微小核糖核酸-451a在人参养荣汤治疗鼻咽癌放射性黏膜损伤中的机制研究

目的:通过检测微小核糖核酸-451a(miR-451a)和富含半胱氨酸的分泌性酸性蛋白(SPARC)mRNA的表达,推断人参养荣汤治疗鼻咽癌(NPC)放射性黏膜损伤的疗效及作用机制。方法:选择2022年3月—2023年5月收治的鼻咽癌放射性口腔黏膜损伤患者30例作为观察组,选择同期健康者30例作为对照组。采用辨证论治拟人参养荣汤加减治疗,比较观察组治疗前后患者中医症候积分量表和口干程度、口咽疼痛程度、黏膜损伤程度。检测治疗前后患者血清miR-451a和SPARC mRNA表达水平。结果:人参养荣汤可以有效降低患者主症和次症严重程度、Ⅲ级和Ⅳ级口腔黏膜损伤程度、口咽疼痛程度以及口干程度,使患者血清中miR-451a表达下降,促进SPARC mRNA蛋白翻译增强(P<0.05)。治疗前后,miR-451a与中医症候积分均呈正相关(P<0.05)。结论:人参养荣汤对鼻咽癌放射性黏膜损伤具有一定的临床疗效,可降低miR-451a表达水平,升高SPARC mRNA表达水平;miR-451a抑制了SPARC mRNA的翻译,可为将来的中西医结合治疗提供理论依据。

lncRNA CRNDE通过调控miR-451对乳头状甲状腺癌细胞恶性行为的影响

目的探讨长链非编码RNA结直肠肿瘤差异表达基因(lncRNA CRNDE)对乳头状甲状腺癌(PTC)恶性进展中的生物学功能及其潜在调节机制。方法收集2019年7月至2021年1月在江苏大学附属人民医院行甲状腺切除手术的30例PTC患者的癌和癌旁组织标本,另外选择人甲状腺癌细胞系(TPC-1和BCPAP)和人甲状腺正常细胞(Nthy-ori 3-1)作为靶细胞。实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测PTC癌和癌旁组织及细胞系中lncRNA CRNDE和微小RNA(miR)-451的表达。将TPC-1和BCPAP细胞随机分为对照(Ctrl)组,lncRNA CRNDE过表达(lncRNA CRNDE-OE)组和lncRNA CRNDE敲除(lncRNA CRNDE-siRNA)组。CCK-8法检测细胞增殖活性;Transwell法检测细胞侵袭和迁移;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测N-钙黏蛋白(N-cadherin),波形蛋白(Vimentin)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白表达;荧光素酶报告实验分析lncRNA CRNDE与miR-451基因的靶向关系。结果与癌旁组织相比,癌组织中lncRNA CRNDE表达增多,miR-451表达降低(P<0.001);与Nthy-ori 3-1细胞相比,TPC-1和BCPCP细胞中lncRNA CRNDE表达上调,miR-451表达下调(P<0.001)。与Ctrl组相比,lncRNA CRNDE-OE组BCPAP和TPC-1细胞存活率,侵袭率和迁移率均升高,细胞凋亡率降低,E-cadherin蛋白表达减少,N-cadherin和Vimentin蛋白表达升高,miR-451表达降低(P<0.01);而lncRNA CRNDE-siRNA组细胞存活率,侵袭率和迁移率均降低,细胞凋亡率升高,E-cadherin蛋白表达增多,N-cadherin和Vimentin蛋白表达降低(P<0.01);双荧光素酶报告实验显示,lncRNA CRNDE与miR-451具有明显的靶向关系。结论PTC癌组织中lncRNA CRNDE高表达,可能通过靶向抑制miR-451表达促进PTC细胞增殖、迁移、侵袭和上皮-间充质转化发生,并抑制细胞凋亡。

