急诊冠状动脉介入治疗术后循环microRNA-26b-5p水平与血糖水平变化的观察性研究

目的:评估急诊冠状动脉介入治疗术(PCI)后循环microRNA-26b-5p水平和血糖水平变化的趋势及相关性。方法:根据入选标准和排除标准,共入选接受急诊PCI术的急性前壁心肌梗死患者38例。详细记录临床相关资料,分别于术前、术后24h、术后72h行循环血microRNA-26b-5p和血糖水平检测。Real Time PCR法检测血液样本中microRNA-26b-5p表达量的变化。结果:对于成功行急诊PCI的急性心肌梗死患者,术后microRNA-26b-5p表达水平较术前明显升高(P<0.01),术后血糖水平逐渐下降(P<0.01),两者之间存在负相关(r=-0.332,P<0.01)。结论:急性心肌梗死患者往往存在应激性高血糖,microRNA-26b-5p可能参与血糖水平的相关。

lncRNA SNHG6通过microRNA-26b-5p对三阴性乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭的作用机制研究

目的 探究lncRNA SNHG6通过microRNA-26b-5p(miR-26b-5p)对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞增殖、迁移、侵袭的作用机制。方法 体外培养人TNBC细胞系MDA-MB-231细胞,培养后分组转染。设置对照组(空载质粒转染),SNHG6敲减组(si-SNHG6慢病毒载体转染)、miR-26b-5p抑制组(空载质粒+miR-26b-5p-inhibitor转染)及共转染组(si-SNHG6慢病毒载体+miR-26b-5p-inhibitor转染)。实时荧光定量聚合酶链反应检测SNHG6及miR-26b-5p的表达,分别进行CCK-8实验、划痕实验及Transwell实验检测MDA-MB-231细胞增殖、迁移及侵袭能力,采用双荧光素酶报告实验检测SNHG6与miR-26b-5p的靶向作用。结果 与对照组比较,SNHG6敲减组SNHG6 mRNA表达下调(P <0.05),miR-26b-5p mRNA表达上调(P <0.05);与对照组比较,miR-26b-5p抑制组SNHG6 mRNA表达上调(P <0.05),miR-26b-5p mRNA表达下调(P <0.05);与SNHG6敲减组比较,miR-26b-5p抑制组和共转染组SNHG6 mRNA表达上调(P <0.05),miR-26b-5p mRNA表达下调(P <0.05);与miR-26b-5p抑制组比较,共转染组SNHG6 mRNA表达下调(P <0.05),miR-26b-5p mRNA表达上调(P <0.05)。对照组、SNHG6敲减组、miR-26b-5p抑制组、共转染组24 h、48 h、72 h的OD值比较,采用重复测量设计的方差分析,结果:(1)不同时间点OD值有差异(F=52.481,P=0.000)。(2)4组OD值有差异(F=50.336,P=0.000),与对照组比较,SNHG6敲减组及共转染组24 h、48 h及72 h的OD值降低(P <0.05),miR-26b-5p抑制组24 h、48 h及72 h的OD值升高(P <0.05);与SNHG6敲减组比较,miR-26b-5p抑制组和共转染组24 h、48 h及72 h的OD值升高(P <0.05);与miR-26b-5p抑制组比较,共转染组OD值降低(P <0.05)。(3)4组OD值变化趋势有差异(F=20.109,P=0.000)。与对照组比较,SNHG6敲减组和共转染组划痕愈合率降低,侵袭细胞数减少(P <0.05),miR-26b-5p抑制组划痕愈合率升高,侵袭细胞数增加(P <0.05);与SNHG6敲减组比较,miR-26b-5p抑制组和共转染组划痕愈合率升高,侵袭细胞数增加(P <0.05);与miR-26b-5p抑制组比较,共转染组划痕愈合率降低,侵袭细胞数减少(P <0.05)。且SNHG6与miR-26b-5p基因序列上存在结合位点。结论 敲减SNHG6通过靶向上调MDA-MB-231细胞中miR-26b-5p的表达,抑制TNBC增殖、迁移及侵袭。

