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microRNA-703调控NLRP3介导的焦亡和炎症反应抑制小鼠子宫内膜异位症研究 被引量:2
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作者 张玲云 何佳英 +1 位作者 王辰玥 徐蓓蕾 《中国计划生育学杂志》 2023年第1期15-18,共4页
目的:探讨microRNA-703(miR-703)调控NLRP3介导的焦亡和炎症反应影响小鼠子宫内膜异位症(EM)进展机制。方法:采用小鼠-小鼠腹腔植入方法构建子宫内膜异位症BABL/C小鼠模型。将小鼠分为EM组和对照组。免疫印迹法和酶联免疫法检测两组焦... 目的:探讨microRNA-703(miR-703)调控NLRP3介导的焦亡和炎症反应影响小鼠子宫内膜异位症(EM)进展机制。方法:采用小鼠-小鼠腹腔植入方法构建子宫内膜异位症BABL/C小鼠模型。将小鼠分为EM组和对照组。免疫印迹法和酶联免疫法检测两组焦亡标志蛋白(NLRP3、pro-caspase-1、caspase-1)和炎症因子表达(IL-1β、IL-18、TNF-α、IL-6)。实时荧光定量PCR检测两组miR-703含量。造模成功的小鼠分别腹腔注射miR-703 NC(EM+NC阴性组)、pre-miR-703(EM+miR-703组),检测两组小鼠子宫内膜异位组织大小,焦亡标志蛋白及炎性因子表达。结果:EM组小鼠NLRP3、caspase-1蛋白表达均高于对照组,炎症因子IL-1β、IL-18、TNF-α、IL-6水平(1.33±0.11ng/ml,0.66±0.08ng/ml,179.69±3.78pg/ml,90.375±4.63pg/ml)均高于对照组(0.30±0.05ng/ml,0.21±0.03ng/ml,50.51±2.96pg/ml,24.99±1.81pg/ml),异位组织中miR-703(0.52±0.09)低于对照组(1.00±0.07)(均P<0.05);在EM小鼠体内转染pre-miR-703后,EM+miR-703组EM组织变小,miR-703表达高于EM+NC阴性组,细胞焦亡标志蛋白表达低于EM+NC阴性组,炎症因子水平均低于EM+NC阴性组(均P<0.05)。结论:miR-703可能通过抑制NLRP3介导的焦亡和炎症反应改善EM症状。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 动物实验 microrna-703 NLRP3 焦亡标志蛋白 炎症反应
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MicroRNA-7-5p通过mTORC2/SGK-1信号通路负向调控人肺泡上皮细胞钠离子通道
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作者 秦克 李同林 +1 位作者 宫帅 江美芳 《川北医学院学报》 CAS 2023年第4期440-443,共4页
目的:探讨microRNA-7-5p通过哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2(mTORC2)/血清糖皮质激素诱导激酶-1(SGK-1)信号通路负向调控人肺泡上皮细胞钠离子通道(ENaC)的机制。方法:对人类非小细胞肺癌肺泡上皮细胞系A549细胞转染microRNA-7-5p模拟剂... 目的:探讨microRNA-7-5p通过哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2(mTORC2)/血清糖皮质激素诱导激酶-1(SGK-1)信号通路负向调控人肺泡上皮细胞钠离子通道(ENaC)的机制。方法:对人类非小细胞肺癌肺泡上皮细胞系A549细胞转染microRNA-7-5p模拟剂,设为microRNA-7-5p组,阴性对照组A549细胞转染与目的基因序列无同源性的不表达microRNA-7-5p的阴性对照剂。雷帕霉素组在A549细胞培养基中加入雷帕霉素。PP242组在A549细胞培养基中加入PP242。空白对照组仅加入lipo fectamineTM 2000试剂。采用RT-qPCR检测各组SGK-1 mRNA;免疫印迹法检测SGK-1蛋白、ENaC蛋白的表达量。比较各组的microRNA-7-5p表达水平、SGK-1 mRNA及蛋白表达量、ENaC蛋白表达量。结果:microRNA-7-5p组的microRNA-7-5p表达水平高于空白对照组、阴性对照组、雷帕霉素组和PP242组,A549细胞转染成功上调microRNA-7-5p表达水平(P<0.05)。microRNA-7-5p组中,SGK-1 mRNA水平、SGK-1及ENaC-α、ENaC-β、ENaC-γ蛋白表达量均低于空白对照组、阴性对照组、雷帕霉素组(P<0.05)。结论:microRNA-7-5p可能通过mTORC2/SGK-1信号通路负向调控ENaC。 展开更多
关键词 microrna-7-5p 上皮细胞钠离子通道 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2 血清糖皮质激素诱导激酶-1
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MicroRNA-766-5p靶向SCAI对宫颈癌细胞增殖、周期和凋亡的作用
