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LncRNA CBR3-AS1调节miR-448/TFAM轴对结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响
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作者 徐娜娜 胡敬暖 王新玮 《检验医学与临床》 CAS 2024年第14期2075-2081,共7页
目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)CBR3-AS1对结直肠癌(CRC)细胞恶性生物学行为的影响及其机制。方法 收集济南市第五人民医院2021年1月至2022年6月获取的40对CRC组织和邻近癌旁组织标本,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测人CRC... 目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)CBR3-AS1对结直肠癌(CRC)细胞恶性生物学行为的影响及其机制。方法 收集济南市第五人民医院2021年1月至2022年6月获取的40对CRC组织和邻近癌旁组织标本,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测人CRC组织、癌旁组织和CRC细胞系、正常结直肠上皮细胞中LncRNA CBR3-AS1、微小RNA-448(miR-448)及线粒体转录因子A(TFAM)mRNA表达。根据不同CRC细胞系中LncRNA CBR3-AS1的表达水平筛选后续实验使用的细胞系。验证miR-448与LncRNA CBR3-AS1、TFAM的靶向关系。在目标细胞中转染靶向LncRNA CBR3-AS1的小干扰RNA(si-CBR3-AS1)、miR-448抑制物(miR-448 inhibitor),采用qRT-PCR、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测LncRNA CBR3-AS1、miR-448及TFAM mRNA和蛋白表达;采用CCK-8法、流式细胞术、划痕愈合实验和Transwell实验分别检测细胞活力、凋亡率、迁移及侵袭能力。结果 CRC组织和细胞中LncRNA CBR3-AS1及TFAM mRNA呈高表达,miR-448呈低表达,且HCT116细胞中LncRNA CBR3-AS1的表达最高,故选择HCT116细胞进行后续靶向验证和转染实验。经验证,HCT116细胞中miR-448与LncRNA CBR3-AS1、TFAM均存在靶向关系。转染si-CBR3-AS1可降低HCT116细胞中LncRNA CBR3-AS1及TFAM mRNA和蛋白表达水平,同时降低细胞活力、划痕愈合率、迁移细胞数、侵袭细胞数,升高miR-448表达水平及凋亡率;转染si-CBR3-AS1基础上转染miR-448 inhibitor可减弱干扰LncRNA CBR3-AS1表达对HCT116细胞的影响。结论 干扰LncRNA CBR3-AS1可抑制CRC细胞的恶性生物学行为,其机制可能与靶向miR-448/TFAM轴有关。 展开更多
关键词 结直肠癌 长链非编码RNA CBR3-AS1 微小RNA-448 线粒体转录因子A 迁移 侵袭
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宫颈鳞癌组织中miR-448、KDM2B表达水平与术后复发的相关性研究 被引量:4
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作者 张文莉 王彩丽 +4 位作者 冯彩霞 王蕊 高瑞 李光 张兴旺 《疑难病杂志》 CAS 2022年第4期350-355,共6页
目的检测宫颈鳞癌组织中微小RNA-448(miR-448)、赖氨酸特异性脱甲基酶2B(KDM2B)信使核糖核酸(mRNA)和蛋白表达水平与患者术后复发的关系。方法选取2017年8月—2020年3月于榆林市第一医院妇产科行腹腔镜手术及术后病理检查确诊为宫颈鳞... 目的检测宫颈鳞癌组织中微小RNA-448(miR-448)、赖氨酸特异性脱甲基酶2B(KDM2B)信使核糖核酸(mRNA)和蛋白表达水平与患者术后复发的关系。方法选取2017年8月—2020年3月于榆林市第一医院妇产科行腹腔镜手术及术后病理检查确诊为宫颈鳞癌患者96例为研究对象,根据宫颈鳞癌患者术后18个月内是否复发分为复发组37例和未复发组59例;荧光定量PCR技术检测宫颈鳞癌组织和癌旁正常宫颈组织中miR-448、KDM2B mRNA表达水平,免疫组织化学法检测KDM2B蛋白表达水平;比较2组患者组织中miR-448、KDM2B mRNA和蛋白表达水平;分析宫颈鳞癌组织中miR-448、KDM2B mRNA表达水平的相关性及二者与患者临床病理参数的关系;多因素Logistic回归分析影响宫颈鳞癌患者术后复发的危险因素。