子宫内膜癌患者血清和癌组织中miR-365、CCL-18表达及临床诊断价值

目的 探讨微小核糖核酸365(microRNA-365,miR-365)、趋化因子18(chemokine ligand 18,CCL-18)在子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)中的诊断价值及其与临床病理特征的关系。方法 收集作者医院2018-12/2021-12月期间确诊的214例EC患者为EC组,选取同期212例良性子宫内膜疾病患者为对照组。采用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测血清及癌组织中miR-365表达水平,采用酶联免疫吸附试验检测血清CCL-18水平,采用免疫组织化学法检测癌组织中CCL-18水平。以EC患者癌组织中miR-365表达水平中位数为界将患者分为miR-365高表达组(n=106)和miR-365低表达组(n=108);同时根据癌组织中CCL-18表达情况分为CCL-18阴性表达组(n=66)和CCL-18阳性表达组(n=148)。采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清miR-365、CCL-18水平对EC的诊断价值。结果 EC组患者血清CCL-18水平高于对照组,miR-365水平低于对照组(P均<0.05)。EC患者癌组织中CCL-18阳性表达率高于癌旁组织,miR-365水平低于癌旁组织(P均<0.05)。EC患者中,miR-365低表达组、CCL-18阳性表达组临床分期Ⅲ期~Ⅳ期、组织低分化、有淋巴结转移、浸润深度≥1/2的患者比例高于miR-365高表达组、CCL-18阴性表达组(P均<0.05)。血清miR-365、CCL-18及二者联合诊断EC的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.718、0.791、0.846。结论 EC患者血清及癌组织中miR-365低表达,CCL-18高表达,二者联合可有效诊断EC,为临床早期诊断EC提供了参考。

大鼠心肌组织中microRNA和18S rRNA的降解与死亡时间的相关性

目的探讨大鼠死后心肌组织中microRNA和18S rRNA的含量变化与死亡时间的关系。方法将SD大鼠断颈处死后置于25℃室温、50%湿度的环境中,于死后不同时间提取心肌组织中总RNA。利用实时荧光定量PCR检测大鼠心肌组织中miR-1-2和18S rRNA的含量变化,结果用循环阈值(Ct值)表示,分析死亡时间与Ct值的关系,最终建立死亡时间推断的回归分析方程。结果大鼠死后120h内心肌组织中miR-1-2含量无明显变化,此后开始下降;而18S rRNA含量在96 h内逐渐增多,随后开始缓慢下降。大鼠死后不同时间18S rRNA的Ct值以及18S rRNA和miR-1-2的ΔCt值与PMI呈非线性相关,二次曲线拟合的R2值分别为0.9487、0.8072。结论 18S rRNA的Ct值和18S rRNA与miR-1-2的ΔCt值与PMI之间存在明显非线性关系,可以作为早期死亡时间推断的指标。

HBV-ACLF患者血清CCK-18、miR-122和HMGA2水平表达意义及预后影响因素分析

目的探讨血清角蛋白18(CCK-18)、微小核糖核酸122(miR-122)、高迁移率组蛋白A2(HMGA2)在乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者中的表达意义及预后影响因素分析。方法回顾性分析2019年1月至2022年1月148例在我院确诊为HBV-ACLF患者的临床资料并纳入HBV-ACLF组,另选取150例在我院行一般体检的健康人作为对照组;对比两组受试者血清CCK-18、miR-122、HMGA2表达差异;Spearman分析CCK-18、miR-122、HMGA2表达与HBV-ACLF发病关系;接收者操作特征曲线(ROC)分析CCK-18、miR-122、HMGA2单独及联合检测对HBV-ACLF的诊断价值;另外对148例HBV-ACLF患者随访1年,截止2023年1月,按照随访结果分为预后良好组(n=86)及预后不良组(n=62),单因素、多因素分析影响HBV-ACLF患者预后不良的独立危险因素;ROC分析CCK-18、miR-122、HMGA2单独及联合检测对HBV-ACLF预后预测价值。结果相比于对照组,HBV-ACLF组患者的CCK-18水平显著降低,而miR-122、HMGA2表达水平显著升高(均P<0.05);Spearman相关系数分析显示,miR-122、HMGA2表达与HBV-ACLF发病之间呈显著正相关,而CCK-18与HBV-ACLF发病之间呈显著负相关(均P<0.05);ROC显示,联合检测的曲线下面积(AUC)显著高于单一指标检测,灵敏度为93.33%,特异性为89.19%;多因素回归分析后显示并发症增多、miR-122及HMGA2表达水平上升是引发HBV-ACLF患者预后不良的独立危险因素,而CCK-18是保护因素(均P<0.05);ROC显示联合检测对预测HBV-ACLF患者的AUC显著高于单一指标检测,灵敏度为90.32%,特异性为81.40%。结论HBV-ACLF患者血清CCK-18、miR-122、HMGA2均具有特异表达水平,且作为影响该类患者预后的独立危险因素提示不良结局的发生,联合检测对于诊断疾病及预测疾病预后均具有较高的临床价值。

