miR-338-3p靶向核因子κB受体活化因子配体影响牙槽骨成骨细胞增殖及凋亡

背景:miR-338-3p能够抑制破骨细胞分化,下调核因子κB受体活化因子配体水平能够促进骨形成。然而miR-338-3p是否通过调控核因子κB受体活化因子配体表达影响牙槽骨成骨细胞增殖、凋亡尚不清楚。目的:探究miR-338-3p靶向核因子κB受体活化因子配体对牙槽骨成骨细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法:分离人牙槽骨成骨细胞,对其进行细胞转染及Wnt-C59(Wnt/β-catenin通路抑制剂)处理,分为转染对照组、miR-338-3p组、miR-338-3p+对照组、miR-338-3p+核因子κB受体活化因子配体组和miR-338-3p+Wnt-C59组。双荧光素酶实验验证miR-338-3p对核因子κB受体活化因子配体的调控作用;CCK-8、EdU染色检测细胞增殖水平;流式细胞术检测细胞周期和凋亡水平;RT-qPCR检测细胞miR-338-3p、核因子κB受体活化因子配体、Wnt-3a、β-catenin、糖原合酶激酶3βmRNA表达水平;Western Blot检测细胞核因子κB受体活化因子配体、增殖细胞核抗原、Ki67、细胞周期蛋白D1、Bcl-2、Bax、天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶3、Wnt-3a、β-catenin、糖原合酶激酶3β蛋白表达水平。结果与结论:①miR-338-3p靶向调控核因子κB受体活化因子配体;②过表达miR-338-3p后,细胞存活率、EdU阳性细胞率、S期细胞比例升高,细胞凋亡率降低,miR-338-3p、增殖细胞核抗原、Ki67、细胞周期蛋白D1、Bcl-2、Wnt-3a、β-catenin mRNA和蛋白水平升高,Bax、天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶3、核因子κB受体活化因子配体、糖原合酶激酶3βmRNA和蛋白水平降低(均P<0.05);③过表达核因子κB受体活化因子配体或Wnt-C59处理能够减弱过表达miR-338-3p对细胞增殖、凋亡的影响(均P<0.05);④结果表明,miR-338-3p靶向核因子κB受体活化因子配体表达可促进牙槽骨成骨细胞增殖,并抑制细胞凋亡,其可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路发挥作用。

miR-338-3p通过靶向PPM1B促进口腔癌细胞凋亡

目的探讨miR-338-3p在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的作用及其调节细胞增殖、迁移和凋亡的机制。方法以正常口腔组织或成人牙龈成纤维细胞(HGF)作为对照组,RT-qPCR法检测OSCC组织或OSCC细胞(TSCCA,CAL-27,Tb3.1)中miR-338-3p和PPM1B mRNA的表达情况;免疫组化法检测OSCC组织与正常组织PPM1B表达量;过表达miR-338-3p后,MTT法检测OSCC细胞增殖、Annexin V-FITC-PI双染试剂盒检测OSCC的凋亡;Western blot法检测PPM1B与凋亡相关蛋白Bax和Claved-caspase 3、Bcl-2的表达;采用生物信息学软件Target scan网站和荧光素酶检测法探索miR-338-3p和PPM1B潜在的靶向关系。通过敲除和过表达PPM1B探索其对OSCC细胞增殖、迁移和凋亡的影响。结果OSCC组织和细胞中miR-338-3p表达下调,而PPM1B mRNA与蛋白水平均升高(P<0.05)。过表达miR-338-3p可抑制OSCC细胞的增殖并诱导细胞凋亡(P<0.05)。Western blot检测显示,miR-338-3p可以促进Bax和Claved-caspase 3并抑制PPM1B、Bcl-2的表达(P<0.05)。敲除PPM1B也抑制了细胞的生长并诱导细胞凋亡(P<0.05)。荧光素酶报告基因检测显示PPM1B和miR-338-3p之间有直接结合(P<0.05)。过表达PPM1B部分逆转了miR-338-3p对OSCC细胞增殖、凋亡的作用(P<0.05)。结论miR-338-3p在OSCC患者和OSCC细胞系中表达下调。过表达miR-338-3p通过靶向PPM1B,抑制OSCC细胞增殖并诱导细胞凋亡。

