miRNA-138-5p靶向调控胱天蛋白酶3减缓吸烟所致睾丸支持细胞TM4细胞凋亡

近年来研究表明,长期大量吸烟可致睾丸出现不可逆性损伤进而出现精子发生受阻,凋亡信号通路在其中发挥着关键作用,其分子调控机制仍有待深入研究。本研究旨在探讨miRNA-138-5p在香烟烟雾所致小鼠睾丸支持细胞TM4细胞(正常小鼠睾丸Sertoli细胞)损伤中的靶向调控机制。MTT法、乳酸脱氢酶法和TUNEL法结果显示,CSE干预后的TM4细胞存活率显著降低(P<0.05),细胞毒性显著增加(P<0.05),细胞凋亡率显著增加(P<0.05);RT-PCR和Western印迹结果证明,10%CSE干预TM4细胞后,凋亡前体基因p53、促凋亡基因Bak和胱天蛋白酶3(caspase-3)的mRNA和蛋白质表达水平显著上调(P<0.05);在TM4细胞中转染miRNA-138-5p过表达质粒后同样进行CSE干预,结果显示,支持细胞存活率较转染前显著升高(P<0.05),凋亡阳性细胞数较转染前显著降低(P<0.05),凋亡前体p53基因、促凋亡基因Bak和Caspase-3的mRNA和蛋白质表达较转染前显著下调(P<0.05);沉默miRNA-138-5p后,Bak、胱天蛋白酶3的mRNA和蛋白质表达水平显著增加(P<0.05);在线数据库分析显示,miRNA-138-5p与胱天蛋白酶3具有较高的匹配预测值,双荧光素酶报告基因结果显示,Bak未结合至miRNA-138-5p,而胱天蛋白酶3可以靶向结合至miRNA-138-5p。以上结果提示,miRNA-138-5p可靶向调控胱天蛋白酶3,减缓吸烟所致睾丸支持细胞凋亡,具有支持细胞的保护作用。

miRNA-138-5p、miRNA-34b在肺癌中的表达及与患者临床特征和预后的关系

目的 探讨miRNA-138-5p、miRNA-34b在肺癌中的表达及与患者临床特征和预后的关系。方法 选取151例肺癌患者,均进行手术切除治疗,取术后肺癌组织及癌旁组织,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测miRNA-138-5p、miRNA-34b水平。比较不同临床特征、不同预后肺癌患者肺癌组织中miRNA-138-5p、miRNA-34b水平,肺癌患者预后的影响因素采用多因素Logistic回归分析。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),评估miRNA-138-5p、miRNA-34b单独及联合检测对肺癌患者预后的预测价值。结果 肺癌组织中miRNA-138-5p、miRNA-34b水平均明显低于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。肿瘤直径≥2 cm、TNM分期为Ⅲ期、有淋巴结转移、分化程度为低分化的肺癌患者肺癌组织中miRNA-138-5p、miRNA-34b水平分别明显低于肿瘤直径﹤2 cm、TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移、分化程度为中高分化的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。至随访结束,151例肺癌患者中,预后良好119例,预后不良32例。预后不良肺癌患者肺癌组织中miRNA-138-5p、miRNA-34b水平均明显低于预后良好患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。多因素Logistic回归分析结果显示,肿瘤直径≥2 cm、TNM分期为Ⅲ期、有淋巴结转移、分化程度为低分化、miRNA-138-5p水平降低、miRNA-34b水平降低均是肺癌患者预后的独立危险因素(P﹤0.05)。ROC曲线显示,miRNA-138-5p、miRNA-34b联合检测预测肺癌患者预后的AUC为0.951(95%CI:0.918~0.984),高于二者单独检测的0.603、0.572。结论 miRNA-138-5p、miRNA-34b在肺癌组织中异常低表达,且与患者临床特征、预后密切相关,有望成为评估肺癌恶性程度及预后的重要分子标志物。