高血压合并焦虑病人血清微RNA-451a、胰岛素样生长因子-1受体表达水平与焦虑程度的关系

目的探讨高血压合并焦虑病人血清微RNA-451a(miR-451a)、胰岛素样生长因子-1受体(IGF1R)表达水平与焦虑程度的关系。方法选取2020年2月至2022年1月在汉中市中心医院进行治疗的高血压病人160例,根据临床诊断和汉密尔顿焦虑量表(HAMA)评估将病人分为高血压组60例、高血压合并轻度焦虑情绪组48例、高血压合并中度焦虑情绪组32例和高血压合并重度焦虑情绪组20例,收集整理所有病例的临床基础资料。采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-451a表达水平、ELISA法检测血清IGF1R表达水平;比较分析高血压病人和高血压合并焦虑情绪病人的临床病理特征;采用Pearson法分析HAMA评分与血清miR-451a、IGF1R表达水平的相关性;采用logistic回归分析高血压合并焦虑的影响因素。结果高血压组、轻度焦虑、中度焦虑和重度焦虑组病人血清miR-451a水平依次降低(0.88±0.30,0.59±0.14,0.48±0.11,0.38±0.09),IGF1R水平依次升高[(2.14±0.60)μg/L,(2.66±0.62)μg/L,(3.08±0.66)μg/L,(3.51±0.74)μg/L];血清miR-451a水平与HAMA评分呈负相关(r=−0.50,P<0.05),血清IGF1R水平与HAMA评分呈正相关(r=0.43,P<0.05);高血压合并焦虑组收缩压[(142.26±18.51)mmHg,(135.29±17.84)mmHg]、舒张压[(84.25±11.30)mmHg,(78.23±10.25)mmHg]、C-反应蛋白[(4.47±0.96)mg/L,(4.16±0.91)mg/L]、IL-6水平[(36.95±6.31)μg/L,(27.48±5.49)μg/L]显著高于高血压组,IL-10水平[(12.34±3.26)ng/L,(16.24±3.91)ng/L]显著低于高血压组(P<0.05);多因素logistic回归分析结果显示,收缩压[OR 95%CI=1.33(1.06,1.67)]、舒张压[OR 95%CI=1.20(1.00,1.45)]、IL-6[OR 95%CI=1.89(1.22,2.93)]、IL-10[OR 95%CI=0.38(0.17,2.93)]、miR-451a[OR 95%CI=0.01(0.00,0.47)]、IGF1R[OR 95%CI=7.62(1.21,48.03)]水平为高血压合并焦虑的影响因素(P<0.05)。结论高血压合并焦虑病人血清中miR-451a低表达,IGF1R高表达,且与病人焦虑程度密切相关。

血清微小RNA-184、微小RNA-451a表达对Ⅰ~ⅡA期非小细胞肺癌根治术后复发转移的预测价值

目的探讨血清微小核糖核酸(miRNA)-184、miR-451a表达对Ⅰ~ⅡA期非小细胞肺癌(NSCLC)根治术后复发转移的预测价值。方法选取2020年1月—2021年10月在本院行根治性切除术的203例Ⅰ~ⅡA期NSCLC患者为NSCLC组,随访2年根据复发转移情况分为复发转移组30例和无复发转移组173例;另选取同期87名体检健康志愿者为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测血清miR-184、miR-451a表达。采用多因素Logistic回归模型分析影响Ⅰ~ⅡA期NSCLC根治术后复发转移的因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-184、miR-451a表达对复发转移的预测价值。结果与对照组比较,NSCLC组血清miR-184、miR-451a表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。随访2年,203例Ⅰ~ⅡA期NSCLC患者术后复发转移率为14.78%(30/203)。与无复发转移组比较,复发转移组血清miR-184、miR-451a表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Ⅰ~ⅡA期NSCLC根治术后复发转移的独立危险因素为ⅡA期、低分化、术后辅助化疗,独立保护因素为miR-184升高、miR-451a升高(P<0.05)。血清miR-184、miR-451a表达联合预测Ⅰ~ⅡA期NSCLC根治术后复发转移的曲线下面积为0.868,大于血清miR-184、miR-451a表达单独预测的0.784、0.781,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Ⅰ~ⅡA期NSCLC患者血清miR-184、miR-451a呈低表达,与根治术后复发转移密切相关,血清miR-184、miR-451a联合检测对Ⅰ~ⅡA期NSCLC根治术后复发转移有较高的预测价值。