MicroRNA-338-3p通过下调SMO表达抑制结直肠癌细胞的侵袭与迁移

目的探讨microRNA-338-3p(miR-338-3p)对结直肠癌细胞侵袭与迁移能力的影响及其调控机制。方法脂质体分别转染miR-338-3p前体(pre-miR-338-3p)和miR-338-3p特异性抑制剂(miR-338-3p-inhibitor)至人结直肠癌SW620及SW480细胞系中,应用实时荧光定量PCR(Real-time RT-PCR)检测细胞中miR-338-3p表达状况,运用半定量RT-PCR及Westernblot分析Smoothened(SMO)mRNA及蛋白表达状况,Transwell侵袭、迁移实验检测转染前后细胞体外侵袭迁移能力;在经anti-SMO-siRNA预先处理的SW480细胞中转染miR-338-3p-inhibitor,检测转染细胞中SMO蛋白的表达变化以及侵袭能力的改变。结果通过生物信息学网站预测SMO可能是miR-338-3p的作用靶基因;SW620细胞中miR-338-3p表达水平较SW480细胞减低,而SMO蛋白增高。转染pre-miR-338-3p至SW620细胞,miR-338-3p表达上调,SMO蛋白表达降低,且肿瘤细胞的侵袭及迁移能力下降;而转染miR-338-3p-inhibitor至SW480细胞后,miR-338-3p表达下降,SMO蛋白表达上升,肿瘤细胞侵袭、迁移能力增强,且此种增强效应可被an-ti-SMO-siRNA所部分逆转,说明miR-338-3p确实是通过抑制SMO而发挥抗癌作用。结论 MiR-338-3p通过下调SMO表达而抑制结直肠癌细胞侵袭与迁移。

血清miR-338-3p和miR-495-3p水平在重症腺病毒肺炎患儿诊断及病情评估中的应用

目的探讨血清微小RNA(miR)-338-3p和miR-495-3p水平在重症腺病毒肺炎患儿诊断及病情评估中的应用。方法选取2020年11月至2022年11月在沧州市中心医院接受治疗的腺病毒肺炎患儿130例作为观察组,根据患儿疾病的严重程度分为轻症肺炎组(n=90)和重症肺炎组(n=40),选取同期在沧州市中心医院检查的130例健康儿童为对照组,比较观察组和对照组、不同病情严重程度患儿血清miR-338-3p和miR-495-3p水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-338-3p和miR-495-3p对重症腺病毒肺炎的诊断价值。采用多因素Logistic回归分析重症腺病毒肺炎的影响因素。结果观察组患儿血清miR-338-3p水平比对照组低,miR-495-3p水平比对照组高(P<0.05)。轻症组和重症组电解质紊乱、循环系统并发症发生率及miR-338-3p水平、miR-495-3p水平、序贯器官衰竭评分和Murray肺损伤评分比较,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-338-3p、miR-495-3p辅助诊断重症腺病毒肺炎的曲线下面积(AUC)分别是0.745(95%CI 0.662~0.828)、0.774(95%CI 0.685~0.863),二者联合诊断的AUC为0.884(95%CI 0.821~0.946),均优于各项指标单独检测(Z=2.593、1.963,P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,miR-495-3p是影响重症腺病毒肺炎发生的危险因素,miR-338-3p为保护因素(P<0.05)。结论重症腺病毒肺炎患儿血清miR-338-3p水平降低,miR-495-3p水平升高,且二者联合检测对重症腺病毒肺炎有一定的诊断价值,可作为评估重症腺病毒肺炎病情严重程度的血清指标。

MicroRNA-338-3p真核表达载体的构建及其对胃癌细胞SGC-7901增殖的影响

目的构建microR-338-3p(miR-338-3p)过表达载体并探究其对人胃癌SGC-7901细胞系体外增殖的影响。方法以pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR真核表达载体为基础,经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切和纯化后与人工合成miR-338-3p的寡聚核苷酸进行连接,转化至E.Coli Top10后,经过DNA测序、BLAST检测及验证;将构建成功的载体瞬时转染入SGC-7901细胞系中,应用Real-time PCR检测miR-338-3p的表达水平,利用MTT法检测细胞增殖的改变。结果测序验证成功构建了miR-338-3p的真核表达载体;瞬时转染SGC-7901细胞后miR-338-3p表达水平有显著增加,能够抑制SGC-7901细胞的体外增殖。结论成功构建了miR-338-3p的真核表达载体,获得了瞬时表达miR-338-3p的人胃癌SGC-7901细胞系,初步证实miR-338-3p过表达可抑制肿瘤细胞的增殖。

