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miR-449a通过靶向NF-κB改善周围神经损伤炎症反应
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作者 王洪娇 解学荣 +2 位作者 王方园 王月静 母玉元 《中国科技期刊数据库 医药》 2024年第1期0204-0207,共4页
旨在评估骨髓间充质干细胞通过miR-449a靶向调控NF-κB信号通路改善周围神经损伤炎症反应的作用机制。方法 采用过表达和抑制miR-449a转染干细胞,检测转然后干细胞的miR-449a水平和活力;体外共培养干细胞和神经元,评价过表达miR-449a的... 旨在评估骨髓间充质干细胞通过miR-449a靶向调控NF-κB信号通路改善周围神经损伤炎症反应的作用机制。方法 采用过表达和抑制miR-449a转染干细胞,检测转然后干细胞的miR-449a水平和活力;体外共培养干细胞和神经元,评价过表达miR-449a的干细胞对神经元的体外作用机制;建立周围神经损伤大鼠模型,分为空白对照组、模型组、干细胞组、干细胞+miR-449a过表达组和干细胞+miR-449a抑制剂组。检测大鼠的行为状态,脊髓神经细胞miR-449a表达,分析NF-кB信号通路蛋白(IκBα、p50、p65)水平,评估炎症因子TNF-α和 IL-1β含量以及观察损伤组织的恢复情况。结果 体外干细胞组与实验组相比细胞活性无明显增加。而加入神经元后,miR-449a过表达组神经元活性明显增多,NF-кB信号通路蛋白(IκBα、p50、p65)表达减少,炎症因子TNF-α和 IL-1β明显减少(P<0.05)。大鼠体内实验也表明建模后大鼠反应迟钝,受到刺激后不鸣叫不躲避,而进干细胞治疗后大鼠体重以及反应逐渐恢复正常,干细胞+miR-449a过表达组中miR-449a表达显著增加,NF-кB信号通路蛋白(IκBα、p50、p65)表达减少,炎症因子TNF-α和 IL-1β明显减少,细胞活性明显增加(P<0.05)。干细胞+miR-449a抑制剂组可以逆转骨髓间充质干细胞修复周围神经损伤的炎症反应。结论 骨髓间充质干细胞可以通过miR-449a靶向调控NF-кB信号通路减轻周围神经损伤炎症反应修复神经损伤。 展开更多
关键词 周围神经损伤 miR-449a NF-Κb信号通路 炎症反应
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miRNA-449b在胃癌组织中的表达及与淋巴结转移的关系 被引量:1
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作者 林爱琴 汪根莲 +1 位作者 段仁杰 李铁臣 《皖南医学院学报》 CAS 2015年第2期113-116,共4页
目的:通过对胃癌组织及癌旁组织中miRNA-449b表达的比较,分析miRNA-449b与胃癌发生及淋巴结转移的关系,为进一步探讨其在胃癌中的作用机制提供依据。方法:收集30例胃癌及癌旁组织标本,提取组织总RNA;茎环法反转录成c DNA;用实时荧光定量... 目的:通过对胃癌组织及癌旁组织中miRNA-449b表达的比较,分析miRNA-449b与胃癌发生及淋巴结转移的关系,为进一步探讨其在胃癌中的作用机制提供依据。方法:收集30例胃癌及癌旁组织标本,提取组织总RNA;茎环法反转录成c DNA;用实时荧光定量PCR方法检测miRNA-449b在组织中的表达水平。结果:相比于癌旁组织,miRNA-449b在胃癌组织中有23例(76.67%)表达下调,7例(23.33%)表达上调,其平均表达水平低于癌旁组织,差异有统计学意义(t=2.395,P=0.023,P<0.05)。miRNA-449b在17例有淋巴结转移的样本中16例表达下调(94.12%),13例无淋巴结转移的样本只有7例表达下调(53.85%),淋巴结转移组与无淋巴结转移组miRNA-449b的下调比例,经卡方检验,差异有统计学意义(P=0.025,P<0.05)。结论:miRNA-449b与胃癌的发生及淋巴结转移相关。 展开更多
关键词 胃癌 mirna-449b 淋巴结转移
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绵羊miR-449a/b前体序列组织表达及生物信息学分析
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作者 王赛桥 赵路 +3 位作者 翟振翰 张丙雷 贾万航 王玉琴 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2175-2184,共10页
【目的】探究miR-449a/b在绵羊生长发育和繁殖性能方面的作用,为进一步研究miR-449a/b在绵羊繁殖调控中的作用提供参考。【方法】以湖羊为研究对象,利用实时荧光定量PCR技术鉴定miR-449a/b在湖羊下丘脑、垂体和卵巢中的相对表达量。使用... 【目的】探究miR-449a/b在绵羊生长发育和繁殖性能方面的作用,为进一步研究miR-449a/b在绵羊繁殖调控中的作用提供参考。【方法】以湖羊为研究对象,利用实时荧光定量PCR技术鉴定miR-449a/b在湖羊下丘脑、垂体和卵巢中的相对表达量。使用TargetScan、miRWalk、miRDB软件预测绵羊miR-449a/b前体序列的靶基因,利用微生信和KOBAS网站对其进行GO功能和KEGG通路富集分析。【结果】试验获得的前体序列与NCBI数据库中绵羊前体序列信息比对结果一致。实时荧光定量PCR结果显示,miR-449a在垂体中的相对表达量显著高于miR-449b(P<0.05),miR-449b在卵巢中的相对表达量极显著高于miR-449a(P<0.01)。利用3个靶基因预测软件做韦恩图分析,取其交集得到miR-449a/b的靶基因数目分别为299和23个。GO功能富集显示,miR-449a/b主要被富集到生物进程;KEGG通路富集结果取前20个通路进行分析发现,主要包括催产素、MAPK等与繁殖调控相关的信号通路。【结论】miR-449a在垂体中的表达量较高,miR-449b在卵巢中的表达量较高。miR-449a/b的靶基因数目分别为299和23个,其基因功能主要集中在生物过程,可能参与湖羊的繁殖调控。 展开更多