血清miR-23b-3p、IL-18水平与肺炎支原体感染所致重症肺炎患儿的病情及预后的关系

目的 分析血清微小RNA-23b-3p(miR-23b-3p)、白细胞介素-18(IL-18)水平与肺炎支原体感染所致重症肺炎患儿的病情及预后的关系。方法 选取2019年1月至2022年1月于郑州大学附属儿童医院诊治的163例肺炎支原体感染所致重症肺炎患儿作为研究对象(重症肺炎组),根据患儿预后分为预后不良组(48例)和预后良好组(115例);另选取同期收治的95例普通肺炎支原体肺炎患儿作为对照(普通肺炎组)。检测各组对象血清miR-23b-3p、IL-18水平的变化,分析miR-23b-3p、IL-18与病情相关指标的相关性,评估miR-23b-3p和IL-18对肺炎支原体感染所致重症肺炎患儿预后不良的预测价值。结果 重症肺炎组患儿血清miR-23b-3p水平、小儿危重病例评分(PCIS)评分低于普通肺炎组(P<0.05),而血清IL-18、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、白细胞计数(WBC)及血沉(ESR)高于普通肺炎组(P<0.05)。重症肺炎组患儿血清miR-23b-3p与PCT(r=-0.617,P<0.001)、WBC(r=-0.696,P=0.015)均呈负相关,而与PCIS评分呈正相关(r=0.705,P=0.002)。重症肺炎组患儿血清IL-18与CRP(r=0.639,P<0.001)、PCT(r=0.596,P=0.003)、WBC(r=0.602,P=0.013)均呈正相关,而与PCIS评分呈负相关(r=-0.669,P=0.024)。预后不良组患儿血清miR-23b-3p水平低于预后良好组,而IL-18水平高于预后良好组(P<0.05)。miR-23b-3p、IL-18预测肺炎支原体感染所致重症肺炎患儿预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.791、0.779,二者联合预测的AUC为0.857。结论 肺炎支原体感染所致重症肺炎患儿血清miR-23b-3p水平降低,IL-18水平升高,二者与患儿病情及预后均具有较好的量化关系,二者可为患儿的早期病情评估及诊治提供帮助。

组织microRNA-124表达及HPV18病毒载量与宫颈癌发病的相关性

目的探讨组织中高危型HPV病毒的载量和micro RNA-124表达水平与宫颈癌发病的相关性,为宫颈癌的临床监测以及诊断提供依据。方法选取在2013年9月-2016年9月在我院行宫颈活检的宫颈癌变患者205例,其中正常或炎症56例,宫颈上皮内瘤变Ⅰ级(cervical intraepithelial neoplasia gradeⅠ,CINⅠ)32例,宫颈上皮内瘤变Ⅱ级(CINⅡ)37例,宫颈上皮内瘤变Ⅲ级(CINⅢ)31例,宫颈癌49例(宫颈鳞癌38例,宫颈腺癌11例)。对宫颈组织或细胞采用逆转录—荧光定量PCR检测micro RNA-124的相对表达,采用第二代杂交捕获技术(HCⅡ)检测HPV18病毒的载量,病毒载量1 pg/ml为阴性组,1~50 pg/ml为低级载量组,51~500 pg/ml为中级载量组,501~1 000 pg/ml则为高级载量组,1 001 pg/ml及以上为极高病毒载量组。Spearman相关性分析病毒载量与宫颈组织病变程度的相关性。结果宫颈癌组HPV18病毒载量及micro RNA-124表达水平显著高于其他组(P均<0.05),而正常或炎症组高危型HPV病毒载量及micro RNA-124的表达水平最低(P=0.001),并且随着宫颈癌病变加重,HPV病毒载量及micro RNA-124的表达水平也随之升高;Spearman相关分析显示,高危型HPV病毒载量与宫颈病变程度呈正相关(R=0.975,P=0.000);随着宫颈癌病变加重,micro RNA-124表达水平呈线性升高(R=0.889,P=0.012)。结论宫颈组织中micro RNA-124表达水平及高危型HPV病毒载量与宫颈癌的发生密切相关。