血清miR-338-3p联合肺部超声评分预测急性呼吸窘迫综合征新生儿的预后价值

目的探讨血清miR-338-3p、肺部超声评分(LUS)对新生儿呼吸窘迫综合征(ARDS)预后价值。方法选择2019年5月至2022年5月在深圳市宝安区石岩人民医院收治的120例ARDS新生儿作为ARDS组,其中男性76例,女性44例;胎龄28~40周,平均胎龄32.32周;出生体质量1.68~3.89 kg,平均出生体质量2.18 kg;新生儿Apgar评分4~8分,平均Apgar评分6.37分;分娩方式,顺产43例,剖宫产57例;病因,脓毒症10例,早产29例,肺炎25例,胎粪吸入综合征21例,其他15例。选择同时期50例正常新生儿为对照组,其中男性34例,女性16例;胎龄31~40周,平均胎龄33.04周;出生体质量1.94~4.02 kg,平均出生体质量2.74 kg;分娩方式,顺产17例,剖宫产33例。ARDS新生儿根据预后分为生存组与死亡组,根据胸部X射线片结果分为轻度组与重度组。实时定量聚合酶链式反应(qPCR)检测血浆miR-338-3p水平,进行床旁肺部LUS及新生儿急性生理学评分围生期补充Ⅱ(SNAPPE-Ⅱ)评分。比较各组血浆miR-338-3p水平、LUS。Pearson相关性分析SNAPPE-Ⅱ与miR-338-3p、LUS的相关性。受试者工作特性(ROC)曲线分析miR-338-3p、LUS对ARDS新生儿死亡的预测价值。采用Logistic回归分析法分析miR-338-3p水平、LUS与ARDS新生儿预后的关系。结果ARDS新生儿LUS高于正常新生儿[(29.45±3.42)分vs(10.04±2.01)分],血浆miR-338-3p水平低于正常新生儿[(10.04±2.01)分vs(1.12±0.11)分](P<0.001)。重度组LUS、SNAPPE-Ⅱ评分高于轻度组[(34.27±4.25)分vs(18.97±2.11)分、(31.84±3.52)分vs(18.56±2.85)分],miR-338-3p水平低于轻度组[(0.28±0.02)vs(0.96±0.04)](P<0.001)。SNAPPE-Ⅱ评分与LUS呈正相关(r=0.971,P<0.001),与miR-338-3p水平呈负相关(r=-0.918,P<0.001)。死亡组新生儿LUS高于生存组,miR-338-3p水平低于生存组[(37.02±3.63)分vs(20.77±3.02)分、(0.33±0.02)vs(0.75±0.02)。P<0.001]。LUS评分、血浆miR-338-3p及两者联合预测ARDS新生儿预后的曲线下面积(AUC)分别为0.851、0.835、0.929。血浆miR-338-3p、LUS是影响ARDS新生儿预后的危险因素(均P<0.05)。结论ARDS新生儿血清miR-338-3p低表达,LUS升高,两者可预测ARDS新生儿病情程度、预后。

甲状腺乳头状癌组织中miR-338-3p、PLCD3表达及其与病理参数、上皮—间质转化、预后的关系

目的探讨甲状腺乳头状癌(PTC)组织中微小核糖核酸-338-3p(miR-338-3p)、磷脂酶Cδ-3(PLCD3)表达及与病理参数、上皮—间质转化(EMT)、预后的关系。方法选取2016年1月—2020年12月商洛市中心医院乳甲外科收治接受手术切除的PTC患者152例,取其癌组织及对应癌旁组织,采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测miR-338-3p、PLCD3 mRNA表达,免疫组织化学法检测EMT相关蛋白[N-钙黏蛋白(N-Cad)、E-钙黏蛋白(E-Cad)、波形蛋白(VIM)];分析miR-338-3p、PLCD3 mRNA表达与PTC病理参数的关系;通过Targetscan数据库预测miR-338-3p与PLCD3的结合位点,采用Pearson法和二列相关性分析miR-338-3p与PLCD3 mRNA及二者与EMT相关蛋白在PTC组织中表达的相关性;根据PTC组织miR-338-3p、PLCD3 mRNA表达均值分为高/低miR-338-3p、PLCD3 mRNA表达组,通过Kaplan-Meier法绘制高/低miR-338-3p、PLCD3 mRNA表达PTC患者无病生存率(DFS)生存曲线;通过Cox回归分析PTC患者DFS的影响因素。结果与癌旁组织比较,PTC组织miR-338-3p和E-Cad蛋白阳性表达率降低,PLCD3 mRNA和N-Cad、VIM蛋白阳性表达率升高(t/χ^(2)/P=32.875/<0.001、15.575/<0.001、37.351/<0.001、21.984/<0.001、16.604/<0.001);miR-338-3p与PLCD3 mRNA在PTC组织中表达呈负相关(r/P=-0.712/<0.001)。PTC组织中miR-338-3p与N-Cad、VIM蛋白阳性表达呈负相关,与E-Cad蛋白阳性表达呈正相关(r/P=-0.642/<0.001、-0.617/<0.001、0.622/<0.001);PTC组织中PLCD3 mRNA与N-Cad、VIM蛋白阳性表达呈正相关,与E-Cad蛋白阳性表达呈负相关(r/P=0.657/<0.001、0.624/<0.001、-0.632/<0.001)。不同TNM分期、淋巴结转移的PTC组织miR-338-3p、PLCD3 mRNA表达差异有统计学意义(F/t/P=30.778/<0.001、3.430/0.001)。miR-338-3p高表达组3年DFS高于低表达组,PLCD3 mRNA高表达组3年DFS低于低表达组(χ^(2)/P=15.615/<0.001、16.088/<0.001)。TNM分期Ⅲ期、淋巴结转移、PLCD3 mRNA≥1.83为PTC患者DFS的独立危险因素[HR(95%CI)=3.127(1.361~7.604)、2.546(1.115~5.817)、2.854(1.178~6.919)],miR-338-3p≥0.57为独立保护因素[HR(95%CI)=0.306(0.116~0.804)]。结论PTC组织中miR-338-3p低表达和PLCD3 mRNA高表达,与TNM分期、淋巴结转移、EMT和预后有关,可能成为PTC诊治新靶点。

