受到抑制。结论原发性膝关节OA的软骨组织及细胞中miR-145的表达较正常软骨的表达明显减低,而且,随着软骨退变程度的加重,miR-145表达呈下降趋势;miR-145可以抑制软骨细胞MMP13、X型胶原、RANK的表达。

MicroRNA-145和KLF5在多发性骨髓瘤骨髓液中的表达及其临床意义

目的:分析微小RNA-145(microRNA-145,miR-145)和Krüpple样因子5(Krüepple-like factor 5,KLF5)在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)骨髓液中的表达及其临床意义。方法:收集2015年1月至2016年3月住院MM诊治患者65例(疾病组)和体检健康正常者36例(对照组)作为研究对象,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测骨髓液中miR-145 mRNA和KLF5 mRNA表达水平;采用Western Blot检测KLF5蛋白表达水平;分析miR-145与KLF5 mRNA在MM髓液中表达的相关性。结果:miR-145 mRNA在MM骨髓液中的表达水平显著低于对照组(P<0.05);KLF5 mRNA及蛋白表达水平显著高于对照组(P<0.05);与I期、Ⅱ期比较,Ⅲ期MM患者骨髓液中miR-145表达水平显著降低(P<0.05),KLF5 mRNA表达水平显著升高(P<0.05);与IgG型和IgA型相比,轻链型与非分泌型MM患者骨髓液中miR-145相对表达量明显降低(P<0.05);KLF5 mRNA在不同免疫分型中的表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);miR-145和KLF5的表达呈负相关(r=-0.452,P<0.05);死亡MM患者骨髓液中miR-145表达水平显著低于存活患者(P<0.05),KLF5 mRNA表达水平显著高于存活患者(P<0.05)。结论:miR-145在MM患者骨髓液中低表达,KLF5高表达,二者表达可能与MM的发生和病情发展密切相关。

MicroRNA-145在急性髓系白血病患者中的表达及意义

目的探讨MicroRNA-145(miR-145)在急性髓系白血病患者骨髓细胞中的表达情况,并分析其临床意义。方法收集急性髓系白血病患者骨髓标本70例,其中初治组46例、缓解组24例,非血液肿瘤性疾病14例作为对照组。通过实时荧光定量PCR方法检测miR-145的相对表达水平。结果 miR-145在初治急性髓系白血病骨髓中表达水平明显低于缓解组及对照组(P<0.01);其中9例经化疗后缓解的急性髓系白血病患者骨髓miR-145表达水平较治疗前显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);且miR-145表达水平与初诊时原始细胞百分数及外周血白细胞数均无相关性(P=0.456、0.394)。结论 miR-145在急性髓系白血病患者表达下调,提示miR-145的表达与白血病的发生、发展存在显著的关系。

慢性阻塞性肺疾病合并冠心病患者组胺、可溶性髓样细胞触发受体-1、微小核糖核酸-145、超敏C反应蛋白的表达特征及检测价值

目的 探讨组胺(HA)、可溶性髓样细胞触发受体-1(sTREM-1)、微小核糖核酸-145(miR-145)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并冠心病(CHD)患者中的表达特征及检测价值。方法 将107例COPD合并CHD患者设为研究组,同期健康体检者107例设为对照组。抽取受检者血液样本,检测miR-145、HA及sTREM-1、hs-CRP水平。比较2组HA、sTREM-1、miR-145、hs-CRP水平,并比较研究组不同病情严重程度和纽约心脏病协会(NYHA)分级患者的HA、sTREM-1、miR-145、hs-CRP水平。观察各指标水平与病情严重程度、NYHA分级的关联性。结果 研究组HA、sTREM-1、hs-CRP水平高于对照组,miR-145水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。不同COPD病情严重程度患者的HA、sTREM-1、miR-145、hs-CRP水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);随着病情严重程度的加剧,HA、sTREM-1、hs-CRP水平持续增高,miR-145持续降低,差异有统计学意义(P<0.05)。不同NYHA分级患者的HA、sTREM-1、miR-145、hs-CRP水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);随着NYHA分级的增高,HA、sTREM-1、hs-CRP水平持续增高,miR-145持续降低,差异有统计学意义(P<0.05)。HA、sTREM-1、hs-CRP与COPD病情严重程度、NYHA分级呈正相关,miR-145与COPD病情严重程度、NYHA分级呈负相关(P<0.05)。结论 COPD合并CHD患者的HA、sTREM-1、miR-145、hs-CRP表达异常,且与COPD病情严重程度、NYHA分级密切相关。