MicroRNA-31表达与老年女性卵巢癌患者应用紫杉醇联合顺铂化疗的疗效及预后关系的研究

目的研究MicroRNA-31表达水平与老年女性卵巢癌患者应用紫杉醇联合顺铂化疗的疗效及对预后的影响。方法选取本院2011年2月~2014年9月收治的老年卵巢癌患者52例,采用紫杉醇联合顺铂化疗的方法进行治疗。对患者化疗后的治疗效果进行随访,分析患者治疗前后卵巢癌组织中MicroRNA-31表达水平及其和疗效及预后的关系。结果患者治疗后3年生存率为25.0%(13/52),无进展生存率为15.4%(8/52)。治疗前MicroRNA-31低表达患者的中位总生存期为12个月,显著低于高表达的28个月(P<0.05),MicroRNA-31低表达患者的中位无进展生存期为8个月,显著低于高表达的16个月(P<0.05)。化疗后MicroRNA-31上升率≥65%的中位总生存期为34个月显著高于上升率<65%的12个月(P<0.05),MicroRNA-31上升率≥65%的中位无进展生存期为24个月显著高于上升率<65%的8个月(P<0.05)。紫杉醇联合顺铂化疗中MicroRNA-31表达是卵巢癌独立的预后因素。结论MicroRNA-31表达水平对判断老年女性卵巢癌患的疗效和预后具有参考意义。

MicroRNA-31在上皮性卵巢癌中的表达及其与预后的关系

目的本研究旨在探讨microRNA-31(miR-31)在上皮性卵巢癌(EOC)中的表达水平与临床病理学因素以及预后的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测150例EOC患者组织中miR-31的表达水平,将miR-31表达情况与随访结果和临床资料相结合进行统计学分析。结果在EOC组织中miR-31的表达较癌旁正常卵巢组织降低(P<0.05)。miR-31的低表达与较差的组织学分级、较多的淋巴结转移、更广泛的腹膜转移和更晚期的病理分期有关(P<0.05),而与其他临床病理学因素无关(P>0.05)。此外,miR-31的表达是患者总生存的独立预测因子。结论 miR-31可能是EOC一个新的诊断和预后标志物。

microRNA-31、Gas6和Axl在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的:研究microRNA-31、Gas6和Axl在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达及其与患者预后和癌胚抗原(CEA)、鳞状细胞癌相关抗原(SCC)、细胞角蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)的相关性。方法:回顾性分析新疆巴州人民医院2017年1月至2017年8月收治的80例ESCC患者的病历资料,并对所有患者均开展5年的随访观察,按照预后状况的差异分作死亡组32例及存活组48例。比较不同食管组织的microRNA-31、Gas6和Axl表达,分析microRNA-31、Gas6、Axl表达及CEA、SCC、CYFRA21-1表达与ESCC患者预后的关系。此外,通过Spearman相关性分析明确ESCC患者microRNA-31、Gas6、Axl表达与CEA、SCC、CYFRA21-1的相关性。结果:ESCC组织中microRNA-31、Gas6和Axl的表达水平分别为(28.37±2.41)、(10.49±1.23)、(10.78±1.14),均高于癌旁正常组织的(13.05±1.77)、(2.62±0.04)、(2.44±0.25)(P<0.05)。ESCC死亡患者CEA、SCC、CYFRA21-1的表达水平分别为(14.79±1.59)ng/mL、(1.52±0.24)ng/mL、(3.92±0.15)ng/mL,均高于存活患者的(3.48±1.01)ng/mL、(0.68±0.08)ng/mL、(2.24±0.07)ng/mL(P<0.05)。ESCC患者microRNA-31、Gas6、Axl的表达与CEA、SCC、CYFRA21-1表达水平均呈正相关关系(P<0.05)。结论:microRNA-31、Gas6和Axl在ESCC中均存在异常高表达,且均与患者的预后及CEA、SCC、CYFRA21-1水平密切相关。