慢性心力衰竭病人血清miR-451a调控MMP-9的表达及临床意义

目的探讨慢性心力衰竭病人血清miR-451a与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达情况及其临床意义。方法选取我院确诊为慢性心力衰竭的病人80例作为研究组,美国纽约心脏病学会(NYHA)分级:Ⅰ级20例,Ⅱ级22例,Ⅲ级26例,Ⅳ级12例。另选择健康成年人80名作为对照组。应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和酶联免疫吸附(ELISA)法分别检测血清miR-451a和MMP-9表达水平,分析二者在不同NYHA分级中的表达情况及相关性。结果与对照组比较,研究组miR-451a表达水平显著降低,而血清MMP-9表达水平显著增加,差异均有统计学意义(P <0.05)。随着NYHA分级的增高,miR-451a表达水平下降,而MMP-9表达水平上升,各分级间差异均有统计学意义(P <0.05)。线性相关分析发现,随着miR-451a表达水平的降低,MMP-9表达水平逐渐增加,血清miR-45a与MMP-9的表达呈负相关(r=-0.702,P <0.05)。结论 miR-451a至少部分通过调控MMP-9表达而在慢性心力衰竭的发生发展及病情演变过程中起作用。

Bcl-2、miR-451和Th17细胞在食管癌中的诊断价值及其与复发的关系

目的探讨Bcl-2、miR-451、Th17细胞在食管癌中的诊断价值及其与复发的关系。方法选取101例食管癌患者作为研究组,95例健康体检者作为对照组。分析两组临床病理特征与各外周血指标水平之间的相关性,ROC曲线分析各外周血指标诊断价值,多元线性回归分析各指标与肿瘤复发的关系。结果研究组外周血Bcl-2、miR-451和Th17细胞水平均高于对照组(均P<0.05);分化程度、临床分期、肿瘤直径、淋巴结转移与外周血Bcl-2、miR-451和Th17细胞水平呈正相关(均P<0.05)。复发患者外周血Bcl-2、miR-451和Th17细胞水平均高于未复发患者(均P<0.05);控制分化程度、临床分期、肿瘤大小、淋巴结转移等其他因素后,外周血Bcl-2、miR-451和Th17细胞水平与复发显著相关(均P<0.05)。结论食管癌患者外周血Bcl-2、miR-451和Th17细胞异常表达且表达水平与分化程度、临床分期及复发等密切相关,联合检测可为临床诊断、预后评估提供客观依据。

基于UML的DL451-91协议RTU系统设计

统一建模语言(UnifiedModelingLanguage)是面向对象软件开发方法的新技术。本文在介绍UML的基础上,结合ROSE建模工具,介绍了基于DL451-91协议实现RTU系统的软件设计方案。

赖氨大黄酸通过升高miRNA-451抑制肺癌A549细胞迁移

目的研究赖氨大黄酸(rhein lysinate,RHL)对肺癌细胞株(A549)迁移的影响及miRNA-451在其中的作用。方法选取处于对数生长期的A549细胞株,并分为对照组、不同剂量(0、10、20、40、80、160μmol/L)的RHL组。采用MTT法检测各组细胞48 h增殖情况;细胞划痕实验和Transwell实验检测各组细胞48 h迁移情况;Real-time PCR检测各组细胞48 h miRNA-451和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)的转录水平;Western blot检测各组细胞48 h MMP-9蛋白水平变化。结果细胞培养48 h后,RHL处理组A549细胞增殖活性呈现明显剂量依赖性抑制。细胞划痕实验和Transwell实验均发现80μmol/L RHL能够抑制A549细胞迁移。同时80μmol/L以上剂量的RHL能够显著升高miR-451水平,降低MMP-9的转录水平(P<0.05)。Western blot检测结果也证实了80μmol/L以上剂量的RHL能够显著抑制MMP-9蛋白表达水平(P<0.05)。结论 RHL通过诱导miR-451的表达、抑制MMP-9的表达,从而抑制A549细胞迁移。

基于DL451-91协议自恢复循环远动RTU系统的软件设计

介绍了基于ＤＬ451 -91协议实现ＲＴＵ系统的软件设计方案 ,并给出了详细流程。此外 ,针对如何提高系统的性能 ,本文也提出了几点建议 ,并在实际工作过程中取得了理想的效果。