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作者 刘倩男 刘伟伟 +2 位作者 毕利红 孙红 张凯 《实用妇科内分泌电子杂志》 2023年第24期1-3,共3页
目的研究MicroRNA-766-5p靶向肿瘤细胞侵袭抑制因子(SCAI)对宫颈癌细胞增殖、周期和凋亡的作用。方法选取人宫颈癌MCF-7细胞模型;CCK8检测细胞增殖;流式细胞术分析细胞周期;Western blot检测细胞周期和凋亡相关蛋白表达。结果MicroRNA-7... 目的研究MicroRNA-766-5p靶向肿瘤细胞侵袭抑制因子(SCAI)对宫颈癌细胞增殖、周期和凋亡的作用。方法选取人宫颈癌MCF-7细胞模型;CCK8检测细胞增殖;流式细胞术分析细胞周期;Western blot检测细胞周期和凋亡相关蛋白表达。结果MicroRNA-766-5p靶向SCAI高效抑制人宫颈癌MCF-7细胞增殖,48 h处理的IC50为(49.33±7.02)nmol/L。低、高药物浓度实验组减少B细胞特性莫洛尼鼠白血病病毒插入位点1(BMI-1)和细胞周期素D1(CyclinD1)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1),增加细胞周期素B1(CyclinB1)和P21,G2/M期周期阻滞,促进促凋亡蛋白[Bcl-2相关X蛋白(Bax)、裂解型多聚ADP-核糖聚合酶(c-PARP)]和抑制凋亡蛋白Bcl-2表达。结论MicroRNA-766-5p靶向SCAI能抑制宫颈癌细胞增殖,促进细胞周期阻滞和凋亡。 展开更多
关键词 microrna-766-5p 肿瘤细胞侵袭抑制因子 宫颈癌 细胞增殖 细胞周期 凋亡
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过表达microRNA-7对人肺癌95D细胞凋亡的影响 被引量:3
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作者 陈超 廖珍媛 +3 位作者 李颖 李永菊 罗军敏 徐林 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期108-112,共5页
目的探讨过表达micro RNA-7对人肺癌95D细胞体内外凋亡的作用。方法将mi R-7真核表达载体(命名为p-mi R-7)体外瞬时转染人肺癌95D细胞,利用TUNEL法观察95D细胞凋亡的变化;免疫荧光技术检测各组细胞磷酸化Caspase3和Caspase9蛋白的表达;... 目的探讨过表达micro RNA-7对人肺癌95D细胞体内外凋亡的作用。方法将mi R-7真核表达载体(命名为p-mi R-7)体外瞬时转染人肺癌95D细胞,利用TUNEL法观察95D细胞凋亡的变化;免疫荧光技术检测各组细胞磷酸化Caspase3和Caspase9蛋白的表达;建立人肺癌裸鼠模型,肿瘤局部注射p-mi R-7后利用TUNEL法检测肿瘤局部细胞凋亡变化,同时,免疫组织化学法检测凋亡相关的磷酸化Caspase3和Caspase9蛋白的表达变化。结果体外转染p-mi R-7后可导致人肺癌细胞的凋亡(P<0.05)。同时,细胞中磷酸化Caspase3和Caspase9蛋白水平显著增加(P<0.05);肿瘤局部注射p-mi R-7后,肿瘤局部mi R-7表达水平及细胞凋亡也明显增强(P<0.05),磷酸化Caspase3和Caspase9蛋白水平也显著增加。结论过表达mi R-7可以导致肿瘤细胞凋亡,这与凋亡相关蛋白Caspase3和Caspase9磷酸化水平增加有关。 展开更多
关键词 microrna-7 肺癌 细胞凋亡 95D细胞
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MicroRNA-7对非小细胞肺癌表柔比星化疗的增敏作用 被引量:1
5
作者 钱静 刘荣花 +4 位作者 刘小明 姜佩 郑一诫 储以微 高海峰 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期158-162,共5页
目的:研究microRNA-7(miR-7)对非小细胞肺癌A549和H1299细胞表柔比星(epirubicin,EPI)化疗的增敏作用及其机制。方法:EPI、miR-7 mimics单独或联合处理A549和H1299细胞后,CCK-8法检测A549和H1299细胞的增殖,Annexin-V/PI染色流式细胞术... 目的:研究microRNA-7(miR-7)对非小细胞肺癌A549和H1299细胞表柔比星(epirubicin,EPI)化疗的增敏作用及其机制。方法:EPI、miR-7 mimics单独或联合处理A549和H1299细胞后,CCK-8法检测A549和H1299细胞的增殖,Annexin-V/PI染色流式细胞术检测A549和H1299细胞的凋亡,实时定量PCR检测A549和H1299细胞中EGFR及Raf-1mRNA的表达。结果:单独使用EPI或转染miR-7 mimics均可抑制A549和H1299细胞的增殖(P<0.05),而转染miR-7 mim-ics后再以50~400 ng/ml EPI处理,较单独EPI处理显著增强对A549和H1299细胞增殖的抑制作用(P<0.05)。当miR-7mimics与EPI联用时,A549和H1299细胞的凋亡率则分别较EPI单独处理组增加(54.9±0.4)%和(67.2±0.5)%(均P<0.01),且伴随EGFR及Raf-1 mRNA表达量的显著下降(P<0.01),A549细胞中分别降低(68.0±6.0)%和(78.2±3.9)%,H1299细胞中分别降低(94.8±6.2)%和(87.8±4.3)%。结论:miR-7可通过下调EGFR及Raf-1 mRNA的表达,协同EPI抑制非小细胞肺癌A549和H1299细胞的增殖,并促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 microrna-7 表柔比星 药物增敏 非小细胞肺癌