LncRNA ZEB2-AS1调控miR-574-3p/ZEB1轴对卵巢癌细胞迁移及侵袭的影响

目的探讨长链非编码核糖核酸(LncRNA)锌指E盒结合同源盒蛋白2反义RNA(LncRNA ZEB2-AS)1对卵巢癌细胞迁移、侵袭的影响及可能的作用机制。方法体外培养人卵巢癌细胞(SKOV3、SW626、A2780)和正常人卵巢上皮细胞(HOSEpiC),实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中ZEB2-AS1、miR-574-3p和锌指E盒结合蛋白(ZEB)1的水平。取对数生长期的SW626细胞,分为对照组、pcDNA3.1-NC组、pcDNA3.1-ZEB2-AS1组、si-NC组、si-ZEB2-AS1组、si-ZEB2-AS1+inhibitor-NC组、si-ZEB2-AS1+miR-574-3p inhibitor组。qRT-PCR检测细胞中ZEB2-AS1、miR-574-3p表达,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell实验检测细胞侵袭能力;Western印迹检测细胞ZEB1和迁移、侵袭相关蛋白的表达;双荧光素酶报告基因检测验证ZEB1与miR-574-3p的靶向关系。结果与正常人卵巢上皮细胞HOSEpiC相比,人卵巢癌SKOV3、SW626、A2780细胞中ZEB2-AS1、ZEB1水平明显升高,miR-574-3p水平明显降低(P<0.05),且SW626细胞中ZEB2-AS1表达水平最高。转染后,与对照组相比,pcDNA3.1-ZEB2-AS1组细胞增殖、迁移和侵袭能力及ZEB1、N-钙黏蛋白(cadherin)、波形蛋白(VIM)、基质金属蛋白酶(MMP)-9表达明显升高,E-cadherin表达明显降低(P<0.05);si-ZEB2-AS1组细胞增殖、迁移和侵袭能力及ZEB1、N-cadherin、VIM、MMP-9表达明显降低,E-cadherin表达明显增加(P<0.05)。与si-ZEB2-AS1组相比,si-ZEB2-AS1+miR-574-3p inhibitor组细胞增殖、迁移和侵袭能力及ZEB1、N-cadherin、VIM、MMP-9表达明显升高,E-cadherin表达明显降低(P<0.05)。双荧光素酶结果显示,高表达miR-574-3p可明显抑制ZEB1 WT的荧光素酶活性(P<0.05)。结论在卵巢癌中,LncRNA ZEB2-AS1过表达可能通过下调miR-574-3p,上调ZEB1的表达,进而诱导上皮-间质转化(EMT),促进卵巢癌细胞的迁移与侵袭。

下调microRNA-214表达对人卵巢癌SKOV-3细胞增殖及凋亡的影响

目的观察下调microRNA-214(miRNA-214)表达对人卵巢癌SKOV-3细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能机制。方法采用脂质体介导方法将miRNA-214抑制剂转染人卵巢癌SKOV-3细胞,分为正常对照组、阴性对照组和miRNA-214下调组,采用实时定量聚合酶链反应方法检测miRNA-214、p21和p53基因mRNA表达,Western blot法检测细胞p21和p53蛋白表达。四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果正常对照组、阴性对照组和miRNA-214下调组人卵巢癌SKOV-3细胞miRNA-214表达分别为11.32±0.47、10.18±0.45和6.52±0.49,细胞增殖率分别为(17.61±1.83)%、(19.14±1.86)%和(11.24±1.89)%,细胞凋亡率分别为(14.47±1.86)%、(13.72±1.89)%和(21.21±1.91)%,p21基因mRNA表达分别为5.96±0.69、5.38±0.74和8.31±0.72,p53基因mRNA表达分别为3.64±0.39、3.17±0.38和5.86±0.37,p21蛋白表达分别为0.47±0.19、0.49±0.21和0.75±0.22,p53蛋白表达分别为0.40±0.14、0.39±0.16和0.66±0.18。与正常对照组和阴性对照组比较,miRNA-214下调组人卵巢癌SKOV-3细胞miRNA-214表达、细胞增殖率降低(P<0.05,P<0.01),细胞凋亡率、p21基因mRNA表达、p53基因mRNA表达、p21蛋白表达、p53蛋白表达均增加(P<0.05,P<0.01);阴性对照组与正常对照组比较,miRNA-214表达、细胞增殖率、细胞凋亡率、p21基因mRNA表达、p53基因mRNA表达、p21蛋白表达、p53蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论下调人卵巢癌SKOV-3细胞miRNA-214表达可抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡,上调p21和p53基因表达可能是其作用机制。