结果宫颈鳞癌组织中miR-448表达水平低于正常宫颈组织,KDM2B mRNA表达水平及蛋白阳性表达率高于正常宫颈组织(t/χ^(2)/P=20.487/<0.001、16.292/<0.001、20.023/<0.001);复发组miR-448表达水平低于未复发组,KDM2B mRNA表达水平显著高于未复发组(t/P=7.166/<0.001、5.708/<0.001);肿瘤低中分化、FIGO分期Ⅲ期、有淋巴结转移患者宫颈鳞癌组织中miR-448表达水平明显低于高分化、FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移患者(t/P=5.239/<0.001、5.977/<0.001、4.138/<0.001),KDM2B mRNA表达水平明显高于高分化、FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移患者(t/P=3.787/<0.001、3.212/0.002、2.255/0.026);宫颈鳞癌组织中miR-448与KDM2B mRNA表达水平呈负相关(r/P=-0.605/<0.001);肿瘤低中分化、FIGO分期Ⅲ期、发生淋巴结转移、miR-448低表达、KDM2B mRNA高表达是影响宫颈鳞癌患者术后发生复发的独立危险因素[OR(95%CI)=2.613(1.377~4.960)、2.537(1.120~5.364)、2.259(1.218~4.188)、3.104(1.471~6.550)、2.948(1.315~6.610)]。结论宫颈鳞癌组织中miR-448表达下调,KDM2B表达上调,二者共同作用参与宫颈鳞癌的发生发展,可能是影响宫颈鳞癌患者术后复发的潜在生物指标。 展开更多
关键词 宫颈鳞癌 微小RNA-448 赖氨酸特异性脱甲基酶2B 术后复发 相关性
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老年COPD急性加重期患者血清miR-448-5p、Six1水平及其临床意义 被引量:5
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作者 夏君燕 张英 高永红 《国际检验医学杂志》 CAS 2023年第14期1737-1742,共6页
目的探讨老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期患者血清同源异形盒基因1(Six1)、微小RNA-448-5p(miR-448-5p)表达水平及其临床意义。方法将2021年3月到2022年3月本院住院部收治的老年COPD急性加重期患者110例(COPD急性加重组)、COPD稳... 目的探讨老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期患者血清同源异形盒基因1(Six1)、微小RNA-448-5p(miR-448-5p)表达水平及其临床意义。方法将2021年3月到2022年3月本院住院部收治的老年COPD急性加重期患者110例(COPD急性加重组)、COPD稳定期患者60例(COPD稳定组)纳入研究。另外,选取同期于该院体检的健康者60例作为对照组。收集受试者基本资料。COPD急性加重期患者血清Six1、miR-448-5p水平与临床指标间的相关性采用Pearson法分析;多因素Logistic回归分析影响COPD患者急性加重的可能因素;miR-448-5p、Six1表达与生存资料采用Kaplan-Meier生存曲线进行分析;多因素Cox回归分析影响COPD急性加重患者预后的因素。结果COPD急性加重组、稳定组及对照组Six1水平依次降低(P<0.05),miR-448-5p水平依次显著升高(P<0.05);相关性分析显示,COPD急性加重期患者血清miR-448-5p、Six1水平均与氧分压(PaO_(2))、第1秒用力呼气容积与用力肺活量的比值(FEV_(1)/FVC)、第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV_(1)%pred)、年龄、二氧化碳分压(PaCO_(2))呈显著相关(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,miR-448-5p、年龄、Six1是COPD发生急性加重的影响因素(P<0.05);死亡组miR-448-5p水平显著低于存活组,Six1水平显著高于存活组(P<0.05);Kaplan-Meier结果显示miR-448-5p高表达患者30 d生存率(80.00%)高于miR-582-5p低表达患者(56.36%),Six1高表达患者30 d生存率(47.27%)低于Six1低表达患者(89.09%);miR-448-5p、Six1是COPD急性加重患者死亡的影响因素(P<0.05)。结论miR-448-5p水平在老年COPD急性加重期患者血清中显著下调、Six1在老年COPD急性加重期患者血清中显著上调,检测血清miR-448-5p、Six1的表达有利于对老年COPD患者病情的评估。 展开更多
关键词 COPD急性加重期 同源异形盒基因1 微小RNA-448-5p 老年人
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弥漫性大B细胞淋巴瘤组织中miR-448和KDM2B的水平表达及临床意义 被引量:2