丹参川芎嗪注射液联合重组人脑利钠肽治疗慢性心力衰竭的疗效及对外周血miR-423-5p、miR-451a表达的影响

目的探讨丹参川芎嗪注射液联合重组人脑利钠肽治疗慢性心力衰竭的疗效及对外周血miR-423-5p、miR-451a表达的影响。方法选取2019年4月—2020年4月我院收治的178例慢性心力衰竭病人作为研究对象,根据治疗方案分组,观察组60例给予丹参川芎嗪注射液联合重组人脑利钠肽治疗,对照A组59例给予重组人脑利钠肽治疗,对照B组59例给予丹参川芎嗪注射液治疗。比较3组临床疗效、不良反应发生率及治疗前后症状评分、心功能指标[左室射血分数(LVEF)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、心排血量(CO)、二尖瓣舒张早期血流速度峰值与晚期血流速度峰值的比值(E/A)]、6 min步行距离、外周血miR-423-5p、miR-451a表达。结果观察组临床疗效优于对照A组、对照B组(P<0.05);观察组治疗后症状评分低于对照A组、对照B组(P<0.05);观察组治疗后LVEF、CO、E/A高于对照A组、对照B组,LVEDD低于对照A组、对照B组(P<0.05);观察组治疗后6 min步行距离高于对照A组、对照B组(P<0.05);观察组治疗后miR-423-5p低于对照A组、对照B组,miR-451a高于对照A组、对照B组(P<0.05);3组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论丹参川芎嗪注射液联合重组人脑利钠肽治疗慢性心力衰竭,可缓解病人临床症状,改善心功能,提高治疗效果,调节外周血miR-423-5p、miR-451a表达。

miR-144/451通过干扰14-3-3ζ/AKT/ROS正反馈通路抑制ROS的产生

利用miR-144/451小分子RNA基因敲除小鼠分离骨髓有核红细胞,使用流式细胞术、定量PCR和Western blot等方法证明miR-144/451是否通过干扰14-3-3ζ/AKT/ROS正反馈通路抑制超氧化活性氧簇(ROS)的产生。结果表明:miR-144/451敲除小鼠呈现小细胞性溶血性贫血,可能是miR-144/451敲后除引起14-3-3ζ增高,而14-3-3ζ增高可引起轻度AKT磷酸化,从而引起Foxo3入核障碍;ROS水平增高,进而激活AKT磷酸化,且ROS促AKT磷酸化程度比14-3-3ζ更强,从而加强14-3-3ζ与Foxo3的结合,引起Foxo3进一步出核,形成正反馈调节机制;ROS水平进一步增高,导致红细胞凋亡加速,小鼠呈现贫血症状。

血清miR-221-3p和miR-451a相对表达水平预测卵巢癌患者预后的临床价值

目的探讨血清miR-221-3p和miR-451a相对表达水平在预测卵巢癌患者3年内出现死亡的诊断效能。方法选取2016年1月至2017年12月在该院就诊、病理诊断为卵巢癌的患者110例(卵巢癌组)作为研究对象。选择同期在该院经病理证实的良性卵巢肿瘤患者75例和女性体检健康者45例分别作为卵巢良性组和健康对照组。采用qRT-PCR法检测各组血清miR-221-3p和miR-451a相对表达水平。观察各组血清miR-221-3p和miR-451a相对表达水平变化,卵巢癌患者血清miR-221-3p和miR-451a相对表达水平在术前、术后的变化,以及其与临床指标和预后的关系。结果卵巢癌组血清miR-221-3p相对表达水平明显高于卵巢良性组和健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);卵巢癌组术后血清miR-221-3p相对表达水平较术前明显降低,差异有统计学意义(t=11.785,P<0.05)。卵巢癌组血清miR-451a相对表达水平较卵巢良性组和健康对照组明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);卵巢癌组术后血清miR-451a相对表达水平较术前明显升高,差异有统计学意义(t=10.833,P<0.05)。卵巢癌患者血清miR-221-3p相对表达水平与血清miR-451a相对表达水平呈负相关(r=-0.648,P<0.01)。血清miR-221-3p和miR-451a相对表达水平在预测卵巢癌患者3年内出现死亡具有较高的效能,联合检测其灵敏度为87.1%,特异度为91.1%,AUC为0.929,AUC均明显高于miR-221-3p(Z=2.016,P<0.05)和miR-451a(Z=2.543,P<0.05)单项检测。结论血清miR-221-3p和miR-451a相对表达水平在预测卵巢癌患者3年内发生死亡具有较高的效能,联合检测能够明显提高预测效能,为是否对卵巢癌患者采取进一步干预措施提供理论依据。