关键词 绵羊 miR-449a miR-449b 生物信息学 靶基因 繁殖调控
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MicroRNA-449a/b抑制人结肠癌细胞内Fra-1的表达 被引量:1
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作者 吴建民 樊淑玉 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期161-167,共7页
MicroRNAs(miRNAs)是一类长度约为22 nt的非编码的调控性小RNA,它们在诸多的生命活动中发挥重要作用,如参与调控细胞的增殖、分化、凋亡以及肿瘤的发生发展.MicroRNA-449a/b(miR-449a/b)是脊椎动物中进化保守的miRNA,作为抑癌基因,参与... MicroRNAs(miRNAs)是一类长度约为22 nt的非编码的调控性小RNA,它们在诸多的生命活动中发挥重要作用,如参与调控细胞的增殖、分化、凋亡以及肿瘤的发生发展.MicroRNA-449a/b(miR-449a/b)是脊椎动物中进化保守的miRNA,作为抑癌基因,参与了许多癌症的发生过程,但其在结肠癌中的作用尚不清楚.本文利用实时荧光定量技术研究了miR-449a/b在结肠癌组织中的表达.利用双荧光素酶报告基因检测系统及Western印迹鉴定miR-449a/b的靶基因.应用MTS法和Transwell分别检测miR-449a/b对结肠癌细胞增殖和迁移的影响.检测组蛋白乙酰化酶抑制剂曲古菌素A(trichostatin A,TSA)对结肠癌细胞中miR-449a/b表达的影响.研究结果表明:与正常结肠组织相比,miR-449a/b在结肠癌组织中低表达;miR-449a/b能够结合到FRA-1 mRNA 3'-非翻译区(3'-untranslated region,3'-UTR),从而抑制结肠癌细胞HCT116内源Fra-1的表达;外源转染miR-449a/b明显抑制结肠癌细胞HCT116的增殖和迁移;并且TSA处理能够诱导结肠癌细胞HCT116中miR-449a/b的表达.以上结果提示:miR-449a/b可能通过抑制靶基因Fra-1的表达,进而抑制结肠癌细胞的增殖和迁移. 展开更多
关键词 miR449a b Fra-1 结肠癌 细胞增殖 细胞迁移
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miR-449a/b负反馈调节E2F1抑制胃癌细胞增殖 被引量:5
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作者 林爱琴 卜文婕 +4 位作者 汪萍 高继光 杨建课 丁飞雨 李铁臣 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期13-19,共7页
目的探讨miR-449a/b在胃癌发生中的可能作用机制。方法采用qRT-PCR方法检测了miR-449a/b和E2F1基因在胃癌细胞BGC-823和胃粘膜细胞GES-1表达情况;采用瞬时转染技术将miR-449a/b模拟物(mimic)以及mimic阴性对照分别转入胃癌细胞BGC-823中... 目的探讨miR-449a/b在胃癌发生中的可能作用机制。方法采用qRT-PCR方法检测了miR-449a/b和E2F1基因在胃癌细胞BGC-823和胃粘膜细胞GES-1表达情况;采用瞬时转染技术将miR-449a/b模拟物(mimic)以及mimic阴性对照分别转入胃癌细胞BGC-823中,qRT-PCR验证转染成功后,通过CCK-8法检测胃癌细胞的增殖能力,流式细胞术检测胃癌细胞凋亡的变化,细胞划痕实验检测胃癌细胞的迁移能力,Western blot方法检测miR-449a/b上调后其靶基因蛋白的表达水平;并通过转染E2F1过表达质粒和空质粒对照入胃癌细胞BGC-823,Western blot确定转染效率后,分别用qRT-PCR和数字PCR检测miR-449a/b的表达水平。结果相比于正常胃粘膜细胞株GES-1,miR-449a/b在胃癌细胞株BGC-823中表达均下调(P<0.01);过表达miR-449a/b可抑制胃癌细胞BGC-823增殖和迁移,并促进其凋亡(P<0.05);过表达的E2F1可上调miR-449a/b的表达(P<0.001),而上调miR-449a/b的表达,其直接靶基因CDK4、CDK6表达下调,并可通过CDKs-pRb-E2F1信号通路,间接下调E2F1蛋白的表达(P<0.01)。结论 miR-449a/b的低表达和E2F1的高表达均参与了胃癌的发生、发展,并且miR-449a/b能负反馈调节E2F1抑制胃癌细胞增殖。 展开更多
关键词 胃癌 miR-449a/b E2F1 细胞增殖
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miR-449a/b在Ⅱ型子宫内膜癌中表达下调 被引量:4
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作者 薛纪森 张乾 +4 位作者 李晓琳 胡燕 杨孝军 颜笑健 郑飞云 《医学研究杂志》 2012年第11期103-107,共5页
