Antidermatophytic Activity of Essential Oils against Locally Isolated <i>Microsporum canis</i>—Gaza Strip

There is a need for new antimicrobial drugs due to the continuous development of resistance. Natural antimicrobials are of utmost importance due to safety issue and availability. The antifungal activity of four essential oils (Mentha piperta, Thymus vulgaris, Cymbopogon citratus, and Oreganum majoranum oils) against locally isolated Microsporum canis was determined by disc diffusion method and minimum inhibitory concentration was determined using broth dilution method. Mentha piperta oil showed the highest antifungal activity among tested oils in this study. The total inhibition attached when 0.046% was used with M. piperta, the total inhibition obtained with the 0.133% of C. citratus oil, which is accounted as the second essential oils, also T. vulgaris and O. majoranum oils achieved reductions at 0.133%. The present work has revealed that all oils have been used in low concentrations and produced promising results in comparison to the positive control (Clotrimazole).

中国南京及周边地区301例头癣临床流行病学特征及病原谱研究

目的分析南京及周边地区头癣患者的流行病学特征及病原谱。方法回顾性分析2013年1月至2022年12月期间301例头癣患者的临床及真菌检测等资料,真菌鉴定采用形态学、时间飞行质谱及分子生物学方法。结果301例患者中,儿童及未成年头癣286例(95%),其中以4~7岁学龄前儿童的分布最多(46.5%),性别分布以男童居多(56.3%)。成人头癣仅15例(5%),成人头癣性别分布以女性居多(66.7%)。所有头癣患者的真菌鉴定结果统计显示,犬小孢子菌(164例,54.5%)、须癣毛癣菌(57例,18.9%)和紫色毛癣菌(44例,14.6%)是最常见的菌种,须癣毛癣菌和犬小孢子菌各年龄段之间病原菌种检出率差异具有统计学意义(P<0.01),石膏样小孢子菌、断发毛癣菌、紫色毛癣菌和红色毛癣菌在不同年龄组检出率差异无统计学意义(P>0.05)。结论4~7岁的男童是最常见的头癣患病群体,过去10年犬小孢子菌已取代须癣毛癣菌成为南京及周边地区头癣感染的优势致病菌,这些结果为头癣的治疗和预防提供了有用的信息。

拮抗犬小孢子菌芽胞杆菌的筛选和鉴定

为了寻找能够拮抗犬小孢子菌的细菌,本试验从健康犬、猫和貉粪便中筛选了抗犬小孢子菌的芽胞杆菌,经培养、染色特性和16S rDNA序列分析对其中抑菌谱最广的芽胞杆菌进行鉴定,采用平板对峙法测定所筛选芽胞杆菌对犬小孢子菌的抑制效果,用碘化丙啶对芽胞杆菌发酵上清处理的犬小孢子菌菌丝进行染色以初步分析抑菌机理。结果显示,共筛选到12株拮抗犬小孢子菌的芽胞杆菌,其中F-15株对犬小孢子菌的抑制率为64.28%,也可抑制金黄色葡萄球菌和沙门菌;F-15株的16S rDNA序列与HSB1株贝莱斯芽胞杆菌的16S rDNA序列相似度为100%;F-15株发酵上清处理的犬小孢子菌菌丝染色后,在荧光显微镜下可见红色荧光,表明其损伤了犬小孢子菌菌丝的细胞膜。本试验为贝莱斯芽胞杆菌及其代谢产物在防控犬小孢子菌等真菌危害中的应用提供了参考。

犬小孢子菌引起的不典型体癣2例

病例1,男,36岁,颈胸部出现多个淡红色丘疹,伴瘙痒5 d,左前臂可见多处抓痕。病例2,男,6岁,2周前右下眼睑处出现1粒以毛囊为中心的红色浮肿性丘疹,逐渐增大,伴触痛和瘙痒。2例患者根据真菌荧光镜检菌丝阳性诊断为体癣,真菌培养鉴定及菌株质谱分析(mass spectrometry,MS)结果显示致病菌均为犬小孢子菌。给予特比萘芬或联苯苄唑外用2周后痊愈,未留瘢痕。