MiRNA-138抑制JNK/p38 MAPK通路保护新生大鼠心肌细胞凋亡

[目的]探究miRNA-138抑制JNK/p38MAPK通路保护新生大鼠心肌细胞凋亡。[方法]收集2018年1月至12月急性心肌缺血患者全血样本33例,另招募同期体检健康者全血样本33例作对照;构建新生大鼠缺血再灌注(I/R)模型,将40只新生大鼠随机分为空白对照组(Control)、模型组(I/Rmodel)、阴性对照组(注射无序序列,Scramble)及miRNA-138过表达组(A d-miRNA-138),每组10只。采用qRT-PCR检测全血和心肌组织中miRNA-138、Bcl2及BaxmRNA的表达,电生理记录仪检测大鼠血流动力学指标水平,HE染色观察大鼠心肌组织病理损伤,免疫组法化检测心肌组织中Casapse-3的表达,TUNEL染色观察大鼠心肌组织细胞的凋亡情况,ELISA法检测心肌组织活性氧(R OS)的含量,Westernblotting检测JNK/p38MAPK通路蛋白的表达。[结果]与健康对照相比,急性心肌缺血患者全血中miRNA-138的水平显著降低(P<0.05);与I/R模型组相比,Ad-miRNA-138组大鼠心肌细胞间隙更小、排列更整齐性、结构更完整,miRNA-138表达、心功能指标+dp/dtmax、HR、LVSP及Bcl2/Bax水平显著上升,凋亡细胞数、Caspase-3阳性表达细胞率、ROS、p-p38/p38、p-c-jun/c-jun及p-JNK1/2/JNK1/2显著下调(P<0.05)。[结论]m iRNA-138可通过抑制JNK/p38MAPK通路,抑制大鼠心肌细胞的凋亡,并减轻活性氧损伤,从而保护新生大鼠心肌细胞。

microRNA-138通过靶向作用于CCND1抑制结肠癌细胞增殖

目的探讨人结肠癌细胞SW620中细胞周期蛋白1(CCND1)的表达情况及其异常表达对细胞增殖的影响,阐述microRNA-138(miR-138)在SW620增殖中的可能机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)以及Western blot确定结肠癌组织和癌旁组织中CCND1的表达情况;随后采用qT-PCR检测结肠癌组织内miR-138的表达,并通过统计学分析miR-138与CCND1表达的相关性,培养SW620细胞并转染miR-138模拟物(mimics)后验证miR-138与CCND1的相关性,在SW620细胞内进一步转染miR-138模拟物后,Transwell和MTT检测不同处理组中细胞增殖和迁移能力的改变情况;继续转染CCND1 siRNA后,探索miR-138影响细胞生物学过程的可能机制。结果结肠癌组织中,与相应癌旁组织相比,CCND1表达显著升高,miR-138表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);转染miR-138mimics后,与空白对照组(未转染组)相比,细胞迁徙能力下降,同时增殖降低,差异有统计学意义(P<0.05);转染CCND1 siRNA后,与未转染组相比,miR-138表达变化无显著差异(P>0.05),而细胞侵袭能力和增殖能力较未转染组相比显著改变,差异有统计学意义(P<0.05)。结论结肠癌组织中CCND1异常升高可能与miR-138的表达降低有关,且miR-138影响SW620细胞的迁移和增殖能力可能是通过影响CCND1的表达实现的。

miRNA-138在TGF-β1诱导的乳腺癌上皮间质转化发生中的作用

目的:探讨miRNA-138在TGF-β1诱导的乳腺癌MDA-MB-231细胞上皮间质转化(EMT)发生中的作用。方法:0.005 g/L TGF-β1刺激MDA-MB-231细胞48 h,以未刺激细胞作为空白对照,RT-PCR和Western blot检测MDA-MB-231细胞E-cadherin和vimentin mRNA、蛋白表达的变化,RT-PCR检测miRNA-138表达的变化。MDAMB-231细胞转染100 nmol/L miRNA-138拟似物48 h,以转染100 nmol/L miRNA无关序列细胞、单纯转染脂质体细胞和空白细胞作为对照,RT-PCR检测miRNA-138表达的变化,RT-PCR和Western blot检测MDA-MB-231细胞E-cadherin和vimentin mRNA、蛋白表达的变化。0.005 g/L TGF-β1刺激同时转染100 nmol/L miRNA-138拟似物48h,以0.005 g/L TGF-β1刺激同时转染100 nmol/L miRNA无关序列和空白细胞作为对照,RT-PCR和Western blot检测MDA-MB-231细胞E-cadherin和vimentin mRNA、蛋白表达的变化。结果:与空白对照组相比,0.005 g/L TGF-β1刺激MDA-MB-231细胞48 h可降低E-cadherin表达,提高vimentin表达,抑制miRNA-138表达(P<0.05)。与其他3组相比,转染100 nmol/L miRNA-138拟似物48 h组MDA-MB-231细胞E-cadherin表达升高,而vimentin表达降低(P<0.05)。与其他2组相比,miRNA-138表达增加可部分逆转TGF-β1刺激诱导的MDA-MB-231细胞EMT的发生。结论:miRNA-138参与TGF-β1诱导的乳腺癌MDA-MB-231细胞EMT的发生。