目的分析Ⅰ型和Ⅱ型子宫内膜癌及良性子宫内膜组织间MicroRNA(miRNA)表达谱差异。方法收集子宫内膜癌手术患者内膜及良性患者内膜组织,利用免疫组化法分组,分别提取总RNA,基因芯片检测差异表达的miRNA,并经反转录PCR和荧光定量PCR验证... 目的分析Ⅰ型和Ⅱ型子宫内膜癌及良性子宫内膜组织间MicroRNA(miRNA)表达谱差异。方法收集子宫内膜癌手术患者内膜及良性患者内膜组织,利用免疫组化法分组,分别提取总RNA,基因芯片检测差异表达的miRNA,并经反转录PCR和荧光定量PCR验证差异表达的miRNA。结果芯片检测发现Ⅱ型子宫内膜癌与Ⅰ型子宫内膜癌及良性内膜组织间存在显著下调的miRNA分别有12个和9个,均下调的有miR-449a/b和miR-20b,显著上调的miRNA分别有18个和4个,均上调的有miR-29a。经反转录PCR和荧光定量PCR验证后发现miR-449a在Ⅱ型子宫内膜癌比Ⅰ型子宫内膜癌及良性内膜组织分别下调347倍和288倍,miR-449b分别下调461倍和424倍。结论Ⅰ型和Ⅱ型子宫内膜癌间miRNA的表达差异可能与不同类型子宫内膜癌的发生发展相关,而miR-449a/b可能与Ⅱ型子宫内膜癌的发病机制有关,可为进一步研究子宫内膜癌发生的分子机制提供依据。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 MICRORNA miR-449a b 基因芯片 荧光定量PCR
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miR-449b通过E2F3-p53途径抑制子宫内膜腺癌细胞HEC-1-B的生长 被引量:2
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作者 陈慧君 黄亦波 +1 位作者 林蓉蓉 郑飞云 《医学研究杂志》 2015年第8期41-45,共5页
目的探讨miR-449b对子宫内膜腺癌细胞HEC-1-B增殖和凋亡的影响及其作用的分子途径。方法脂质体lipofectamine 2000包被miR-449b并转染入HEC-1-B细胞,实时荧光定量PCR检测转染前后细胞内miR-449b的表达水平,CCK-8试验检测转染前后细胞活... 目的探讨miR-449b对子宫内膜腺癌细胞HEC-1-B增殖和凋亡的影响及其作用的分子途径。方法脂质体lipofectamine 2000包被miR-449b并转染入HEC-1-B细胞,实时荧光定量PCR检测转染前后细胞内miR-449b的表达水平,CCK-8试验检测转染前后细胞活性,流式细胞仪来检测转染前后细胞凋亡情况。细胞克隆形成实验观察转染前后细胞克隆形成能力。Western blot方法检查转染前后细胞内E2F3蛋白和p53的表达情况。结果转染后实验组miR-449b表达量较NC组增加,细胞增殖能力和克隆能力减弱,而细胞凋亡增加(P<0.05)。miR-449b使E2F3表达下调,p53表达上调(P<0.05)。结论 miR-449b通过E2F3-p53途径抑制HEC-1-B细胞增殖并促进凋亡,可能作为治疗子宫内膜腺癌的新分子靶标。 展开更多
关键词 miR-449b HEC-1-b细胞 增殖 凋亡 E2F3 P53
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结直肠癌组织中微小RNA-449b的水平及临床意义 被引量:1
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作者 张道权 金树 周玉保 《临床肿瘤学杂志》 CAS 北大核心 2019年第4期334-337,共4页
目的探讨微小RNA-449b(miR-449b)在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法收集本院2012年1月至2014年12月收治的92例手术切除的结直肠癌组织和88例癌旁正常肠黏膜组织存档蜡块,采用实时定量PCR(QPCR)法检测以上组织中miR-449b的表达情... 目的探讨微小RNA-449b(miR-449b)在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法收集本院2012年1月至2014年12月收治的92例手术切除的结直肠癌组织和88例癌旁正常肠黏膜组织存档蜡块,采用实时定量PCR(QPCR)法检测以上组织中miR-449b的表达情况,并分析其与临床病理特征(性别、年龄、部位、浸润深度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期、分化程度及血清CEA、CA50和CA199水平)的关系,根据随访资料分析miR-449b表达与预后的关系。结果 QPCR检测发现92例结直肠癌组织中miR-449b水平分别为0.367±0.183,低于癌旁组织的1.029±0.228(P<0.05);miR-449b表达与结直肠癌患者的性别、年龄、部位、分化程度及血清CEA、CA50和CA199水平均无关(P>0.05),而与浸润深度、淋巴结转移、远处转移和TNM分期均有关(P<0.05)。miR-449b低表达者的中位总生存期为37.0(95%CI:33.168~40.382)个月,低于miR-449b高表达者的47.0(95%CI:42.561~51.419)个月(P<0.001)。结论 miR-449b在结直肠癌组织中表达降低,与结直肠癌的发生发展有关,且miR-449b低水平的预后较差,在该类型恶性肿瘤的诊断和预后预测上有一定价值。 展开更多
关键词 结直肠癌 微小RNA-449b 临床意义 预后
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m icroRNA-449b对高迁移率族蛋白B1介导树突状细胞功能的影响 被引量:2
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作者 王勇涛 董宁 +3 位作者 柴艳芬 于燕 齐安龙 姚咏明 《感染.炎症.修复》 2015年第4期205-212,共8页