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作者 陈思言 张伶莉 杨丽华 《现代检验医学杂志》 CAS 2022年第4期128-133,共6页
目的探讨微小核糖核酸(micro RNA,miR)-448和赖氨酸特异性脱甲基酶2B[lysine(K)-specific demethylase 2B,KDM2B]在弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)组织中的表达及临床意义。方法选择2017年7月~2018年3月在... 目的探讨微小核糖核酸(micro RNA,miR)-448和赖氨酸特异性脱甲基酶2B[lysine(K)-specific demethylase 2B,KDM2B]在弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)组织中的表达及临床意义。方法选择2017年7月~2018年3月在达州市中心医院收治的97例DLBCL患者作为观察对象,选取同期50例淋巴结反应性增生(reactive lymph node hyperplasia,RHL)组织患者作为对照组,采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)法检测DLBCL组织与RHL组织中miR-448和KDM2B mRNA表达水平,免疫组织化学染色法检测KDM2B蛋白表达水平,分析miR-448和KDM2B表达水平与DLBCL患者临床病理特征的关系,Pearson分析miR-448和KDM2B表达水平的相关性,Kaplan-Meier生存分析miR-448和KDM2B表达与DLBCL患者生存率的关系以及COX回归模型分析影响DLBCL患者预后的影响因素。结果DLBCL组织中miR-448表达水平为0.65±0.08,显著低于对照组的1.04±0.19,差异有统计学意义(t=17.473,P<0.001);DLBCL组织中KDM2B mRNA表达水平为2.89±0.54,显著高于对照组的0.98±0.21,差异有统计学意义(t=24.058,P<0.001);免疫组织化学染色结果显示,与对照组比较,DLBCL组织中KDM2B蛋白阳性表达率(72.16%vs 22.00%)显著升高,差异有统计学意义(χ^(2)=33.561,P<0.001);miR-448和KDM2B表达与Ann Arbor分期、IPI评分、Hans分型有关(χ^(2)=4.227~12.960,均P<0.05);与年龄、性别、LDH水平、ECOG评分和有无B症状无关(χ^(2)=0.072~3.726,均P>0.05);相关性分析显示,miR-448和KDM2B表达水平呈负相关(r=-0.602,P<0.001);Kaplan-Meier生存分析显示,miR-448高表达组DLBCL患者三年累积生存率显著高于miR-448低表达组患者(55.53%vs 31.38%),差异有统计学意义(χ^(2)=7.434,P=0.006)。KDM2B阳性表达组DLBCL患者三年累积生存率显著低于阴性表达组患者(31.73%vs 56.67%),差异有统计学意义(χ^(2)=8.877,P=0.006);COX多因素分析结果显示,Ann Arbor分期(95%CI=1.567~4.012,P=0.005),miR-448(95%CI=2.213~4.478,P=0.001),KDM2B(95%CI=1.506~4.554,P=0.003)是影响DLBCL患者不良预后的独立危险因素。结论在DLBCL组织中,miR-448低表达,KDM2B高表达,且二者表达与DLBCL病理特征和患者生存有关,可作为DLBCL患者潜在的预后标志物。 展开更多
关键词 微小核糖核酸-448 赖氨酸特异性脱甲基酶2B 弥漫性大B细胞淋巴瘤
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miRNA-448对非小细胞肺癌细胞增殖、转移及上皮间质化的影响 被引量:2
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作者 王红梅 孙冬霞 +3 位作者 王芳 王俊兰 张伟伟 高洁 《标记免疫分析与临床》 CAS 2019年第10期1741-1746,共6页
目的检测microRNA-448(miRNA-448)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织及细胞系中表达情况,并观察其对细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质化(EMT)的影响。方法采用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)法检测NSCLC组织及细胞系中miR-448的表达情况。对肺癌细胞... 目的检测microRNA-448(miRNA-448)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织及细胞系中表达情况,并观察其对细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质化(EMT)的影响。方法采用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)法检测NSCLC组织及细胞系中miR-448的表达情况。