circ_0061140靶向miR-338-3p调控多发性骨髓瘤细胞的增殖和凋亡

目的:研究环状RNA 0061140(circ_0061140)对多发性骨髓瘤Sko-007细胞增殖和凋亡的影响和调控机制。方法:采用生物信息学数据库预测circ_0061140的靶miRNA,双荧光素酶报告实验证实circ_0061140与miR-338-3p靶向关系。实时定量PCR分析健康对照者和多发性骨髓瘤病人外周血中circ_0061140和miR-338-3p表达。将circ_0061140小干扰RNA(si-circ_0061140)、miR-338-3p模拟物、si-circ_0061140联合miR-338-3p抑制剂分别转染Sko-007,采用CCK-8法、流式细胞术分析干扰circ_0061140或过表达miR-338-3p或同时抑制circ_0061140和miR-338-3p对Sko-007细胞增殖、凋亡的影响。蛋白质印迹法分析B细胞淋巴瘤-2蛋白(Bcl-2)和Bcl相关x蛋白(Bax)表达变化。结果:miR-338-3p是circ_0061140达靶基因。circ_0061140在多发性骨髓瘤病人血清中的表达显著高于健康对照者(P<0.01),miR-338-3p在多发性骨髓瘤病人血清中的表达显著低于健康对照者(P<0.01)。干扰circ_0061140表达后Sko-007细胞增殖活力、Bcl-2表达显著降低(P<0.01),miR-338-3p和Bax表达、细胞凋亡率显著升高(P<0.01)。过表达miR-338-3p后Sko-007细胞增殖活力、Bcl-2表达显著降低(P<0.01),细胞凋亡率、Bax表达显著升高(P<0.01)。与干扰circ_0061140比较,同时抑制circ_0061140和miR-338-3p表达后Sko-007细胞增殖活力、Bcl-2表达显著升高(P<0.01),细胞凋亡率、Bax表达显著降低(P<0.01)。结论:circ_0061140通过靶向miR-338-3p促进多发性骨髓瘤细胞增殖,抑制细胞凋亡,在多发性骨髓瘤中具有致癌作用。

肠易激综合征患者血清miR-219a-5p和miR-338-3p水平与肠道微生物及炎症因子水平的关系

目的探讨肠易激综合征(IBS)患者血清微小RNA-219a-5p(miR-219a-5p)和微小RNA-338-3p(miR-338-3p)水平与肠道微生物及炎症因子水平的关系。方法选取2019年10月至2022年10月湖北民族大学附属民大医院收治的90例IBS患者作为观察组,另选取同期在该院体检的90例健康者作为对照组。比较两组血清miR-219a-5p和miR-338-3p水平、肠道微生物数量及炎症因子[高敏C-反应蛋白(hs-CRP)、白细胞计数(WBC)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1α、IL-1β、IL-10]水平。采用Pearson相关分析IBS患者血清miR-219a-5p、miR-338-3p水平与肠道微生物数量、炎症因子水平及Chao 1指数的相关性。结果观察组血清miR-219a-5p、miR-338-3p水平及Chao I指数明显低于对照组(P<0.05)。观察组双歧杆菌、乳酸杆菌数量低于对照组,大肠埃希菌、链球菌数量高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-1α、IL-1β水平及WBC高于对照组,IL-10水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,IBS患者血清miR-219a-5p、miR-338-3p水平与双歧杆菌、乳酸杆菌数量及IL-10水平均呈正相关(P<0.05),与大肠埃希菌、链球菌数量及hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-1α、IL-1β、WBC及Chao 1指数均呈负相关(P<0.05)。结论IBS患者血清miR-219a-5p、miR-338-3p水平与肠道微生物数量及炎症因子水平有相关性,可能成为IBS诊断和治疗的血清指标。

