血清miR-130a表达水平与COPD急性加重期患者近期预后不良的临床关系

目的 探讨慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者血清微小核糖核酸-130a(miR-130a)表达水平及其与近期预后不良的关系。方法 选取2019年6月—2021年6月武汉市第三医院收治的85例AECOPD患者和门诊随诊的66例慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期患者,分别设为AECOPD组和COPD组,另同期选取70例健康者设为对照组,三组均检测血清miR-130a表达水平。根据AECOPD患者入院28 d预后情况将其分为预后良好组及预后不良组,分析血清miR-130a表达水平与AECOPD患者预后的关系及其预测价值。结果 AECOPD组和COPD组血清miR-130a表达水平均高于对照组(P<0.05),且AECOPD组血清miR-130a表达水平高于COPD组(P<0.05);85例AECOPD患者入院28 d预后不良发生率为41.18%;年龄大、吸烟史、合并冠心病、动脉氧分压低、血清miR-130a表达水平高及机械通气均是AECOPD患者近期预后不良的危险因素(P<0.05);血清miR-130a表达水平预测AECOPD近期预后不良的灵敏度、特异度、曲线下面积分别为85.71%、74.00%、0.813。结论 AECOPD患者血清miR-130a水平呈高表达,与近期预后密切相关,是近期预后不良的危险因素,并对近期预后不良具有一定的预测价值。

CircFoxo3调节miR-130a-5p/TEAD1轴对心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡影响的实验研究

目的探讨环状RNA叉头框蛋白O3(CircFoxo3)调节miR-130a-5p/TEA域转录因子1(TEAD1)轴对心力衰竭(HF)大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法将SD大鼠分为对照组、HF组、si-NC组、si-CircFoxo3组、agomir NC组、miR-130a-5p agomir组、si-CircFoxo3+antagomir NC组、si-CircFoxo3+miR-130a-5p antagomir组,每组18只。除对照组外,其他组大鼠均通过腹腔注射盐酸阿霉素的方法构建HF大鼠模型。建模成功后进行药物处理,每3 d给药一次,持续3周。应用反转录实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测心肌组织中CircFoxo3、miR-130a-5p表达水平。应用彩色多普勒超声仪检测大鼠左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室射血分数(LVEF)水平。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测大鼠血清人基质裂解素2(ST_(2))、N端脑钠肽前体(NT-pro BNP)水平。应用HE染色、Masson染色检测大鼠心肌组织病理变化和心肌纤维化情况。通过TUNEL染色检测心肌细胞凋亡水平。应用Western blot法检测大鼠心肌组织TEA域转录因子1(TEAD1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、裂解的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)蛋白表达水平。通过双荧光素酶报告基因实验验证CircFoxo3与miR-130a-5p、miR-130a-5p与TEAD1的关系。结果与对照组比较,HF组大鼠心肌组织病理损伤、心肌纤维化严重,LVESD、LVEDD水平上升,心肌组织CircFoxo3及TEAD1、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平升高,血清ST_(2)、NT-pro BNP水平升高,心肌细胞凋亡率升高,LVEF、miR-130a-5p和Bcl-2蛋白水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与HF组、si-NC组比较,si-CircFoxo3组大鼠心肌组织病理损伤减轻,LVESD、LVEDD水平降低,心肌组织CircFoxo3及TEAD1、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平降低,血清ST_(2)、NT-pro BNP水平降低,心肌细胞凋亡率降低,LVEF、miR-130a-5p及Bcl-2蛋白水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与HF组、agomir NC组比较,miR-130a-5p agomir组大鼠心肌组织病理损伤、心肌纤维化有所改善,LVESD、LVEDD水平降低,心肌组织TEAD1、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平降低,血清ST_(2)、NT-pro BNP水平降低,心肌细胞凋亡率降低,LVEF、miR-130a-5p及Bcl-2蛋白水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与si-CircFoxo3组、si-CircFoxo3+antagomir NC组比较,si-CircFoxo3+miR-130a-5p antagomir组大鼠心肌组织病理损伤、心肌纤维化加剧,LVESD、LVEDD水平升高,心肌组织TEAD1、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平升高,血清ST_(2)、NT-pro BNP水平升高,心肌细胞凋亡率升高,LVEF、miR-130a-5p、Bcl-2蛋白水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。CircFoxo3与miR-130a-5p、miR-130a-5p与TEAD1存在靶向关系。结论沉默CircFoxo3可能通过海绵化上调miR-130a-5p来抑制TEAD1表达,进而抑制HF大鼠心肌细胞凋亡。