卵巢癌细胞上皮间质转化及侵袭转移过程中microRNA-9的调控作用

目的探讨microRNA-9(miR-9)参与调控卵巢癌细胞EMT过程,以及影响卵巢癌细胞侵袭及转移的分子机制。方法使用TargetScan及PicTar数据库,预测可能靶向E-cadherin 3’UTR区的miRNA,双荧光素酶报告体系进行验证;上调候选miR后,用qRT-PCR和Western blot检测E-cadherin的表达变化;细胞免疫荧光观察E-cadherin、?-Catenin和Vimentin的表达;划痕实验、Transwell实验,观察卵巢癌细胞运动和侵袭能力的改变。结果 TargetScan、PicTar预测发现miR-9是唯一可与CDH1结合的miRNA。双荧光素酶报告系统验证预测结果正确。在SKOV-3中上调miR-9后,E-cadherin的表达受到显著抑制;细胞形态向间质细胞样转变,发生EMT分子水平的特征性改变;体外实验表明,卵巢癌细胞的运动和侵袭能力得到明显促进。结论 miR-9可以通过靶向调控E-cadherin表达,促进卵巢癌细胞的EMT进程,对卵巢癌细胞的运动和侵袭能力产生重要影响。

microRNA-125b在葛根素诱导人卵巢癌细胞SKOV3凋亡中的作用研究

目的探讨micRNA-125b在葛根素诱导卵巢癌细胞SKOV3凋亡中的重要作用。方法运用qRT-PCR技术检测葛根素处理卵巢癌细胞SKOV3中microRN A-125b的改变。运用干涉RNA技术抑制SKOV3细胞中microRNA-125 b表达。运用Western blot技术检测SKOV3细胞microRNA-125b低表达后,葛根素处理组与对照组中凋亡相关蛋白的改变。结果葛根素能够显著抑制卵巢癌细胞SKOV3的增殖活力以及促进其凋亡相关蛋白Cleaved Caspase-3,Bax和Bcl-2的表达,并且初步揭示了葛根素处理卵巢癌细胞SKOV3后能够促进microRNA-125b的表达;抑制卵巢癌细胞SKOV3中microRNA-125b的表达能够降低葛根素对SKOV3细胞凋亡蛋白Cleaved Caspase-3,Bax和Bcl-2的表达。结论 microRNA-125b参与了葛根素对卵巢癌细胞SKOV3的促凋亡作用,提示microRNA-125b是卵巢癌细胞SKOV3耐药机制中的关键分子。