目的:探讨mi R-449b在高迁移率族蛋白B1(HMGB1)刺激树突状细胞(DC)中的变化及其对DC免疫功能的影响。方法:分别以10、100、1 000 ng/ml剂量的HMGB1刺激小鼠脾脏来源的CD11c+DC,于48后检测DC表面分子CD80、CD86、MHC-II及细胞内mi R-449... 目的:探讨mi R-449b在高迁移率族蛋白B1(HMGB1)刺激树突状细胞(DC)中的变化及其对DC免疫功能的影响。方法:分别以10、100、1 000 ng/ml剂量的HMGB1刺激小鼠脾脏来源的CD11c+DC,于48后检测DC表面分子CD80、CD86、MHC-II及细胞内mi R-449b改变;流式细胞仪分析不同剂量HMGB1刺激对DC凋亡的影响。DC转染mi R-449b模拟物(mi R-449b)、抑制物(In-mi R-449b)及相应对照(mi R-NC、In-mi RNC)后,HMGB1(100 ng/ml)刺激48 h收取细胞,检测DC表面分子、凋亡改变以及与T细胞混合培养后T细胞增殖、分化功能的变化。结果:HMGB1刺激DC后,其表面分子随着剂量的增加表达上调,其中以100 ng/ml组上调最为明显,而大剂量(1 000 ng/ml)时表达有所下调;mi R-449b在48 h 100及1 000 ng/ml HMBG1组表达明显上调(P<0.05);随着HMGB1剂量的增加,DC在48 h凋亡逐渐增加(P<0.05)。转染mi R-449b可上调其在细胞内表达,而抑制物可抑制其表达;上调mi R-449b后HMGB1(100 ng/ml)刺激48 h DC表面分子CD86表达显著上调(P<0.05)、凋亡增加(P<0.01)、对T细胞的共刺激增殖效应减弱、混合性淋巴细胞反应中IL-4水平增多(P<0.01)、IFN-γ水平下降(P<0.05)。结论:mi R-449b可负性调控HMGB1介导DC免疫功能及促进其凋亡,进而在机体免疫反应障碍过程中发挥调控作用。 展开更多
关键词 miR-449b 树突状细胞 高迁移率族蛋白 b1 免疫功能
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miR-449b表达对慢性乙型肝炎合并肝细胞癌患者预后的影响
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作者 梁伊乐 胡新俊 +1 位作者 岳峰 徐芸 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2021年第6期516-518,523,共4页
目的:探讨miR-449b表达对慢性乙型肝炎(CHB)合并肝细胞癌(HCC)患者预后的影响。方法:选取2014年1月至2018年1月的100例CHB合并HCC患者为观察组,同期40例CHB患者作为对照组,使用qRT-PCR检测患者外周血中miR-449b水平,分析miR-449b与观察... 目的:探讨miR-449b表达对慢性乙型肝炎(CHB)合并肝细胞癌(HCC)患者预后的影响。方法:选取2014年1月至2018年1月的100例CHB合并HCC患者为观察组,同期40例CHB患者作为对照组,使用qRT-PCR检测患者外周血中miR-449b水平,分析miR-449b与观察组患者总生存期(OS)的关系。结果:观察组外周血miR-449b表达水平(0.27±0.10),低于对照组(0.64±0.10),差异有统计学意义(P<0.05)。miR-449b表达与HBV病毒载量、肿瘤分期、Child-Pugh分级具有相关性(P<0.05)。观察组共失访9例,成功随访率91.0%,平均随访时间(49.9±7.9)个月,死亡51例。miR-449b表达增高组2年死亡率为15.91%,miR-449b表达降低组2年死亡率为38.30%,差异具有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier联合Log-rank检验提示,miR-449b表达降低组OS短于miR-449b表达升高组(P<0.05)。Cox分析结果显示,miR-449b表达、年龄、TNM分期、病毒载量是CHB合并HCC OS的独立影响因素(P<0.05)。结论:CHB合并HCC患者外周血中miR-449b表达水平与TNM分期、病毒载量及Child-Pugh分级有关,且miR-449b表达降低患者的OS缩短,miR-449b可能是CHB合并HCC预后的标志物。 展开更多
关键词 肝细胞癌 慢性乙型肝炎 miR-449b 总生存期
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miR-449b对绵羊早期胚胎发育的影响 被引量:2
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作者 任秀美奥 姚旭东 +6 位作者 蒙亚琦 郭延华 唐红 张译元 赵兴旺 王立民 周平 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第7期2661-2668,共8页
【目的】研究miR-449b对绵羊早期胚胎发育的影响。【方法】采用Percoll密度梯度离心法获得纯化绵羊精子,将绵羊卵丘-卵母细胞复合体(COCs)在培养箱中培养16~18 h获得成熟卵母细胞,从1月龄纯种萨福克绵羊耳组织分离成纤维细胞,通过实时... 【目的】研究miR-449b对绵羊早期胚胎发育的影响。【方法】采用Percoll密度梯度离心法获得纯化绵羊精子,将绵羊卵丘-卵母细胞复合体(COCs)在培养箱中培养16~18 h获得成熟卵母细胞,从1月龄纯种萨福克绵羊耳组织分离成纤维细胞,通过实时荧光定量PCR比较绵羊精子、成熟卵母细胞与成纤维细胞中miR-449b的相对表达量;给成熟卵母细胞分别显微注射0.9%生理盐水(Con组)、miR-449b模拟物对照(NC mimic)与miR-449b模拟物(miR-449b mimic),注射后进行孤雌激活,分别于激活的第2、7天统计胚胎卵裂率与囊胚率;将成熟卵母细胞进行体外受精(IVF),收集IVF、Con、NC mimic与miR-449b mimic组2-细胞胚胎,采用免疫荧光法比较组蛋白H3K9me3的变化。【结果】miR-449b在精子中的表达显著高于成熟卵母细胞和成纤维细胞(P<0.05);与Con组相比,miR-449b mimic和NC mimic组胚胎的卵裂率均显著降低(P<0.05),NC mimic组胚胎卵裂率显著低于miR-449b mimic组(P<0,05);miR-449b mimic组胚胎囊胚率提高,但差异不显著(P>0.05);IVF、Con、NC mimic与miR-449b mimic组2-细胞胚胎均表达组蛋白H3K9me3,且都在细胞核表达。与Con组相比,NC mimic组2-细胞胚胎组蛋白H3K9me3的表达水平显著增加(P<0.05),miR-449b mimic组显著降低(P<0.05);NC mimic组2-细胞胚胎组蛋白H3K9me3的表达水平显著高于miR-449b mimic组(P<0.05),miR-449b mimic与IVF组无显著差异(P>0.05)。【结论】miR-449b能显著提高绵羊早期胚胎的发育率,且降低早期胚胎中H3K9me3的表达水平。 展开更多
