微流控芯片用于AFP快速检测的研究

目的建立一种可以用于免疫分析的微流控芯片系统。方法采用激光直接加工法制备微流控芯片，建立由流体拉制系统、免疫反应系统和信号处理系统构成的芯片系统，用于甲胎蛋白的测定。结果芯片系统可以在20min内完成AFP的分析，所需要的标本量和试荆量为5μl，线性范围为1-800ng／ml，批内CV平均为4．8％，批间CV平均为7．0％，回收率为96．3％。结论微流控芯片系统是一种快速、耗费小、可重复使用的AFP测定方法。

农药广谱特异性抗体制备技术研究进展

基于抗原-抗体特异性结合反应的农药免疫学检测技术的发展已经日趋成熟,能够帮助实现农药多残留免疫检测的广谱特异性抗体制备技术成为研究热点之一。本文介绍了农药广谱特异性抗体的原理及其常用的3种制备途径,包括选择共性结构半抗原制备抗体,独特型抗体和重组抗体。并对有机磷、拟除虫菊酯、氨基甲酸酯三大类农药的广谱特异性抗体制备及免疫多残留分析技术的研究现状作一综述。

基于超顺磁珠的微流控免疫分析系统的设计

介绍采用激光直接加工法制备微流控芯片,建立基于超顺磁珠的化学发光微流控免疫分析系统,用于甲胎蛋白的测定。芯片系统可以在20min内完成AFP的分析,所需要的标本量和试剂量为5μl,线性范围在1～800ng/ml。

磁微球标记物载体在高灵敏电化学发光免疫检测中的应用

报道了一种基于磁性微球作为发光标记物载体的高灵敏相思子毒素电化学发光免疫检测方法。首先在酶标板上吸附固定相思子毒素多抗,与相思子毒素作用后再与生物素化的单抗结合,形成双抗体夹心免疫复合物,然后通过生物素-链霉亲和素相互作用连接三联吡啶钌标记的亲和素包被磁性微球形成磁性微球免疫复合物,将复合物从酶标板上解离后进行电化学发光检测。利用此方法检测相思子毒素,浓度在2～200ng/L范围内与电化学发光强度呈良好的对数线性关系,拟合方程为lgY=1.295lgX＋0.201（R=0.995,n=7,p〈0.0001）,检出限达2ng/L。方法特异性高、重现性好,可用于痕量毒素的高灵敏检测,在临床诊断、环境监测、生物防护等领域有较好的应用前景。

总T_3快速检测微流控芯片的制作及应用研究

目的 建立一种可以用于免疫分析的微流控芯片系统。方法 采用激光直接加工法制备微流控芯片，建立由流体控制系统、免疫反应系统和信号处理系统构成的芯片系统，用免疫竞争法测定总T3。结果 芯片系统可以在20min内完成总T3的分析，所需要的标本量和试剂量为5μl。线性范围为1～10ng／ml，批内CV平均为7．2％。批间CV平均为10．7％，回收率为108．5％。结论 微流控芯片系统用于检测总T3具有快速、灵敏、稳定、可重复使用的特点。

微流控芯片用于甲胎蛋白化学发光免疫分析的研究

目的：建立一种可用于免疫分析的微流控芯片系统。方法：采用激光直接加工法制备微流控芯片，建立基于超顺磁珠的化学发光微流控免疫分析系统，用于甲胎蛋白（AFP）的测定。结果：芯片系统可在20min内完成AFP的分析，所需要的标本量和试剂量为5μl，线性范围为1～800ng／ml，批内变异系数（CV）平均为6，3％，批间CV平均为7．8％，回收率为94．3％。结论：微流控芯片系统是一种快速、耗费小、可重复使用的AFP测定方法。

微流控免疫芯片快速检测法的建立及其检测TSH和T_4的效果

目的 在已制备的微流控芯片系统上建立基于顺磁微球的免疫检测方法，并将此方法用于检测促甲状腺激素（TSH）和甲状腺素（T4）。方法 采用数字激光刻蚀技术制备微流控芯片，以luminol-H2O2为发光体系，用双抗夹心法测定TSH，用免疫竞争法测定T4。结果 该检测系统可以在25min内完成检测，所需的标本和抗体试剂量为10山，TSH检测范围为0～50μIU／ml，批内CV平均为4．9％，批间CV平均为4．9％，平均回收率为93．74％；T4检测范围为9．375～300ng／ml，批内CV平均为4．9％，批间CV平均为4．7％，平均回收率为91．27％。结论 本方法检测TSH和T4具有操作简便、节约时间、节省试剂、稳定性好、准确度高的优点。

TSH的快速免疫检测在微流控芯片系统中的应用

目的建立一种可将免疫反应原理与化学发光技术相结合的微流控芯片系统。方法采用激光直接加工法制备微流控芯片,用双抗夹心法测定TSH。结果芯片系统可以在25min内完成TSH的检测流程,所需的标本和抗体试剂量为10μl,线性范围为0-50μIU/ml,批内CV平均为4.7%,批间CV平均为4.6%,平均回收率为95.3%。结论用于检测TSH的微流控芯片系统灵敏、快速、操作简便、可重复使用。