MiR-130c-5p靶向乌鳢水泡病毒g基因抑制病毒增殖

为了研究miR-130c-5p在乌鳢水泡病毒(snakehead vesiculovirus,SHVV)感染中潜在靶基因g的靶向关系以及对病毒复制的影响,本研究以斑点叉尾鮰卵巢(channel catfish ovary,CCO)为实验材料,通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)和免疫印迹(Western blot)技术测定SHVV不同感染时间和感染剂量条件下,病毒基因水平和蛋白水平以及miR-130c-5p变化情况。此外,将SHVV的g基因上miR-130c-5p对应的靶序列克隆到质粒pmirGLO,构建质粒pmirGLO-G用于双荧光素酶报告实验进行靶基因验证。结果显示,随着SHVV感染时间及剂量的不断增加,miR-130c-5p和g基因的表达水平都显著上调。进一步实验证明,miR-130c-5p类似物和pmirGLO-G质粒共转染可显著抑制荧光素酶活性强度,而转染miR-130c-5p抑制剂则明显上调了pmirGLO-G报告载体的荧光信号。此外,miR-130c-5p的过表达显著降低了病毒g基因的mRNA及蛋白表达,而抑制miR-130c-5p的表达则上调了g基因的mRNA及蛋白的表达水平。研究结果表明,miR-130c-5p通过靶向SHVV的g基因,引起G蛋白的降解,从而抑制SHVV的增殖。本研究结果为理解microRNA调控SHVV的致病机制提供了重要基础,为抗SHVV疫苗等药物的研发提供了理论支持。

miR-130a-5p靶向Runx2对牙槽骨成骨细胞增殖和分化的影响及其调控机制研究

目的:探究miR-130a-5p靶向Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)对牙槽骨成骨细胞(Alveolar osteoblast,AOB)增殖、凋亡、成骨分化的影响及其机制。方法:将AOB分为NC组、miR-NC组、miR-130a-5p组、miR-130a-5p+Runx2组和miR-130a-5p+SHH组。双荧光素酶报告验证miR-130a-5p对Runx2、Sonic hedgehog(SHH)的调控关系;CCK-8及EdU染色检测细胞增殖能力;AnnexinV-FITC/PI法检测细胞凋亡能力;ALP染色、茜素红染色检测细胞成骨分化能力;RT-qPCR检测miR-130a-5p、Runx2、SHH、神经胶质瘤关联癌基因同源物1(Gli1)mRNA水平;Western Blot检测增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、Ki67、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 related X protein,Bax)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)、骨钙素(Osteocalcin,OCN)、骨形态发生蛋白2(Bone morphogenetic protein 2,BMP2)、Runx2、SHH、Gil1水平。结果:miR-130a-5p靶向调控Runx2、SHH。过表达miR-130a-5p后,细胞24 h、48 h、72 h OD值及EdU阳性率降低,细胞凋亡率升高,成骨分化能力降低,miR-130a-5p、Bax蛋白水平升高,Runx2、PCNA、Ki67、Bcl-2、ALP、OCN、BMP2蛋白及SHH、Gil1 mRNA和蛋白水平均降低(P<0.05)。过表达miR-130a-5p和Runx2或过表达miR-130a-5p和SHH可减弱过表达miR-130a-5p对细胞增殖、凋亡、成骨分化的影响。结论:miR-130a-5p靶向Runx2抑制AOB增殖和成骨分化,并促进AOB凋亡,其可能通过抑制SHH信号通路发挥作用。