MicroRNA-138在胶质瘤中的表达及其功能研究

目的:探讨microRNA-138(miR-138)调控胶质瘤增殖和迁移能力的机制.方法:利用胶质瘤病例分析miR-138与胶质瘤临床病理之间的关系;利用realtime-PCR检测胶质瘤细胞U87和U251中miR-138的表达;MTT检测miR-138对胶质瘤细胞增殖的影响;划痕实验检测miR-138对胶质瘤细胞迁移的影响;Western blot检测miR-138对h TERT蛋白表达的影响.结果:MiR-138的表达水平与胶质瘤临床病理密切相关,胶质瘤患者普遍呈现miR-138低表达现象,miR-138在胶质瘤细胞U87和U251中的表达低于正常胶质细胞HEB.过表达miR-138抑制胶质瘤细胞U87和U251的增殖和迁移能力,同时miR-138能够下调h TERT蛋白的表达.结论:MiR-138通过下调h TERT蛋白的表达抑制胶质瘤细胞的增殖和迁移,是新的胶质瘤抑癌因子.

miRNA-138调控卵巢上皮癌细胞对顺铂敏感性的机制研究

目的探讨mi RNA-138和沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)的差异表达对卵巢上皮癌顺铂化疗敏感性的影响。方法选取2014年1月-2017年1月在牡丹江医学院红旗医院妇科就诊卵巢上皮癌患者80例。根据患者对顺铂化疗的敏感性分为顺铂敏感组和顺铂耐药组。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)和Western blot检测卵巢上皮癌组织中mi RNA-138和SIRT1的表达水平;培养SKOV3细胞,分别转染mi RNA-138的类似物(mi RNA-138 mimic)和抑制物(mi RNA-138 inhibitor)后,q RTPCR检测SIRT1 mi RNA的表达变化,并采用MTT法检测细胞对顺铂的敏感性;SIRT1 mi RNA 3'-UTR野生型(wt)和突变型(mut)萤光素酶报告质粒与mi RNA-138 mimic共转染,双荧光素酶报告系统分析荧光素酶活性。结果铂敏感组mi RNA-138表达水平高于顺铂耐药组,而SIRT1表达水平低于顺铂耐药组,差异有统计学意义(P<0.05);过表达mi RNA-138可降低SIRT1的表达,提高SKOV3细胞对顺铂的敏感性,而抑制mi RNA-138可提高SIRT1的表达,降低SKOV3细胞对顺铂的敏感性,差异有统计学意义(P<0.05);mi RNA-138 mimic与SIRT1 mi RNA 3'-UTR野生型质粒共转染,荧光素酶活性降低(P<0.05),而与SIRT1 mi RNA 3'-UTR突变型质粒共转染,荧光素酶活性无变化(P>0.05)。结论 mi RNA-138可能通过SIRT1调控卵巢上皮癌细胞对顺铂的敏感性,可作为卵巢上皮癌顺铂化疗耐药治疗的靶点。

肺炎支原体肺炎患儿血清miR-126联合miR-138水平对预后的预测价值

目的研究肺炎支原体肺炎(MPP)患儿血清微RNA(miR)-126联合miR-138水平对预后的预测价值。方法选取2020年7月至2022年10月江苏省南通市第一人民医院儿科MPP患儿114例,根据预后情况将其分为预后良好组和预后不良组,比较两组一般资料及临床资料,包括性别、年龄、发热时间、病情严重程度、血常规指标[白细胞计数(WBC)、血小板计数(PLT)、红细胞沉降率(ESR)]、炎症因子指标[白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)]、miR-126、miR-138水平;分析MPP患儿预后的影响因素及miR-126联合miR-138水平对预后的预测价值。结果114例MPP患儿治疗1个疗程后预后不良19例。预后不良组重症占比及WBC、PLT、IL-6、TNF-α、CRP、miR-126、miR-138水平高于预后良好组(P<0.05);两组性别、年龄、发热时间、ESR比较,差异无统计学意义(P>0.05)。病情严重程度及WBC、TNF-α、CRP、miR-126、miR-138水平为MPP患儿预后不良的影响因素(OR>1,P<0.05)。miR-126联合miR-138水平预测MPP患儿预后的曲线下面积高于各指标单独检测。结论血清miR-126联合miR-138水平对MPP患儿预后的预测价值较高。