微珠芯片免疫法测定食品中氯霉素残留

采用微珠芯片免疫分析法快速定量检测食品中的氯霉素残留。玻璃微珠经过表面化学修饰后形成氨基化表面，在碳二亚胺（EDC）催化作用下固定琥珀酸氯霉素，随后加入氯霉素单克隆抗体和氯霉素标准品或待测样品的混合物，待抗体抗原完全反应后加入荧光标记二抗示踪。绘制氯霉素浓度与荧光信号强度的标准曲线，然后根据标准曲线对待测样品中氯霉索进行定量分析。方法检测限为0．01μg·L^-1；在0．05μg·L^-1及0．2μg·L^-1两个添加水平，加标回收率分别为92％～110％和92．5～108．5％；重复性实验CV分别为6．33％和5．99％；重现性实验CV分别为10．11％和9．12％。该方法具有良好的灵敏度、准确度和精密度，符合快速、高通量检测氯霉素残留的要求，并为实现介观流控免疫分析提供了基础。

Improvement of Immunoassay Detection Sensitivity by Using Well-Defined Raspberry-Like Magnetic Microbeads as Carriers

Well-defined raspberry-like magnetic microbeads （RMMBs） as immunoassay solid carriers were pre- pared by chemicM covalent binding between Fe304 magnetic microspheres and SiO2 nanoparticles. These RMMBs were not as agglomerative as nano-sized magnetie particles （〈 200 nm）, which was an advangtage for high efficient magnetic separation. When compared to Fe304@SiO2 core-shell magnetic microbeads （CMMBs） with smooth surface, RMMBs exhibited stronger capacity to bind biomolecules. Limit of blank （LOB） and limit of detection （LoD） of HBsAg detection using RMMBs as carriers via chemiluminiscence immunoassay （CLIA） were 0.472 and 1.022 μg/L, respectively, showing a notable improvement compared with CMMBs whose LoB and LoD were 1.017 and 1.988 μg/L, respectively. All these indicated a great potential of RMMBs in immunoassay application.

微粒子免疫检测技术在寄生虫学研究及诊断中的应用

医学实验方法的发展和应用是医学研究和疾病快速诊断的基础。微粒子免疫检测技术(MIA)主要用于定量检测特异性蛋白质,如细胞因子、病原体抗原以及核酸等大分子物质。该技术应用微粒子作为固相支持,能够对一个样品中多达100种不同的分析物进行同步检测,具有极高的灵敏度、特异性、稳定性,以及快速、多重的检测能力。近年来,作为一种检测手段,MIA越来越多地应用于寄生虫学的研究与诊断性检测中。本文就MIA的历史发展、优缺点、在寄生虫学研究及诊断中的应用和前景等做一综述。

磁珠载体-电化学免疫分析研究进展

磁珠不仅拥有巨大的比表面积和高效的分散能力,而且在其表面可以形成牢固的免疫复合物;同时利用磁珠的超顺磁性可以快速的将其分离,样品前处理简单,不需要预浓缩、净化等复杂工序就可以实现对目标物的快速检测。此外,电化学分析技术具有超高的灵敏度,因此将磁珠与电化学免疫分析技术相结合,利用两者的优点则给人们提供了一种新的检测思路。目前,该领域研究活跃,并取得了重要研究进展,开发出了灵敏度高、检测速度快、简便易用的微型电化学免疫检测系统,可以用于食品检测、环境评估和临床诊断等领域。本文介绍了以磁珠为固相载体的电化学免疫分析技术的最新研究进展,特别是从磁电极免疫分析、基于旋转圆盘电极的免疫分析、酶标记免疫磁珠分析和纳米粒子标记免疫磁珠分析四个方面进行具体论述,并对该领域的发展前景做了展望。

间接免疫荧光法、免疫印迹法和多重微珠免疫法检测抗核抗体的比较和评价

目的通过比较间接免疫荧光法、免疫印迹法和多重微珠免疫法三种方法检测抗核抗体的一致性,同时对免疫印迹法和多重微珠免疫法在检测抗核抗体谱的比较,评估各种方法的优势及其局限,为临床实践提供依据。方法收集578例同时进行三种方法检测的疑似自身免疫性疾病患者的血清样本检测结果,使用Kappa系数分析比较几种检测方法的一致性。结果在578例样本中,使用间接免疫荧光法检测抗核抗体阳性者280例(48.4%);使用免疫印迹法阳性者225例(38.9%);使用多重微珠免疫法阳性者252例(43.6%)。三种方法中任意两种方法检测抗核抗体的一致性均在85%以上,Kappa值均高于0.7,其中,间接免疫荧光法和免疫印迹法一致性最强,Kappa值为0.808(95%CI:0.761~0.855)。使用免疫印迹法与多重微珠免疫法检测9种抗核抗体谱,一致性均大于90%,而Kappa值则在0.535至0.839之间,其中一致性最强的抗体类型为抗SSA抗体和抗JO1抗体,分别为0.839和0.832。结论以上三种方法检测抗核抗体的一致性较高,其中间接免疫荧光法的阳性率最高,间接免疫荧光法和免疫印迹法一致性最强。免疫印迹法与多重微珠免疫法检测抗核抗体谱一致性较高。应联合使用三种方法,提高自身免疫性疾病的诊断率,避免漏检。