关键词 miR-449b 早期胚胎 H3K9me3 精子
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miR-449b介导5-氟尿嘧啶/顺铂抑制肝癌细胞的迁移 被引量:4
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作者 侯彭姣 邓艳春 +1 位作者 梁娜 刘长征 《基础医学与临床》 CSCD 2017年第6期792-796,共5页
目的研究化疗药5-氟尿嘧啶和顺铂对miR-449b在肝癌细胞中表达的影响及其抑制肝癌细胞迁移能力的分子机制。方法收集肝癌患者的组织样本,提取总RNA,用real-time PCR法检测肝癌组织样本中miR-449b的表达;5-氟尿嘧啶和顺铂处理肝癌细胞,检... 目的研究化疗药5-氟尿嘧啶和顺铂对miR-449b在肝癌细胞中表达的影响及其抑制肝癌细胞迁移能力的分子机制。方法收集肝癌患者的组织样本,提取总RNA,用real-time PCR法检测肝癌组织样本中miR-449b的表达;5-氟尿嘧啶和顺铂处理肝癌细胞,检测miR-449b的表达;在肝癌细胞中过表达miR-449b或用5-氟尿嘧啶和顺铂分别处理肝癌细胞,利用细胞划痕实验检测肝癌细胞的迁移能力变化;设计拯救实验,探究化疗药5-氟尿嘧啶和顺铂通过诱导miR-449b表达,参与肝癌细胞迁移能力调控;软件预测结合Western blot实验,鉴定miR-449b的功能靶基因。结果 miR-449b在肝癌患者组织中表达下调(P<0.001);5-氟尿嘧啶和顺铂诱导肝癌细胞内源性miR-449b的表达上调(P<0.001);过表达miR-449b可以抑制肝癌细胞的迁移(P<0.001);敲低miR-449b的表达可以抑制5-氟尿嘧啶和顺铂对肝癌细胞迁移能力的抑制作用(P<0.05);catenin-δ是miR-449b的直接靶基因。结论5-氟尿嘧啶和顺铂通过诱导miR-449b的表达抑制肝癌细胞的迁移。 展开更多
关键词 miR-449b 5-氟尿嘧啶 顺铂 肝细胞癌
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miR-449b多态性位点rs10061133差异调控LHCGR表达 被引量:2
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作者 潘虹 陈蓓丽 +1 位作者 李腾龑 马旭 《生殖医学杂志》 CAS 2019年第12期1479-1483,共5页
目的探究miR-449b多态性位点rs10061133 A>G在卵巢功能不全(POI)中的可能作用机制。方法生物信息学预测可能与POI相关的miR-449b潜在靶基因。双荧光素酶检测LHCGR是否为miR-449b的靶基因以及miR-449b rs10061133不同基因型对LHCGR表... 目的探究miR-449b多态性位点rs10061133 A>G在卵巢功能不全(POI)中的可能作用机制。方法生物信息学预测可能与POI相关的miR-449b潜在靶基因。双荧光素酶检测LHCGR是否为miR-449b的靶基因以及miR-449b rs10061133不同基因型对LHCGR表达调控的影响。结果生物信息学预测LHCGR为miR-449b的潜在靶基因,双荧光素酶测定证实LHCGR是miR-449b的靶基因。与GG基因型相比,rs10061133 AA基因型显著减弱LHCGR 3’UTR的荧光素酶活性。结论LHCGR为miR-449b的靶基因,多态性位点rs10061133 A>G可能通过差异调控LHCGR表达在POI的发生发展中发挥作用。 展开更多
关键词 miR-449b 多态性 LHCGR 卵巢功能不全
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bta-miR-34b/c和bta-miR-449a/b/c靶基因预测及生物信息学分析 被引量:2
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作者 杜鑫泽 马鑫浩 +5 位作者 张殿琦 杜嘉伟 马婧 谢琨成 何杰 昝林森 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第7期2451-2461,共11页
【目的】试验旨在对bta-miR-34b/c和bta-miR-449a/b/c的序列保守性、转录因子和靶基因进行生物信息学预测和分析,探究其影响精子发生的作用机制,为研究其生物学功能及作用机制提供指导和思路。【方法】利用miRBase数据库获取不同物种的b... 【目的】试验旨在对bta-miR-34b/c和bta-miR-449a/b/c的序列保守性、转录因子和靶基因进行生物信息学预测和分析,探究其影响精子发生的作用机制,为研究其生物学功能及作用机制提供指导和思路。【方法】利用miRBase数据库获取不同物种的bta-miR-34b/c和bta-miR-449a/b/c序列并进行相似性分析;通过TargetScan、miRWalk、miRDB等方法预测bta-miR-34b/c和bta-miR-449a/b/c的靶基因,对获得的靶基因集合分别进行GO功能和KEGG通路富集分析;通过AnimalTFDB获取共同调控bta-miR-34b/c和bta-miR-449a/b/c的转录因子,并构建TF-miRNA-mRNA作用网络。【结果】bta-miR-34b/c和bta-miR-449a/b/c在不同物种间高度保守。预测得到2个转录因子和49个候选靶基因,这些靶基因主要富集在精子发生、钙离子依赖性胞吐的调节、胰岛素分泌的调节等GO条目,以及HIF-1信号通路、甲状腺激素信号通路、Wnt信号通路等KEGG通路。bta-miR-34b/c、bta-miR-449a/b/c与上游转录因子NR2C2和HIC1,下游靶基因AXL、E2F3、DAAM1等共同构成的作用网络通过调控减数分裂、细胞周期、细胞凋亡、精子细胞能量代谢等生物过程影响精子发生。【结论】bta-miR-34b/c、bta-miR-449a/b/c通过上游转录因子和下游靶基因组成的分子调控网络共同调节精子发生过程。 展开更多