上皮性卵巢癌患者microRNA-15a/b表达及其临床意义

目的检测上皮性卵巢癌(EOC)患者肿瘤组织以及血清microRNA-15a/b(miR-15a/b)表达水平,并探讨其临床意义。方法回顾性选取30例卵巢良性疾病或健康体检者(对照组)以及64例EOC患者,应用实时定量PCR检测肿瘤组织以及血清中miR-15a/b表达水平,同时评价两类样本中miR-15a/b表达相关性。受试者工作特征曲线(ROC)和Kaplan-Meier生存分析分别用于评价血清miR-15a/b表达的诊断价值及对预后的影响。结果 EOC患者血清以及组织miR-15a/b表达水平均低于对照组(P <0. 001和P <0. 01),且血清与组织中miR-15a/b表达呈显著正相关(r=0. 912,P <0. 001和r=0. 881,P <0. 001)。ROC分析显示血清miR-15a/b表达能够较好地区分EOC患者与对照组,曲线下面积分别为0. 805(95%CI:0. 718～0. 893)和0. 806(95%CI:0. 718～0. 894)。此外,miR-15a/b高、低表达组间患者的FIGO分期、肿瘤分化程度以及淋巴结转移等有显著差异(P <0. 05)。Kaplan-Meier生存分析发现miR-15a低表达患者的总体生存以及无病生存均短于miR-15a高表达患者(P=0. 005和0. 072)。结论 miR-15a/b表达下调是EOC患者常见的分子事件,且血清miR-15a可以作为非侵入性分子标志用于EOC的诊断及预后判断。

上皮性卵巢癌组织中microRNA-375、ERBB2的表达及与临床病理特征和预后的关系

目的探究上皮性卵巢癌(EOC)组织中microRNA-375(miR-375)、erb-b2受体酪氨酸激酶2(ERBB2)的表达及与临床病理特征和预后的关系。方法选取2015年10月—2017年10月上海交通大学附属第六人民医院收治的134例EOC患者的基本资料。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-375和ERBB2在EOC组织及其癌旁正常组织中的表达,并分析两者的相关性及其与临床病理特征和预后的关系。结果EOC组织中miR-375 mRNA相对表达量较癌旁组织低(P<0.05),而ERBB2 mRNA相对表达量较癌旁组织高(P<0.05)。EOC组织中miR-375 mRNA和ERBB2 mRNA相对表达量在淋巴结转移和FIGO分期方面差异有统计学意义(P<0.05)。EOC组织中miR-375的表达与ERBB2的表达呈负相关(P<0.05)。miR-375低表达组的3年总生存率较高表达组低(P<0.05)。ERBB2高表达组的3年总生存率较低表达组低(P<0.05)。Cox回归分析显示,高级别的FIGO分期、有淋巴结转移、miR-375低表达以及ERBB2高表达是影响EOC患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论EOC组织中miR-375呈低表达而ERBB2呈高表达,两者呈负相关,且均与FIGO分期及淋巴结转移有关,对评估病情进展及其预后生存率具有重要的临床价值。

MicroRNA-21在卵巢癌中的表达及其与临床病理因素之间的关系

目的 检测卵巢癌组织中microRNA-21基因的表达,并探讨其与临床病理因素间的关系.方法 采用实时定量PCR方法检测64例卵巢癌组织和30例正常卵巢组织中microRNA-21的相对表达量,并分析microRNA-21的表达量在不同临床病理因素间的差异.结果 在正常卵巢组织、卵巢癌组织中microRNA-21的相对表达量分别为4.23±1.02、7.64±0.87,其差异具有统计学意义（P＜0.05）;无淋巴结转移组与有淋巴转移组的相对表达量分别为4.99±1.02,7.24±0.91,其差异有统计学意义（P＜0.05）;临床分期为0～Ⅱ期及Ⅲ～Ⅳ期的卵巢癌组织中microRNA-21的相对表达量分别为4.42±0.82、7.75±1.13,其差异有统计学意义（P＜0.05）,但microRNA-21在卵巢癌组织中的表达与患者年龄、临床病理分型无关,其差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 microRNA-21的表达量在卵巢癌组织中较正常卵巢组织显著增加,其异常高表达可能与卵巢癌的发生、发展有关.