HPV18在不同病理类型宫颈癌中miRNA表达差异研究

目的探究人类乳头瘤病毒18(human papillomavirus 18,HPV18)在不同病理类型宫颈癌中微小核糖核酸(miRNA)表达差异。方法选取30例HPV18阳性宫颈腺癌患者为A组,30例HPV18阳性宫颈鳞癌患者为B组,15例宫颈正常者为C组。验证A组与B组的病灶组织差异表达miRNA,比较三组的差异表达miRNA及靶基因的表达情况,并比较A组中不同年龄、分期、分化程度及转移情况者的表达情况。结果A组与B组的差异表达miRNA为miR-34、miR-19,A组的miR-19及存活素(survivin)表达显著高于B组,miR-34及蛋白酪氨酸磷酸酶基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)表达显著低于B组,且A组与B组miR-19和survivin高于C组,miR-34和PTEN低于C组,差异有统计学意义(P<0.05),A组中不同年龄者的上述指标表达比较,差异无统计学意义(P>0.05),不同分期、分化程度及转移情况者的上述指标表达比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-19、miR-34、survivin及PTEN在HPV18阳性在不同病理类型宫颈癌中的表达差异显著,且不同分期、分化程度及转移情况者的表达情况差异明显。

lncRNA HCG18调控miR-324-5p/GLI1轴在急性髓系白血病细胞增殖和侵袭中的作用机制

目的长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18(lncRNA HCG18)调对急性髓系白血病(AML)的作用机制尚不清楚。探讨lncRNA HCG18控微小RNA-324-5p(miR-324-5p)/胶质瘤相关基因同源蛋白1(GLI1)轴对AML细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法选择2017年1月-2021年3月在本院血液科住院治疗的AML患者35例作为研究对象(AML组),另选取同期在本院治疗并进行骨髓穿刺检查的非血液系统肿瘤性疾病患者30例作为对照组,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测所有入选人员骨髓单个核细胞中lncRNA HCG18与miR-324-5p的表达。体外培养AML细胞HL-60,将细胞分为对照组、si-NC组、lncRNA HCG18 siRNA组、miR-NC组、miR-324-5p mimics组、miR-324-5p mimics+GLI1 NC组、miR-324-5p mimics+GLI1组、lncRNA HCG18 siRNA+NC inhibitor组、lncRNA HCG18 siRNA+miR-324-5p inhibitor组,分别检测检测HL-60细胞中lncRNA HCG18、miR-324-5p表达、HL-60细胞增殖、迁移与侵袭及GLI1、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9蛋白表达。双荧光素酶报告系统分析miR-324-5p与lncRNA HCG18、GLI1的靶向关系。结果与对照组比较,AML组患者骨髓单个核细胞中lncRNA HCG18表达水平(2.85±0.32)较对照组(1.03±0.11)显著升高(P<0.01),而miR-324-5p表达水平(0.47±0.05)较对照组(1.05±0.09)显著降低(P<0.01);沉默lncRNA HCG18表达或过表达miR-324-5p后HL-60细胞增殖、细胞迁移与侵袭数、Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达显著降低(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验显示,miR-324-5p与lncRNA HCG18、GLI1均有靶向关系;抑制miR-324-5p表达可逆转沉默lncRNA HCG18表达对HL-60细胞增殖、迁移与侵袭的抑制作用;GLI1过表达可逆转过表达miR-324-5p对HL-60细胞增殖、迁移与侵袭的抑制作用。结论lncRNA HCG18在AML细胞中高表达,抑制lncRNA HCG18表达可通过调控miR-324-5p/GLI1轴抑制AML细胞增殖、迁移与侵袭。

