MicroRNA-145对骨肉瘤细胞增殖及凋亡的影响

背景与目的:MicroRNA145(miRNA145)是microRNA家族中的重要一员,已被证实在多种肿瘤细胞中呈现低表达,并认为miRNA 145作为一种抑癌基因可以影响肿瘤细胞的生长和侵袭能力,但其在骨肉瘤中的作用未见相关报道。该研究旨在探讨miRNA145对骨肉瘤细胞增殖、细胞周期以及凋亡的影响。方法:用脂质体法将miRNA145真核表达质粒瞬时转染入人骨肉瘤细胞(MG63),实验设置空白对照组、空载体转染组和miRNA145质粒转染组3组,转染后荧光显微镜下观察转染效率,实时定量RT-PCR检测各组细胞miRNA145的表达,MTT增殖实验检测各组细胞的增殖情况,流式细胞仪检测各组细胞周期及细胞凋亡率。结果:转染后miRNA145质粒转染组细胞增殖速度明显下降,细胞周期停止在G1期之前,凋亡率增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:miRNA145可以有效地抑制骨肉瘤细胞的增殖,促进细胞凋亡。

上调miRNA145对肝癌细胞的作用及其机制研究

目的:探讨微小RNA145(miRNA145)对肝癌细胞生长、凋亡及侵袭转移的影响。方法:实验将Hep G2细胞随机设置为3组:空白对照组、空质粒组及转染组,转染后real-time PCR法检测验证各组细胞miRNA145及N-钙黏蛋白(N-cadherin)mRNA的表达,并用Western blot检测miRNA145目标蛋白N-钙黏蛋白的表达,MTS增殖实验检测各组细胞的生长情况,流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡率,Transwell法检测各组细胞的侵袭转移能力。结果:Real-time PCR结果证实转染组细胞miRNA145表达比空质粒组和空白对照组细胞明显增多(P<0.05),同时N-钙黏蛋白的表达在转染组细胞中显著减少(P<0.05);经Western blot结果证实,转染组细胞中N-钙黏蛋白表达比空质粒组和空白对照组细胞明显减少(P<0.05);转染组细胞活性在转染后第2天、第3天均明显下降,70.04%的细胞周期停止在G1期,转染后Hep G2细胞凋亡率明显增高,细胞的侵袭转移能力下降,差异均有统计学意义。结论:上调miRNA145表达能有效抑制肝癌细胞的细胞周期进展和侵袭转移,促进细胞凋亡。

MicroRNA-145在NSCLC患者血清中的表达特点及与预后的相关性

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清微小RNA145(MicroRNA-145)的表达变化特点及与患者预后的相关性。方法选取我院2014年1月至2015年1月确诊的90例NSCLC患者(NSCLC组)、90例年龄及性别相匹配的健康对象作为对照组,采用RT-PCR技术检测两组患者血清MicroRNA-145水平,并分析不同分化程度、病理学类型、TNM分期、病灶大小、淋巴结转移、患者中的MicroRNA-145水平差异,采用Cox比例风险回归模型分析影响NSCLC患者预后的影响因素。结果 NSCLC组患者的血清MicroRNA-145水平显著的高于对照组(P<0.05);不同TNM分期、不同分化程度、是否发生淋巴结转移的NSCLC组患者的血清MicroRNA-145水平差异具有统计学意义(P<0.05);经过2年随访,失访9例患者,存活35例患者,2年生存率为38.89%;采用Cox比例风险模型进行分析,发现NSCLC患者TNM分期增高、发生淋巴结转移、血清MicroRNA-145水平升高对患者延长生存时间不利(P<0.05)。结论 NSCLC患者血清MicroRNA-145水平高表达,并且与患者病理学特征、预后情况关系密切。

miR-145对视网膜色素上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究微小RNA miR-145对视网膜色素上皮细胞(RPE)增殖和凋亡的影响。方法:建立hRPE细胞的培养及传代体系,并鉴定其细胞迁移能力,构建miR-145慢病毒载体后转染hRPE细胞,MTT检测慢病毒转染RPE细胞后细胞增殖状态细胞,Transwell法检测细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞周期及凋亡率。结果:培养成功的hRPE细胞的迁移能力转移能力强,能继续后续慢病毒感染后实验。miR145慢病毒载体转染hRPE细胞后,细胞的增殖减慢,RPE细胞周期G_1期被抑制,细胞凋亡率上升。结论:miR145能减缓视网膜色素上皮细胞增殖,并增加其凋亡率,对由于RPE细胞增殖引起的疾病如增殖性玻璃体视网膜病变等有一定治疗前景。