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脑出血患者外周血microRNA-7表达的变化及其与近期预后的关系 被引量:1
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作者 陈培培 张世瑶 +1 位作者 付强 李莉 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第9期13-17,共5页
目的研究脑出血患者外周血microRNA-7(miR-7)表达的变化及其与近期预后的关系。方法选择2015年3月—2019年3月新疆医科大学第一附属医院收治的65例自发性脑出血患者作为脑出血组,同期体检的55例健康志愿者作为对照组。检测两组研究对象... 目的研究脑出血患者外周血microRNA-7(miR-7)表达的变化及其与近期预后的关系。方法选择2015年3月—2019年3月新疆医科大学第一附属医院收治的65例自发性脑出血患者作为脑出血组,同期体检的55例健康志愿者作为对照组。检测两组研究对象外周血miR-7的表达;随访脑出血患者的短期预后并根据出院后90 d的改良Rankin量表(mRS)评分分为mRS<3分的预后良好患者和≥3分的预后不良患者,分析预后不良的影响因素及miR-7对预后不良的预测价值。结果脑出血组外周血miR-7的表达水平低于对照组(P<0.05);脑出血组中预后不良患者的入院时GCS评分、外周血miR-7的表达水平、早期肠内营养比例低于预后良好患者(P<0.05),随机血糖、hs-CRP、初始血肿体积、出血破入脑室比例高于预后良好患者(P<0.05);miR-7表达减少及随机血糖、hs-CRP增加是预后不良的危险因素,早期肠内营养是预后不良的保护因素(P<0.05);miR-7表达减少对短期预后不良具有预测价值(P<0.05)。结论脑出血患者外周血miR-7表达减少且是短期预后不良的危险因素、对短期预后不良具有预测价值。 展开更多
关键词 脑出血 microrna-7 近期预后 危险因素 预测价值
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姜黄素通过调控microRNA-7641及其靶基因p16抑制膀胱癌T24细胞增殖的机制研究 被引量:6
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作者 吴雅莉 鲁琼 +5 位作者 王洋波 徐冉 原海燕 屈健 周艳钢 唐甜甜 《中南药学》 CAS 2018年第5期641-645,共5页
目的确定可能导致膀胱癌的mi RNAs,并研究其在姜黄素抗癌作用中的机制。方法对T24和SV-HUC-1细胞进行了芯片测序和q PCR分析。检测mi R-7641在含姜黄素或不含姜黄素的T24和SVHUC-1细胞株中的潜在致瘤性。并使用蛋白质印迹分析p16是mi R-... 目的确定可能导致膀胱癌的mi RNAs,并研究其在姜黄素抗癌作用中的机制。方法对T24和SV-HUC-1细胞进行了芯片测序和q PCR分析。检测mi R-7641在含姜黄素或不含姜黄素的T24和SVHUC-1细胞株中的潜在致瘤性。并使用蛋白质印迹分析p16是mi R-7641在T24细胞中作用的重要靶基因。结果姜黄素诱导mi R-7641的表达下调及p16的上调,而p16是mi R-7641的转录后水平靶点之一,从而导致膀胱癌细胞凋亡增加。结论研究表明姜黄素可能是治疗无肌肉浸润性膀胱癌的临床治疗的潜在有效药物。 展开更多
关键词 姜黄素 microrna-7641 P16基因 膀胱癌 T24细胞
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中国汉族帕金森病人microRNA-7变异分析(英文)
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作者 张学伟 郭纪锋 +12 位作者 艾三喜 胡雅岑 孙启英 徐倩 吕占云 李凯 董晓丽 沈璐 江泓 潘乾 夏昆 严新翔 唐北沙 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1189-1192,共4页
目的:调查中国大陆帕金森病(Parkinson’s disease,PD)患者microRNA-7基因的变异。方法:对225例汉族PD患者应用DNA测序技术进行microRNA-7基因突变分析。结果:在本组PD患者中未发现microRNA-7变异。结论:MicroRNA-7基因突变不是导致中... 目的:调查中国大陆帕金森病(Parkinson’s disease,PD)患者microRNA-7基因的变异。方法:对225例汉族PD患者应用DNA测序技术进行microRNA-7基因突变分析。结果:在本组PD患者中未发现microRNA-7变异。结论:MicroRNA-7基因突变不是导致中国人群罹患PD的主要因素。 展开更多