关键词 miR-34b/c miR-449a/b/c 精子发生 靶基因 转录因子
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非小细胞肺癌组织中miR-449a/b/c的表达及临床意义 被引量:10
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作者 贺文财 金丽山 李华 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2017年第4期303-308,共6页
目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中微小RNA(miRNA)-449a/b/c的表达水平、临床意义及与预后的关系。方法收集2013年1月至2015年12月收治的82例手术切除的NSCLC组织及69例癌旁组织标本,采用荧光实时定量PCR(QPCR)法检测以上组织中miR-449... 目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中微小RNA(miRNA)-449a/b/c的表达水平、临床意义及与预后的关系。方法收集2013年1月至2015年12月收治的82例手术切除的NSCLC组织及69例癌旁组织标本,采用荧光实时定量PCR(QPCR)法检测以上组织中miR-449a/b/c的表达并比较3者在NSCLC组织及癌旁组织中的分布差异,Pearson相关分析NSCLC组织中miR-449a、miR-449b和miR-449c表达的相关性,分析NSCLC组织中miR-449a/b/c表达与临床病理特征(性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期、组织学类型和淋巴结转移)的关系,同时根据随访数据比较不同miR-449a/b/c表达患者的预后情况。结果 QPCR结果显示,NSCLC组织中miR-449a、miR-449b和miR-449c的平均表达量依次为0.210±0.028、0.359±0.031和0.133±0.020,均低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);NSCLC组织中miR-449a、miR-449b和miR-449c的表达均呈正相关,相关系数r_(miR-449a/b)、r_(miR-449a/c)和r_(miR-449b/c)分别为0.246、0.390和0.331(P<0.05);NSCLC组织中miR-449a/b/c表达均与TNM分期有关,miR-449a和miR-449c表达与肿瘤大小有关。全组中位总生存期(OS)为12.4个月,其中miR-449a低表达组和高表达组的中位OS分别为11.2个月和13.5个月(P>0.05),miR-449b低表达组和高表达组的中位OS分别为9.6个月和14.2个月(P<0.05),miR-449c低表达组和高表达组的中位OS分别为11.7个月和13.7个月(P>0.05)。结论miR-449a/b/c在NSCLC组织中表达降低,且均与TNM分期有关,miR-449b表达与预后有关,可能与NSCLC发生、发展有关,对NSCLC诊断及病情评估有一定价值。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌(NSCLC) 微小RNA-449a(mirna-449a) 微小RNA-449b(mirna-449b) 微小RNA-449c(mirna-449c)
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Inhibitory Effect of MiR-449b on Cancer Cell Growth and Invasion through LGR4 in Non-Small-Cell Lung Carcinoma 被引量:8
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作者 Dong YANG Jin-song LI +2 位作者 Qian-yu XU Tian XIA Jia-hong XIA 《Current Medical Science》 SCIE CAS 2018年第4期582-589,共8页
Non-small-cell lung carcinoma (NSCLC) is one of the most frequently diagnosed malignancies worldwide. Previous studies have shown that microRNA-449b (miR-449b) functions as a tumor suppressor in many cancers. Howe... Non-small-cell lung carcinoma (NSCLC) is one of the most frequently diagnosed malignancies worldwide. Previous studies have shown that microRNA-449b (miR-449b) functions as a tumor suppressor in many cancers. However, the role of miR- 449b