急性髓系白血病患者PD-L1和MicroRNA-138-5p的表达及其临床意义

目的:探讨PD-L1和MicroRNA-138-5p(miR-138)在急性髓系白血病(AML)患者外周血单个核细胞(PBMNCs)中的表达特点及其临床意义。方法:应用SYBR GreenⅠreal-time PCR方法分别检测20例初治AML患者、9例复发/难治AML患者和8例完全缓解患者PBMNCs中PD-L1 mRNA和miR-138的表达水平,并选择20例健康体检者外周血样本作为对照组。结果:初治AML组和复发/难治AML组患者PD-L1的表达水平均显著高于健康对照组(P<0.01),而且复发/难治AML组患者PD-L1的表达水平显著高于初治AML组患者(P<0.01);初治AML组和复发/难治AML组患者miR-138的表达水平均显著低于健康对照组(P<0.01);在20例初治AML患者中共收集了8例完全缓解期标本,完全缓解组mi R-138的表达水平高于初治AML组(P<0.05),而缓解组PD-L1的表达水平与初治AML组差异无统计学意义(P>0.05);初治AML患者中PD-L1 mRNA与mi R-138表达呈负相关(P<0.05)。结论:AML患者PBMC中PD-L1表达增加、miR-138表达下调,且两者间有相关性。

microRNA-138与心力衰竭关系的研究

目的研究microRNA-138在心力衰竭患者血清中的表达水平。方法选择2015年1~3月朝阳市中心医院心内科住院的48例心力衰竭患者（心力衰竭组）,病情严重程度按NYHA心功能分级分为Ⅱ~Ⅳ级,另外选取同期心内科住院的40例非心力衰竭患者（对照组）,采用荧光定量PCR法测定血清microRNA-138的表达水平。符合Framingham心力衰竭诊断标准的患者均可入心力衰竭组。结果心力衰竭患者血清microRNA-138表达水平较非心力衰竭患者升高,差异有统计学意义（P〈0.05）,且随NYHA心功能分级的增加而升高。将血清miR-138水平与临床常用心功能评估指标作相关性分析,结果显示,心力衰竭组患者血清miR-138水平与氨基末端脑钠肽前体（NT-proBNP）水平呈正相关（P〈0.05）,与左室射血分数（LVEF）值呈负相关（P〈0.01）,miR-138诊断心力衰竭的ROC曲线下面积为0.81。结论microRNA-138可作为诊断心力衰竭、危险分层、疗效及预后的一个客观生物标志物。

miR-138靶向调控SIRT1表达及其对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨微小RNA-138(miRNA-138)在膀胱癌细胞中的表达情况,并研究其对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响及其可能的靶基因。方法采用实时定量PCR(QPCR)法检测膀胱癌细胞T24和正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1中miR-138的表达水平。将T24细胞分为3组:未转染组、miR-138对照组(转染阴性对照片段)和miR-138转染组(转染miR-138mimics)。采用MTT法检测细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞的凋亡情况;Western blotting检测细胞中沉默信息调节因子1(SIRT1)蛋白的表达水平;双荧光素酶报告基因实验验证miR-138与SIRT1间的靶向关系。结果膀胱癌T24细胞中miR-138的表达量为0.57±0.19,低于SV-HUC-1细胞的1.00±0.26(P<0.05)。miR-138转染组的miR-138表达量为2.59±0.67,高于未转染组的1.00±0.36和miR-138对照组的1.08±0.49(P<0.05)。miR-138转染组T24细胞的增殖率显著低于未转染组和miR-138对照组(P<0.05)。转染48 h后,miR-138转染组的细胞凋亡率为(29.8±1.9)%,高于未转染组的(5.8±1.2)%和miR-138对照组的(7.7±0.9)%(P<0.05)。miR-138转染组SIRT1的相对表达量为0.59±0.22,低于未转染组的1.00±0.35和miR-138对照组的1.20±0.42(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证明SIRT1是miR-138的直接作用靶点。结论 miR-138在膀胱癌细胞中低表达,可能通过靶向SIRT1调控膀胱癌细胞的增殖和凋亡。