血清LncRNA HCG11及miR-26b-5p与急性缺血性脑卒中患者脑梗死面积及功能预后的相关性

目的研究急性缺血性脑卒中患者血清长链非编码RNA人类白细胞抗原复合物组11(long non coding RNA human leukocyte antigen complex group 11,LncRNA HCG11)及微小核糖核酸-26b-5p(microRNA-26b-5p,miR-26b-5p)水平与脑梗死面积及功能预后的相关性。方法选取2021年1月至2022年12月本院收治的急性缺血性脑卒中患者106例,根据梗死面积将其分为小面积组、中面积组和大面积组,随访1年后根据改良Rankin量表(modified Rankin Scale,mRS)分为预后良好组和预后不良组。采用qRT-PCR检测LncRNA HCG11,miR-26b-5p相对表达量;采用Logistic回归分析影响患者预后的因素;绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析LncRNA HCG11和miR-26b-5p对患者梗死面积的诊断及对预后的预测价值。采用Spearman相关分析LncRNA HCG11、miR-26b-5p与梗死面积及美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale,NHISS)的相关性。结果急性缺血性脑卒中大面积梗死患者的LncRNA HCG11水平升高,miR-26b-5p水平降低(P<0.05);与预后良好患者相比,预后不良患者的LncRNA HCG11水平升高,miR-26b-5p水平降低(P<0.05);不同梗死面积患者高血压史、高血脂史以及NHISS评分、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)之间比较,差异具有统计学意义(P<0.05);LncRNA HCG11与梗死面积及NHISS均呈正相关(r_(梗死面积)=0.553,P_(梗死面积)<0.001;r_(NHISS)=0.462,P_(NHISS)<0.001),miR-26b-5p与梗死面积及NHISS均呈负相关(r'_(梗死面积)=-0.534,P'_(梗死面积)<0.001;r'_(NHISS)=-0.447,P'_(NHISS)<0.001);miR-26b-5p为影响患者预后不良的保护因素,高血压史、NHISS评分、CRP和LncRNA HCG11为患者预后不良的影响因素(P<0.05);LncRNA HCG11和miR-26b-5p及联合诊断患者梗死面积优于单独指标诊断(Z_(LncRNA HCG11)=3.049,P_(LncRNA HCG11)=0.002;Z_(miR-26b-5p)=2.657,P_(miR-26b-5p)=0.008,AUC=0.937);且LncRNA HCG11+miR-26b-5p对患者预后的预测能力显著优于LncRNA HCG11、miR-26b-5p、CRP、NHISS单独指标(Z_(LncRNA HCG11)=2.207,P_(LncRNA HCG11)=0.027;Z_(miR-26b-5p)=2.080,P_(miR-26b-5p)=0.038;Z_(CRP)=2.341,P_(CRP)=0.019;Z_(NHISS)=2.093,P_(NHISS)=0.036,AUC=0.892);LncRNA HCG11与miR-26b-5p呈负相关(r=-0.425,P<0.05)。结论急性缺血性脑卒中患者血清LncRNA HCG11水平升高,miR-26b-5p水平降低,均为患者脑梗死面积及功能预后的影响因素,对患者脑梗死面积及功能预后具有一定的诊断及预测价值。

miR-26b-5p靶向VEGF抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究

目的探讨miR-26b-5p对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法培养人正常肺上皮细胞BEAS-2B和非小细胞肺癌细胞A549,通过qPCR检测BEAS-2B和A549细胞中miR-26b-5p和VEGF mRNA的表达水平。通过Western Blot检测BEAS-2B和A549细胞中E-cadherin、Vimentin和VEGF蛋白的表达水平。生物信息学预测VEGF与miR-26b-5p的靶向关系。使用脂质体法将NC-mimic和miR-26b-5p-mimic转染A549细胞,通过CCK8法、EDU实验检测miR-26b-5p对细胞生长的影响;通过划痕实验和Transwell侵袭实验检测miR-26b-5p对细胞迁移和侵袭的影响;通过Western Blot检测对E-cadherin、Vimentin和VEGF蛋白表达的影响。结果与BEAS-2B细胞相比,在A549细胞中,miR-26b-5p表达水平显著下降(P<0.05),VEGF的mRNA和蛋白表达水平显著上升(P<0.05),E-cadherin蛋白的表达水平显著下降(P<0.05),而Vimentin的蛋白表达水平显著上升(P<0.05)。与NC-mimic组相比,miR-26b-5p-mimic组在24h、48h以及72h时细胞吸光值显著减少(P<0.05),24h划痕距离显著增加(P<0.05),24h侵袭细胞数显著减少(P<0.05),E-cadherin蛋白表达显著上调(P<0.05)、Vimentin和VEGF蛋白表达显著下调(均P<0.05)。结论过表达miR-26b-5p可以通过靶向抑制VEGF的表达,从而抑制非小细胞肺癌A549细胞的增殖、迁移和侵袭。