关键词 帕金森病 microrna-7基因 基因突变 DNA测序
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MicroRNA-7与肿瘤关系研究进展及在口腔肿瘤中的展望 被引量:2
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作者 郭拴龙 张斌 李莹 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1261-1263,共3页
MicroRNAs是具有调控基因表达功能的非编码小分子单链RNA,长度约为21-25个核苷酸,在癌症以及其他疾病的发生、发展中发挥着重要的作用。最近的研究发现MicroRNA-7在多种肿瘤细胞中表达异常,而将人工合成的MicroRNA-7导入肿瘤细胞可以明... MicroRNAs是具有调控基因表达功能的非编码小分子单链RNA,长度约为21-25个核苷酸,在癌症以及其他疾病的发生、发展中发挥着重要的作用。最近的研究发现MicroRNA-7在多种肿瘤细胞中表达异常,而将人工合成的MicroRNA-7导入肿瘤细胞可以明显影响其细胞增殖、侵袭、转移能力。本文就MicroRNA-7在多种肿瘤的研究进展做一综述,并对其在口腔恶性肿瘤中的应用作一展望。 展开更多
关键词 microrna-7 肿瘤 口腔 治疗
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MicroRNA-7在帕金森病中的作用及研究进展 被引量:1
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作者 何浩 杨文明 +1 位作者 王晓旸 胡建鹏 《安徽医药》 CAS 2018年第4期599-602,共4页
帕金森病(PD)是仅次于阿尔茨海默病的第二大神经退行性疾病。但是其具体致病机制尚未完全明了。并且现今治疗仅能改善症状,并不能阻止病情发展。近些年,人们发现各种MicroRNAs尤其是MicroRNA-7在PD的发生进展和治疗中具有重大意义。因此... 帕金森病(PD)是仅次于阿尔茨海默病的第二大神经退行性疾病。但是其具体致病机制尚未完全明了。并且现今治疗仅能改善症状,并不能阻止病情发展。近些年,人们发现各种MicroRNAs尤其是MicroRNA-7在PD的发生进展和治疗中具有重大意义。因此,详细阐明MicroRNA-7在PD中的作用和意义,可帮助我们更透彻地了解PD的致病机制,为寻求新的治疗方法提供新的思路。 展开更多
关键词 microrna-7 帕金森病 致病机制 治疗方法
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卵巢癌组织中microRNA-7表达水平及其临床意义 被引量:1
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作者 焦丽敏 梁进 +1 位作者 王琼 李纪强 《安徽医药》 CAS 2016年第3期504-507,共4页
目的探讨microRNA-7在卵巢癌组织中的表达水平及其临床意义。方法收集该院确诊的卵巢癌患者42例,每例均行手术切除。同时收集38例良性卵巢上皮囊肿组织作为良性对照组。采用RT-PCR方法分别检测卵巢癌组织、癌旁组织和良性病变组织样本mi... 目的探讨microRNA-7在卵巢癌组织中的表达水平及其临床意义。方法收集该院确诊的卵巢癌患者42例,每例均行手术切除。同时收集38例良性卵巢上皮囊肿组织作为良性对照组。采用RT-PCR方法分别检测卵巢癌组织、癌旁组织和良性病变组织样本microRNA-7的表达,并分析其表达与卵巢癌临床特征的关系。结果卵巢癌组织microRNA-7表达为0.176±0.063,癌旁组织表达为0.314±0.099,良性病变组织表达为0.465±0.123。与癌旁组织和良性病变组织比较,卵巢癌组织中microRNA-7表达显著下降(P均<0.05)。microRNA-7的表达与患者的年龄、病理分型无关,与临床分期和区域淋巴结转移相关(P均<0.05)。单因素分析结果显示,microRNA-7高表达的卵巢癌病人总生存期长于低表达组(P=0.02)。结论microRNA-7在卵巢癌组织中表达下显著调,可能是卵巢癌患者重要的预后指标之一。 展开更多
关键词 卵巢癌 微小RNA microrna-7 RT-PCR
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Role of microRNA-7 in digestive system malignancy 被引量:4
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作者 wan-qun chen ling hu +1 位作者 geng-xin chen hai-xia deng 《World Journal of Gastrointestinal Oncology》 SCIE CAS 2016年第1期121-127,共7页
