p38MAPK对轻度热应激大鼠脾脏巨噬细胞免疫功能的影响

目的:探讨p38MAPK在Bip蛋白介导的体外轻度热应激大鼠巨噬细胞功能改变中的信号作用.方法:p38MAPK抑制剂预处理大鼠脾脏巨噬细胞,将细胞置于41℃恒温箱中,使细胞轻度热应激,1h后恢复到37℃(抑制组),以未应激(对照组)和41℃热应激1h后60min巨噬细胞(应激组)为对照,分别检测3组巨噬细胞吞噬、杀伤、趋化功能,同时检测p38MAPK蛋白和Bip蛋白的表达.结果:p38MAPK抑制剂预处理大鼠脾脏巨噬细胞,与应激组比较,轻度热应激后巨噬细胞吞噬、趋化和杀伤活性明显降低(0.17±0.01vs0.74±0.03,33.32±3.55vs82.07±5.17,24.20%±2.39%vs60.80%±4.02%,均P<0.01);应激组p38MAPK蛋白表达明显上调,p38MAPK抑制剂预处理后,抑制组p38MAPK蛋白表达受到抑制,与应激组比较差异有显著性(p38/β-actin:2.863±0.794vs4.752±1.386,P<0.01);Bip蛋白的表达(Bip/β-actin)也因p38MAPK抑制剂预处理而由应激组的1.270±0.535降至抑制组的1.028±1.061(P<0.05).结论:p38MAPK抑制剂可显著抑制轻度热应激大鼠巨噬细胞吞噬、趋化和杀伤功能以及p38MAPK和Bip蛋白的表达.

热敏灸对抑郁症模型大鼠行为学的影响

目的:制备抑郁症大鼠模型,观察热敏灸"百会"对抑郁症大鼠模型行为学结果的影响,了解热敏灸"百会"治疗抑郁症的效果。方法:用雌性SD大鼠,采用孤养和慢性不可预见性温和应激(CUMS)制备抑郁症大鼠模型。以Open-Field测试大鼠的直立活动和水平活动得分;以1h内大鼠摄入饮用水和蔗糖水量计算糖水消耗百分比;以Morris水迷宫测试大鼠的学习记忆力。结果:与模型组相比,热敏灸组大鼠的水平活动得分和直立活动得分均增加;糖水消耗百分比升高;逃避潜伏期缩短。结论:热敏灸"百会"具有改善抑郁症的效果。

热敏灸对抑郁症模型大鼠海马BDNF mRNA表达的影响

目的:观察热敏灸对抑郁症模型大鼠学习记忆力及海马脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA表达的影响,研究热敏灸治疗抑郁症的效果及作用机制。方法:雌性SD大鼠,采用孤养和慢性不可预见性温和应激(CUMS)制备抑郁症大鼠模型。以Morris水迷宫测试大鼠的学习记忆力;以RT-PCR技术检测大鼠海马BDNF mRNA的表达量。结果:模型组大鼠学习记忆力下降,海马BDNF mRNA的相对表达量减少;与模型组相比,热敏灸组大鼠学习记忆力改善,海马BDNF mRNA的相对表达量增加。结论:热敏灸具有改善抑郁症大鼠模型的学习记忆力,可能与其提高海马BDNF mR-NA的表达有关。

Hsp70对慢性心理应激小鼠胚胎在体外培养中的作用

目的探讨HSP70能否对慢性轻度不可预见性应激(CUMS)小鼠2-细胞胚胎在体外培养的环境中起到应激保护作用。方法设立对照组,构建CUMS雌性昆明小鼠模型,予以PMSG/HCG促排卵获取2-细胞胚胎,置于M16培养液中培养48小时,观察优胚率及囊胚形成率,免疫荧光检测Hsp70及Caspase-3在胚胎的表达情况,共培养囊胚与Ishikawa细胞观察粘附率,并进行统计学分析。结果实验组的优胚率和囊胚率分别为62.2%和20.6%,均低于对照组的89%和31%,差异有统计学意义(P<0.05)。HSP70在实验组胚胎中阳性表达率为86.67%,高于对照组的30%,差异有统计学意义(P<0.05)。Caspase-3在实验组及对照组之间阴性表达率无统计学差异(P<0.05)。实验组胚胎的粘附率为20%,低于对照组的30%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HSP70可能对CUMS小鼠2-细胞胚胎在体外培养的环境中起到应激保护作用,该作用可能通过抗凋亡因子(caspase-3)实现。