超声弹性成像联合血清miR-26b-5p及环氧化酶-2检测对早期子宫肌瘤的临床诊断价值

目的:探讨超声弹性成像联合血清微小RNA-26b-5p(miR-26b-5p)、环氧化酶-2(COX-2)检测对早期子宫肌瘤的诊断价值。方法:选取2020年10月至2022年9月在无锡联勤保障中心第九〇〇医院诊断的228例疑似子宫肌瘤患者,以病理切片检查结果为“金标准”,将其分为阳性组(124例)和阴性组(104例),两组均行超声弹性成像检查,采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测患者血清miR-26b-5p表达水平,酶联免疫吸附法检测血清COX-2水平,通过受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC),分析血清miR-26b-5p、COX-2对子宫肌瘤的诊断价值,采用四表格法分析超声弹性成像以及超声弹性成像联合血清miR-26b-5p、COX-2对子宫肌瘤的诊断价值。结果:经病理切片检查,228例患者中子宫肌瘤阳性124例,阴性104例;超声弹性成像结果显示阳性117例,阴性111例,超声弹性成像检查诊断的灵敏度为74.19%,特异度为75.96%,准确率为75.00%。阳性组患者血清miR-26b-5p水平明显低于阴性组,COX-2水平明显高于阴性组,两组比较差异有统计学意义(t=4.519、5.601,P<0.05)。血清miR-26b-5p诊断子宫肌瘤的AUC为0.749,灵敏度为95.97%,特异度为46.15%,最佳截断值为1.10;血清COX-2诊断子宫肌瘤的AUC为0.835,灵敏度为66.13%,特异度为84.62%,最佳截断值为40.58 mg/L;超声弹性成像联合血清miR-26b-5p、COX-2诊断的灵敏度为93.55%,特异度为86.54%,准确率为90.35%,与单独诊断比较差异有统计学意义(χ^(2)=23.158、17.169,P<0.05)。结论:超声弹性成像联合血清miR-26b-5p、COX-2诊断早期子宫肌瘤具有较高的效能。

血清 microRNA-155、microRNA-23b-3p、 microRNA-16-5p与难治性肺炎支原体肺炎 患儿病情严重程度及预后的关系

目的探讨血清microRNA-155(miR-155)、microRNA-23b-3p(miR-23b-3p)、microRNA-16-5p(miR-16-5p)水平与难治性肺炎支原体肺炎(RMPP)患儿病情严重程度及预后的关系。方法前瞻性选取2023年6月—2023年12月杭州市儿童医院收治的101例RMPP患儿为研究对象,收集治疗前血清miR-155、miR-23b-3p、miR-16-5p水平。根据病情严重程度将患儿分为重症组39例与轻症组62例。所有患儿自治疗起随访1个月,根据治疗效果将患儿分为预后不良组22例与预后良好组79例。分析不同病情严重程度及不同预后RMPP患儿血清miR-155、miR-23b-3p、miR-16-5p水平;采用多因素逐步Logistic回归模型分析影响RMPP患儿预后的因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-155、miR-23b-3p、miR-16-5p预测RMPP患儿预后的价值。结果重症组患儿血清miR-155基因相对表达量高于轻症组(P<0.05),miR-23b-3p、miR-16-5p基因相对表达量均低于轻症组(P<0.05)。预后不良组患儿血清miR-155基因相对表达量高于预后良好组(P<0.05),miR-23b-3p、miR-16-5p基因相对表达量均低于预后良好组(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示,儿童器官功能障碍评分2(PELOD-2)[O^R=5.129(95%CI:2.111,12.466)]、miR-155[O^R=3.924(95%CI:1.614,9.535)]、miR-23b-3p[O^R=3.850(95%CI:1.584,9.356)]、miR-16-5p[O^R=3.777(95%CI:1.554,9.179)]是影响RMPP患儿预后的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-155、miR-23b-3p、miR-16-5p及三者联合预测RMPP患儿预后的敏感性分别为63.64%(95%CI:0.408,0.820)、72.73%(95%CI:0.496,0.884)、68.18%(95%CI:0.451,0.853)、86.36%(95%CI:0.640,0.964),特异性分别为70.89%(95%CI:0.594,0.803)、78.48%(95%CI:0.675,0.866)、72.15%(95%CI:0.608,0.814)、91.14%(95%CI:0.820,0.961),曲线下面积分别为0.725(95%CI:0.622,0.827)、0.718(95%CI:0.604,0.831)、0.710(95%CI:0.591,0.829)、0.923(95%CI:0.866,0.980)。结论血清miR-155、miR-23b-3p、miR-16-5p水平与RMPP患儿病情严重程度及预后有关,三者联合预测RMPP患儿的效能良好。

MicroRNA-26b-5p表达水平与心肌梗死和细胞凋亡的相关性

心肌缺血再灌注(I/R)可进一步导致心肌细胞的凋亡和坏死。越来越多的证据表明,microRNA(miRNA)参与了与心肌I/R相关的病理和生理过程。本研究旨在考察microRNA-26b-5p(miR-26b-5p)表达水平与心肌梗死和细胞凋亡的相关性。本研究建立了小鼠心肌I/R模型和缺氧/复氧(H/R)心肌细胞模型(H9C2细胞),检测了miR-26b-5p在I/R小鼠心肌组织和H/R心肌细胞中的表达,并分析了上调miR-26b-5p的表达在体内和体外对心肌细胞凋亡的影响及机制。研究显示,在H/R H9C2细胞和I/R小鼠模型心肌组织中miR-26b-5p的表达水平明显降低。miR-26b-5p的过表达减轻了I/R小鼠模型心肌损伤并在体内和体外抑制了心肌细胞凋亡。此外,丝裂原活化蛋白激酶6(MAPK6)为miR-26b-5p的直接靶标,miR-26b-5p负调节MAPK6的表达。在H/RH9C2细胞中MAPK6的上调抑制了miR-26b-5p对心肌细胞的保护作用。研究结果表明,miR-26b-5p通过靶向MAPK6抑制心肌细胞凋亡从而发挥心脏保护作用。