脓毒症患儿外周血单个核细胞中微小RNA-466和GPR18 mRNA的表达及诊断价值

目的探讨微小RNA-466(miRNA-466)和G蛋白偶联受体18(GPR18)mRNA在脓毒症患儿外周血单个核细胞中的表达及诊断价值。方法选取中山大学附属第八医院儿科2017年10月至2019年6月收治的脓毒症患儿90例为病例组,选取体检健康儿童60例为对照组,检测两组外周血白细胞计数(WBC)和C反应蛋白(CRP)水平,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测外周血单个核细胞中miRNA-466和GPR18 mRNA相对表达量。采用受试者工作特征(ROC)曲线比较WBC、CRP及外周血单个核细胞中miRNA-466和GPR18 mRNA相对表达量对患儿脓毒症的诊断价值。结果病例组WBC、CRP水平,外周血单个核细胞中miRNA-466和GPR18 mRNA相对表达量均高于对照组(P<0.05)。病例组CRP水平(r=0.472,P<0.01),外周血单个核细胞中miRNA-466相对表达量(r=0.489,P<0.001)和GPR18 mRNA相对表达量(r=0.507,P<0.001)均与序贯器官衰竭评分(SOFA评分)呈正相关。外周血单个核细胞中miRNA-466和GPR18 mRNA表达水平呈正相关(r=0.618,P<0.001)。ROC曲线分析结果显示,CRP水平、miRNA-466和GPR18 mRNA相对表达量诊断脓毒症的曲线下面积分别为0.758(95%CI:0.669~0.817)、0.901(95%CI:0.813~0.969)和0.858(95%CI:0.761~0.917)。联合检测miRNA-466和GPR18 mRNA时诊断脓毒症的曲线下面积为0.947(95%CI:0.898~0.981),灵敏度为90.9%,特异度为93.9%。结论脓毒症患儿外周血单个核细胞中miRNA-466和GPR18 mRNA表达升高,联合检测可提高脓毒症诊断效能。

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者血清miR-223、IL-18水平变化及临床意义

目的探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)血清微小RNA-223(miR-223)、白细胞介素18(IL-18)水平变化及临床意义。方法选取OSAHS患者80例(OSAHS组),另选取同期健康者46例作为对照组(CON组),根据睡眠呼吸暂停低通气指数(AHI)对OSAHS患者进行病情程度分级(AHI≤10次/小时为轻度、10<AHI≤20次/小时为中度、AHI>20次/小时为重度)。比较两组年龄、性别、BMI、AHI、夜间最低氧饱和度(LSpO2)、氧饱和度低于90%时间占睡眠时间百分比(Ts90%)及血清miR-223、IL-18水平,比较不同病情程度OSAHS患者血清miR-223、IL-18水平,采用Logistic回归分析OSAHS的影响因素,使用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-223、IL-18水平诊断OSAHS的价值。结果OSAHS组血清IL-18及BMI、AHI、Ts90%高于CON组,而miR-223、LSpO2低于CON组(P均<0.05)。随着OSAHS患者病情程度的加重,血清IL-18水平逐渐升高,miR-223水平逐渐降低(P均<0.05)。IL-18(OR=1.853)、AHI(OR=1.828)、BMI(OR=1.719)是OSAHS的危险因素,miR-223(OR=0.569)是其保护因素(P均<0.05)。miR-223、IL-18诊断OSAHS的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.801、0.767,二者联合诊断的AUC为0.861,高于miR-223、IL-18任一单项指标(P均<0.05)。结论OSAHS患者血清中IL-18水平升高,miR-223水平降低,二者可较好地反映患者病情,联合检测可为疾病的早期识别提供帮助。

血清miR-21-3p、IL-18水平对重症急性胰腺炎患者急性肾损伤的预测价值

目的探讨血清微小核糖核酸-21-3p(miR-21-3p)、IL-18水平对重症急性胰腺炎(SAP)患者急性肾损伤(AKI)的预测价值。方法选择SAP患者195例,根据住院期间是否发生AKI分为AKI组57例、非AKI组138例。入院次日,采集清晨空腹肘静脉血,离心留取血清,采用实时荧光定量PCR技术检测血清miR-21-3p,采用ELISA法检测血清IL-18。收集所有研究对象基本病历资料(包括性别、年龄、BMI、糖尿病史、高血压史、收缩压、舒张压)、实验室检查资料[空腹血糖、TG、TC、HDL-C、LDL-C、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、胱抑素C(Cys C)]、Ranson评分,采用Logistic回归模型分析SAP患者AKI发生的危险因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清miR-21-3p、IL-18水平对SAP患者AKI发生的预测价值。结果AKI组血清miR-21-3p、IL-18水平均高于非AKI组(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析发现,miR-21-3p、IL-18、Scr、BUN、hs-CRP、Cys C、Ranson评分均为SAP患者AKI发生的独立危险因素(P均<0.05)。ROC曲线分析显示,血清miR-21-3p、IL-18水平单独和联合预测SAP患者AKI发生的曲线下面积(AUC)分别为0.786、0.769、0.858,血清miR-21-3p、IL-18水平联合预测SAP患者AKI发生的AUC高于二者单独(P均<0.05)。结论血清miR-21-3p、IL-18是SAP患者AKI发生的独立危险因素;血清miR-21-3p、IL-18水平对SAP患者AKI发生均具有一定预测价值,二者联合时预测价值更高。