犬和猫皮肤癣菌三重荧光定量PCR检测方法的建立及应用

建立鉴别犬小孢子菌(Microsporum canis,MC)、须癣毛癣菌(Trichophyton mentagrophytes,TM)和秕糠马拉色菌(Malassezia furfur,MF)的三重荧光PCR检测方法,根据MC、TM和MF 3种真菌的ITS基因保守序列设计引物和探针,建立三重荧光PCR检测方法。所建立的三重荧光PCR方法仅对MC、TM和MF出现阳性扩增,与大肠埃希氏菌、产色葡萄球菌和铜绿假单胞菌等犬、猫皮肤病常见病原无交叉反应,对MC、TM和MF的最低检出限分别为1.36×10^(1)、1.35×10^(1)、1.33×10^(1)拷贝;组内和组间变异系数均小于2%,重复性好。应用建立三重荧光PCR方法对88份犬、猫临床样品进行检测,结果检出1份MC阳性、21份TM阳性、20份MF阳性,检测结果与单一荧光PCR方法一致。该方法可对MC、TM和MF同时快速检测,可用于犬、猫真菌性皮肤病的快速诊断。

两种真菌混合感染引起的幼儿头癣

报告1例两种真菌混合感染引起的幼儿头癣。患儿女,3岁。脱发斑伴瘙痒1余年,痒痛加重2个月。皮肤科检查:脱发斑周围头发松动,部分有小脓疱。取松动病发行真菌检查镜下可见发内孢子;脓疱处病发镜下可见发外少量菌丝,发内外大量孢子。真菌培养结果示两种不同形态的菌落生长,核糖体r DNA的内转录间隔区(ITS)分子测序结果分别鉴定为紫色毛癣菌与犬小孢子菌。诊断:幼儿黑点癣;脓癣。治疗:予外用2%咪康唑乳膏及特比萘芬凝胶,连续规律治疗3个月后患儿症状明显改善。随访2年,皮损痊愈未复发。

不同地域犬小孢子菌转录间隔区遗传特性分析

为探究不同国家地区犬小孢子菌遗传特点及系统进化关系,对7个不同国家地区11条犬小孢子菌“ITS1-5.8S-ITS2”基因序列进行同源比对,单倍型分析及系统进化分析。结果显示,来自7个不同国家的11条犬小孢子菌有5个多态性位点,分别为86、87、89、487、650,单倍型(h)分析将其分为3个单倍型(h),其中h1和h3各含有1条基因序列,剩余序列均属于h2。同源性分析发现,11条犬小孢子菌同源性为99.75%。系统进化结果显示,中国、埃及和伊拉克3个地区的犬小孢子菌亲缘关系较近,新疆地区的犬小孢子菌呈现单独分支,表明其与其他地区的犬小孢子菌亲缘关系较远。该研究7个不同国家地区的犬小孢子菌遗传特点和系统进化进行分析,旨在为后续的相关研究提供理论参考。

20例儿童脓癣临床特征分析

目的探讨分析儿童脓癣的临床特征,以提高临床医师对儿童脓癣的认识。方法回顾性分析2017—2022年我院确诊的20例儿童脓癣患儿的临床资料、治疗和预后。结果20例脓癣中,单发脓肿型17例,多发毛囊炎型3例。19例饲养过猫、犬或兔子,1例有足癣接触史。经口服盐酸特比萘芬片联合口服糖皮质激素和抗生素再辅以外用药物治疗,所有患儿在6~12周内临床治愈。1例有胃部不适,余未见不良反应。3例伴有癣菌疹。结论儿童脓癣临床表现有时不典型,容易误诊。真菌荧光染色直接镜检阳性率高。脓癣培养的病原真菌以犬小孢子菌最常见,其次为须癣毛癣菌。盐酸特比萘芬片治疗脓癣预后较好,安全有效。