MicroRNA-21-5p和MicroRNA-18b-5p在大肠癌中的表达及意义

目的研究MicroRNA-21-5p和MicroRNA-18b-5p在大肠癌中的表达和临床意义。方法选取大肠癌组织和癌旁正常组织50例,应用qPCR法,检测MicroRNA-21-5p和MicroRNA-18b-5p表达水平;应用免疫组化法,检测PI3K表达水平。结果 MicroRNA-21-5p、MicroRNA-18b-5p和PI3K在大肠癌组织中的的表达量显著高于癌旁正常组织(P<0.05),且MicroRNA-21-5p、MicroRNA-18b-5p均和PI3K具有明显正相关性(P<0.05)。结论 MicroRNA-21-5p和MicroRNA-18b-5p通过PI3K/AKT信号通路在大肠癌的发生、发展过程中起重要作用。

新肾癌标志物microRNA-130b-5p在肾细胞癌中的表达及临床意义

目的本研究通过检测比较microRNA-130b-5p(miR-130b-5p)在肾癌及癌旁正常组织之间以及肾癌细胞系和正常肾细胞系之间的表达水平,并分析其表达水平与临床病理资料之间的关系,为进一步研究miR-130b-5p在肾癌中深入的功能和机制奠定基础。方法采用qPCR方法检测miR-130b-5p在42对肾癌组织和癌旁正常组织中表达量的差异,并运用秩和检验方法分析肾癌组织中miR-130b-5p表达量与患者临床病理特征之间的相关性。培养肾癌细胞系(786-O和ACHN)和正常肾上皮细胞系(293T)并采用qPCR方法检测细胞中miR-130b-5p的表达量。结果miR-130b-5p在肾癌组织中的表达量明显高于癌旁正常组织(P<0.01),且肾癌组织中miR-130b-5p表达量与患者AJCC临床分期呈正相关(P=0.041),与其他临床病理资料如年龄、性别、T分期、组织类型和Fuhrman分级未发现明显相关关系(P>0.05)。同时,miR-130b-5p表达量在肾癌细胞系中也明显高于正常肾上皮细胞系(P<0.01)。结论 miR-130b-5p在肾癌组织和细胞系中均高表达,且其在肾癌组织中的表达水平与患者AJCC临床分期呈正相关,提示miR-130b-5p与肾癌的发生、发展相关,有望成为新的肾癌肿瘤标志物。

MicroRNA-26a-5p在重症脑梗死患者中的表达与预后的关系

目的探讨microRNA-26a-5p(miR-26a-5p)在重症脑梗死患者中的表达与预后的关系。方法选取50例重症脑梗死患者、50例轻型急性脑梗死(ACI)患者,另选取健康体检者50例为对照组,分别测定3组人员血清中miR-26a-5p的相对表达水平,同时测定脑梗死患者血清中C反应蛋白(CRP)和S100钙结合蛋白β(S100β)含量。根据miR-26a-5p的相对表达水平将重症脑梗死患者分为miR-26a-5p高表达组和miR-26a-5p低表达组,分别比较两组患者性别、年龄、继发院内感染率、脑梗死再发率、APACHE-Ⅱ评分、NIHSS评分、改良Ranking量表评分以及30 d预后的关系。结果轻型ACI组和重症脑梗死组血清中miR-26a-5p相对表达水平均高于对照组(P<0.01),重症脑梗死组血清中miR-26a-5p相对表达水平高于轻型ACI组(P<0.01)。重症脑梗死组血清中CRP含量高于轻型ACI组(P<0.01),但S100β含量无差异(P>0.05)。相关性分析发现轻型ACI组和重症脑梗死组血清中miR-26a-5p表达水平与CRP含量呈正相关,相关系数r为0.651和0.731(P<0.01);但与S100β无明显相关性(P>0.05)。重症脑梗死患者miR-26a-5p高表达组继发院内感染率、脑梗死再发率、APACHE-Ⅱ评分、NIHSS评分均高于miR-26a-5p低表达组,而改良Ranking量表评分低于miR-26a-5p低表达组。重症脑梗死患者miR-26a-5p高表达组中位总体生存时间小于miR-26a-5p低表达组。结论在重症脑梗死患者中检测血清中miR-26a-5p相对表达水平对判断预后有重要临床意义。