microRNA-29a抑制上皮性卵巢癌增殖及能量代谢的研究

目的观察microRNA-29a对上皮性卵巢癌增殖及能量代谢的抑制作用,并分析其与患者临床病理特征及预后的关系。方法采用荧光定量PCR技术分析microRNA-29a在上皮性卵巢癌组织及细胞中的表达水平,采用流式细胞术及CCK-8法分析microRNA-29a过表达或者敲低后的卵巢癌细胞增殖能力。通过Seahorse法分析microRNA-29a表达改变后卵巢癌细胞的能量代谢情况。采用液相质谱技术分析microRNA-29a表达改变后的卵巢癌细胞培养基中的代谢物质变化。分析microRNA-29a表达水平与患者临床病理特征及预后的关系。结果相较于正常卵巢组织和正常卵巢细胞,microRNA-29a在卵巢癌组织及细胞中低表达(均P<0.05)。在卵巢癌细胞中过表达microRNA-29a能够显著抑制细胞增殖能力,同时抑制细胞代谢能力,细胞培养基中磷酸烯醇式丙酮酸、丙酮酸及乳酸等水平也降低。microRNA-29a高表达(≥1.98)患者5年生存率高于低表达(<1.98)患者(54.4%比22.9%,P<0.05),5年无进展生存率亦高于低表达患者(55.23%比20.89%,P<0.05)。microRNA-29a表达水平与患者肿瘤大小、组织分化程度、远处转移、淋巴结转移以及肿瘤分期均有关(均P<0.05),microRNA-29a高表达患者肿瘤较小、组织分化较好、远处转移及淋巴结转移率较低、肿瘤分期较早。结论MicroRNA-29a在卵巢癌组织和细胞中低表达。microRNA-29a高表达能够抑制细胞增殖和代谢能力,且提示较好的患者预后。

MicroRNA-29b在卵巢上皮性癌中的表达及临床意义

目的:检测MicroRNA-29b(miR-29b)在卵巢上皮性癌组织的表达,并分析miR-29b与卵巢上皮性癌临床病理特征之间的关系。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)定量分析60例卵巢上皮性癌,15例卵巢良性肿瘤及15例正常卵巢组织中miR-29b的表达,并将检测结果与临床指标进行统计学分析。结果:(1)卵巢上皮性癌组织中miR-29b的表达量显著低于正常卵巢及卵巢良性肿瘤组织(P<0.05)。(2)miR-29b表达量与FIGO分期、淋巴结转移及腹水产生相关(P<0.05),与患者年龄、细胞分化、病理类型、残灶直径等临床病理参数无关(P>0.05)。Ⅲ～Ⅳ期和淋巴结转移组的表达量分别低于Ⅰ～Ⅱ期和无淋巴结转移组(P<0.05);腹水组miR-29b的表达量亦低于无腹水组(P<0.05)。(3)Kaplan-Meier法比较生存曲线表明,miR-29b表达量低者术后生存时间短(P<0.05);COX多因素生存分析表明,miR-29b低表达与患者生存时间短独立相关,低表达组的死亡危险度是高表达组的3.996倍。结论:miR-29b可能作为抑癌因子参与了卵巢上皮性癌的发生发展,对卵巢上皮性癌具有潜在的辅助诊断及预后评估意义。

卵巢癌组织中microRNA-7表达水平及其临床意义

目的探讨microRNA-7在卵巢癌组织中的表达水平及其临床意义。方法收集该院确诊的卵巢癌患者42例,每例均行手术切除。同时收集38例良性卵巢上皮囊肿组织作为良性对照组。采用RT-PCR方法分别检测卵巢癌组织、癌旁组织和良性病变组织样本microRNA-7的表达,并分析其表达与卵巢癌临床特征的关系。结果卵巢癌组织microRNA-7表达为0.176±0.063,癌旁组织表达为0.314±0.099,良性病变组织表达为0.465±0.123。与癌旁组织和良性病变组织比较,卵巢癌组织中microRNA-7表达显著下降(P均<0.05)。microRNA-7的表达与患者的年龄、病理分型无关,与临床分期和区域淋巴结转移相关(P均<0.05)。单因素分析结果显示,microRNA-7高表达的卵巢癌病人总生存期长于低表达组(P=0.02)。结论microRNA-7在卵巢癌组织中表达下显著调,可能是卵巢癌患者重要的预后指标之一。