盐酸小檗碱联合抗真菌药物对犬小孢子菌体外抗菌活性的研究

目的:比较盐酸小檗碱联合3种常用抗真菌药物伊曲康唑、特比萘芬和灰黄霉素对犬小孢子菌体外抗菌活性。方法:实验参照美国临床实验室标准化研究所(CLSI)颁布的M38-A2方案和相关文献对临床分离的30株犬小孢子菌进行体外药敏试验。其中盐酸小檗碱的最小抑菌浓度(MIC)值定义为与生长对照相比,肉眼观察出现100%生长抑制的最低药物浓度。采用分级抑制浓度指数(FICI)评定两药联合效果。FICI≤0.5,两药为协同作用,FICI>4,两药为拮抗作用,0.5<FICI≤4,两药为无关作用。结果:盐酸小檗碱和不同浓度灰黄霉素联合,以0.5 n/gL灰黄霉素和盐酸小檗碱联合FICI值≤0.5所占比例最高,协同作用最强,P<0.05,差异有统计学意义。盐酸小檗碱和不同浓度伊曲康唑联合,以0.125 ng/L和0.250 ng/L伊曲康唑和盐酸小檗碱联合,FICI≤0.5所占比例最高,P<0.05,差异有统计学意义。盐酸小檗碱和不同浓度特比萘芬联合,以0.04 ng/L特比萘芬和盐酸小檗碱联合,FICI≤0.5所占比例最高,但P>0.05,差异无统计学意义。盐酸小檗碱分别与灰黄霉素、伊曲康唑、特比萘芬联合FICI值≤0.5所占比例分别为25.00%、40.38%和18.93%,3种联合方案以盐酸小檗碱和伊曲康唑联合协同作用最强,P<0.05,差异有统计学意义。结论:盐酸小檗碱联合应用灰黄霉素、特比萘芬、伊曲康唑在体外均有不同程度协同抗犬小孢子菌活性作用,以盐酸小檗碱联合伊曲康唑协同作用最强。

吉林省15年浅部真菌病菌种分析

目的:了解15年1986年～2001年吉林省浅部真菌病的致病菌及菌种变迁情况,指导临床预防治疗。方法:用沙堡琼脂培养基分离培养15年吉林省浅部真菌病的致病菌,并动态分析各年代菌种分离结果。结果:共分离出8种2763株致病菌,其中红色毛癣菌居首位,须癣毛癣菌居第2位,犬小孢子菌居第3位。在头癣病原菌中,犬小孢子菌由80年代的84.3%逐渐减少,至90年代后期仅占9.6%。而红色毛癣菌则逐年增高。在其他各病种中,红色毛癣菌及絮状表皮癣菌逐年增高,犬小孢子菌则逐年减少。结论:15年吉林省浅部真菌病致病菌种有明显变迁,尤其犬小孢子菌随年代明显减少为显著特征。

15例人畜共患体癣的临床分析

目的通过对生活在同一家庭患有体癣的患者、家庭成员和所养宠物进行观察和分析,探讨人畜共患癣病的常见致病菌种以及治疗方案。方法收集2005年3月～2009年1月就诊于我院因接触宠物而致病的体癣患者,对其宠物的带菌情况进行调查,确诊后给予外用特比萘芬乳膏或联苯苄唑凝胶,未愈者给予口服伊曲康唑治疗。结果共收集15例患者,真菌培养结果显示8例为石膏样小孢子菌,4例为须癣毛癣菌,3例为犬小孢子菌。患者皮损真菌培养结果和所养宠物皮损真菌培养结果一致。按上述方法对患者及其宠物进行治疗,所有患者和10只(3只被丢弃)宠物全部治愈。结论 15例人畜共患体癣中,石膏样小孢子菌感染所致的比例最高,其次是须癣毛癣菌和犬小孢子菌,外用特比萘芬乳膏或联苯苄唑凝胶以及口服伊曲康唑胶囊可以有效治疗此类人畜共患皮肤癣菌病。

犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌多重PCR检测方法的建立及初步应用

宠物浅表皮肤真菌病主要由犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌感染引起。本研究根据3种真菌基因内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)区域的序列差异设计4条引物,通过优化多重PCR反应条件,建立了一种可同时快速检测这3种真菌的多重PCR,同时对其特异性、灵敏性、重复性进行分析。结果显示,建立的多重PCR方法对犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌基因组DNA均可扩增出特异性预期片段,条带大小分别为286、596、188 bp;最低检测限(灵敏性)分别为12.6、8.8、13.6pg/μL;被检测的6份人工模拟样品扩增结果准确。应用该多重PCR方法检测27份人临床皮屑样品和43份宠物犬、猫毛发样品,结果显示阳性检出率分别为74.07%(20/27)和83.72%(36/43);采用常规真菌分离培养法从阳性样品中获得10株致病性真菌,分离率为17.86%(10/56);两种检测方法的种属鉴定结果表明多重PCR法优于常规方法。本研究建立的多重PCR检测方法简便、特异、灵敏,可同时对宠物浅表真菌病原作出快速诊断与鉴别。

利用抑制消减杂交初步构建犬小孢子菌在不同诱导底物表达的差异基因文库

目的比较犬小孢子菌在儿童与成人头皮组织、儿童头皮组织与儿童光滑皮肤组织为诱导底物表达的差异基因,探讨犬小孢子菌蛋白酶在头癣中的发病机制。方法将犬小孢子菌菌株分别接种于含儿童光滑皮肤组织(driver1)、儿童头皮组织(tester)和成人头皮组织(driver2)三种底物诱导培养基中培养,经抑制消减杂交技术(SSH)分别构建在tester与driver1,tester与driver2培养基中培养的犬小孢子菌菌株正反向差异基因文库,菌液PCR筛选鉴定,对阳性克隆进行测序分析。结果在tester与driver1的正向差异基因文库中初步筛选出1个差异表达基因与编码红色毛癣菌线粒体细胞色素b和NADH1-5具有高度同源性,另15个差异表达基因在真菌界均未知。结论应用SSH技术成功构建了不同底物诱导培养基犬小孢子菌表达的差异基因文库;这个与编码红色毛癣菌线粒体细胞色素b和NADH1-5具有高度同源性的差异表达基因,可能在犬小孢子菌所致头癣中起一定作用,进一步研究该基因的功能对研究头癣的发病机制具有重要意义。

犬小孢子菌毛发穿孔试验及扫描电镜观察

目的 光镜和电镜下观察犬小孢子菌对毛发破坏的程度 ,比较犬小孢子菌头癣株和体癣株对不同年龄组毛发感染时间的差异。方法 临床采集不同年龄组的健康人毛发 ,分别进行头癣株和体癣株的毛发穿孔试验及扫描电镜观察。结果 犬小孢子菌头癣株和体癣株均可致毛发破坏 ;在各个年龄组中 ,头癣株导致毛发感染的时间明显短于体癣株 (P <0 .0 1) ;无论是头癣株还是体癣株 ,感染毛发的感染时间均随着年龄的增长而延长 (P <0 .0 1)。结论 犬小孢子菌头癣株较体癣株对毛发的破坏早且严重 ;年龄越小 ,毛发越易受破坏。

1960～2015年湖北及周边地区头癣病原菌变化情况分析

目的了解1960~2015年间湖北及周边地区头癣病例的病原菌变化情况。方法归类、统计1960~2015年间我院皮肤性病科真菌室分离、鉴定来自头癣病例的病原真菌种类和数量。鉴定方法包括形态学、生理及生化实验方法。结果本地区20世纪60年代头癣高发,病原菌以许兰毛癣菌(41.9%)和紫色毛癣菌(31.0%)为主。70年代病例数锐减。90年代,犬小孢子菌比例达高峰(36.9%)后下降,目前罕见。近5a紫色毛癣菌已取代许兰毛癣菌,成为本地区主要病原菌(63.0%)。许兰毛癣菌、红色毛癣菌多见于成人,而紫色毛癣菌、犬小孢子菌、趾(指)间毛癣菌和铁锈色小孢子菌均更多见于儿童。成年患者中女性所占比例(64.6%)显著高于儿童患者中女性比例(50.6%)(除许兰毛癣菌外)(P<0.05)。结论本地区头癣病原菌种类不断变迁,目前优势菌为紫色毛癣菌。