There are several malignancies of the digestive system(including gastric, pancreatic and colorectal cancers, and hepatocellular carcinoma), which are the most common types of cancer and a major cause of death worldwid... There are several malignancies of the digestive system(including gastric, pancreatic and colorectal cancers, and hepatocellular carcinoma), which are the most common types of cancer and a major cause of death worldwide. MicroRNA(miR)-7 is abundant in the pancreas, playing an important role in pancreatic development and endocrine function. Expression of miR-7 is downregulated in digestive system malignancies compared with normal tissue. Although there are contrasting results for miR-7 expression, almost all research reveals that miR-7 is a tumor suppressor, by targeting various genes in specific pathways. Moreover, miR-7 can target different genes simultaneously in different malignancies of the digestive system. By acting on many cytokines, miR-7 is also involved in many gastrointestinal inflammatory diseases as a significant carcinogenic factor. Consequently, miR-7 might be a biomarker or therapeutic target gene in digestive system malignancies. 展开更多
关键词 microrna-7 DIGESTIVE system MALIGNANCY TUMOR BIOMARKER TARGET gene INFLAMMATION
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MicroRNA-7与肺癌关系的研究进展 被引量:3
13
作者 陈艳艳 廖娇 赵玉霞 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2016年第1期48-52,共5页
MicroRNA-7(miR-7)首先在果蝇(Drosophilamelanogaster)体内被发现,参与果蝇翼、卵子等形成。在人类体内miR-7不但参与细胞增殖、分化等,还参与肿瘤的发生发展,尤其在肺癌中起重要作用。多数研究报道肺癌组织和肺癌细胞株中miR-... MicroRNA-7(miR-7)首先在果蝇(Drosophilamelanogaster)体内被发现,参与果蝇翼、卵子等形成。在人类体内miR-7不但参与细胞增殖、分化等,还参与肿瘤的发生发展,尤其在肺癌中起重要作用。多数研究报道肺癌组织和肺癌细胞株中miR-7呈低表达,低表达组患者预后差,提高miR-7的表达能抑制肿瘤生长。miR-7作为肿瘤抑制因子,负性调控BCL-2、EGFR等的表达,调节肿瘤细胞对放化疗和靶向治疗的敏感性,有望成为肺癌治疗的新靶点。 展开更多
关键词 MICRORNAS miR-7 肺肿瘤
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Construction of a recombinant lentivirus containing human microRNA-7-3 and its inhibitory effects on glioma proliferation 被引量:3
14
作者 Lun Dong Chongxu Han +4 位作者 Hengzhu Zhang Xuewen Gu Jian Li Yongkang Wu Xiaodong Wang 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2012年第27期2144-2150,共7页