调控circARF3/miR-338-3p对ox-LDL诱导的血管内皮细胞损伤的影响

目的:探讨调控circARF3/miR-338-3p对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管内皮细胞损伤的影响及其可能作用机制。方法:采用双荧光素酶报告实验验证circARF3与miR-338-3p的靶向关系。人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)分为6组:空白对照组(未处理)、模型组(50 mg/L ox-LDL处理24 h)、pcDNA组、pcDNA-circARF3组、pcDNA-circARF3+miR-NC组、pcDNA-circARF3+miR-338-3p组,后4组基于脂质体转染法分别转染相应质粒后再用ox-LDL处理24 h。采用MTT法、Annexin V-FITC/PI双染法分别检测细胞增殖及凋亡,Western blot法检测细胞中Bax、Bcl-2蛋白的表达,采用试剂盒检测培养上清液中SOD、LDH活性和MDA的水平,ELISA法检测IL-6、TNF-α水平。结果:circARF3可靶向结合、负向调控miR-338-3p。与空白对照组比较,模型组增殖抑制率、凋亡率和Bax蛋白表达均升高,而Bcl-2蛋白表达降低,培养上清液中SOD活性降低,MDA水平和LDH活性升高,IL-6、TNF-α水平升高(P<0.05);与模型组、pcDNA组相比,pcDNA-circARF3组增殖抑制率、凋亡率和Bax蛋白表达减少,Bcl-2蛋白表达提高,培养上清液中SOD活性升高,MDA水平和LDH活性降低,IL-6、TNF-α水平降低(P<0.05);与pcDNA-circARF3+miR-NC组比较,pcDNA-circARF3+miR-338-3p组增殖抑制率、凋亡率和Bax蛋白表达均升高,Bcl-2蛋白表达降低,培养上清液中SOD活性降低,MDA水平和LDH活性升高,IL-6、TNF-α水平升高(P<0.05)。结论:circARF3过表达可能通过抑制miR-338-3p削弱ox-LDL引发的血管内皮细胞损伤。

未破裂颅内动脉瘤病人血清miR-338-3p表达变化及临床意义

目的:分析未破裂颅内动脉瘤(UIAs)病人血清微小RNA-338-3p(miR-338-3p)的表达情况及其临床意义。方法:选取住院的UIAs病人105例作为观察组,另选取同期无脑动脉瘤的常规体检者100名作为对照组。UIAs病人入院后1 d、对照组体检当日的清晨空腹肘静脉血,检测血清miR-338-3p、血清基质金属蛋白酶2(MMP-2)水平,分析血清miR-338-3p、MMP-2表达与UIAs病人临床病理特征的关系,采用Pearson相关分析UIAs病人血清miR-338-3p与MMP-2的相关性。结果:观察组血清miR-338-3p、MMP-2水平均高于对照组(P<0.01和P<0.05)。不同动脉瘤直径及动脉瘤数目病人血清miR-338-3p、MMP-2水平差异均有统计学意义(P<0.05~P<0.01)。Pearson相关分析显示,UIAs病人血清miR-338-3p与MMP-2呈显著正相关关系(P<0.01)。结论:UIAs病人血清miR-338-3p、MMP-2水平均高于对照组,二者呈正相关,且均与病人动脉瘤直径和数目有关。

MicroRNA-338-3p在结直肠癌中的表达及其临床意义

背景与目的:MicroRNA(miRNA,miR)是一类可负性调控基因表达的非编码小RNA,能通过与mRNA分子相互作用阻遏蛋白质翻译或导致RNA降解;且在肿瘤的发生、发展中扮演着重要的角色。本研究旨在探讨microRNA-338-3p(miR-338-3p)在结直肠癌与癌旁组织中差异表达状况及其与临床病理特征和预后之间的关系。方法:选取南方医院2008年9—11月间经手术切除的原发性结直肠癌标本40例,完善相关病理资料;常规抽提肿瘤及对照癌旁组织中总RNA,应用实时荧光定量PCR检测标本中miR-338-3p表达状况,并分析其与临床病理特征及预后的关系。结果:40例结直肠癌与癌旁组织相比,miR-338-3p表达明显下调(0.122 6±0.087 3 vs0.905 8±0.410 5),差异有统计学意义(P<0.01);miR-338-3p表达水平与肿瘤TNM分期(P=0.031)、浸润深度(P=0.001)以及分化程度(P=0.042)有关;miR-338-3p表达水平越低,其3年无进展生存率及总生存率越低。结论:MiR-338-3p可能作为"抑癌基因"参与了结直肠癌的发生、发展,并可作为结直肠癌预后判断的新的生物标志物。