抑制miR-130a表达对SACC-83顺铂化疗敏感性及XIAP MDR1蛋白表达的影响

目的研究抑制miR-130a表达对人涎腺腺样囊性癌细胞株(SACC-83)顺铂(DDP)化疗敏感性及X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)、多药耐药基因(MDR1)表达的影响。方法构建人涎腺腺样囊性癌DDP耐药细胞株(SACC-83/DDP),采用实时荧光定量(qRT-PCR)检测SACC-83、SACC-83/DDP细胞中miR-130a表达水平;将SACC-83/DDP细胞随机分为对照组、mir-130a inhibitor组(转染mir-130a inhibitor)、DDP+mir-130a inhibitor阴性对照组(30μmol/L DDP+转染mir-130a inhibitor阴性对照)及DDP+mir-130a inhibitor组(30μmol/L DDP+转染mir-130a inhibitor),采用CCK-8法测定各组细胞生存率以及对DDP的耐药性,流式细胞术检测细胞凋亡率,TUNEL染色检测细胞凋亡指数;qRT-PCR检测细胞miR-130a、XIAP、MDR1、PTEN mRNA水平,免疫印记法检测细胞XIAP、MDR1、PTEN蛋白表达。结果与SACC-83细胞相比,miR-130a在SACC-83/DDP细胞中高表达(P<0.05);与对照组和mir-130a inhibitor组相比,DDP+mir-130a inhibitor组细胞生存率降低,凋亡率和凋亡指数升高(P<0.05);与mir-130a inhibitor组相比,DDP+mir-130a inhibitor组细胞生存率降低,凋亡率和凋亡指数升高(P<0.05);与对照组相比,mir-130a inhibitor组、DDP+mir-130a inhibitor组细胞miR-130a水平、XIAP mRNA及蛋白、MDR1 mRNA及蛋白表达降低(P<0.05),凋亡率、凋亡指数和PTEN蛋白表达升高(P<0.05);与DPP+mir-130a inhibitor组相比,DDP+mir-130a inhibitor阴性对照组细胞miR-130a水平、XIAP mRNA及蛋白、MDR1 mRNA及蛋白表达升高(P<0.05),凋亡率、凋亡指数和PTEN蛋白表达下降(P<0.05);SACC-83/DDP细胞对DDP的耐药性明显高于SACC-83细胞,抑制miR-130a表达逆转了SACC-83/DDP细胞的DDP耐药性。结论抑制miR-130a表达,可能下调XIAP表达,增强人涎腺腺样囊性癌细胞株对顺铂化疗的敏感性。

LncRNAFEZF1-AS1通过miR-130a-5p/CCND1轴促进非小细胞肺癌发展的分子机制研究

目的探讨FEZF1-AS1通过miR-130a-5p/CCND1轴促进非小细胞肺癌(NSCLC)发展的分子机制。方法利用TCGA数据库分析FEZF1-AS1在NSCLC中的表达,qRT-PCR检测其在NSCLC癌组织与癌旁组织以及NSCLC细胞系中的表达,并分析其与临床特征的关系。利用数据库预测FEZF1-AS1与hsa-miR-130a-5p的结合位点以及hsa-miR-130a-5p与CCND1的结合位点;应用CCK8、克隆形成实验、划痕实验、Transwell实验检测FEZF1-AS1、hsa-miR-130a-5p对肺癌细胞系增殖、侵袭、迁移能力的影响;双荧光素酶报告实验验证FEZF1-AS1与hsa-miR-130a-5p以及hsa-miR-130a-5p与CCND1存在结合;将H1299、H358分别分为si-NC组、si-FEZF1-AS1组、si-FEZF1-AS1+NC inhibitor组、si-FEZF1-AS1+hsa-miR-130a-5p inhibitor组,应用Western blot检测CCND1的蛋白表达水平,明确FEZF1-AS1/hsa-miR-130a-5p是否通过ceRNA机制调控了CCND1的表达。结果FEZF1-AS1在NSCLC中呈高表达,且在NSCLC癌组织中的表达量明显增高(P<0.05),高表达与NSCLC的淋巴结转移有关,在H1299、H358细胞系中的表达量也显著增高(P<0.05);敲减FEZF1-AS1降低了NSCLC细胞的增殖、迁移、侵袭能力(P<0.05);hsa-miR-130a-5p与FEZF1-AS1、CCND1之间存在结合(P<0.05);hsa-miR-130a-5p影响NSCLC细胞的增殖、迁移、侵袭能力(P<0.05);si-FEZF1-AS1降低了CCND1蛋白表达,hsa-miR-130a-5p inhibitor逆转了si-FEZF1-AS对CCND1的敲减作用(P<0.05)。结论FEZF1-AS1在NSCLC组织中高表达,且与淋巴结转移有关,促进了NSCLC细胞的增殖、迁移、侵袭,并通过miR-130a-5p/CCND1轴促进了非小细胞肺癌的发展。