In the present study, we constructed a lentivirus, FIV-CMV-GFP-miR-7-3, containing the microRNA-7-3 gene and the green fluorescent protein gene, and used it to transfect human glioma U251 cells. Fluorescence microscop... In the present study, we constructed a lentivirus, FIV-CMV-GFP-miR-7-3, containing the microRNA-7-3 gene and the green fluorescent protein gene, and used it to transfect human glioma U251 cells. Fluorescence microscopy showed that 80% of U251 cells expressed green fluorescence. Real-time reverse transcription PCR showed that microRNA-7-3 RNA expression in U251 cells was significantly increased. Proliferation was slowed in transfected U251 cells, and most cells were in the G1 phase of the cell cycle. In addition, the expression of the serine/threonine protein kinase 2 was decreased. Results suggested that transfection with a lentivirus carrying microRNA-7-3 can effectively suppress epidermal growth factor receptor pathway activity in U251 cells, arrest cell cycle transition from GI phase to S phase and inhibit glioma cell growth. 展开更多
关键词 microrna-7-3 LENTIVIRUS serine/threonine protein kinase 2 GLIOMA PROLIFERATION epidermal growthfactor receptor cell cycle neural regeneration
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过表达microRNA-7通过下调CGG结合蛋白1的表达抑制人肺癌细胞生长 被引量:16
15
作者 胡燕 廖珍媛 +7 位作者 陈超 秦娜琳 郑静 田丹 李永菊 朱顺飞 罗军敏 徐林 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期125-130,共6页
目的探讨过表达microRNA-7(miR-7)对人肺癌细胞体内外生长的作用和可能机制。方法利用真核表达载体pcDNA3.1(-)-pri-miR-7(p-miR-7),体外瞬时转染95D人肺癌细胞,MTT法和克隆形成实验检测95D细胞的增殖变化;免疫荧光技术检测95D细胞Ki-67... 目的探讨过表达microRNA-7(miR-7)对人肺癌细胞体内外生长的作用和可能机制。方法利用真核表达载体pcDNA3.1(-)-pri-miR-7(p-miR-7),体外瞬时转染95D人肺癌细胞,MTT法和克隆形成实验检测95D细胞的增殖变化;免疫荧光技术检测95D细胞Ki-67和CGG结合蛋白(CGGBP1)的表达;建立人肺癌裸鼠肿瘤模型,肿瘤局部注射p-miR-7真核表达载体,测量肿瘤大小并观察小鼠生存时间;实时PCR检测肿瘤组织中miR-7表达水平;免疫组织化学技术检测组织中Ki-67和CGGBP1蛋白的表达。结果过表达miR-7可明显抑制肺癌细胞的体外增殖(P<0.05),Ki-67和CGGBP1的表达显著减少(P<0.05);体内实验结果显示,局部注射p-miR-7组中miR-7表达水平明显增加,同时荷瘤裸鼠的肿瘤生长缓慢,生存时间明显延长(P<0.05)。肿瘤组织中Ki-67和CGGBP1蛋白的表达量均显著减少(P<0.05)。结论过表达miR-7可显著抑制人肺癌细胞的体内外生长,可能与其下调肿瘤生长相关蛋白CGGBP1的表达有关。 展开更多
关键词 肺癌 miR-7 人肺癌95D细胞 细胞生长 CGG结合蛋白1
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microRNA-7对人肝癌细胞MHCC-97H上皮间质转化的影响及作用机制 被引量:3
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作者 张传海 桂阳 +2 位作者 郭凤林 马金良 余继海 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第1期29-34,共6页