microRNA 26b-5p靶向下调p300对人脐带间充质干细胞的增殖作用

目的探讨潜在microRNA靶向下调p300表达水平对人脐带间充质干细胞(human umbilical cord derived mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)增殖的影响。方法通过双荧光素酶报告基因(Firefly/Renilla Luciferase)系统筛选出作用于p300 3'UTR的目标microRNA,mimic转染UC-MSCs后RT-q PCR检测miRNA表达水平的变化,Western blot检测p300蛋白水平变化,RT-q PCR和Western blot检测多潜能转录因子表达水平的变化,MTT法检测UC-MSCs增殖能力的变化,并比较克隆形成能力的差异。结果证实mir 26b-5p通过不完全互补配对结合p300的3'UTR区,显著降低了荧光素酶的相对活性(P<0.05);mir 26b-5p mimic转染后抑制p300蛋白表达水平(P<0.05),并下调Nanog基因和蛋白表达水平(P<0.05);mir 26b-5p mimic转染后UC-MSCs的增殖受到抑制(P<0.05),克隆形成能力下降(P<0.05)。结论 UC-MSCs高表达mir 26b-5p能够显著抑制p300蛋白表达和干性相关基因Nanog的表达,并且抑制UC-MSCs的增殖能力和克隆形成能力。

血清血管紧张素转化酶2及微小RNA-26b-5p对急性冠状动脉综合征患者经皮冠状动脉介入治疗术后心肌损伤的预测价值

目的探讨血清血管紧张素转化酶2(ACE2)、微小RNA-26b-5p(miR-26b-5p)对急性冠状动脉综合征患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后心肌损伤的预测价值。方法选取2019年11月至2021年1月在华北石油管理局总医院行PCI手术的急性冠状动脉综合征患者122例,根据PCI术后6个月是否发生心肌损伤,分为心肌损伤组39例和心肌未损伤组83例。收集所有患者临床资料,采用酶联免疫吸附法检测血清ACE2水平、实时荧光定量PCR法检测血清miR-26b-5p水平,Pearson法分析血清ACE2与miR-26b-5p水平的相关性,受试者工作特征曲线评价血清ACE2、miR-26b-5p水平对急性冠状动脉综合征患者PCI术后心肌损伤的预测价值。结果与心肌未损伤组相比,心肌损伤组术后6个月肌钙蛋白I(cTnI)、术后6个月肌酸激酶同工酶(CK-MB)较高,差异有统计学意义(t=40.656、27.486,P<0.05)。与心肌未损伤组相比,心肌损伤组血清ACE2水平较高,血清miR-26b-5p水平较低,差异均有统计学意义(t=11.159、14.842,P<0.05);血清miR-26b-5p与ACE2水平呈负相关(r=-0.567,P<0.05);血清ACE2、miR-26b-5p水平预测急性冠状动脉综合征患者PCI术后心肌损伤的曲线下面积(AUC)分别为0.796、0.878,敏感度分别为87.20%、85.50%,特异度分别为60.20%、82.10%;两者联合预测急性冠状动脉综合征患者PCI术后心肌损伤的AUC为0.916,敏感度、特异度分别为89.70%、79.50%。结论急性冠状动脉综合征PCI术后心肌损伤患者血清ACE2呈高表达,血清miR-26b-5p呈低表达,ACE2、miR-26b-5p可预估急性冠状动脉综合征患者PCI术后心肌损伤,两者联合预测价值较好。