in NSCLC is still unknown. In the present study, miR-449b was significantly down- regulated in NSCLC samples and cell lines. Bioinformatics analysis revealed that 3'-UTR region of leucine rich repeat containing G protein-coupled receptor 4 (LGR4) mRNA had putative complementary sequences to miR-449b, which was further confirmed by the luciferase assay. Western blotting showed that restoration of miR-449b in NSCLC cells decreased the expression of LGR4. Interestingly, over-expression of miR-449b inhibited growth and invasion of NSCLC cells in vitro. Furthermore, ectopic expression of LGR4 reversed miR-449b-suppressed proliferation and invasion of NSCLC cells. Therefore, the data of the present study demonstrate that miR-449b inhibits tumor cell growth and invasion by targeting LGR4 in NSCLC. 展开更多
关键词 non-small-cell lung carcinoma microrna-449b leucine rich repeat containing G protein-coupled receptor 4 growth INVASION
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miR-449b对GBM细胞替莫唑胺治疗敏感性的影响
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作者 许琼华 张熠 《生命科学仪器》 2017年第3期36-40,49,共6页
目的 miR-449b在多种肿瘤细胞中都处于低表达状态,是潜在的肿瘤抑制因子。本课题主要探究miR-449b表达对GBM细胞替莫唑胺(TMZ)治疗敏感性的的影响及内在的调控机制。方法选用两株GBM细胞,T98G和LN229,将miR-449b模拟剂转入这两种细胞中... 目的 miR-449b在多种肿瘤细胞中都处于低表达状态,是潜在的肿瘤抑制因子。本课题主要探究miR-449b表达对GBM细胞替莫唑胺(TMZ)治疗敏感性的的影响及内在的调控机制。方法选用两株GBM细胞,T98G和LN229,将miR-449b模拟剂转入这两种细胞中,采用MTT法、克隆集落法和免疫印迹法检测miR-449b表达对不同剂量TMZ处理后的GBM细胞的存活、增殖能力和凋亡水平的影响;同时检测miR-449b表达对替莫唑胺治疗下GBM细胞ATP水平的影响,以及将外源ATP脂质体转入后对细胞活力的影响。结果 MTT研究表明,增加miR-449b表达可降低替莫唑胺治疗下GBM细胞的存活能力,表现为肿瘤细胞活力下调、克隆集落形成能力减弱及Cleaved-PARP的蛋白水平增加;ATP检测结果发现,miR-449b表达可降低替莫唑胺应激下肿瘤细胞ATP水平,并且外源性ATP补充可明显增强替莫唑胺治疗下肿瘤细胞的活力。结论以上研究结果提示,miR-449b可通过加剧替莫唑胺治疗下GBM细胞ATP水平消耗,进而促进GBM细胞对替莫唑胺治疗的敏感性,有利于提高替莫唑胺对GBM的治疗效果及其在临床上的应用。 展开更多
关键词 miR-449b GbM 替莫唑胺 敏感性 ATP
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miR⁃449a与miR⁃19b⁃3p在急性脑梗死介入取栓前后的水平变化及检测价值 被引量:3
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作者 盛文乾君 贾若飞 +1 位作者 钟金浩 邓德贤 《分子诊断与治疗杂志》 2022年第5期852-856,共5页
目的探究miR⁃449a与miR⁃19b⁃3p在急性脑梗死介入取栓前后的水平变化及检测价值。方法选取佛山市中医院2019年8月至2021年8月116例急性脑梗死患者作为观察组,另选取同期58例健康体检者作为对照组,比较两组血清miR⁃449a、miR⁃19b⁃3p水平,... 目的探究miR⁃449a与miR⁃19b⁃3p在急性脑梗死介入取栓前后的水平变化及检测价值。方法选取佛山市中医院2019年8月至2021年8月116例急性脑梗死患者作为观察组,另选取同期58例健康体检者作为对照组,比较两组血清miR⁃449a、miR⁃19b⁃3p水平,观察组均行介入取栓治疗,比较观察组介入取栓前、介入取栓后12 h血清miR⁃449a、miR⁃19b⁃3p水平,对比不同预后患者临床资料、介入取栓前后血清miR⁃449a、miR⁃19b⁃3p水平,分析血清miR⁃449a、miR⁃19b⁃3p对预后的影响及预测价值。结果观察组血清miR⁃449a低于对照组,miR⁃19b⁃3p高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组介入取栓后12 h血清miR⁃449a高于介入取栓前,miR⁃19b⁃3p低于介入取栓前,差异有统计学意义(P<0.05);预后不良患者介入取栓后12 h血清miR⁃449a低于预后良好患者,miR⁃19b⁃3p高于预后良好患者,差异有统计学意义(P<0.05);根据介入取栓后12 h血清miR⁃449a、miR⁃19b⁃3p表达均数为界分为低表达与高表达,血清miR⁃449a单独低表达所致预后不良的OR为7.619,miR⁃19b⁃3p单独高表达所致预后不良的OR为3.800,两者同时存在时呈正向交互作用OR为20.583,γ为2.265,为次相乘模型;介入取栓后12 h血清miR⁃449a、miR⁃19b⁃3p两者联合预测预后不良的AUC为0.892(95%CI:0.821~0.942),明显优于两者单独预测(P<0.05)。结论miR⁃449a与miR⁃19b⁃3p在急性脑梗死患者中呈异常表达,介入取栓后早期检测两者水平可作为预测预后不良的重要辅助途径。 展开更多