miR-138-5p在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨微小RNA-138-5p(miR-138-5p)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及临床意义。方法采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测102例NSCLC组织和98例癌旁组织中miRNA-138-5p表达,分析miRNA-138-5p表达与NSCLC临床病理特征(性别、年龄、TNM分期、肿瘤直径和淋巴结转移)的关系; Kaplan-Miere法绘制生存曲线,差异行Log-rank检验;Cox回归模型分析影响总生存(OS)的因素。结果 QPCR检测结果显示,NSCLC组织中miR-138-5p表达水平为0. 42±0. 11,显著低于癌旁组织的1. 03±0. 28,差异具有统计学意义(P<0. 05)。miR-138-5p表达与TNM分期、肿瘤直径及淋巴结转移均有关(P<0. 05)。miR-138-5p高表达者的中位OS>36个月,显著高于低表达者的26个月,差异有统计学意义(P<0. 05)。Cox单因素分析显示除miR-138-5p表达外,淋巴结转移、肿瘤直径和TNM分期也与OS有关(P<0. 05)。结论 miR-138-5p在NSCLC中表达下调,其表达与NSCLC发生发展、预后有关,miR-138-5p可作为NSCLC诊断和预后预测新的靶点。

食管鳞癌组织微小RNA-138、微小RNA-145表达水平与1型/2型辅助性T细胞漂移和预后的关系

目的 分析食管鳞癌组织中微小RNA(miR)-138、miR-145的表达水平及两者与1型辅助性T细胞(Th1)/2型辅助性T细胞(Th2)漂移和预后的关系。方法 2015年5月~2018年5月间我院收治的112例食管鳞癌病人为食管鳞癌组,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测食管鳞癌组织及癌旁组织中miR-138、miR-145的表达水平。同期70例健康体检人群作为对照组,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测食管鳞癌组及对照组血清Th1型细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-2和Th2型细胞因子IL-4、IL-10水平。分析癌组织中miR-138、miR-145表达水平与临床病理参数关系。Pearson相关性分析癌组织中miR-138、miR-145与Th1型、Th2型细胞因子的相关性。分析不同miR-138、miR-145表达情况食管鳞癌病人生存情况。结果 食管鳞癌组织中miR-138、miR-145的表达水平分别为(1.155±0.232)、(1.110±0.217),癌旁组织分别为(4.155±0.732)、(3.910±0.617),食管鳞癌组织中miR-138、miR-145的表达水平明显低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。不同肿瘤分期的食管鳞癌组织中miR-138、miR-145表达水平差异具有统计学意义(P<0.05)。癌组织中miR-138、miR-145的表达水平均与IFN-γ、IL-2呈正相关(r=0.451、0.543;0.520、0.401,P<0.05),与IL-4、IL-10呈负相关(r=-0.391、-0.510;-0.402、0.553,P<0.05)。miR-138高表达病人的3年总体生存率(overall survival, OS)为58.49%(31/53),明显高于低表达病人17.24%(P<0.05);miR-145高表达3年OS为52.73%(29/55),明显高于低表达病人21.43%(12/56)(P<0.05)。结论 食管鳞癌组织中miR-138、miR-145表达水平降低,且与病人不良预后有关。miR-138、miR-145可能通过影响Th1/Th2漂移促进食管鳞癌恶性进展。

胃癌细胞株BGC-823中miR-138-5p负性调控Sirt1基因的表达

目的在胃癌细胞中筛选并鉴定靶向Sirt1基因的micorRNA。方法生物信息学软件预测特异性靶向Sirt1基因3’端非编码区域(3′-UTR)的microRNA;分别构建野生型和突变型与目的 microRNA匹配的Sirt1基因3′-UTR序列双荧光素酶报告基因载体;将miR-138-5p过表达质粒分别与野生型和突变型双荧光素酶报告基因载体共转染入胃癌细胞株BGC-823中,应用双荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性。miR-138-5p过表达质粒转染BGC-823细胞,荧光定量PCR检测转染细胞miR-138-5p与Sirt1 mRNA的表达,Western blot检测SIRT1蛋白的表达。结果生物信息学软件预测显示miR-138-5p为靶向调控Sirt1的候选micro RNA;成功构建野生型和突变型Sirt1基因3′-UTR双荧光素酶报告基因载体;荧光素酶活性实验表明,miR-138-5p可以下调野生型质粒的荧光素酶活性,不影响突变型质粒的荧光素酶。miR-138-5p过表达质粒转染后的BGC-823细胞中,miR-138-5p表达显著上调,Sirt1基因mRNA和蛋白的表达水平明显下调。结论在胃癌细胞中miR-138-5p靶向作用于Sirt1基因3′-UTR,并负性调控Sirt1基因。