胰炎消方对重症急性胰腺炎患者miR21-3p、IL-18及肾功能相关指标的影响

目的观察中药胰炎消方治疗重症急性胰腺炎(SAP)的效果及对微小核糖核酸-21-3p(miR-21-3p)、白细胞介素-18(IL-18)及肾功能相关指标的影响。方法将SAP患者90例按照随机数字表法分为治疗组与对照组各45例。对照组予以胃肠减压、营养支持,维持水/电解质酸碱平衡、静脉补液、抑制胰酶分泌等西医常规治疗,治疗组在此基础上予以中药胰炎消方口服或胃管注入,两组疗程均为7 d。比较两组腹痛、腹胀、发热等主要症状的缓解时间和肠鸣音恢复时间;比较两组治疗前后全身炎症反应综合征(SIRS)评分、改良Marshall评分、血淀粉酶、尿淀粉酶含量及血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、胱抑素C(CysC)、miR-21-3p、IL-18含量、24 h尿量。结果治疗组腹痛、腹胀、发热缓解时间及肠鸣音恢复时间均短于对照组(P<0.01);治疗后两组SIRS评分、改良Marshall评分均较治疗前显著降低(P<0.01);两组比较,治疗组SIRS评分、改良Marshall评分均低于对照组(P<0.01)。治疗后两组SCr、BUN、CysC、血淀粉酶、尿淀粉酶均显著降低(P<0.01),24 h尿量增加(P<0.01),两组比较,治疗组各项指标改善均优于对照组(P<0.01);与治疗前比较,治疗后两组血清miR-21-3p、IL-18含量均降低(P<0.01),两组比较,治疗组改善程度优于对照组(P<0.01)。结论中药胰炎消方有利于快速缓解症状,改善全身炎症反应,下调血清miR21-3p、IL-18水平,保护肾脏功能,治疗SAP效果显著。

血清miR-150、IL-18水平有助于评估脓毒症休克患者的预后

目的:探讨脓毒症休克患者血清中微小RNA-150(miR-150)、白细胞介素-18(IL-18)水平,与脓毒症休克的关系。方法:选取2017年3月-2020年3月海南医学院第一附属医院住院的脓毒症患者115例,按照病情严重程度分为脓毒症组(83例)和脓毒症休克组(32例),选取同期体检健康者120例作为对照组。根据3个月预后结果将脓毒症休克组患者分为预后良好组(23例)和预后不良组(9例)。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测所有受试者血清miR-150水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测所有受试者血清IL-18水平,Pearson分析脓毒症休克组患者miR-150、IL-18水平与实验室指标及评分的相关性,采用Logistic回归分析影响脓毒症休克患者预后的因素。结果:对照组、脓毒症组、脓毒症休克组白细胞计数(WBC)、C反应蛋白(CRP)、丙氨酸转氨酶(ALT)、降钙素原(PCT)水平依次升高,血小板计数(PLT)水平依次降低(P均<0.05);脓毒症休克组病程长于脓毒症组;天门冬氨酸转氨酶(AST)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、序贯器官功能衰竭评估(SOFA)评分、急性生理与慢性健康状态评估(APACHEⅡ)评分高于脓毒症组(P均<0.05);对照组、脓毒症组、脓毒症休克组血清miR-150表达水平依次降低,而IL-18水平依次升高(P均<0.05);脓毒症休克组患者miR-150与CRP、NLR、SOFA评分、APACHEⅡ评分、IL-18呈负相关(P均<0.05);IL-18与WBC、CRP、NLR、APACHEⅡ评分呈正相关,与PLT呈负相关(P均<0.05);与预后良好组比较,预后不良组血清miR-150表达水平更低,IL-18水平更高(P均<0.05);血清CRP、IL-18高水平及miR-150低水平是影响脓毒症休克患者预后的危险因素。结论:脓毒症休克患者血清中miR-150呈低表达、IL-18呈高表达,且与患者不良预后有一定关系。