YAP1、miR-31与老年卵巢癌患者微血管密度的关系

目的研究Yes相关蛋白(YAP)1、miR-31与老年卵巢癌患者微血管密度的关系。方法选取老年卵巢癌患者105例作为卵巢癌组,选取行体检的63例作为卵巢良性病变组,采用荧光定量PCR检测YAP1、miR-31、微血管密度(MVD),采用酶联免疫吸附试验检测血管内皮生长因子(VEGF)水平;分析YAP1、miR-31与老年卵巢癌患者MVD的关系。结果与卵巢良性病变组相比,卵巢癌组YAP1、MVD、VEGF水平显著升高(P<0.05),miR-31表达量显著降低(P<0.05)。YAP1与miR-31呈负相关(r=-0.028,P=0.008),与MVD呈正相关(r=0.010,P=0.001);miR-31与MVD呈负相关(r=-0.017,P=0.003)。结论YAP1在卵巢癌中异常高表达,miR-31异常低表达,且与MVD相关,可用于患者MVD改变的诊断。

长链非编码RNA PVT1抑制miR-31表达并促进卵巢癌细胞侵袭转移的实验研究

目的:探讨长链非编码RNA PVT1能否抑制卵巢癌细胞侵袭转移,明确其影响可否通过抑制miR-31的方式实现。方法:qRT-PCR法检测长链非编码RNA PVT1及miR-31在卵巢癌组织及卵巢癌细胞系SKOV3中的表达,同时分别设定正常卵巢组织和卵巢正常上皮细胞系IOSE80作为对照。研究PVT1表达水平与卵巢癌患者临床病理参数的相关性。SKOV3细胞中转染PVT1 siRNA下调PVT1表达,qRT-PCR检测PVT1表达对miR-31表达的影响,Transwell实验检测PVT1表达对SKOV3侵袭转移能力的影响。“反义”实验验证下调miR-31能否逆转PVT1 siRNA对SKOV3侵袭转移能力的抑制效应。荧光素酶报告基因实验检测miR-31与PVT1的靶向结合作用。结果:卵巢癌组织及细胞系中,PVT1表达显著增高,miR-31表达显著降低,两者表达呈明显负相关。PVT1高表达与卵巢癌患者的高临床分期及腹膜后转移密切相关。转染PVT1 siRNA可明显下调SKOV3中PVT1表达,促进miR-31表达,抑制SKOV3细胞的侵袭转移能力;转染miR-31 inhibitor可明显逆转PVT1 siRNA对SKOV3侵袭转移能力的抑制效应;荧光素酶报告基因实验证实miR-31可与PVT1靶向结合。结论:PVT1可通过抑制miR-31的方式促进卵巢癌细胞侵袭转移。

卵巢癌组织中lncRNA-PVT1、miR-31的表达变化及其临床意义

目的观察卵巢癌组织中长链非编码RNA浆细胞瘤移位基因1(lncRNA-PVT1)、微小RNA-31(miR-31)的表达变化,并探讨其临床意义。方法卵巢癌患者93例,均接受手术治疗,术中留取癌组织及癌旁组织,采用实时荧光定量PCR法检测卵巢癌组织及癌旁组织中lncRNA-PVT1、miR-31,采用Pearson线性相关分析法分析卵巢癌组织中lncRNA-PVT1、miR-31表达的相关性,分析lncRNA-PVT1、miR-31表达与卵巢癌患者临床病理参数的关系。结果卵巢癌组织中lncRNA-PVT1、miR-31的相对表达量分别为3.10±0.24、0.53±0.12,癌旁组织中lncRNA-PVT1、miR-31的相对表达量分别为1.02±0.17、0.94±0.14,两者相比,P均<0.05。卵巢癌组织中lncRNA-PVT1、miR-31表达呈负相关关系(r=-0.672,P=0.012)。癌组织中lncRNA-PVT1、miR-31表达与卵巢癌患者肿瘤FIGO分期、腹膜转移及淋巴结转移有关(P均<0.05)。结论卵巢癌组织中lncRNA-PVT1高表达、miR-31低表达,两者负相关,有可能成为新的卵巢癌诊断标志物,可用于辅助判断卵巢癌的进展情况。