癫痫患者脑电图异常与血液miR-130b-3p和miR-7及FGL2表达特征的关系

目的探讨癫痫患者脑电图异常与血液miR-130b-3p、miR-7及纤维蛋白原样蛋白2(FGL2)表达特征的关系。方法选取接受治疗的癫痫患者124例作为观察组(癫痫发作轻度患者36例、中度患者51例及重度患者37例,脑电图轻度异常患者65例、中度异常35例及重度异常24例),同时选取体检健康者120例作为对照组;比较观察组和对照组、不同程度癫痫发作患者、不同程度脑电图异常的癫痫患者血液miR-130b-3p、miR-7及FGL2表达差异,分析癫痫患者血液miR-130b-3p、miR-7及FGL2与疾病程度和脑电图异常的相关性。结果观察组miR-130b-3p、FGL2高于对照组(P<0.05),miR-7低于对照组(P<0.05);癫痫发作重度患者miR-130b-3p、FGL2高于轻度和中度患者(P<0.05),miR-7低于轻度和中度患者(P<0.05);全面性癫痫发作患者miR-130b-3p、FGL2高于部分性发作患者(P<0.05);脑电图重度异常癫痫患者miR-130b-3p、FGL2高于脑电图轻度和中度异常患者(P<0.05),miR-7低于轻度和中度异常患者(P<0.05);脑电图中度异常癫痫患者miR-130b-3p、FGL2高于脑电图轻度异常患者(P<0.05),miR-7低于轻度异常患者(P<0.05);癫痫患者miR-130b-3p及FGL2与疾病严重程度、脑电图异常程度呈正相关(P<0.05),miR-7与疾病严重程度、脑电图异常程度呈负相关(P<0.05)。结论癫痫患者血液miR-130b-3p及FGL2表达上调,而miR-7下调,3项指标均与与癫痫患者疾病严重程度、脑电图异常程度存在相关关系。

RNA XIST、mir-130b-3p在乳腺癌组织中的表达及与其预后相关性

目的 探讨RNA XIST、mir-130b-3p在乳腺癌组织中的表达及与其临床病理特征及预后的相关性。方法选择120例乳腺癌患者,收集其癌组织和癌旁正常组织,采用免疫组化染色法测定RNA XIST、mir-130b-3p水平及其与乳腺癌临床病理学特征的关系;从治疗起对所有患者随访60个月,记录总生存率,并建立Logistic多元回归方程分析乳腺癌患者死亡高危因素。结果 RNA XIST在乳腺癌组织中表达量高于癌旁正常组织(P<0.05),mir-130b-3p在乳腺癌组织的表达量低于癌旁正常组织(P<0.05);RNA XIST与mir-130b-3p在乳腺癌组织中表达呈显著负相关关系(P<0.05);RNA XIST、mir-130b-3p表达量与患者年龄、肿瘤直径、肿瘤分期、淋巴结转移、分化程度显著相关(P<0.05);所有患者均从治疗起随访60个月,6例于治疗后24~36个月复发,8例全身转移,54例死亡,存活患者RNA XIST表达量低于死亡患者(P<0.05)、mir-130b-3p表达量高于死亡患者(P<0.05);年龄≥55岁、肿瘤直径>5 cm、肿瘤Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移、RNA XIST高表达、mir-130b-3p低表达为乳腺癌患者死亡危险因素(P<0.05)。结论 RNA XIST、mir-130b-3p与乳腺癌患者预后显著相关,且两者在癌细胞中的表达量呈负相关关系,可对其进行监测作为早期筛查乳腺癌生物标志物和治疗靶点。

LncRNA HOTAIR通过miR-130a-3p/ABCC5调控乳腺癌细胞紫杉醇耐药的分子机制研究

目的探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA,LncRNA)HOTAIR调控乳腺癌细胞紫杉醇耐药的潜在分子机制。方法筛选出乳腺癌紫杉醇抗性细胞系(MCF7/TR细胞),并且检测MCF7/TR细胞以及亲代细胞的HOTAIR的表达水平以及紫杉醇耐药指标(增殖水平、凋亡水平、细胞周期、细胞内紫杉醇浓度)。结果敲低HOTAIR后,紫杉醇处理可以显著抑制MCF7/TR细胞的增殖和诱导细胞凋亡,并且诱导MCF7/TR细胞停滞于G_(1)期。敲低HOTAIR后MCF7/TR细胞内紫杉醇浓度升高。miR-130a-3p与HOTAIR存在相互作用。过表达miR-130a-3p时MCF7/TR细胞内紫杉醇浓度明显升高,敲低HOTAIR后,MCF/TR细胞中miR-130a-3p的表达水平升高。miR-130a-3p靶向ABCC5 mRNA的3′端非翻译区。过表达ABCC5时MCF7/TR细胞内紫杉醇浓度明显升高。结论LncRNA HOTAIR通过miR-130a-3p/ABCC5轴减少了紫杉醇耐药细胞中紫杉醇细胞内水平,促进了乳腺癌细胞对紫杉醇的耐药。

