血清miR-26b、miR-320b水平与GDM胰岛素抵抗相关性

目的:分析血清微小RNA-26b(miR-26b)、miR-320b水平与妊娠期糖尿病(GDM)患者发生胰岛素抵抗(IR)的相关性。方法:回顾性随机选取本院2020年5月-2023年5月收治的GDM孕妇85例纳入GDM组,同期产前检查健康孕妇90例为对照组。检测两组孕妇血清miR-26b、miR-320b水平,收集两组孕妇临床相关资料并进行比较。用Pearson法分析miR-26b、miR-320b水平与GDM孕妇IR的相关性。根据研究组孕妇是否发生IR将其分成有IR组和无IR组,单因素和多因素分析GDM孕妇发生IR的影响因素。结果:两组年龄、孕周、生产史、收缩压、舒张压比较无差异(P>0.05);GDM组孕前体质指数(BMI)高于对照组,miR-26b、miR-320b水平均低于对照组,胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)高于对照组(均P<0.05)。GDM组孕妇miR-26b、miR-320b水平与HOMA-IR水平呈负相关(P<0.05),孕妇IR发生率为61.7%。IR孕妇孕前BMI、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)水平均高于无IR孕妇,miR-26b、miR-320b均低于无IR孕妇(均P<0.05)。经logistic回归分析显示,miR-26b(OR=0.305)、miR-320b(OR=0.426)是GDM孕妇发生IR的独立保护因素(均P<0.05)。ROC曲线分析显示,miR-26b、miR-320b及二者联合预测GDM孕妇发生IR的敏感度分别为73.9%、69.6%、87.0%,特异性分别为66.2%、71.6%、87.8%,曲线下面积分别为0.778、0.798、0.918。结论:miR-26b、miR-320b在GDM孕妇中异常低表达,且与HOMA-IR呈负相关;miR-26b、miR-320b升高是GDM孕妇发生IR的保护因素,二者联合检测可有效预测GDM孕妇发生IR情况。

MicroRNA-320b抑制PI3K-AKT信号通路调控胃癌细胞系MGC-803和MKN45的增殖作用

目的:探究microRNA-320b(miR-320b)在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞系增殖和凋亡的影响。方法:使用Real-time PCR法检测miR-320b在66例胃癌患者癌组织及其癌旁组织中的表达,分析胃癌患者癌组织miR-320b表达与临床特征的关系。检测胃癌细胞系MGC-803,MKN45和正常胃上皮细胞GES-1中miR-320b的表达。采用miR-320b mimics和miR-320b inhibitor转染胃癌细胞系MGC-803和MKN45,分别使用CCK-8实验和流式细胞仪检测miR-320b对细胞增殖和凋亡的影响,运用蛋白免疫印迹法检测miR-320b干扰和过表达对PI3K-AKT信号通路激活的影响。结果:胃癌组织中miR-320b表达显著低于癌旁组织(P<0.001),胃癌细胞系MGC-803和MKN45中miR-320b表达显著低于胃上皮细胞系GES-1(P<0.01)。与转染miR-NC比较,转染miR-320b mimics的MGC-803和MKN45细胞增殖显著降低,细胞凋亡增加,而转染miR-320b inhibitor的MGC-803和MKN45细胞增殖显著增加,细胞凋亡减少。与转染miR-NC比较,转染miR-320b mimics的MGC-803和MKN45细胞p-PI3K和p-AKT蛋白水平显著降低,而转染miR-320b inhibitor的MGC-803和MKN45细胞p-PI3K和p-AKT蛋白水平显著增加。结论:miR-320b可能作为抑癌基因在胃癌中发挥作用,并对胃癌细胞的增殖和凋亡具有显著影响。

精神分裂症患者血清非编码小分子RNA-320a及RNA-320b表达的研究

目的:探讨精神分裂症患者血清非编码小分子RNA(miR)-320a、320b的表达。方法:应用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应技术(RT-PCR)检测30例首次发病的精神分裂症患者(发病组)、30例治疗后临床缓解的精神分裂症者(缓解组)和30名正常对照者(健康对照组)血清miR-320a及miR-320b表达水平。结果:发病组和缓解组血清miR-320a和miR-320b表达明显低于健康对照组(P均<0.001),且发病组明显低于临床治愈组(P均<0.05)。结论:精神分裂症患者血清miR-320b和miR-320a表达低,并与病情有关。