目的探讨microRNA-7(miR-7)对肝癌细胞株MHCC-97H上皮-间质转化(EMT)的影响及作用机制。方法将构建的miR-7真核载体单独及分别联合野生型或突变型EGFR 3’-UTR真核载体共转染MHCC-97H细胞,采用Realtime PCR、Western blot检测EMT标识蛋... 目的探讨microRNA-7(miR-7)对肝癌细胞株MHCC-97H上皮-间质转化(EMT)的影响及作用机制。方法将构建的miR-7真核载体单独及分别联合野生型或突变型EGFR 3’-UTR真核载体共转染MHCC-97H细胞,采用Realtime PCR、Western blot检测EMT标识蛋白E-cadherin、β-catenin、N-cadherin和Vimentin的表达;细胞划痕、Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力的变化;双荧光素酶实验分析miR-7对EGFR的调控作用。结果与正常组相比,转染miR-7真核载体组细胞E-cadherin、β-catenin表达均显著升高(P<0.01),N-cadherin、Vimentin表达则明显降低(P<0.01);同时,细胞的侵袭、迁移能力均明显减弱(P<0.01);分别与转染GV272+EGFR 3’-UTR野生型和转染GV272/miR-7+EGFR 3’-UTR突变型相比,转染GV272/miR-7+EGFR 3’-UTR野生型组萤火虫荧光素酶活性显著降低(P<0.01)。结论 miR-7可通过与EGFR 3’-UTR结合而抑制EGFR信号通路,降低MHCC-97H细胞侵袭、迁移能力,进而抑制MHCC-97H细胞EMT。 展开更多
关键词 microrna-7 MHCC-97细胞 上皮间质化转变 EGFR
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microRNA-7对小鼠肠系膜淋巴结αβT淋巴细胞组成的影响 被引量:5
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作者 赵娟娟 朱顺飞 +7 位作者 徐华林 胡燕 郭萌萌 陶弋婧 周涯 秦娜琳 郑静 徐林 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1163-1168,共6页
目的:研究miR-7(MicroRNA-7,miRNA-7)对小鼠肠系膜淋巴结αβT淋巴细胞比例的影响并初步探讨其意义。方法:利用miR-7基因敲减(Knockdown,KD)小鼠模型,观察其肠系膜淋巴结大小、重量和淋巴结细胞总数,以及HE染色的病理学变化;流式细胞术(... 目的:研究miR-7(MicroRNA-7,miRNA-7)对小鼠肠系膜淋巴结αβT淋巴细胞比例的影响并初步探讨其意义。方法:利用miR-7基因敲减(Knockdown,KD)小鼠模型,观察其肠系膜淋巴结大小、重量和淋巴结细胞总数,以及HE染色的病理学变化;流式细胞术(FACS)检测淋巴结中αβT淋巴细胞亚群(CD3+T细胞、CD4+T细胞和CD8+T细胞)以及CD4+T细胞和CD8+T细胞的活化相关分子CD69、CD62L和功能相关因子IFN-γ表达的情况。结果:与野生型(Wild type,WT)小鼠相比,miR-7KD小鼠肠系膜淋巴结大小、重量指数和淋巴结细胞总数均显著增高(P<0.05),且HE染色显示MLNs有病理性改变;肠系膜淋巴结中αβCD3+T细胞比例增加显著,其中以CD4+T细胞比例变化最为明显(P<0.05),而CD19+B淋巴细胞比例明显下调(P<0.05),但各亚群细胞总数均明显增加(P<0.05);最后,CD4+T细胞和CD8+T细胞中的CD62L+细胞的比例均显著下调(P<0.05),而CD69+细胞和IFN-γ+细胞比例均显著上调(P<0.05)。结论:miR-7敲减后可显著影响肠系膜淋巴结中αβT淋巴细胞的组成比例,提示其对肠系膜淋巴结中淋巴细胞的组成和功能具有重要的调控作用。 展开更多
关键词 miR-7基因敲减 肠系膜淋巴结 ΑΒT细胞
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microRNA-7敲减对内毒素诱导小鼠急性肺损伤的影响 被引量:5
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作者 赵娟娟 徐华林 +7 位作者 郭萌萌 陶弋婧 周涯 陈超 秦娜琳 郑静 田丹 徐林 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1257-1261,共5页
目的:观察microRNA-7(miR-7)敲减对内毒素诱导小鼠急性肺损伤的影响并探讨其意义。方法:利用脂多糖(LPS)腹腔注射(10 mg/kg体重)野生型(Wild type,WT)小鼠和miR-7基因敲减(Knockdown,KD)小鼠建立急性肺损伤(Acute lung injury,ALI)模型... 目的:观察microRNA-7(miR-7)敲减对内毒素诱导小鼠急性肺损伤的影响并探讨其意义。方法:利用脂多糖(LPS)腹腔注射(10 mg/kg体重)野生型(Wild type,WT)小鼠和miR-7基因敲减(Knockdown,KD)小鼠建立急性肺损伤(Acute lung injury,ALI)模型;HE染色观察肺组织病理学变化;计算肺泡灌洗液(BAL)中的细胞总数;Real-time PCR检测肺组织炎症相关因子表达变化;流式细胞术(FACS)进一步检测BAL中固有免疫细胞γδT细胞、F4/80巨噬细胞(Macrophages,Mφ)和适应性免疫细胞CD4^+T细胞和CD8^+T细胞的比例和绝对数变化;FACS检测CD4^+T细胞活化相关分子CD62L和CD69的表达水平。结果:相对野生型(Wild type,WT)小鼠,HE染色显示miR-7KD小鼠的肺组织小血管充血和炎性细胞浸润明显减少,病理性损伤明显减轻;Real-time PCR结果显示促炎性细胞因子IL-6的表达水平显著降低(P<0.01),而抗炎性细胞因子IL-4、TGF-β的表达水平明显增加(P<0.05);同时,BAL中总细胞数显著减少(P<0.05);FACS检测进一步显示miR-7KD小鼠的BAL中F4/80^+Mφ细胞的比例及绝对数均明显下调(P<0.05),而γδT细胞的比例上调(P<0.05),但其细胞绝对数无差异(P>0.05);BAL中CD4^+T细胞和CD8^+T细胞的比例及其绝对数均显著降低(P<0.05);最后CD4^+T细胞活化膜分子CD62L的表达水平明显上调(P<0.05),而CD69的表达水平显著下调(P<0.05)。结论:miR-7敲减可减轻ALI模型小鼠的肺部损伤,提示其可能在ALI发生中发挥了重要调控作用。 展开更多