lncRNA MAGI2-AS3靶向调控miR-130a-5p对柯萨奇病毒B3诱导的大鼠心肌细胞H9C2损伤的影响

目的:探讨lncRNA MAGI2-AS3靶向miR-130a-5p调控柯萨奇病毒B3(CVB3)诱导的大鼠心肌细胞H9C2损伤的分子机制。方法:对照组,用不含药物、病毒的DMEM处理H9C2细胞48 h。CVB3组,用含有100倍半数组织培养感染剂量CVB3的DMEM处理H9C2细胞48 h(感染)。CVB3+sh-NC组,H9C2细胞转染sh-NC慢病毒后感染CVB3。CVB3+sh-MAGI2-AS3组,H9C2细胞转染sh-MAGI2-AS3慢病毒后感染CVB3。CVB3+miR-NC组,H9C2细胞转染miR-NC后感染CVB3。CVB3+miR-130a-5p组,H9C2细胞转染miR-130a-5p mimic后感染CVB3。sh-MAGI2-AS3+抗miR-NC组,sh-MAGI2-AS3、抗miR-NC共转染H9C2细胞后感染CVB3。sh-MAGI2-AS3+抗miR-130a-5p组,sh-MAGI2-AS3、抗miR-130a-5p共转染H9C2细胞后感染CVB3。qRT-PCR检测MAGI2-AS3、miR-130a-5p相对表达量;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率;ELISA法检测TNF-α、IL-6分泌水平;双荧光素酶报告实验验证MAGI2-AS3与miR-130a-5p靶向关系;Western blot检测Bcl-2、Cleaved-Caspase-3蛋白相对表达量。结果:与对照组比较,CVB3组MAGI2-AS3相对表达量、细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平及TNF-α、IL-6分泌水平升高,而miR-130a-5p相对表达量、Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05)。分别与CVB3+sh-NC组、CVB3+miR-NC组相比,CVB3+sh-MAGI2-AS3组、CVB3+miR-130a-5p组细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平及TNF-α、IL-6分泌水平降低,Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.05)。MAGI2-AS3可靶向调控miR-130a-5p表达。与sh-MAGI2-AS3+抗miR-NC组比较,sh-MAGI2-AS3+抗miR-130a-5p组细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平及TNF-α、IL-6分泌水平升高,Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:沉默MAGI2-AS3可通过上调miR-130a-5p而抑制细胞凋亡、炎症反应,进而减轻CVB3诱导的H9C2细胞损伤。

LncRNA MRPL39通过海绵吸附miR-130靶向PTEN调控人肺癌细胞的迁移和侵袭

目的探究LncRNA MRPL39对人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)迁移和侵袭的影响及机制。方法采用qPCR法检测肺癌及癌旁组织中MRPL39和miR-130的表达;构建低表达MRPL39的肺腺癌A549细胞株,CCK-8法、Transwell小室实验检测细胞增殖、迁移和侵袭,双荧光素酶报告基因验证MRPL39与miR-130靶向关系,并评价低表达MRPL39对裸鼠成瘤的影响。结果与癌旁组织比较,肺癌组织中MRPL39升高,miR-130降低;与sh-NC组比较,sh-MRPL39组细胞中MRPL39、细胞存活率、N钙黏素和波形蛋白表达、移植瘤体积及重量明显降低,迁移细胞数和侵袭细胞数减少,E钙黏素表达升高;差异均有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测显示,MRPL39与miR-130存在靶向关系;干扰miR-130表达可部分逆转沉默MRPL39对细胞增殖、迁移和侵袭的影响,及上皮间质转化转移和第10号染色体丢失的磷酸酶基因(PTEN)表达的抑制作用。结论敲低LncRNA MRPL39可抑制肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力,可能与海绵吸附miR-130调控PTEN表达有关。

miR-130a-3p在HCC致病机制中的作用及作为预后标志物的评估

目的分析miR-130a-3p是否参与肝细胞癌(hepatocellalar carcinoma,HCC)疾病演进并抑制转移,评估其作为预后标志物的可能。方法基于癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中miR-130a-3p的表达量和HCC患者生存信息,综合分析miR-130a-3p的表达分布以及对HCC诊断和预后价值的评估;通过抑制miR-130a-3p的表达,进而检测HepG2细胞增殖活力、细胞的迁移和侵袭能力;利用LncBase 3.0预测miR-130a-3p的靶基因,并通过Western blot检测V-maf肌骨神经纤维肉瘤肿瘤基因同源物B(V-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog B,MAFB)蛋白质表达水平,明确miR-130a-3p对MAFB的调控作用。结果miR-130a-3p在HCC组织中显著低表达(t=-13.556,P<0.001),且表达量与患者的总生存时间密切相关(Log-rank=4.675,HR=0.681,P=0.031),此外,其表达量还可以有效区分HCC患者和健康对照(AUC=0.891);抑制miR-130a-3p的表达后,HepG2细胞的增殖(t=24.950,P<0.001)、迁移(t=7.503,P=0.012)及侵袭(t=6.350,P=0.011)能力显著增强;MAFB是miR-130a-3p的靶基因之一,并且抑制miR-130a-3p后,其表达量上调(t=130,P<0.001)。结论miR-130a-3p可以作为HCC的预后评估标志物并抑制其转移。

