微孔草子油对大鼠胚胎毒性和致畸作用研究

目的探讨微孔草子油对大鼠胚胎毒性和致畸作用。方法性成熟Wistar大鼠,雌性100只,雄性50只,按雌性:雄性=2:1合笼配对,每日清晨检查阴拴和精子,发现者定为受孕零天。孕鼠随机分为5组(每组20只):给药组(设3个剂量组:给予微孔草子油2.5g/kg、5.0g/kg、10.0g/kg,ig)、环磷酰胺组(7mg/kg,sc)和菜子油组(给予等容积菜子油,ig)。受孕第7天开始,给药组、菜子油组每天给予受试物1次,连续10d。环磷酰胺组于受孕第11天给予环磷酰胺,每日1次,连续3d。受孕第20天处死孕鼠,观察受试物对孕鼠和胚胎的毒性及致畸作用。结果微孔草子油各剂量组孕鼠体重、活胎率明显高于环磷酰胺组(P<0.01),死胎率、吸收胎率显著低于环磷酰胺组(P<0.01),与菜子油组间无显著性差异(P>0.05);微孔草子油各剂量组胎鼠体重、身长、尾长与菜子油组无显著性差异(P>0.05),外观、内脏、骨骼未发现畸形;环磷酰胺组140只胎鼠中有112只出现畸形。结论微孔草子油在2.5g/kg、5.0g/kg、10.0g/kg剂量时对孕鼠和胚胎无明显的毒性和致畸作用。

微孔草油中脂肪酸的分离和鉴定

微孔草[Microula sikkimensis(Clarke)Hemsl.]种子含油45%,其油中含有γ-亚麻酸,(顺式-6,9,12-十八碳三烯酸)8.1%。通过硝酸银硅胶柱层析和高压液相色谱分离,采用高碘酸钠、高锰酸钾氧化裂解的方法和红外光谱,紫外光谱,气相色谱分析,质谱分析,对油中的γ-亚麻酸,顺式-6,9,12,15-十八碳四烯酸,顺式-11-廿碳烯酸,顺式-13-廿二碳烯酸,顺式-15-廿四碳烯酸进行了分离、鉴定。

响应面法优化超临界CO_2萃取微孔草籽油工艺及其脂肪酸组成分析

利用单因素实验及响应面法优化超临界CO2萃取微孔草籽油的工艺。响应面法优化得到的最佳工艺条件为:萃取压力25 MPa,萃取时间3 h,萃取温度49℃。在此条件下,微孔草籽油得率为39.53%,与理论预测值基本一致。采用GC/MS联用方法分析微孔草籽油主要脂肪酸组成为油酸(39.76%),亚油酸(12.19%),亚麻酸(22.91%)。微孔草籽油不饱和脂肪酸含量较高,具有较高的开发利用价值。

色质联用(GC/MS)研究天祝微孔草草籽油中的脂肪酸

采用色谱-质谱二联仪（GC／MS）研究天祝微孔草草籽油的化学成分。共分离鉴定出11种化合物，占油样总量的99．92％，主要是亚油酸、油酸、α-亚麻酸、顺-11-二十碳烯酸、软腊酸、γ-亚麻酸、硬脂酸。饱和脂肪酸4种，不饱和脂肪酸7种，含量分别占总量的13、54％和％．46％。γ-亚麻酸含量为6．37％。种子含油43．5％。

微孔草种子油的三萜醇和甾醇成分

微孔草Microula sikkimensis Hemsl,种子油中的不皂化物含量为0.6％。从不皂化物中分离出三萜醇和甾醇。已鉴定有4个三萜醇(β—香树脂醇、环阿屯醇、羽扇醇和24—次甲基环阿屯醉),11个甾醇(胆甾醉,△~7胆甾醇、菜油甾醇,24—甲墓△~7—胆甾醇、β—谷甾醇,22-二氢菠菜甾醇、菜子甾醇、豆甾烯醇、5,24(28)—豆甾烯醇、△~7—燕麦甾醇和7,24(28)-麦角甾醇)。

微孔草籽油脂肪酸的HPLC-MS分析

采用柱前衍生-高效液相色谱荧光检测法(HPLC-FLD)分析了超临界CO2萃取得到的微孔草籽油的脂肪酸成分。用荧光衍生试剂1-[2-(对甲苯磺酸酯)乙基]-2-苯基咪唑[4,5-f]9,10-菲(TSPP)作为柱前衍生试剂,对39种饱和与不饱和脂肪酸标准品进行衍生,经梯度洗脱实现了39种脂肪酸衍生物完全分离,使用外标法定量,建立了同时测定17种脂肪酸绝对含量的方法。结果表明,微孔草籽油中油酸、亚油酸、亚麻酸相对含量分别是29.09%、23.85%、20.25%;不饱和脂肪酸占总脂肪酸的相对含量为73.19%。