miRNA前体-320b-2启动子区单核苷酸多态性与冠心病相关性及对血浆microRNA-320b表达水平的影响

目的探讨中国汉族人群miRNA前体-320b-2（pre-miR-320b-2）启动子区单核苷酸多态性（rs10916581）对冠心病易感性的关联性及对血浆microRNA-320b（miR-320b）表达水平的影响，并探索可能影响血浆miR-320b表达水平的因素。方法采用病例一对照研究方法，于2004年5月至2009年10月应用单纯抽样法随机法选择人住武汉同济医院、协和医院和武钢总医院3个医院冠心病患者1507例和与之年龄、性别频率匹配的1379名健康对照为研究对象，对研究对象的rs10916581位点进行基因分型。从上述人群中采用单纯随机法选择无急性感染疾病的174例冠心病患者，并选择匹配的无急性感染疾病无糖尿病的181名健康对照，应用RT—PCR法检测其血浆miR-320b表达水平。采用多元非条件logistic回归分析rs10916581与冠心病易感性的关联，采用广义线性回归分析各因素与血浆miR-320b表达水平的关联。结果在单因素logistic回归模型中，rs10916581与冠心病易感性的关联性无统计学意义（P值均〉0．05）。在校正年龄、性别、BMI、吸烟状态、糖尿病、高血压、TC／HDL—C比值、总TG后，rs10916581与冠心病易感性的关联性仍无统计学意义[与CC基因型相比，CT、TT、CT＋TT基因型患冠心病的OR（95％CI）值分别为0．94（0．76～1．15）、0．99（0．74～1．33）和0．95（0．78—1．16）]。年龄、性别、吸烟状态、BMI、高血压、糖尿病、冠心病家族史和rs10916581在冠心病的发生中无交互作用（P交互值均〉0．05）。在对照、病例和总人群中，rs10916581均不影响血浆miR-320b的表达水平[B（95％CI）值分别为：-0．028（-0．495～0．440）、0．250（-0．226—0．727）、0．134（-0．218—0．486），P值均〉0．05]。但在病例组中，血浆miR-320b表达水平与BMI负相关[B（95％CI）值为-0．140（-0．261--0．020），P=0．022]，与TC／HDL-C值正相关[8（95％CI）值为0．620（0．261—0．979），P=0．001]，总人群中血浆miR-320b表达水平与TC／HDL—C值正相关[13（95％CI）值为0．108（0．027～0．190），P=0．009]，与糖尿病、高血压患病状态则呈负相关[β（95％CI）值分别为-1．025（-1．696--0．354）、-0．594（-1．138～-0．049），P值均〈0．05]。结论pre-miR-320b-2启动子区rs10916581与冠心病易感性和血浆miR-320b表达水平无关联，冠心病患者的BMI、TC／HDL-C值、糖尿病和高血压患病状态可能影响血浆miR-320b的表达水平。

miR-320b靶基因预测与鉴定

目的寻找miR-320b靶基因,探讨其参与T2DM发生发展的分子机制。方法4种在线软件Target Scan、MIRDB、DIANA TOOLS和miRmap预测miR-320b靶基因。采用在线软件VENNY2.1选取4种预测结果交集。在线数据库String查询靶基因编码蛋白质间的相关性,筛选其候选靶基因。采取全基因合成方式合成野生型及突变型靶基因双荧光素酶重组Psicheck-2质粒载体,Sanger测序鉴定重组质粒是否构建成功。选取对数生长期293T细胞分为6组:野生型质粒+miRNA阴性对照组(Psicheck2-PTEN-WT+NC)和野生型质粒+miR-320b mimic组(Psicheck2-PTEN-WT+mimic);突变型质粒+miRNA阴性对照组(Psicheck2-PTEN-Mut+NC)和突变型质粒+miR-320b mimic组(Psicheck2-PTEN-Mut+mimic);空质粒载体+miRNA阴性对照组(Psicheck2-NC+NC)和空质粒载体+miR-320b mimic组(Psicheck2-NC+mimic)。各组进行相应质粒和miRNAs共转染,检测双荧光素酶活性。结果4种在线软件Target Scan、MIRDB、DIANA TOOLS和miRmap预测miR-320b靶基因数分别为847、1045、806和6208,VENNY2.1取交集后得到66个共同靶基因。在线数据库String显示,66个靶蛋白之间的相关性主要集中在以人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)为核心的蛋白。双荧光素酶报告基因实验显示,Psicheck2-PTEN-WT+miR320b组荧光素酶活性比值低于Psicheck2-PTEN-WT+NC组(P<0.05)。结论miR-320b作用于靶基因PTEN的3’UTR,为探讨miR-320b参与T2DM发生发展提供依据。