微小RNA-26b-5p对缺血性心律失常大鼠心房肌细胞L型钙通道的影响

目的探讨微小RNA(miR)-26b-5p对磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/磷脂酰肌醇3,4,5-三磷酸(PIP3)信号通路的调控作用以及对缺血性心律失常大鼠心房肌细胞L型钙通道的影响。方法选择SD大鼠72只,按照随机数表法分为假手术组、模型组、LY294002组、阴性对照组、过表达组、联合组,每组12只。各组给予相应干预24h,除假手术组外的其余各组大鼠建立缺血性心律失常模型,假手术组大鼠仅开胸不结扎。建模过程中检测各组大鼠心律失常指标,采用Curtis-Walker评分法进行心律失常评分;荧光定量PCR法检测心房肌细胞中miR-26b-5p表达;全细胞膜片钳技术记录心房肌细胞L型钙通道电流(ICa-L);蛋白印迹法检测L型钙通道α1C亚基(CACNA1C)、钙调蛋白及PI3K/PIP3通路相关蛋白表达。结果与模型组比较,LY294002组大鼠左心室室性期前收缩次数、室性心动过速持续时间、心室颤动持续时间、心律失常评分、心房肌细胞ICa-L峰值密度绝对值、CACNA1C、钙调蛋白表达显著升高,磷酸化PI3K、PIP3、磷酸化蛋白激酶B(Akt)表达显著降低,过表达组大鼠左心室室性期前收缩次数、室性心动过速持续时间、心室颤动持续时间、心律失常评分、心房肌细胞ICa-L峰值密度绝对值、CACNA1C、钙调蛋白表达显著降低,miR-26b-5p、磷酸化PI3K、PIP3、磷酸化Akt表达显著升高(P<0.05)。与过表达组比较,联合组大鼠左心室室性期前收缩次数、室性心动过速持续时间、心室颤动持续时间、心律失常评分、心房肌细胞ICa-L峰值密度绝对值、CACNA1C、钙调蛋白表达显著升高,磷酸化PI3K、PIP3、磷酸化Akt表达显著降低(0.82±0.08vs1.09±0.11,0.91±0.09vs1.17±0.11,0.94±0.09vs1.20±0.12,P<0.05)。结论miR-26b-5p过表达可能通过激活PI3K/PIP3相关信号通路,阻滞缺血性心律失常大鼠心房肌细胞L型钙通道,改善心律失常表现。

MicroRNA-20b-5p对早期膝骨关节炎模型大鼠软骨和软骨下骨血管新生的影响

背景:血管新生是早期膝骨关节炎膝关节微环境的重要病理特征,通过膝关节腔注射microRNA的方式抑制血管新生可能为早期膝关节的治疗提供新的作用靶点。目的:观察miR-20b-5p激动剂对早期膝骨关节炎大鼠关节软骨、软骨下骨血管生成的影响,探讨miR-20b-5p对早期膝骨关节炎大鼠软骨及软骨下骨可能的保护机制。方法:从12只SD雄性大鼠中随机抽取3只作为空白组,余下9只制备早期膝骨关节炎模型后随机分组,即模型组、miR-20b agomir组及miR-20b agomir NC组,每组3只大鼠。造模后1周,空白组不予处理,模型组、miR-20b agomir组、miR-20b agomir NC组分别于双后膝注射0.2 mL生理盐水、miR-20b-5p agomir溶液、miR-20b-5p agomir NC溶液1次。4周后处死各组大鼠取膝关节进行番红O-固绿、免疫组织化学染色及国际骨关节炎研究学会“软骨病理评价系统”评分,实时荧光定量PCR及Western blot检测软骨及软骨下骨中缺氧诱导因子1α、血管内皮生长因子的mRNA和蛋白表达水平。结果与结论:①miR-20b agomir组国际骨关节炎研究学会“软骨病理评价系统”评分明显低于模型组和miR-20b agomir NC组(P<0.05);模型组与miR-20b agomir NC组的国际骨关节炎研究学会“软骨病理评价系统”评分相比差异无显著性意义(P>0.05);②膝关节病理切片显示,相比空白组,其他各组均有软骨基质流失和软骨、软骨下骨的缺氧诱导因子1α、血管内皮生长因子蛋白表达水平增加,其中miR-20b agomir组的软骨基质流失程度以及软骨、软骨下骨的缺氧诱导因子1α、血管内皮生长因子蛋白表达水平低于模型组和miR-20b agomir NC组(P<0.05);③miR-20b agomir组软骨、软骨下骨的缺氧诱导因子1α、血管内皮生长因子的mRNA及蛋白表达水平均低于模型组和miR-20b agomir NC组(P<0.05);④提示过表达miR-20b-5p可下调早期膝骨关节炎软骨及软骨下骨缺氧诱导因子1α、血管内皮生长因子表达,抑制膝骨关节炎软骨及软骨下骨的血管新生,达到保护关节软骨的作用。

妊娠期高血压miR-26b、miR-15b、miR-204-5p、miR-200a表达水平及临床意义

目的 探讨妊娠期高血压miR-26b、miR-15b、miR-204-5p、miR-200a表达水平及临床意义。方法 回顾性选取83例2022年1月至2023年1月承德市妇幼保健院收治的妊娠期高血压患者的临床资料作为病例组,其中28例妊娠期高血压作为妊娠期高血压组、28例轻度子痫前期作为轻度子痫前期组、27例重度子痫前期作为重度子痫前期组;另随机选择同期于本院产科门诊规律围产期保健并入院待产的94名正常足月单胎妊娠孕妇为对照组。结果 收缩压、舒张压:重度子痫前期组>轻度子痫前期组>妊娠期高血压组>对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清miR-26b、miR-15b、miR-204-5p、miR-200a表达水平:重度子痫前期组>轻度子痫前期组>妊娠期高血压组>对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清miR-26b、miR-15b、miR-204-5p、miR-200a水平联合检测诊断妊娠期高血压的AUC值为0.940,高于各指标单独检测(0.768、0.809、0.744、0.795,P<0.05)。病例组不良妊娠结局总发生率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 妊娠期高血压患者不良妊娠结局的几率更大,血清miR-26b、miR-15b、miR-204-5p、miR-200a在妊娠期高血压患者中呈高表达,其表达水平与患者病情严重程度具有一定关系,且四者联合检测对妊娠期高血压的诊断价值更高。