关键词 miR-7基因敲减 急性肺损伤 肺泡灌洗液 免疫细胞
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TTF-1启动子调控microRNA-7真核表达载体的构建 被引量:2
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作者 陈超 赵娟娟 +6 位作者 胡艳 郭萌萌 陶弋婧 周涯 秦娜琳 郑静 徐林 《遵义医学院学报》 2014年第3期263-270,共8页
目的构建甲状腺转录因子(TTF-1)启动子调控miR-7表达的真核表达载体,并观察其表达miR-7对人肺癌细胞体外生长的影响。方法抽提人肺癌95D细胞基因组DNA,PCR分别扩增TTF-1启动子序列(promoter)和miR-7前体序列,纯化产物分别经Kpn I/Mul I... 目的构建甲状腺转录因子(TTF-1)启动子调控miR-7表达的真核表达载体,并观察其表达miR-7对人肺癌细胞体外生长的影响。方法抽提人肺癌95D细胞基因组DNA,PCR分别扩增TTF-1启动子序列(promoter)和miR-7前体序列,纯化产物分别经Kpn I/Mul I双酶切和Mul I/HindⅢ双酶切,克隆入PGL3-basic-载体,构建pGL3-basic-TTF-1-promoter-miR-7真核表达载体(命名为p-T-miR-7);将p-T-miR-7真核载体体外瞬时转染人肺癌95D细胞,Real-time PCR探针法检测细胞中miR-7的表达水平;CCK-8实验和克隆形成实验检测细胞增殖情况;划痕实验检测转染后细胞的体外迁移情况。结果经酶切和测序鉴定成功构建TTF-1启动子调控的miR-7真核表达载体p-T-miR-7;转染后72 h,与对照相比,p-T-miR-7转染组中miR-7的表达水平增加约2.5倍(P<0.05);CCK-8实验和克隆形成实验显示,p-T-miR-7转染组中95D细胞的增殖能力明显下降(P<0.05);划痕实验进一步显示,细胞的体外迁移能力也显著削弱(P<0.05)。结论成功构建TTF-1启动子调控的miR-7真核表达载体,这为后续肺癌基因治疗策略开发提供重要前期实验基础。 展开更多
关键词 肺癌 甲状腺转录因子 微小RNA-7 真核表达
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MicroRNA-7在CD4^+T细胞体外活化中的表达及意义 被引量:1
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作者 徐华林 赵娟娟 +4 位作者 崔盼盼 郭萌萌 陶弋婧 陈超 徐林 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1419-1423,共5页
目的:观察microRNA-7(miR-7)在体外活化CD4^+T细胞中表达的变化,初步探讨其意义。方法:采用免疫磁珠分选法(MACS)获得FVB小鼠脾脏中CD4^+CD62L^+T细胞,经抗CD3/CD28抗体刺激后,Real-time PCR检测miR-7表达水平,FACS检测活化膜分子CD69... 目的:观察microRNA-7(miR-7)在体外活化CD4^+T细胞中表达的变化,初步探讨其意义。方法:采用免疫磁珠分选法(MACS)获得FVB小鼠脾脏中CD4^+CD62L^+T细胞,经抗CD3/CD28抗体刺激后,Real-time PCR检测miR-7表达水平,FACS检测活化膜分子CD69的表达变化;进一步观察刺激不同时间点CD4+T细胞中miR-7表达的变化;观察ERK抑制剂PD98059处理后,CD4^+T细胞活化下miR-7表达的变化,同时CCK8法检测细胞增殖变化,FACS检测CD69和CD62L分子的表达变化;最后,Real-time PCR检测各组细胞中IL-6、IL-10和IFN-γ等细胞因子表达水平变化。结果:与对照组相比,抗CD3/CD28抗体刺激后,CD4^+CD62L^+T细胞中miR-7表达水平显著上调,CD69分子的表达明显增加(P<0.05);与刺激0 h组和24 h组相比,48 h组和72 h组miR-7的表达水平显著上调(P<0.05);PD98059处理组中,CD4^+T细胞的miR-7表达水平显著下降(P<0.05),同时,活化膜分子CD69的表达比例明显降低(P<0.05);最后,细胞表达IL-6、IL-10和IFN-γ的水平均显著减弱(P<0.05)。结论:miR-7在活化的CD4+T细胞中明显上调,并与ERK信号相关,为后续探讨miR-7在CD4^+T细胞功能中的作用提供了前期实验基础。 展开更多
关键词 miR-7 CD4+T细胞 ERK信号途径 细胞因子
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