胃癌组织中miR-338-3p、PTP1B的表达观察及患者预后影响因素分析

目的观察胃癌组织中微小RNA-338-3p(miR-338-3p)、蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)的表达变化,并分析患者预后影响因素。方法接受手术治疗的胃癌患者89例,术中分别留取胃癌及癌旁组织,采用实时荧光PCR法检测上述组织miR-338-3p、PTP1B;Spearman相关性分析法分析胃癌组织中miR-338-3p与PTP1B表达的相关性,另分析miR-338-3p、PTP1B表达与胃癌病理参数的关系;Kaplan-Meier曲线分析不同miR-338-3p、PTP1B表达水平胃癌患者术后3年累积生存率,多因素Cox回归分析法分析胃癌患者预后不良的影响因素。结果胃癌组织中miR-338-3p表达水平低于癌旁组织,PTP1B表达水平高于癌旁组织(P均<0.05)。胃癌组织中miR-338-3p与PTP1B表达水平呈负相关(P<0.05)。miR-338-3p、PTP1B表达与胃癌TNM分期、浸润深度、淋巴结转移相关(P均<0.05)。miR-338-3p高表达组(43例,≥0.87)、miR-338-3p低表达组(46例,<0.87)3年累积生存率分别为76.74%(33/43)、47.83%(22/46),两组比较,P<0.05;PTP1B高表达组(45例,≥1.05)、PTP1B低表达组(44例,<1.05)3年累积生存率分别为44.44%(20/45)、79.55%(35/44),两组比较,P<0.05。单因素分析显示,年龄≥60岁、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、浸润深度T3~T4、淋巴结转移及PTP1B表达水平、miR-338-3p表达水平是胃癌患者预后不良的影响因素。多因素分析显示,胃癌患者预后不良的独立风险因素是TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移、高PTP1B表达水平,预后不良的独立保护因素是高miR-338-3p表达水平(P均<0.05)。结论胃癌组织中miR-338-3p表达水平降低,PTP1B表达水平升高,两者均与胃癌TNM分期、浸润深度、淋巴结转移相关,高PTP1B表达水平是胃癌患者预后不良的独立风险因素,高miR-338-3p表达水平是胃癌患者预后不良的独立保护因素,PTP1B和miR-338-3p可能作为患者术后预后的评估指标。

卵巢上皮性癌组织中miR-338-3p的表达

目的:检测微小RNA-338-3p(miR-338-3p)在卵巢上皮性癌组织中的表达情况,探讨其在卵巢癌发生发展中的作用。方法:采用qRT-PCR检测20例正常卵巢组织、20例良性卵巢上皮性肿瘤组织和65例卵巢上皮性癌组织中miR-338-3p的表达情况,分析卵巢上皮性癌与组织中miR-338-3p表达与临床病理指标的关系,Kaplan-Meier法分析miR-338-3p表达对卵巢癌患者生存的影响。结果:卵巢上皮性癌组织中miR-338-3p的表达显著低于正常卵巢组织和良性卵巢上皮性肿瘤组织(P<0.05)。临床分期晚、组织级别高、有淋巴结转移的卵巢上皮性癌组织中miR-338-3p表达低(P<0.05)。miR-338-3p表达水平相对较低的卵巢上皮性癌患者的总体生存率和无进展生存期明显短于miR-338-3p表达水平相对较高的患者(P<0.05)。结论:miR-338-3p低表达与卵巢癌患者预后不良有关,可作为卵巢癌预后的标记物。