对肺癌细胞株A549转染miR-448模拟物(mimics)和抑制剂(inhibitor),并应用细胞计数试剂盒-8检测不同时间细胞增殖活性,Transwell试验测定miR-448模拟物或抑制剂对A549细胞迁移及侵入的影响。Western blot测定E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白和波形蛋白表达,并检测miR-448对NSCLC细胞与内皮细胞的黏附性影响。结果qRT-PCR结果显示,与对照组相比,NSCLC组织及细胞系中miR-448的表达水平明显降低,在A549细胞系中miR-448下调最为显著(P<0.05)。A549细胞转染miR-448模拟物或抑制剂后可导致细胞增殖率随时间增加逐渐降低或升高(P<0.05)。在模拟物组,细胞迁移能力明显加强(P<0.05),相反,A549细胞中,miR-448抑制剂会显著抑制此能力(P<0.05)。与此类似,A549细胞侵袭能力可因miR-448过表达或低表达而增加或降低。miR-448模拟物可显著提高A549细胞中E-cadherin蛋白表达,而N-cadherin和vimentin蛋白水平显著下降,且A549细胞与内皮细胞黏附能力降低(P值均<0.05),而抑制剂则产生相反作用(P值均<0.05)。结论在NSCLC组织及细胞中miR-448呈低表达,其过表达可抑制NSCLC细胞增殖、转移及EMT过程,而miR-448低表达可促进细胞增殖、转移及EMT。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 微小RNA-448 增殖 迁移 上皮间质化
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microRNA-448对类风湿关节炎滑膜细胞增殖和凋亡的影响及其机制研究 被引量:3
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作者 徐立 张旭然 张淼 《现代医学》 2021年第11期1290-1296,共7页
目的:探讨microRNA-448(miR-448)对类风湿关节炎滑膜细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法:类风湿关节炎滑膜细胞MH7A分成Control组、Anti-NC组(转染inhibitor control)、Anti-miR-448组(转染miR-448 inhibitor)、Anti-miR-448+si-NC组(... 目的:探讨microRNA-448(miR-448)对类风湿关节炎滑膜细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法:类风湿关节炎滑膜细胞MH7A分成Control组、Anti-NC组(转染inhibitor control)、Anti-miR-448组(转染miR-448 inhibitor)、Anti-miR-448+si-NC组(共转染miR-448 inhibitor、siRNA control)、Anti-miR-448+si-程序性细胞死亡因子5(PDCD5)组(共转染miR-448 inhibitor、PDCD5 siRNA)。CCK-8检测细胞增殖,PI单染法检测细胞周期,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测C-Caspase-3、cyclin D1、p21蛋白表达。荧光素酶报告系统鉴定miR-448和PDCD5的靶向关系。结果:与Control组和Anti-NC组比较,Anti-miR-448组细胞存活率降低[(100.00±9.52)%、(99.71±10.36)%vs(52.62±4.47)%,P<0.05],凋亡率升高[(4.32±0.35)%、(4.18±0.62)%vs(12.51±1.32)%,P<0.05],G0/G1期比例升高[(48.51±3.26)%、(50.80±6.20)%vs(63.81±5.41)%,P<0.05],细胞中C-Caspase-3、p21蛋白表达水平升高,cyclin D1蛋白表达水平下降。与Anti-miR-448+si-NC组比较,Anti-miR-448+si-PDCD5组类风湿关节炎滑膜细胞存活率升高[(100.00±10.35)%vs(147.84±16.50)%,P<0.05],细胞G_(0)/G_(1)期比例降低[(64.08±6.10)%vs(53.11±4.75)%,P<0.05],细胞凋亡率降低[(13.05±1.16)%vs(6.92±0.35)%,P<0.05],细胞中C-Caspase-3、p21、PDCD5蛋白表达水平降低,cyclin D1蛋白表达水平升高。结论:下调的miR-448通过靶向上调PDCD5表达抑制类风湿关节炎滑膜细胞增殖,阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 类风湿关节炎滑膜细胞 microrna-448 凋亡 增殖 程序性细胞死亡因子5
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