脓癣201例病原菌分布及流行病学分析

目的了解武汉市及其周边地区脓癣病原菌分布情况。方法回顾性分析2000年1月-2011年12月本科门诊及住院脓癣患者的病例资料,并对国内同期正式发表的文献资料进行汇总和比较。结果 201例脓癣患者中,男70例,女131例;年龄4个月～89岁;2.5～10岁占64.68%。主要病原菌:紫色毛癣菌62株(30.85%)、犬小孢子菌46株(22.89%)和须癣毛癣菌43株(21.39%)。其中,亲人性皮肤癣菌95株(47.26%)、亲动物性皮肤癣菌89株(44.28%)、亲土性皮肤癣菌17株(8.46%)。2006-2011年与2000-2005年相比,紫色毛癣菌检出率显著升高,石膏样小孢子菌检出率显著降低。>18岁组的亲人性皮肤癣菌比例显著高于各儿童组,<10岁组的亲动物性皮肤癣菌比例显著高于各成人组。国内同期报道脓癣552例,主要为犬小孢子菌(38.95%)、须癣毛癣菌(29.71%)和红色毛癣菌(14.49%)感染。结论脓癣病原菌分布有显著的年龄特征,武汉地区脓癣的亲动物性皮肤癣菌比例显著低于国内各地区,而亲人性皮肤癣菌比例显著高于国内各地区;并以紫色毛癣菌为首要致病菌。

宠物猫致夫妻共患犬小孢子菌体癣

报道由犬小孢子菌引起的人畜共患体癣2例,二者系夫妻,家中饲养宠物猫。因多发环状红斑2周就诊。取患者及猫的皮屑真菌镜检及培养,鉴定为须癣毛癣菌,经口服及外用抗真菌药物后治愈。

犬小孢子菌胞外酶活性研究

目的 观察感染不同部位的犬小孢子菌胞外酶活性。方法 将 2 0株犬小孢子菌临床株按采集的部位分为头癣株和体癣株 ,分别进行胞外酶丝氨酸蛋白酶和脂肪酶的活性检测。结果 犬小孢子菌头癣株丝氨酸蛋白酶活性显著高于体癣株 (P <0 .0 1) ,而两者的脂肪酶活性无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 不同感染部位的犬小孢子菌存在着种内差异 ,其致病活性有明显不同。

犬小孢子菌微量液基稀释法抗真菌药敏试验的方法学研究

目的对北京儿童医院的头癣患者分离所得的182株犬小孢子菌进行抗真菌药敏试验条件的探索。方法对致病真菌进行取样、培养、鉴定、分离和纯化，经微量稀释法测定8种常见抗真菌药物的最小抑菌浓度，并对原药敏方案进行适当调整。结果受试菌株的接种浓度为1—3×10^4 CFU／mL。除伊曲康唑、联苯苄唑、阿莫罗芬外，使用沙氏液体培养基测定的药物最小抑菌浓度均较使用RPMI-1640液体培养基时药物浓度明显升高。孵育温度为28℃，孵育时间为5d。结论各种药物的最小抑菌浓度（minimal inhibitory concentration，MIC）之间的差异有统计学意义，M38-A方案有较好的重复性和稳定性，可作为一种较好的实验室方法被应用。

犬小孢子菌病20例临床分析及文献回顾

目的通过对20例犬小孢子菌病的临床分析及近10a的文献复习,探讨犬小孢子菌病的临床特征。方法根据真菌学检查确诊的犬小孢子菌感染,分析患者一般资料、皮损特征、病程、治疗及预后情况;并对近10a报道的犬小孢子菌病总结回顾。结果门诊确诊及文献回顾共计302例患者,年龄为17d^83岁,男女比例约为1∶2,80%患者有接触宠物史。儿童患者多表现为头癣,成人多为体癣。依据真菌学镜检和培养可确诊。抗真菌药物治疗后预后良好。结论犬小孢子菌病是一种常见的皮肤癣菌病,发病率高,传染性强。一旦确诊,应及时规范治疗,同时给予宣教,杜绝传染源,降低发病率。