参附注射液上调microRNA-181d-5p抑制大鼠心肌肥大及其机制

目的:研究参附注射液(SFI)改善大鼠心肌肥大的microRNA调控机制。方法:健康SD大鼠行腹主动脉缩窄(AAC)术建立心肌肥大模型,动物分成3组:SFI组(6.0m L·kg-1·d-1)、model组(6.0m L·kg-1·d-1)和Sham组(6.0m L·kg-1·d-1),腹腔注射,连续12周。造模成功大鼠心肌作micro RNA(mi R)基因芯片筛选有显著差异表达的mi Rs,Real-time RT-PCR方法检测确认候选mi R。利用生物信息学方法分析候选mi R的候选靶基因,并用RT-PCR与Western blot方法检测靶基因m RNA及其靶蛋白表达水平。在苯肾上腺素(PE)刺激建立的培养乳鼠心肌细胞肥大模型,分别给予SFI,候选mi R模拟物mi R-mimic和抑制剂mi R-inhibitor后,检测心肌细胞表面积,候选靶基因和靶蛋白表达的变化。结果:model组大鼠HW/BW及LVW/BW显著高于Sham组和SFI组(P<0.01);而SFI组HW/BW及LVW/BW与Sham组相比无显著差异;基因芯片筛选结果显示,model组与SFI组相比共有23种mi Rs差异表达显著,其中下调的有mi R-181d-5p等13种;MHC m RNA及MHC蛋白在model组大鼠心肌中过表达,而在SFI组中的表达与Sham组接近。SFI上调PE刺激的心肌细胞mi R-181d-5p水平,抑制PE刺激所致心肌细胞表面积增大;mi R-181d-5p-mimic能抑制心肌细胞MHC蛋白表达,抑制细胞表面积增大,而mi R-181d-5p-inhibitor的作用结果相反。结论:micro RNA-181d-5p具有抑制心肌肥大的作用,SFI可能通过上调或维持mi R-181d-5p的表达从而降低MHC m RNA与MHC蛋白的表达,抑制腹主动脉缩窄大鼠心肌肥大,从而改善大鼠心功能,对心肌肥大产生治疗作用。

特发性肺纤维化患者血清KL-6、CCL18和microRNA-21的表达及意义

目的分析特发性肺纤维化(IPF)患者血清中涎液化糖链抗原(KL)-6、趋化因子配体(CCL)18及微小核糖核酸(microRNA,miR)-21的表达及其与肺功能水平、病情严重程度的关系。方法选取2014年3月至2018年6月就诊的IPF患者60例为IPF组,同时收集60例健康体检者作为对照组,采用酶联免疫吸附法检测两组对象血清KL-6、CCL18蛋白表达水平,实时荧光定量PCR法检测两组对象血清miR-21表达水平,观察患者血清中上述标志物分子含量的变化;探讨其水平与肺功能指标———用力肺活量占预计值的百分比(FVC%pred)及一氧化碳弥散量占预计值的百分比(DLco%pred)间的相关性,并进一步对稳定期和急性加重期IPF患者的血清KL-6、CCL18和miR-21水平进行对比分析。结果IPF组患者血清KL-6、CCL18、miR-21水平显著高于对照组(P<0.01),且其表达水平与FVC%pred(KL-6:r=-0.47,P<0.01;CCL18:r=-0.53,P<0.01;miR-21:r=-0.50,P<0.01)、DLco%pred(KL-6:r=-0.35,P<0.01;CCL18:r=-0.48,P<0.01;miR-21:r=-0.38,P<0.01)分别呈显著负相关。与稳定期IPF患者相比,急性加重期IPF患者血清KL-6、CCL18、miR-21水平进一步升高(P=0.011、0.049、0.033)。结论IPF患者血清KL-6、CCL18和miR-21水平较正常人显著升高,且其水平高低与肺功能参数、病情严重程度之间有一定相关性,可用作病情评估、预后判定的生物学指标。