miR-130b-3p在肾癌中表达及PI3K/AKT途径参与的机制研究

目的探究miR-130b-3p调节PI3K/AKT途径对肾癌细胞生物学行为的影响及作用机制。方法临床收集肾癌患者78例,检测肿瘤组织和癌旁组织中miR-130b-3p和PTEN蛋白水平,分析miR-130b-3p与肾癌病理特征的关系。通过相关性分析探究肾癌组织中miR-130b-3p与PTEN蛋白的相关性。786-O细胞分为NC、miR-130b-3p、PTEN和miR-130b-3p+PTEN组,分别转染NC、miR-130b-3p mimic和/或pcDNA 3.1 PTEN来过表达miR-130b-3p和/或PTEN。分别检测各组细胞活力、凋亡率、侵袭能力以及PI3K/AKT通路水平。结果肾癌组织中miR-130b-3p水平显著高于癌旁组织(P<0.05)。miR-130b-3p表达水平与性别、年龄、肿瘤直径无关,高水平的miR-130b-3p与高临床分期和淋巴转移有关(P<0.05)。miR-130b-3p与PTEN靶向结合(P<0.05)。与NC组比较,miR-130b-3p组的PTEN蛋白和凋亡率显著降低,增殖活力、侵袭能力和PI3K/AKT通路显著升高(P<0.05);PTEN组的PTEN蛋白和凋亡率显著升高,增殖活力、侵袭能力和PI3K/AKT通路显著抑制(P<0.05)。miR-130b-3p+PTEN组的PTEN蛋白和凋亡率显著高于miR-130b-3p组且显著低于PTEN组,而增殖活力、侵袭能力和PI3K/AKT通路显著低于miR-130b-3p组且显著高于PTEN组(P<0.05)。结论miR-130b-3p在肾癌组织中上调,高水平的miR-130b-3p与肾癌患者的高临床分期和转移有关,miR-130b-3p可调控PI3K/AKT途径,抑制PTEN蛋白表达,促进肾癌细胞的侵袭并抑制凋亡。

癫痫患者外周血CD69、miR-130b-3p表达水平及其临床意义

目的探讨CD69、miR-130b-3p在癫痫患者外周血中的表达水平及其临床意义。方法选取2018年2月至2019年2月该院神经内科收治的95例癫痫患者作为癫痫组,根据病情严重程度分为轻度31例,中度22例,重度42例。另选取同期来该院进行健康体检的健康者60例作为对照组。采用流式细胞仪检测两组外周血CD69表达水平,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测两组外周血miR-130b-3p表达水平;采用Pearson相关分析癫痫患者外周血CD69与miR-130b-3p表达水平的相关性;采用Logistic回归分析影响癫痫发生的影响因素。结果与对照组比较,癫痫组外周血CD69、miR-130b-3p表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。外周血CD69、miR-130b-3p表达水平在轻度、中度、重度癫痫患者中依次升高,两两比较,差异有统计学意义(P<0.05)。癫痫患者外周血CD69与miR-130b-3p表达水平呈正相关(r=0.546,P<0.05)。外周血CD69、miR-130b-3p表达水平升高是癫痫发生的危险因素(P<0.05)。结论癫痫患者外周血CD69、miR-130b-3p呈高表达,二者均与患者病情严重程度有关。

miR-130a/b在消化系统疾病中的研究进展

自1993年在线虫中首次发现微小RNA(microRNA,miRNA)之后,人们对其的发生、功能、作用方式等认识逐渐完善,随着方法学的进步及实验仪器的完善,其研究热度逐步提升。miR-130家族在肿瘤方面研究甚广,但尚未在消化系统疾病方面做出详细回顾,本文旨在以作用靶点及通路为重点阐述miR-130家族在消化系统疾病中的作用。