关键词 急性脑梗死 介入取栓 微小mRNA⁃449a 微小mRNA⁃19b⁃3p
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基于转录组学分析miR-34b/c与miR-449对小鼠输出小管结构与功能的影响
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作者 武宇洁 刘悦 +4 位作者 胡燕琴 王莉 白芙蓉 徐晨 伍静文 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1059-1067,共9页
目的:研究miR-34b/c、miR-449在维持输出小管正常结构与功能中发挥的作用,探索miR-34b/c^(-/-)、miR-449^(-/-)双敲除小鼠不育的分子机制。方法:HE染色对小鼠输出小管形态进行观察;利用转录组测序技术对野生型小鼠和miR-34b/c^(-/-)、mi... 目的:研究miR-34b/c、miR-449在维持输出小管正常结构与功能中发挥的作用,探索miR-34b/c^(-/-)、miR-449^(-/-)双敲除小鼠不育的分子机制。方法:HE染色对小鼠输出小管形态进行观察;利用转录组测序技术对野生型小鼠和miR-34b/c^(-/-)、miR-449^(-/-)双敲除小鼠输出小管基因表达进行分析,从中筛选出miR-34b/c、miR-449可能的靶基因与差异表达基因进行联合分析;qRT-PCR法验证测序结果。结果:双敲除小鼠输出小管形态异常;与野生型小鼠相比,双敲除小鼠输出小管中参与纤毛等结构形成以及水、离子、蛋白质转运等活动的基因表达显著下降。结论:miR-34b/c、miR-449的缺失导致双敲除小鼠输出小管结构异常,输出小管纤毛运动与重吸收功能障碍,导致双敲除小鼠不育。 展开更多
关键词 miR-34b/c miR-449 输出小管 转录组学 不育 小鼠
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miR-449a靶向调控外周血Toll样受体5影响风湿性心脏病发生发展的分子机制研究 被引量:1
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作者 李宝亮 苏华 +2 位作者 李梦嘉 耿丽娜 马俊帅 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第17期2057-2063,共7页
目的:研究微小RNA-449a(miR-449a)是否通过靶向外周血中的Toll样受体5(TLR5)影响风湿性心脏病的发生发展。方法:实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测风湿性心脏病患者外周血中TLR5和miR-449a的表达水平。在风湿性心脏病心肌细胞中转... 目的:研究微小RNA-449a(miR-449a)是否通过靶向外周血中的Toll样受体5(TLR5)影响风湿性心脏病的发生发展。方法:实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测风湿性心脏病患者外周血中TLR5和miR-449a的表达水平。在风湿性心脏病心肌细胞中转染miR-449a模拟物或TLR5小干扰RNA si-TLR5。采用qRT-PCR检测miR-449a表达,Western blot分析细胞核相关抗原Ki67(Ki67)、活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved-caspase-3)、TLR5、磷酸化p65(p-p65)和磷酸化IκBα(p-IκBα)蛋白表达,MTT测定细胞增殖,流式细胞仪评估细胞凋亡,ELISA测定炎症因子IL-1β、TNF-α水平。Starbase靶位点预测软件与双荧光素酶报告基因分析miR-449a与TLR5之间的靶向关系。在风湿性心脏病心肌细胞中共转染miR-449a模拟物和TLR5过表达质粒pcDNA-TLR5,观察细胞增殖、凋亡和NF-κB信号通路活性变化。结果:风湿性心脏病患者外周血中miR-449a的表达水平明显降低,TLR5 mRNA和TLR5蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。过表达miR-449a明显提高风湿性心脏病心肌细胞的Ki67蛋白表达水平、细胞存活率,显著降低Cleaved-caspase-3、p-p65、p-IκBα蛋白表达水平、细胞凋亡率和IL-1β、TNF-α水平(P<0.05)。低表达TLR5明显提高风湿性心脏病心肌细胞的Ki67蛋白表达水平、细胞存活率,显著降低Cleaved-caspase-3蛋白表达水平、凋亡率(P<0.05)。miR-449a通过靶向TLR5调控TLR5蛋白的表达。高表达TLR5后,miR-449a对风湿性心脏病心肌细胞增殖、Ki67蛋白表达的促进作用,以及miR-449a对细胞凋亡、Cleaved-caspase-3、p-p65、pIκBα蛋白表达和IL-1β、TNF-α水平的抑制作用被逆转。结论:miR-449a通过靶向TLR5抑制NF-κB信号通路活性,促进风湿性心脏病心肌细胞的增殖与抑制其凋亡。 展开更多
关键词 风湿性心脏病 miR-449a TLR5 增殖 凋亡 NF-Κb信号通路
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