低氧下miR-451a对K562细胞向红系分化过程的影响

目的:探讨低氧下K562细胞向红系分化过程中GATA-1蛋白的表达变化及GATA-1如何通过上调miR-451a表达抑制14-3-3ζ的表达调控红系分化。方法:将K562细胞分为常氧组及低氧组,经氯化血红素(hemin)诱导96 h后,检测联苯胺染色阳性细胞率、γ-globin的mRNA表达以及CD235a的表达等相应红系分化指标,验证模型是否复制成功;采用Western blot及qRT-PCR检测GATA-1蛋白和miR-451a在上述2组中的表达变化及过表达GATA-1后miR-451a的表达变化;将常氧组和低氧组细胞分别分为阴性对照组(NC组)及miR-451a过表达组,结合相应红系分化指标共同判断4组细胞红系分化程度;过表达miR-451a后通过Western blot检测14-3-3ζ的表达变化。结果:低氧下K562细胞诱导96 h后联苯胺染色阳性细胞率、γ-globin的mRNA表达及CD235a的表达均显著高于0 h(P<0.05),这提示,低氧下K562细胞红系分化模型复制成功。低氧组GATA-1蛋白及miR-451a的表达水平均显著高于常氧组(P<0.05)。低氧下过表达GATA-1后,miR-451a的表达水平较NC组明显升高(P<0.05)。低氧下过表达miR-451a后,联苯胺染色阳性细胞率、γ-globin的mRNA表达水平及CD235a的表达均明显高于NC组(P<0.05)。14-3-3ζ的蛋白表达水平检测结果显示,低氧下miR-451a过表达组14-3-3ζ的表达水平低于NC组(P<0.05)。结论:低氧条件可显著提高GATA-1蛋白的表达水平,GATA-1表达的升高可上调miR-451a,进而抑制14-3-3ζ的蛋白表达,阻碍K562细胞红系分化模型中的细胞增殖过程,发挥促红系分化的作用。

MB451-180热烘定型机的改造

ＭＢ４５１－１８０热烘定型机的改造江阴市第九毛纺织厂吴周林金继忠我厂１９９１年底安装投入运行的ＭＢ４５１－１８０热烘定型两用机是由邵阳第二纺织机械厂制造的。近几年来，我厂生产规模不断扩大，品种由单一向多元化发展。该机长期处于满负荷运转，针板链条及导机...

老年脓毒症患者血清miR-206及miR-451水平与疾病严重程度和预后的相关性研究

目的探讨血清微小核糖核酸(micro RNA,miR)-206及miR-451水平在老年脓毒症中的表达及其与严重程度和预后的关系。方法选取2018年1月~2020年12月儋州市人民医院收治的老年脓毒症患者158例,其中脓毒症非休克组94例和脓毒症休克组64例,另根据患者28天的生存情况,将其分为存活组(n=115)和死亡组(n=43)。比较各组第1,3和7天血清miR-206及miR-451表达水平变化。应用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-206及miR-451表达水平预测老年脓毒症患者死亡的价值。结果脓毒症休克组第1,3和7天血清miR-206(4.28±1.60,5.63±2.19,6.05±2.58)及miR-451(3.08±1.42,4.27±1.53,4.93±1.80)表达水平均明显高于脓毒症非休克组(2.62±1.05,3.15±1.40,2.96±1.27;1.93±0.86,2.46±1.02,2.30±0.95),差异有统计学意义(t=10.417~19.630,均P<0.01)。死亡组第1,3和7天血清miR-206(4.45±1.66,6.12±2.64,6.37±2.71)及miR-451(3.35±1.48,4.70±1.72,5.37±1.80)表达水平均明显高于存活组(2.50±0.97,2.90±1.35,2.83±1.31;1.80±0.81,2.17±0.92,2.05±0.86),差异有统计学意义(t=12.506~22.814,均P<0.01)。ROC曲线显示,第3天miR-206及miR-451两项联合预测老年脓毒症患者死亡的曲线下面积(0.936,95%CI:0.877~0.994)最大,其敏感度和特异度分别为97.2%和86.0%。结论血清miR-206及miR-451表达水平升高与老年脓毒症患者的严重程度及预后有关,第3天两项联合预测老年脓毒症患者死亡具有较好的价值。