miR-338-3p和MACC1基因在卵巢上皮性癌(EOC)组织中的表达及其意义

目的探讨微RNA-338-3p(miR-338-3p)和MET转录调剂因子MACC1在卵巢上皮性癌(epithelial ovariancancer,EOC)组织中的表达及其临床意义。方法采用实时荧光定量PCR技术检测20例正常卵巢组织、20例卵巢良性上皮性肿瘤组织和65例EOC组织中miR-338-3p和 MACC1 基因的表达情况,分析二者表达的相关性及其与EOC临床病理指标的关系,Log-rank和Cox回归分析影响EOC患者复发和死亡的危险因素,Kaplan-Meier法分析miR-338-3p和MACC1表达对EOC患者生存的影响。结果 EOC组织中miR-338-3p和 MACC1 基因的表达分别为0.331±0.038和0.774± 0.025 ,与正常卵巢组织和良性卵巢肿瘤组织中的表达差异有统计学意义( F=77.916,P<0.001;F=77.945,P <0.001),不同性质卵巢组织中miR-338-3p和MACC1的表达呈明显负相关( r=-0.968,P <0.001)。在EOC中,临床分期越晚、组织级别越高、有淋巴结转移的癌组织中miR-338-3p表达越低、MACC1表达越高。Log-rank单因素分析显示miR-338-3p低表达与EOC患者的复发( P =0.038,HR=4.139,95%CI:1.271~8.078)和死亡( P =0.008,HR=3.007,95%CI:1.217~7.431)相关。与其他患者相比,miR-338-3p低表达且MACC1高表达的EOC患者的总体生存率和无进展生存率最低(χ 2= 16.960,P=0.001;χ 2=18.930,P =0.000)。结论 miR-338-3p低表达和MACC1高表达可能与EOC患者预后不良相关,二者可能共同参与EOC的进展和复发。

卵巢上皮性癌细胞中miR-338-3p过表达对MACC1表达及细胞迁移和侵袭的影响

目的:探讨卵巢上皮性癌OVCAR-3和OVCAR-8细胞中miR-338-3p过表达对MET转录调节因子(MACC1)表达及细胞迁移和侵袭的影响。方法:在线医学数据库检索miR-338-3p在卵巢上皮性癌组织中的表达,预测其下游靶基因,双荧光素酶报告实验验证其靶基因;miR-338-3p和MACC1过表达慢病毒载体及阴性对照慢病毒载体分别转染OVCAR-3和OVCAR-8细胞,Transwell实验分析其对OVCAR-3和OVCAR-8迁移和侵袭的影响,Western blot法检测经典Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达的影响。结果:miR-338-3p在上皮性卵巢癌组织中的表达低于正常卵巢组织,MACC1是miR-338-3p下游的靶基因之一。过表达MACC1可促进OVCAR-3和OVCAR-8细胞的迁移和侵袭(P<0.05),而过表达miR-338-3p可抑制OVCAR-3和OVCAR-8细胞的迁移和侵袭(P<0.05),也可抑制MACC1、Wnt3a和p-LRP6蛋白的表达(P<0.05)。结论:miR-338-3p可能通过调节MACC1和经典Wnt/β-catenin通路影响卵巢上皮性癌细胞的迁移和侵袭。

miR-338-3p在恶性肿瘤中的表达异常及其表观遗传组蛋白的修饰位点

目的探讨不同种类肿瘤中miR-338-3p表达谱及其表达异常的表观遗传修饰调控机制。方法生物信息学大数据库(TCGA Pan-Cancer)分析miR-338-3p在15种不同种类肿瘤组织中的表达谱;以胃癌为研究对象,分析数据库中45例正常胃组织和366例胃癌组织中miR-338-3p表达情况;CRCH37数据库预测miR-338-3p上游启动子区组蛋白修饰位点;利用染色质免疫共沉淀获取组蛋白结合的DNA,PCR扩增miR-338-3p启动子区片段,凝胶电泳验证PCR产物。结果 miR-338-3p在包括食道癌(ESCA)等不同种类肿瘤中表达异常,其中ESCA、头颈部鳞状细胞癌(HNSC)、肾嫌色细胞癌(KICH)、肾乳头状肾细胞癌(KIRP)、肺鳞癌(LUSC)和甲状腺癌(THCA)中表达显著下调(P<0.05),而在结肠腺癌(COAD)、肾透明细胞癌(KIRC)和肝细胞肝癌(LIHC)表达显著上调(P<0.05);366例胃癌组织中miR-338-3p表达普遍下调;染色质免疫共沉淀结合PCR证实组蛋白H3K9m2和H3K4m3是可能引起miR-338-3p下调的两个修饰位点。结论 miR-338-3p在胃癌中表达下调,组蛋白H3K9和H3K4甲基化修饰是潜在原因。