支气管哮喘患儿外周血miR-30a、miR-15b-5p水平与气道炎症、肺功能的关系

目的:分析支气管哮喘患儿外周血microRNA-30a(miR-30a)、microRNA-15b-5p(miR-15b-5p)水平与气道炎症、肺功能的关系。方法:选择2020年3月—2022年3月我院收治的123例支气管哮喘患儿作为研究组,另外选择同期在我院体检的100例健康儿童作为对照组。入院后均检测外周血miR-30a、miR-15b-5p水平,利用肺功能仪检测第1秒用力呼气量(FEV_(1))、用力肺活量(FVC)及FEV_(1)/FVC等肺功能指标水平,同时检测气道炎症指标水平。比较各组血清miR-30a、miR-15b-5p水平及肺功能、气道炎症指标,采用Pearson相关分析探讨血清miR-30a、miR-15b-5p水平与气道炎症、肺功能的关系,采用受试者工作特征曲线(ROC)评估外周血miR-30a、miR-15b-5p水平对支气管哮喘发生的预测价值。结果:研究组患儿外周血miR-30a、miR-15b-5p水平均高于对照组(P<0.05)。研究组患儿诱导痰中的细胞总数、中性粒细胞、嗜酸粒细胞、淋巴细胞的数目均高于对照组,巨噬细胞的数目低于对照组(P<0.05)。研究组患儿FEV_(1)、FVC、FEV_(1)/FVC肺功能指标均低于对照组(P<0.05)。Pearson相关分析显示,支气管哮喘患儿外周血miR-30a、miR-15b-5p水平均与肺功能指标(FEV_(1)、FVC、FEV_(1)/FVC)及巨噬细胞呈负相关(P<0.05),与细胞总数、中性粒细胞、嗜酸粒细胞、淋巴细胞数目呈正相关(P<0.05)。ROC曲线分析显示,外周血miR-30a、miR-15b-5p预测小儿支气管哮喘发生的曲线下面积为0.841(95%CI:0.792~0.890)、0.862(95%CI:0.817~0.917),二者联合预测小儿支气管哮喘发生的曲线下面积为0.911(95%CI:0.874~0.958)。结论:支气管哮喘患儿外周血miR-30a、miR-15b-5p水平均呈高表达,且二者水平变化与气道炎症、肺功能密切相关,另外可作为预测支气管哮喘患儿发病的有效指标。

超声心动图联合血清miR-26b-5p在诊断急性心肌梗死中的应用

探讨超声心动图联合血清微小核糖核酸-26b-5p(miR-26b-5p)在急性心肌梗死(AMI)诊断中的价值。选取115例AMI患者(观察组)和80例陈旧性心肌梗死患者(对照组),分析两组超声心动图参数及血清miR-26b-5p差异。观察组左室舒张末期内径(LVEDd)、左室收缩末期内径(LVEDs)、左室舒张末期容积(LVEDV)、室收缩末期容积(LVESV)、心肌做功指数(Tei)明显高于对照组(P<0.05),而左室射血分数(LVEF)、E/A、miR-26b-5p明显低于对照组(P<0.05)。冠脉不同狭窄程度患者的LVEF、血清miR-26b-5p水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。血清miR-26b-5p与Gensini评分呈负相关(r=-0.503,P<0.05)。超声心动图联合血清miR-26b-5p诊断AMI的灵敏性和阴性预测值明显高于超声心动图单独诊断(P<0.05)。随访结果显示,发生主要不良心血管事件(MACE)患者LVEDs、LVESV明显高于未发生MACE患者(P<0.05),LVEF、miR-26b-5p明显低于未发生MACE患者(P<0.05)。LVEDs、LVEF、miR-26b-5p及联合预测MACE发生的ROC曲线下面积分别为0.753、0.732、0.701和0.915,P<0.05。急性心肌梗死患者的血清miR-26b-5p水平降低,miR-26b-5p联合超声心动图参数在鉴别诊断AMI及预测MACE方面有较好的应用价值。