MicroRNA-200b在卵巢癌组织及血浆中的表达及其对癌细胞侵袭迁移的影响

目的观察microRNA-200b(简称miR-200b)在上皮性卵巢癌(EOC)患者卵巢组织以及血浆中的表达水平,探讨miR-200b对卵巢癌细胞侵袭迁移的影响。方法选取2014年12月-2015年12月郑州澍青医学高等专科学校附属医院经病理确诊为EOC患者36例(EOC组),另选取同期因子宫肌瘤或子宫腺肌病及其他非卵巢病变行手术切除者共20例作为对照组。采用实时荧光定量RT-PCR(q RT-PCR)法检测EOC患者和正常对照组卵巢组织中及血浆中miR-200b表达水平,人卵巢癌细胞SK-OV-3转染miR-200b抑制物后,采用transwell法观察细胞侵袭能力,并采用q RT-PCR和Western blot检测MMP-9的m RNA及蛋白表达水平。结果miR-200b在上皮性卵巢患者卵巢组织及血浆中的表达水平均显著高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01);miR-200b抑制物可明显降低SK-OV-3细胞迁移能力,差异有统计学意义(P<0.01);且MMP-9的m RNA及蛋白水平均明显降低(P<0.01)。结论 miR-200b在上皮性卵巢癌组织中高表达,miR-200b可能通过影响MMP-9来促进卵巢癌细胞的侵袭迁移。

miR-876-5p通过靶向FBXO31促进卵巢癌细胞增殖和侵袭的机制

目的探究微小RNA(microRNA,miR)-876-5p通过靶向F-box蛋白31(FBXO31)促进卵巢癌细胞增殖和侵袭的机制。方法对TCGA数据库中,miR-876-5p和FBXO31在卵巢癌患者中的表达特点和与预后的关系进行分析。通过双荧光素酶报告验证miR-876-5p靶向FBXO31。将卵巢癌细胞系SKOV-3分为4组:对照组、mimic组、mimic+FBXO31组和FBXO31组。通过质粒转染技术过表达miR-876-5p和(或)FBXO31。qPCR和Western blot检测RNA或蛋白的表达水平。分别通过CCK-8法、Transwell实验检测各组的细胞生长和侵袭能力。通过荷瘤裸鼠实验在体内验证miR-876-5p和FBXO31对肿瘤生长的影响。结果在TCGA数据库中,miR-876-5p高表达的患者的生存率显著低于miR-876-5p低表达患者(P<0.05)。卵巢癌患者FBXO31水平显著降低,卵巢癌分期的越高FBXO31水平越低,并且FBXO31高表达卵巢癌患者的生存率显著高于FBXO31低表达(P<0.05)。miR-876-5p直接靶向FBXO31。过表达miR-876-5p抑制FBXO31 mRNA和蛋白的表达水平(P<0.05),过表达FBXO31显著逆转miR-876-5p对FBXO31的抑制作用(P<0.05)。Mimic组的细胞活力和细胞迁移能力显著高于对照组(P<0.05),FBXO31组的细胞活力和细胞迁移能力显著低于对照组(P<0.05),并且mimic+FBXO31组的细胞活力和细胞迁移能力显著低于mimic组(P<0.05)。miR-876-5p组荷瘤裸鼠的肿瘤体积和质量均显著高于对照组(P<0.05),miR-876-5p+FBXO31组肿瘤体积和质量显著低于miR-876-5p组(P<0.05)。结论miR-876-5p具有促进卵巢癌进展的作用,而FBXO31可能抑制卵巢癌进展。miR-876-5p直接靶向FBXO31,并且miR-876-5p过表达可通过抑制FBXO31促进卵巢癌细胞生长、侵袭,起到抑制卵巢癌生长的作用。