miR-138转录可下调p33ING1在衰老细胞中的表达

p33ING1参与了多种生物学过程,包括细胞生长抑制、凋亡、DNA损伤修复、染色质重塑等.近来研究显示,p33在细胞衰老过程中表达降低,这可能与衰老细胞的抗凋亡有关.但p33在衰老细胞中表达下调的分子机理仍不清楚.我们发现,在衰老细胞中miR-138表达升高与p33基因的表达降低密切相关.以下实验结果支持如此结论:(1)与年轻细胞相比,带p33ING1 3′UTR报告载体荧光素酶活性在衰老细胞中降低;突变3′UTR上的miR-138结合位点可升高报告载体荧光素酶在衰老细胞中的活性;(2)在衰老细胞中miR-138的表达升高;(3)在年轻细胞中,过表达miR-138不仅可抑制带p33ING1 3′UTR报告载体荧光素酶活性,而且下调细胞内p33ING1基因mRNA和蛋白水平.与此相反,抑制miR-138活性可升高带p33ING1 3′UTR报告载体荧光素酶活性,并且上调细胞内p33ING1基因mRNA和蛋白水平.这些结果表明,p33ING1基因是miR-138的靶基因;在衰老过程中,miR-138表达升高,由此导致该基因的表达降低.

miR-138 rs139365823多态性与先天性心脏病风险的相关性研究

目的探讨miR-138中的遗传多态性是否可能导致先天性心脏病(CHD)的发生和潜在的机制。方法本研究通过miR-138基因分型的方法对100例法洛四联症(TOF)患者及正常对照人群进行病例对照研究。鉴定2个miR-138 SNPs,包括位于pre-miR-138序列中的rs139365823和位于pri-miR-138序列中的rs76987351。结果rs139365823等位基因A的基因型及等位基因频率与TOF风险增加明显相关,但与rs76987351 A/G等位基因无明显相关。PCR数据显示,rs139365823等位基因A明显增加miR-138的表达,而rs76987351等位基因A具有相反的作用。由于TOF是由流出道(OFT)发育异常引起,因此将参与OFT发育有关的Dvl2鉴定为miR-138的直接靶基因。此外,rs139365823等位基因A增强了miR-138对Dvl2的抑制作用。结论本研究证明了miR-138 rs139365823等位基因A增加了miR-138的表达及它对靶基因的抑制作用。

结直肠癌组织中HIF-1α与miR-138的表达变化及其与患者预后的相关性探讨

目的探讨结直肠癌组织中缺氧诱导因子-1a(HIF-1a)与micro RNA-138(mi R138)的表达变化及与其患者预后的相关性。方法选择2016年1月~2017年8月科室收治的结直肠患者70例,设为观察组,患者行手术治疗,术中取结直肠癌病灶组织;以癌旁组织设为对照组。采用免疫组织化学法完成两组HIF-1α与mi R138蛋白表达测定,记录结直肠癌组织患者病理资料,包括:年龄、肿瘤直径、肿瘤分期、分化程度、淋巴结转移及术后复发情况,对上述病理资料进行单因素分析;采用COX回归模型分析结直肠癌组织中HIF-1α与mi R138与患者预后的相关性。结果观察组结肠癌组织中HIF-1α与mi R138阳性率,均高于对照组(P<0.05);单因素及COX回归模型分析结果表明:结直肠癌组织中HIF-1α与mi R138阳性率与性别、年龄无相关性(P>0.05);结直肠癌组织中HIF-1α与mi R138阳性率与肿瘤大小、肿瘤分期、淋巴结转移、分化程度及浸润呈正相关性(P<0.05)。结论结直肠癌组织中HIF-1α与mi R138均呈高表达,其表达水平与患者预后具有一定的相关性,加强患者HIF-1α与mi R138水平测定能评估患者预后,值得推广应用。