糖尿病合并代谢综合征病人血清miR-126a、miR-130b水平及与骨质疏松的关系

目的:探讨2型糖尿病合并代谢综合征(MS)病人血清miRNA-126a、miRNA-130b水平及其与骨质疏松的关系。方法:选取162例2型糖尿病病人为研究对象,其中72例单纯糖尿病病人为对照组,90例糖尿病合并MS病人为观察组,同时根据是否发生骨质疏松将2型糖尿病合并MS病人分为骨质疏松组(52例)与非骨质疏松组(38例)。实时定量聚合酶链反应法检测病人血清miR-126a、miR-130b相对表达量;检测各项实验室指标及骨质疏松症相关因子水平。Pearson法分析骨质疏松病人血清miR-126a、miR-130b表达水平与骨质疏松症相关因子的相关性;多因素logistic回归分析法分析影响骨质疏松发生的相关因素。结果:观察组血清miR-126a、miR-130b表达水平均高于对照组(P<0.05);骨质疏松组病人体质量指数(BMI)、血红蛋白(Hb)、骨钙素、骨密度(BMD)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)均低于非骨质疏松组(P<0.05),而总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血清Ⅰ型前胶原氨基端肽原(P1NP)及血清miR-126a、miR-130b表达水平均升高(P<0.05);miR-126a、miR-130b均与BMI、Hb、骨钙素、BMD、IGF-1呈明显负相关关系(P<0.01),而与TC、TG、HDL-C、HbAlc、PINP呈明显正相关关系(P<0.01);logistic分析显示BMI、Hb、IGF-1及miR-126a、miR-130b表达水平均为骨质疏松发生的影响因素(P<0.05~P<0.01)。结论:2型糖尿病合并MS病人血清miR-126a、miR-130b表达水平升高可促进骨质疏松发生,并可能作为预测骨质疏松发生的重要辅助指标。

lncRNA MEG3靶向miR-130a-5p调控人视网膜色素上皮细胞损伤的研究

目的探讨lncRNA MEG3在年龄相关性黄斑变性(AMD)患者中的表达及其靶向miR-130a-5p对人视网膜色素上皮(RPE)细胞损伤的影响。方法选取2020年6月至2021年8月永州职业技术学院附属医院收治的AMD患者38例以及同期的健康体检者38例,收集其空腹静脉血,qRT-PCR检测其血清lncRNA MEG3表达水平。不同浓度(0μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L、600μmol/L)过氧化氢(H2O2)处理人RPE细胞系ARPE-19细胞构建RPE细胞损伤模型,并检测lncRNA MEG3在H2O2处理的ARPE-19细胞中表达。双荧光素酶报告基因实验和RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验分析lncRNA MEG3与miR-130a-5p的靶向关系。ARPE-19细胞分为对照组(常规培养,不进行任何特殊处理)、H2O2组(200μmol/L H2O2处理24 h)、Vector组(转染pcDNA3.1-NC 24 h后200μmol/L H2O2处理24 h)、lncRNA MEG3组(转染pcDNA3.1-lncRNA MEG324 h后200μmol/L H2O2处理24 h)、lncRNA MEG3+miR-NC组(共转染pcDNA3.1-lncRNA MEG3和miR-NC 24 h后200μmol/L H2O2处理24 h)、lncRNA MEG3+miR-130a-5p组(共转染pcDNA3.1-lncRNA MEG3和miR-130a-5p mimics 24 h后200μmol/L H2O2处理24 h),qRT-PCR检测各组细胞中lncRNA MEG3、miR-130a-5p表达水平,噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞活性,流式细胞仪检测各组细胞凋亡,2,7-二氯二氢代荧光黄二醋酸(DCFH-DA)荧光探针法、硫代巴比妥酸(TBA)法、水溶性四唑盐1(WST-1)法分别检测各组细胞内活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平,ELISA法检测各组细胞上清液中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、β-淀粉样蛋白(Aβ)水平,Western blot检测各组细胞中核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶1(HO-1)通路相关蛋白表达。结果与健康体检者比较,lncRNA MEG3在AMD患者血清中呈低表达(P<0.05)。与0μmol/L H2O2处理组比较,100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L、600μmol/L H2O2处理ARPE-19细胞均可降低细胞存活率以及下调细胞中lncRNA MEG3表达水平(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验和RIP实验证实lncRNA MEG3与miR-130a-5p存在靶向关系。过表达lncRNA MEG3通过下调miR-130a-5p表达提供了H2O2诱导的ARPE-19细胞存活率、SOD水平及Nrf2、HO-1蛋白表达水平,降低了细胞凋亡率及ROS、MDA、IL-6、TNF-α、Aβ水平(P<0.05)。结论lncRNA MEG3在AMD患者血清中呈低表达,上调lncRNA MEG3可靶向负调控miR-130a-5p表达,激活Nrf2/HO-1通路,减轻人RPE细胞氧化应激和炎症反应,保护细胞免受损伤。