LncRNA CASC2、miR-155-5p与上皮性卵巢癌病人化疗敏感性及预后的相关性研究

目的:分析长链非编码RNA(LncRNA)癌易感性候选基因2(CASC2)、miR-155-5p与上皮性卵巢癌病人化疗敏感性及预后的相关性关系。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测87例上皮性卵巢癌病人(上皮性卵巢癌组)及72例卵巢良性肿瘤病人(对照组)LncRNA CASC2、miR-155-5p表达水平,比较2组LncRNA CASC2、miR-155-5p表达水平,分析上皮性卵巢癌组LncRNA CASC2、miR-155-5p表达水平与临床病理特征的相关性关系。根据上皮性卵巢癌组病人术后化疗是否出现继发耐药分为化疗耐药组(n=32例)和化疗敏感组(n=55例),分析LncRNA CASC2、miR-155-5p表达水平与化疗敏感性的关系。同时采用Pearson法分析上皮性卵巢癌组织中LncRNA CASC2与miR-155-5p的相关性关系,采用Kaplan-Meier法分析两者与上皮性卵巢癌病人5年生存情况的关系。结果:上皮性卵巢癌组LncRNA CASC2表达水平低于对照组,而miR-155-5p表达水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01);上皮性卵巢癌组LncRNA CASC2、miR-155-5p表达水平与腹腔转移、FIGO分期、分化程度及淋巴结转移有关(P<0.05~P<0.01),而与年龄、肿瘤大小、腹水及组织学类型无关(P>0.05);化疗敏感组miR-155-5p表达水平低于化疗耐药组,而LncRNA CASC2表达水平高于化疗耐药组,差异均有统计学意义(P<0.01);上皮性卵巢癌组LncRNA CASC2与miR-155-5p呈负相关关系(r=-0.637,P<0.05);miR-155-5p高表达者5年内总生存率及中位生存时间均低于miR-155-5p低表达者(P<0.05),而LncRNA CASC2高表达者5年内总生存率及中位生存时间均高于LncRNA CASC2低表达者(P<0.05)。结论:上皮性卵巢癌病人癌组织LncRNA CASC2、miR-155-5p表达水平与化疗敏感性及预后存在密切相关性,可作为有效的预测指标。

间充质干细胞外囊泡中microRNA-4488通过靶向ABHD8抑制卵巢癌进展

目的:研究间充质干细胞(MSC)分泌的细胞外囊泡(EV)中miR-4488通过ABHD8对卵巢癌进展的调控机制。方法:RT-qPCR和Western blot法检测正常卵巢组织和卵巢癌组织中miR-4488和含有α/β-水解酶结构域8(ABHD8)的表达水平,通过双荧光素酶报告基因测定确定miR-4488和ABHD8之间的关系,生物信息学分析miR-4488可能来源于MSC的EV。进一步探究MSC-EV-miR-4488和ABHD8在卵巢癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移中的调节作用,并通过裸鼠移植瘤体内验证该作用。结果:与正常卵巢细胞和组织相比,卵巢癌细胞和组织中miR-4488低表达,ABHD8高表达。ABHD8是miR-4488的靶基因,MSC-EV包含的miR-4488抑制ABHD8表达。敲低ABHD8会抑制卵巢癌细胞增殖、侵袭和迁移能力,促进癌细胞的凋亡。MSC-EV中过表达的miR-4488通过抑制ABHD8表达抑制细胞增殖、侵袭和迁移。以上体外发现在小鼠体内也得到了证实。结论:MSC-EVs中过表达的miR-4488通过靶向调控ABHD8的表达,抑制卵巢癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力,进而发挥抑癌作用。