CYFRA21-1、CyclinE、miRNA-451在膀胱癌中的表达及意义

目的探讨细胞角蛋白19抗原21-1(CYFRA21-1)、细胞周期蛋白E(CyclinE)、微小RNA-451(miRNA-451)在膀胱癌中的表达及意义。方法选取郑州大学附属郑州中心医院2021年1月至2023年1月收治的60例膀胱癌患者作为膀胱癌组,选取同期60例泌尿系良性疾病患者作为良性疾病组,60例健康体检者作为对照组。比较三组研究对象CYFRA21-1、CyclinE、miRNA-451水平,比较不同临床特征膀胱癌患者CYFRA21-1、CyclinE、miRNA-451水平,ROC曲线分析CYFRA21-1、CyclinE、miRNA-451单独及联合检测诊断膀胱癌的价值。结果膀胱癌组CYFRA21-1、CyclinE水平高于良性疾病组和对照组,良性疾病组高于对照组;膀胱癌组miRNA-451低于良性疾病组和对照组,良性疾病组低于对照组;不同肿瘤分期膀胱癌患者CYFRA21-1、CyclinE、miRNA-451水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。CYFRA21-1、CyclinE、miRNA-451联合检测诊断膀胱癌的AUC值高于单项检测,差异有统计学意义(ZCYFRA21-1~联合检测=3.400,ZCyclinE~联合检测=3.581,ZmiRNA-451~联合检测=3.279,P<0.05)。结论膀胱癌患者中CYFRA21-1、CyclinE呈高表达,miRNA-451呈低表达,其表达与肿瘤分期有关,CYFRA21-1、CyclinE、miRNA-451联合检测有助于早期诊断膀胱癌。

西门子6ES5-451数字输出模块常见故障检修

6ES5-451数字输出模块是西门子S5-115U可编程控制器中连接执行元件的接口.其作用是将CPU内部信号电平转换成为数字信号,直接输出一定的电压电流值,使继电器、电磁阀、指示灯等执行元件按预先设置好的程序工作.该模块系悬浮式输出,输出电流0.5A,输出点数分为4组共32点.模块在工作过程中,常常由于外部执行元件短路或高电压窜入等线路故障,引起模块损坏.现将故障原因和排除办法介绍如下.

血浆miRNA在子宫内膜异位症中的诊断价值

目的探讨血浆微小核糖核酸(micro RNA,miR)-451a、miR-3613-5p和miR-125b-5p在子宫内膜异位症(endometriosis,EMT)中的诊断价值。方法选取2021年12月至2023年2月就诊于福建中医药大学附属人民医院妇科的子宫内膜异位症患者35例作为病例组,同期选取30名健康体检无异常的育龄女性作为对照组。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应技术检测两组纳入者的miR-451a、miR-3613-5p和miR-125b-5p表达水平,并通过受试者操作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线)评价其在EMT诊断中的价值。结果①病例组患者血浆中miR-451a、miR-3613-5p和miR-125b-5p的表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。②病例组中轻中度(Ⅱ~Ⅲ期)患者及重度(Ⅳ期)患者间miRNA表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05),血浆中的糖类抗原125(carbohydrate antigen 125,CA125)表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。③通过ROC分析miRNA对EMT的诊断效能,miR-451a的敏感度为85.7%,特异性为40.0%;miR-3613-5p的敏感度为60.0%,特异性为90.0%;miR-125b-5p的敏感度为60.0%,特异性为76.7%;三者联合诊断的敏感度为48.6%,特异性为96.7%。结论相较于健康女性,miR-451a、miR-3613-5p和miR-125b-5p在EMT患者血浆中表达水平升高,且不受临床分期影响,有望作为EMT无创诊断的候选标志物。