QPRT、miR-26b-5p在乳腺癌中表达及其与患者预后的关系

目的分析喹啉酸磷酸核糖基转移酶(QPRT)、微小RNA-26b-5p(miR-26b-5p)在乳腺癌中表达及其与患者预后的关系。方法选取2015年3月—2017年10月于广州市中西医结合医院行乳腺癌(经病理组织检查均为乳腺浸润性导管癌)改良根治术女性患者89例为研究对象,获取乳腺癌组织(观察组)和癌旁正常乳腺组织(对照组),免疫组化法检测QPRT表达,原位杂交技术检测miR-26b-5p表达水平,分析QPRT、miR-26b-5p水平与患者术后复发转移的关系,COX多因素分析乳腺癌患者发生复发转移的影响因素。结果观察组QPRT的阳性表达率明显高于对照组,miR-26b-5p的阳性表达率明显低于对照组(χ^(2)/P=54.395/0.000、23.448/0.000);QPRT与miR-26b-5p在乳腺癌组织中表达呈负相关(r/P=-0.343/0.000);QPRT、miR-26b-5p表达水平与患者TNM分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移有关(QPRT:χ^(2)/P=5.326/0.021、4.991/0.025、6.740/0.009,miR-26b-5p:χ^(2)/P=5.902/0.015、4.946/0.026、7.949/0.005);QPRT高表达患者术后复发转移率明显高于QPRT低表达患者(65.38%vs.29.73%,χ^(2)/P=13.260/0.000),miR-26b-5p低表达患者术后复发转移率明显高于miR-26b-5p高表达患者(63.79%vs.25.81%,χ^(2)/P=12.550/0.000);分化程度低、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结发生转移、QPRT高表达、miR-26b-5p低表达是影响乳腺癌患者术后复发转移的危险因素[OR(95%CI)=2.381(1.394~4.066)、2.317(1.272~4.221)、2.449(1.243~4.825)、2.604(1.501~4.517)、3.007(1.625~5.564)]。结论乳腺癌组织中QPRT表达上调,miR-26b-5p表达下调,是影响乳腺癌患者术后发生复发转移的危险因素,可能为临床治疗乳腺癌提供潜在靶点。

miR-26b-5p通过靶向NFE2L3调控结直肠癌细胞生长、迁移和侵袭

目的探究miRNA-26b-5p(miR-26b-5p)靶向调控NFE2L3表达水平影响结直肠癌细胞生长、迁移和侵袭能力的分子机制。方法通过qPCR的方法检测了人正常肠上皮细胞(NCM460)及结直肠癌细胞系(HT29、SW620及HCT116)中miR-26b-5p的表达水平。通过qPCR及western blot检测了上述细胞系中NFE2L3的表达水平。生物信息学方法分析了miRNA-26b-5p与NFE2L3结合的靶向序列。双荧光素酶基因报告实验检测miR-26b-5p对NFE2L3的靶向调控机制。用脂质体法将miR-26b-5p mimic或同时将NFE2L3转染HT29及SW620结直肠癌细胞系中,通过CCK-8及克隆形成实验观察对细胞生长的影响,通过流式细胞术观察凋亡能力的影响,通过Transwell观察细胞迁移和侵袭能力的影响。结果与人正常上皮细胞系相比,在结直肠癌细胞系中miR-26b-5p的表达水平显著下调(P <0.05),而NEF2L3的m RNA水平及蛋白水平则显著上调(P <0.05)。双荧光素酶报道基因实验显示miR-26b-5p能显著影响NEF2L3 3′UTR表达载体的荧光素酶活性(P <0.05)。过表达miR-26b-5p可显著抑制结直肠癌细胞系细胞的生长、克隆形成及迁移和侵袭能力,引起细胞凋亡(均P <0.05),而同时过表达NEF2L3则可抵消miR-26b-5p的对细胞功能的作用(均P <0.05)。结论在结直肠癌中miR-26b-5p低表达,而NEF2L3高表达;miR-26b-5p可靶向调控癌基因EF2L3的表达水平,从而调控结直肠癌细胞的生长、凋亡、迁移和侵袭,参与结直肠癌的发生发展。

MicroRNA-199b-5p在贝那普利改善自发性高血压大鼠心脏重构中的作用

目的探讨microRNA-199b-5p(miR-199b-5p)在贝那普利改善自发性高血压大鼠(SHR)心脏重构中的作用。方法取10周龄雄性SHR16只,随机分为两组:即SHR干预组和SHR对照组各8只;另取Wistar大鼠8只作为正常对照组即:NC组。SHR干预组:给予10mg/(kg.d)贝那普利灌胃8周;SHR对照组和NC组给予同等剂量蒸馏水灌胃8周。干预前后测量鼠尾动脉血压,测量后麻醉取心脏样本。HE染色、检测miR-199b-5p及TGF-β1、Smad3的表达水平。结果 SHR干预组心肌细胞形态学与NC组无明显差异;两组SHR心脏组织中的miR-199b-5p、TGF-β1、Smad3表达量高于NC组(P<0.01);但SHR干预组较SHR对照组低(P<0.01)。结论贝那普利可能通过抑制miR-199b-5p表达,下调TGF-β1、Smad3蛋白的表达从而改善SHR心脏重构。