An Ethylene Over-Producing Mutant of Tomato (<i>Solanum lycopersicum</i>), Epinastic, Exhibits Tolerance to High Temperature Conditions

Above-optimal temperatures reduce yield in many crops, including tomato, largely because of the heat-sensitivity of their reproduction process. A full understanding of heat-stress (HS) response and thermotolerance of tomato reproduction is still lacking. Recently, using external application of the plant hormone ethylene, it was demonstrated that ethylene plays a role in heat-tolerance of tomato pollen (the male reproductive cells). In order to expand our understanding on involvement of ethylene in tomato pollen thermotolerance, we analyzed the response of wild type and ethylene-related tomato mutant plants to HS, at physiological and molecular levels. We report that mild chronic HS conditions highly reduce the number of viable and germinating pollen grains as well as the production of seeded fruits in wild type tomato plants, while no significant reduction was detected/observed in pollen quality, number of seeded fruits and seeds per fruit in plants of the ethylene over-producer mutant epinastic. Our findings suggest that ethylene is involved in thermotolerance of tomato reproduction, pointing to an effect on pollen viability and germination potential, highlighting candidate genes involved in pollen response to HS (like SlHSP17, SlHSP101, SlMBF1) and suggesting directions for further studies.

长期慢性温和应激对大鼠抑郁样行为及热休克蛋白70的影响

目的探讨不同时间长度慢性温和应激对大鼠抑郁样行为的影响，及其对热休克蛋白70的影响。方法将标准鼠龄SD雄性大鼠分为两组，一组接受3周的慢性温和应激，为短期组（n=6）。另一组接受6周的慢性温和应激，为长期组（n=5）。慢性温和应激前后分别进行糖水偏好实验与敞箱实验，检测大鼠的抑郁样行为。慢性温和应激结束后分别利用Western—Blot、RT—PCR、免疫组化的方法检测大鼠海马与额叶的热休克蛋白70（HSP70）水平。结果长期组慢性温和应激后糖水偏好程度、水平运动指数、中央格停留时间均高于短期组（P〈0．05）；Western-Blot检测显示长期组海马与额叶的HSP70（相对光密度值分别为0．81±0．08，0．85±0．08）均高于短期组（0．60±0．06，0．85±0．07）（P〈0．05）；RT—PCR检测显示长期组海马的HSP70（0．90±0．05，1．37±0．38）高于短期组（0．78-4-0．04，1．08±0．14）（P〈0．05）；免疫组化显示长期组的HSP70在海马与额叶也高于短期组（P〈0．05）。结论长期慢性温和应激较短期慢性温和应激，大鼠的抑郁症状明显减少，同时伴随的是长期应激大鼠脑的HSP70增加。

HSP70在不同应激程度CUMS昆明小鼠胚胎中的表达及作用

目的建立雌性昆明小鼠慢性轻度不可预见性应激(CUMS)动物模型,探讨在心理应激状态下,热休克蛋白70(HSP70)是否参与机体对胚胎的应激保护作用。方法将300只雌性昆明小鼠以9种应激因子在28d内随机应用造模,并分为轻度、中度和重度应激3组。对照组(50只)不造模。通过孕马血清促性腺激素/人绒毛膜促性腺激素促排卵,观察卵巢反应及胚胎发育潜能;采用免疫荧光染色及实时荧光定量PCR检测HSP70在2-细胞胚胎及孕4d(D4)胚胎中的表达。结果 28dCUMS刺激后,实验组小鼠轻度应激占50%(150只),中度应激占32%(96只),重度应激占18%(54只)。促排卵后,轻度应激组小鼠2-细胞胚胎数、D4胚胎数和优胚率等与对照组比较差异均无统计学意义,而中、重度应激组小鼠较对照降低(P<0.05)。免疫荧光染色和实时荧光定量PCR显示HSP70在轻、中度应激组小鼠2-细胞胚胎和D4胚胎中的表达高于对照组(P<0.05),而重度应激组较对照组差异无统计学意义。结论 CUMS刺激后HSP70的表达升高,可能与其应激保护作用有关。