miRNA-138与EZH2在肾透明细胞癌发生发展中作用机制的研究

目的:探讨miRNA-138及其调控靶基因EZH2在肾透明细胞癌(RCC)发生发展中的相关作用机制。方法:利用第二代大规模平行测序技术对10例RCC及对应癌旁组织进行全基因组测序,在肾癌组织中筛选出表达显著上调的miRNA-138;其次在人肾癌细胞株786-O、ACHN、Caki-1、769-P、os-rc-2及对照细胞人胚肾细胞293T中对miRNA-138进行转染,采用划痕实验检测miRNA-138对细胞株侵袭和迁移能力的影响;进而用多种预测软件预测靶基因,对预测的候选靶基因EZH2进行PCR验证。结果:发现miRNA-138在RCC中表达上调,并能够显著促进人肾癌细胞株786-O、ACHN的迁移;而其候选靶基因EZH2的表达在临床组织标本中显著上调;相应蛋白变化需要进一步验证。结论:EZH2表达在RCC中明显高于正常组织,提示EZH2可能是RCC一个敏感的生物学标志。推测miRNA-138与其靶基因EZH2可能参与肿瘤代谢和细胞凋亡等信号通路,在RCC的发生发展中发挥重要作用。

microRNA-138在大鼠脑缺血再灌注神经损伤中的作用与机制研究

目的:探讨microRNA-138(miR-138)在脑缺血再灌注神经损伤中的作用及机制。方法:SD大鼠分为正常组、假手术组和模型组,模型组采用线栓法建立大鼠大脑中动脉局灶缺血再灌注损伤模型,术后24 h取脑组织检测miR-138和Lcn-2的表达水平;采用脂质体Lipofectamine 2000将miR-138 mimics转染PC12细胞,采用q PCR检侧miR-138的表达丰度,采用MTT法检测细胞生长曲线,采用Western blot检测Lcn-2蛋白的表达水平,采用双荧光素酶报告基因验证miR-138的靶基因。结果:模型组中miR-138的表达量显著低于正常组和假手术组,过表达miR-138能够促进缺氧后PC12细胞的增殖,同时Lcn-2蛋白表达量降低,miR-138能够靶向作用于Lcn-2,过表达Lcn-2能够逆转miR-138的作用。结论:过表达miR-138对脑缺血再灌注损伤有显著的保护作用,机制可能是通过抑制靶基因Lcn-2蛋白的表达。

miRNA-138在冠心病患者血清中的表达水平及临床意义

目的研究冠心病患者血清中miRNA-138的表达水平与稳定型心绞痛.不稳定型心绞痛以及急性心肌梗死的关系,并探讨其临床意义。方法收集2019年12月~2021年2月就诊于哈尔滨医科大学附属第一医院的冠心病患者86例,其中稳定型心绞痛组30例,不稳定型心绞痛组31例,急性心肌梗死组25例,同时选择健康成年人22例作为对照组。患者均经过冠状动脉造影或冠状动脉血管成像(computerized tomographic angiography,CTA)确诊。采集血液,离心分离血清,放入-80℃冰箱保存,利.用血清miRNA试剂盒提取血清miRNA,逆转录合成cDNA,用q-PCR分析各组患者血清中miRNA-138的表达水平。结果将4组血清miRNA-138的相对表达量进行比较,差异均有统计学意义(P<0.01);稳定型心绞痛组与不稳定型心绞痛组比较,血清中miRNA-138的相对表达量差异无统计学意义(P>0.05);上述两组分别与心肌梗死组相比,血清miRNA-138的相对表达量差异均有统计学意义(P<0.01)。对照组和另外3组分别绘制ROC曲线显示:稳定型心绞痛组:曲线下面积为0.903,P<0.001,最佳临界值为0.8851,敏感度为0.773,特异性对应是0.839;不稳定型心绞痛组:曲线下面积是0.880,P<0.001,最优临界值是0.84415,敏感度是0.818,特异性是0.700;心肌梗死组:曲线下面积是1.000,P<0.001,最优临界值是0.60765,敏感度是1.000,特异性是1.000,P<0.001。miRNA-138与各实验组进行相关性分析,miRNA-138与稳定型心绞痛组、不稳定型心绞痛组和心肌梗死组的严重程度呈负相关,P<0.001。结论.miRNA-138在冠心病患者血清中表达水平降低,灵敏度及特异性较高,可以为临床冠心病的诊断及预测提供新的方向。