狼疮性肾炎患者血清miR-4532、miR-2861表达变化及临床意义

目的观察狼疮性肾炎(LN)患者血清miR-4532、miR-2861表达变化,并探讨其临床意义。方法选择80例LN患者,其中活动期组(SLEDAI评分≥10分)42例、稳定期组(SLEDAI评分<10分)38例,另选取同期健康人员40例作为对照组。采用逆转录-聚合酶链反应技术检测血清miR-4532、miR-2861表达,采用Pearson相关性分析血清miR-4532、miR-2861表达与IL-6、IL-18、肾小球滤过率、24 h尿蛋白定量、SLEDAI评分、补体C3、补体C4的关系,通过受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-4532、miR-2861表达对LN的诊断效能。结果活动期组、稳定期组血清miR-4532、miR-2861均较对照组低(P均<0.05),且活动期组较稳定期组低(P均<0.05)。LN活动期组患者血清miR-4532、miR-2861表达与血清IL-6、IL-18、24 h尿蛋白定量以及SLEDAI评分均呈负相关,而与肾小球滤过率呈正相关(P均<0.05)。血清miR-4532诊断LN的ROC曲线下面积为0.732(95%CI:0.651~0.834),最佳阈值为7.58,敏感度为81.14%,特异度为64.23%;miR-2861诊断LN的ROC曲线下面积为0.741(95%CI:0.623~0.802),最佳阈值为8.90,敏感度为78.35%,特异度为66.82%。结论miR-4532、miR-2861在LN患者血清中表达降低,其表达变化与患者病情进展及炎症反应相关,对LN临床诊断和病情评估具有重要的应用价值。

Rhopaladins类似物对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡的影响及其机制

目的观察Rhopaladins类似物(RPDPB)对宫颈Hela细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法取对数生长期Hela细胞,将细胞分为实验组、对照组、空白组,实验组又分为不同剂量组,不同剂量组分别以3.125、6.25、12.5、25、50、100μmol/L RPDPB干预,对照组只加DMSO培养液,空白组加入不含细胞的MEM培养液,分别于24、48、72 h采用CCK-8法检测OD值,计算细胞增殖抑制率。取对数生长期Hela细胞,将细胞分为实验组、对照组,实验组又分为不同剂量组,不同剂量组分别以12.5、25、50μmol/L RPDPB干预,对照组只加DMSO不加药,48 h后采用AnnexinV-FITC/PI双染法检测Annexin V-FITC和PI,计算细胞凋亡率。取对数生长期Hela细胞,将细胞分为实验组、对照组,实验组又分为不同剂量组,不同剂量组分别以12.5、25、50μmol/L RPDPB干预,对照组只加DMSO不加药,48 h后采用RT-PCR法检测细胞人乳头瘤病毒18 E6(HPV18 E6)、人乳头瘤病毒18 E7(HPV18 E7)、WNT2B、β-catenin mRNA和miR-145 RNA。取对数生长期Hela细胞,将细胞分为实验组、对照组,实验组又分为不同剂量组,不同剂量组分别以12.5、25、50μmol/L RPDPB干预,对照组只加DMSO不加药,48 h后采用Western blot法检测细胞WNT2B、β-catenin蛋白。结果与对照组比较,实验组细胞增殖抑制率增加,且呈时间和剂量依赖性(P均<0.05)。与对照组比较,实验组细胞早期凋亡率和晚期凋亡率增加,且呈剂量依赖性(P均<0.05)。与对照组比较,实验组HPV18 E6 mRNA、HPV18 E7 mRNA、WNT2B mRNA、β-catenin mRNA相对表达量降低,miR-145 RNA相对表达量升高,且呈剂量依赖性(P均<0.05)。与对照组比较,实验组WNT2B、β-catenin蛋白相对表达量降低,且呈剂量依赖性(P均<0.05)。结论RPDPB可抑制宫颈癌Hela细胞增殖,并诱导细胞凋亡,呈时间和剂量依懒性,作用机制可能是其通过下调HPVE6/E7 mRNA表达,导致miR-145 RNA表达上调,进而抑制下游WNT2B/β-catenin通路中WNT2B、β-catenin mRNA和蛋白表达。

非酒精性脂肪性肝病血清标志物研究进展

目的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是目前全球最流行的慢性肝脏疾病,其主要发生机制包括胰岛素抵抗和氧化应激等。不同血清标志物与NAFLD发病机制密切相关,但尚无明确的定论。本文主要就NAFLD发生发展过程中不同血清标志物的作用作一综述。