miR-338-3p对甲状腺乳头状癌细胞系TPC-1增殖、侵袭、迁移和上皮-间质转化的调控作用

目的探讨微小RNA-338-3p(miR-338-3p)过表达靶向沉默信息调节因子(SIRT)6对人甲状腺乳头状癌细胞系TPC-1增殖、侵袭、迁移和上皮-间质转化(EMT)的影响。方法采用荧光素酶报告实验分析miR-338-3p与SIRT6的靶向关系。构建SIRT6 pcDNA载体过表达SIRT6,将miR-338-3p mimic与pcDNA-SIRT6单独或联合转染至TPC-1细胞,根据转染质粒的不同分为6组:对照组(不作处理)、mimic-NC组(转染mimic-NC)、miR-338-3p mimic组(转染miR-338-3p mimic)、pcDNA-SIRT6组(转染pcDNA-SIRT6)、mimic-NC+pcDNA-SIRT6组(共转染mimic-NC和pcDNA-SIRT6)和miR-338-3p mimic+pcDNA-SIRT6组(共转染miR-338-3p mimic和pcDNA-SIRT6)。分别检测各组TPC-1细胞的克隆形成率、侵袭细胞数、划痕愈合率及上皮型钙黏蛋白(E-cad)、神经型钙黏蛋白(N-cad)和波形蛋白的表达量。结果miR-338-3p的靶基因为SIRT6。与对照组比较,miR-338-3p mimic组克隆形成率、侵袭细胞数和划痕愈合率显著降低(P<0.05),E-cad蛋白表达显著升高(P<0.05),N-cad、波形蛋白表达显著降低(P<0.05);pcDNA+SIRT6组克隆形成率、侵袭细胞数和划痕愈合率显著升高,E-cad蛋白表达水平显著降低(P<0.05),N-cad、波形蛋白表达显著升高(P<0.05)。与pcDNA-SIRT6组比较,miR-338-3p mimic+pcDNA-SIRT6组克隆形成率、侵袭细胞数、划痕愈合率显著降低(P<0.05),E-cad蛋白表达显著升高(P<0.05),N-cad、波形蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论miR-338-3p过表达靶向SIRT6可抑制TPC-1细胞的增殖、侵袭、迁移和EMT。

99Tc-MDP通过miR-338-3p靶向下调RANKL抑制破骨细胞活性机制研究

目的探究99Tc-MDP通过miR-338-3p调控RANKL影响破骨细胞活性进而缓解骨质疏松发生的分子机制。方法经药物处理细胞后,通过qRT-PCR检测破骨细胞(osteoporosis-derived osteoclast,OC)中miR-338-3p以及破骨细胞活性标志物CD51和MMP-9的表达;采用CCK-8、双荧光素酶报告基因和Western blotting检测OC细胞存活率、细胞增殖活力以及miR-338-3p与RANKL之间的靶向调节关系。结果99Tc-MDP抑制OC细胞存活及CD51和MMP-9的表达;99Tc-MDP上调miR-338-3p同时下调RANKL;双荧光素酶报告基因以及Western blotting结果证实miR-338-3p靶向下调RANKL;进一步实验表明,99Tc-MDP通过上调miR-338-3p进而抑制RANKL表达从而抑制OC细胞增殖及活性。结论99Tc-MDP通过上调miR-338-3p从而下调RANKL抑制破骨细胞活性,进而缓解骨质疏松发生。

miR-338-3p调控MORC4促进宫颈癌细胞紫杉醇化疗敏感性

目的探究miR-338-3p通过调控MORC4表达对宫颈癌细胞紫杉醇(taxol,TAX)化疗敏感性的影响。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-338-3p的表达水平;MTT检测宫颈癌紫杉醇耐药细胞株(HeLa/TAX)细胞增殖活力;Transwell检测HeLa/taxol细胞侵袭能力;Annexin V-FITC/PI检测HeLa/TAX细胞凋亡水平;免疫印迹蛋白(Western blotting)检测HeLa/TAX细胞中MORC家族的CW型锌指(4Microrchidia4,MORC4)表达水平。结果miR-338-3p在宫颈癌细胞中异常低表达,且在TAX耐药细胞HeLa/TAX中表达较亲本HeLa细胞更低;过表达miR-338-3p可上调TAX促进HeLa/TAX细胞凋亡的作用和抑制细胞侵袭的作用;miR-338-3p靶向负调控MORC4表达;miR-338-3p可通过靶向下调MORC4表达,上调TAX对HeLa/TAX细胞增殖和侵袭的抑制作用,以及诱导细胞凋亡。结论过表达miR-338-3p可通过靶向下调MORC4表达,上调TAX对HeLa/TAX细胞凋亡的促进作用和对细胞侵袭能力的抑制作用,以此促进宫颈癌细胞对TAX化疗敏感性。