微小RNA-451靶向巨噬细胞游走抑制因子调控甲状腺癌细胞增殖、凋亡的机制

目的探讨微小RAN（miR）-451靶向巨噬细胞游走抑制因子（MIF）对甲状腺癌细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法反转录．聚合酶链反应（RT—PCR）检测甲状腺癌组织及滤泡状（PTC-133）、乳头状（K1）及未分化（8505C）甲状腺癌细胞株中miR-451的mRNA表达；miR—NC、miR-451模拟物（mimics）、miR-451抑制物（inhibitor）转染K1甲状腺癌细胞，Western blot检测MIF蛋白表达，3组共转染组miR-NC＋miR-451、Wt—MIF＋miR-451mimics、Mut-MIF＋miR-451mimics转染K1甲状腺癌细胞，检测荧光素酶活性，以此证实MIF是否为miR-451靶基因；后续实验分为miR—NC、miR-451mimics、miR-451mimics＋pcDNA3．1-MIF及miR—NC＋pcDNA3．1-MIF4组，各组细胞培养48h后，细胞计数试剂盒（CCK-8）实验检测细胞增殖，流式细胞仪检测细胞凋亡，Western blot检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3（Cleaved Caspase-3）、磷脂酰肌醇-3-激酶（P13K）、蛋白激酶B（Akt）、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）蛋白表达。结果甲状腺癌组织中miR-451的mRNA表达（0．889±0．367）显著低于癌旁组织（6．214±0．884）（t=28．883，P=0．004），甲状腺癌细胞中K1细胞的表达最低，选择作为后续研究；MIF是miR-451的靶基因；与miR-NC组比较P13K（0．562±0．051）；p-Akt（0．134±．022）；CleavedCaspase-3（0．052±0．014）；细胞凋亡率（5．16±0．77）％，miR-451mimics和nliR-451mimics＋pcDNA3．1-MIF组P13K（0．133±0．021、0．223±0．026）、p—Akt（0．034±0．011、0．062±0．013）蛋白表达显著降低（与miR-451mimics组比较：tPI3K=30．157，P=0．003；tp-Akt=46．626，P=0．001。结论MIF是miR-451的靶基因，miR-451可通过靶向MIF抑制P13K／Akt信号通路抑制K1甲状腺癌细胞增殖及促进细胞凋亡。

miRNA-451调控人脑胶质瘤细胞上皮-间质转化发生的机制研究

目的研究miRNA-451过表达后通过靶标钙结合蛋白39（CAB39）调控人脑胶质瘤细胞上皮-间质转化发生的机制，以及miRNA-451过表达对胶质瘤细胞侵袭和迁移能力的影响。方法培养U251胶质瘤细胞，将其分为空白对照组、无义序列组以及miRNA-451 mimics处理组（简称miRNA-451组）。采用实时定量PCR检测转染后U251细胞miRNA-451的表达；以Western blot法检测CAB39、E-钙黏素、N-钙黏素、波形蛋白、TWIST、人基质金属蛋白酶2（MMP-2）、人基质金属蛋白酶9（MMP-9）、Snail、蛋白激酶B（AKT）、磷酸化蛋白激酶B（P—AKT）的表达水平；通过细胞免疫荧光实验进一步验证N-钙黏素、波形蛋白的表达水平；采用划痕实验和Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力的变化。结果与空白对照组及无义序列组相比，miRNA-451组的miRNA-451相对表达水平明显升高（均P〈0．05）。Western blot结果显示，与空白对照组及无义序列组相比，miRNA-451组CAB39、N-钙黏素、波形蛋白、TWIST、MMP-2、MMP-9、Snail、P-AKT的表达水平降低（均P〈0．05），而E-钙黏素的表达水平升高（均P〈0．05）。细胞免疫荧光实验结果显示，miRNA-451组的N-钙黏素、波形蛋白的表达水平相对于空白对照组明显降低（均P〈0．05）。划痕操作后24h、48h miRNA-451组的划痕修复率与空白对照组及无义序列组相比均明显降低（均P〈0．05）。转染48h后miRNA-451组穿过滤膜的细胞数目与空白对照组及无义序列组相比显著减少（均P〈0．05）。结论miRNA-451可能通过降低靶标CAB39的表达调控P13K／AKT通路，抑制人脑胶质瘤细胞中上皮-间质转化现象的发生，从而抑制人脑胶质瘤细胞的侵袭和迁移能力。