异补骨脂甲素调控miR-124对小鼠胚胎干细胞向神经细胞分化的影响

目的探讨异补骨脂甲素(isobavachin,IBA)调控微小RNA-124(miR-124)对小鼠J1胚胎干细胞向神经细胞分化的影响。方法采用qRT-PCR和免疫荧光染色分别检测IBA干预或抑制miR-124表达的J1细胞中miR-124、八聚体转录因子4(octamer transcription factor-4,OCT4)和神经微丝H(neurofilament-H, NFH)的表达。使用Targetscan在线预测、双荧光素酶报告基因和Western blot实验验证miR-124和锌指蛋白18(zinc finger and BTB domain containing 18, ZBTB18)的靶向关系。在J1细胞中转染pcDNA-ZBTB18或miR-124 mimics、ZBTB18 shRNA,免疫荧光染色检测细胞中OCT4和NFH的表达。结果 IBA可显著抑制J1细胞中OCT4蛋白表达,并上调miR-124和NFH表达;而抑制miR-124表达后所得结果相反。miR-124可靶向调控ZBTB18蛋白表达。在J1细胞中过表达ZBTB18,OCT4阳性表达率升高而NFH阳性表达率降低;敲减ZBTB18可在一定程度上减弱miR-124对IBA干预J1细胞OCT4和NFH表达的促进或抑制作用。结论 IBA能够促进J1细胞中miR-124表达,而miR-124可靶向调控ZBTB18,从而调节OCT4和NFH蛋白表达,这可能是IBA促进小鼠胚胎干细胞分化为神经细胞的作用机制。

循环长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18、微小RNA-185-5p水平与糖尿病肾脏疾病患者血管钙化的相关性分析

目的分析血清循环长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18(long non-coding RNA human leucocyte antigen complex group 18,LncRNA HCG18)、微小RNA-185-5p(microRNA-185-5p,miR-185-5p)水平与糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)患者血管钙化的相关性。方法选取2018年10月至2021年9月于上海健康医学院附属崇明医院就诊的DKD患者145例,男性73例,女性72例,依据患者血管钙化情况分为钙化组70例,其中男性38例,女性32例,年龄范围46~78岁,年龄(57.14±14.27)岁;未钙化组75例,其中男性35例,女性40例,年龄范围44~77岁,年龄(59.47±15.06)岁。另选同期健康体检者70名为对照组。荧光定量PCR法检测血清LncRNA HCG18、miR-185-5p水平;采用全自动生化分析仪测定血钙、血磷、血肌酐(serum creatinine,Scr)水平;采用酶标仪测定碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、超敏C反应蛋白(high-sensitivity c-reactive protein,hs-CRP)及甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)水平;Pearson法分析DKD合并血管钙化患者血清LncRNA HCG18、miR-185-5p水平与血管钙化相关指标的相关性及血清LncRNA HCG18与miR-185-5p的相关性;受试者工作特征曲线分析血清LncRNA HCG18、miR-185-5p水平对DKD合并血管钙化的诊断价值。结果钙化组、未钙化组血清LncRNA HCG18、血钙、血磷、Scr、ALP、hs-CRP及PTH均高于对照组(P<0.05),血清miR-185-5p水平低于对照组(P<0.05);钙化组血清LncRNA HCG18、血钙、血磷、Scr、ALP、hs-CRP及PTH均高于未钙化组(P<0.05),血清miR-185-5p水平低于未钙化组(P<0.05)。DKD合并血管钙化患者血清LncRNA HCG18与miR-185-5p呈负相关(P<0.05),血清LncRNA HCG18与血钙、血磷、Scr、ALP、hs-CRP及PTH均呈正相关(P<0.05),血清miR-185-5p与血钙、血磷、Scr、ALP、hs-CRP及PTH均呈负相关(P<0.05)。血清LncRNA HCG18、miR-185-5p水平及二者联合诊断DKD合并血管钙化的曲线下面积分别为0.820、0.758、0.880。结论DKD血管钙化患者血清LncRNA HCG18呈高表达、miR-185-5p呈低表达,二者均对DKD患者血管钙化有一定的诊断价值,联合检测诊断价值更高。

微RNA18与B细胞易位基因2在肝癌细胞中差异表达相关性的研究

目的研究微RNA18（miR18）对肝癌细胞HepG2基因表达谱的影响，预测其靶基因，初步探讨miR-18与抗增殖基因B细胞易位基因2（BTG2）两者在肝癌发生过程中差异表达的相关性。方法利用基因表达谱芯片技术筛选HepG2的微RNA差异表达谱，应用生物信息学方法预测表达明显上调的miR-18的靶基因，初步筛选出直接调控的靶基因为抗增殖基因BTG2；应用RT-PCR和Northernblot法分析BTG2正常与肝癌组织中的表达情况。结果生物信息学分析结果显示miR-18分子调控的下游靶基因有609个，涉及细胞增殖、分化和凋亡、转录调节等众多生理和病理过程；抗增殖基因BTG2在肝癌组织和细胞中呈明显低表达。结论miR-18在肝癌细胞中表达明显上调，并可能负性调控抗增殖基因BTG2在肝癌细胞中的表达，两者共同在肝癌细胞增殖方面发挥着重要作用。