低氧经miR-130a-3p靶向Sirt7对人滋养细胞迁移、侵袭及上皮-间质转化的影响

目的探究低氧条件下miR-130a-3p靶向去乙酰化酶7(Sirt7)对人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo迁移、侵袭及上皮-间质转化(EMT)的影响及其作用机制。方法以HTR-8/SVneo细胞为研究对象,将miR-130a-3p inhibitor及其阴性对照inhibitor-NC转染至细胞中或联合Sirt7抑制剂97491干预,采用低氧(1%O 2)处理48 h,qRT-PCR检测细胞中miR-130a-3p及Sirt7 mRNA表达水平;Transwell检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot检测细胞中Sirt7、HIF-1α、MMP-2、MMP-9、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平;TargetScan Human 7.1在线软件和双荧光素酶报告基因实验预测并验证miR-130a-3p与Sirt7的靶向关系。结果低氧可上调HTR-8/SVneo细胞中miR-130a-3p表达水平,下调Sirt7 mRNA和蛋白表达水平;miR-130a-3p低表达可升高Sirt7 mRNA表达水平;提高细胞迁移及侵袭能力;下调HIF-1α和E-cadherin蛋白表达水平,上调Sirt7、MMP-2、MMP-9、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平。然而,联合Sirt7抑制剂97491处理可逆转miR-130a-3p低表达对低氧细胞迁移、侵袭及上皮-间质转化的促进作用。结论miR-130a-3p在低氧诱导的滋养细胞中高表达,抑制miR-130a-3p表达可促进低氧条件下HTR-8/SVneo细胞迁移、侵袭及上皮-间质转化,其可能通过靶向Sirt7调控HIF-1α实现的。

血清miR-130a预测Her2阳性转移性乳腺癌患者化疗心脏毒性的临床价值

目的分析血清miR-130a与人表皮生长因子受体2阳性(Her2+)转移性乳腺癌患者化疗心脏毒性的关系。方法纳入该院2019年7月至2021年9月168例Her2+转移性乳腺癌患者作为研究对象,均接受紫杉醇+曲妥珠单抗化疗方案。采用实时荧光定量PCR检测曲妥珠单抗治疗前(基线)血清miR-130a水平。观察随访治疗开始后不良反应的发生情况,并记录治疗失败时间(TTF),采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-130a水平预测乳腺癌患者化疗心脏毒性的价值。结果基线血清miR-130a表达水平与N分期、左室射血分数(LVEF)有关(P<0.05)。血清miR-130a高水平组患者的TTF明显短于低水平组(P<0.05)。心脏毒性组患者基线血清miR-130a水平显著高于非心脏毒性组(P<0.05)。ROC曲线分析显示,基线血清miR-130a水平预测乳腺癌患者化疗发生心脏毒性的曲线下面积为0.733(95%CI:0.657~0.809)。结论基线血清miR-130a水平与Her2+转移性乳腺癌患者接受曲妥珠单抗化疗后心脏毒性风险相关,可作为早期亚临床心功能不全的预测因子。

尼妥珠单抗联合同步放疗在宫颈癌治疗中对miR-196a、miR-130a表达的影响研究

目的探讨尼妥珠单抗联合同步放疗在宫颈癌治疗中的疗效分析及对miR-196a、miR-130a表达的影响。方法选取2015年1月至2016年6月本院收治的106例宫颈癌患者作为研究对象,随机分为对照组与研究组,每组53例。对照组给予常规化疗及三维后装腔内放射治疗,研究组在对照组治疗基础上给予尼妥珠单抗治疗。比较两组肿瘤控制率、不良反应发生情况及治疗前后miR-196a、miR-130a表达水平、免疫功能(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))、肿瘤标志物[癌抗原153(CA153)、糖类抗原199(CA199)、癌胚抗原(CEA)]、生存情况[中位总生存期(OS)、中位无进展生存期(PFS)]。结果研究组肿瘤控制率为90.57%,高于对照组的75.47%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组miR-196a、miR-130a表达水平比较差异无统计学意义;治疗后,两组miR-196a、miR-130a表达水平均低于治疗前,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)均低于治疗前,CD8^(+)高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前后,两组CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)比较差异无统计学意义。治疗前,两组血清CA153、CA199、CEA水平比较差异无统计学意义;治疗后,两组血清CA153、CA199、CEA水平均低于治疗前,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组血小板减少、血红蛋白减少、消化道损伤、呕吐恶心Ⅰ~Ⅱ、Ⅲ~Ⅳ发生率比较差异无统计学意义。研究组中位PFS、中位OS均长于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论尼妥珠单抗联合同步放疗治疗宫颈癌患者,有利于下调miR-196a、miR-130a表达,提高肿瘤控制率,延长患者生存期,且安全性较高。