离子色谱法测定乳制品中的亚硝酸盐和硝酸盐

建立一种使用离子色谱技术检测乳制品中亚硝酸盐和硝酸盐的方法。乳制品试样经水溶解后,使用亚铁氰化钾和硫酸锌溶液沉淀其中的蛋白质,上清液经C_(18)柱、银柱、钠柱3种固相萃取柱净化后,进行离子色谱-电导检测器测定,使用外标法定量,然后对检测方法进行方法验证。结果表明:亚硝酸盐(以NaNO_(2)计)和硝酸盐(以NaNO_(3)计)含量分别在0.01~0.20μg/mL和0.1~2.0μg/mL内与峰面积线性良好,线性相关系数(R^(2))≥0.99,定量限分别为0.2、0.4 mg/kg,加标回收率为92.5%~102.0%,相对标准偏差为1.5%~6.6%。该方法结果准确、重复性好、操作简单,适用于乳制品中亚硝酸盐和硝酸盐的测定。

低酸度酒精阳性乳奶牛血液及乳指标分析

本试验旨在通过对低酸度酒精阳性乳奶牛的乳指标和血液指标分析,探究低酸度酒精阳性乳发生的原因,为低酸度酒精阳性乳的防控提供理论支持。选取内蒙古发生酒精阳性乳的某大型牧场,从平均泌乳天数(150~170d)、平均胎次(2~3胎)、平均日产奶量(30~35kg)相近的牛中,根据70%酒精测试和加州乳房炎测试(CMT)结果,挑选出酒精测试为阴性、CMT测试为阴性的牛只11头作为阴性组;酒精测试为阳性、CMT测试为阴性的11头牛只作为阳性组。随后对各组牛奶中的离子含量和肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)含量,奶牛血清中离子含量和抗氧化指标等进行检测。结果显示:阳性组牛只牛奶中的钾、镁、CK含量显著高于阴性组(P<0.05),阳性组牛只牛奶中的钙含量和pH值显著低于阴性组(P<0.05);阳性组牛只血清中的钾含量和MDA含量显著高于阴性组(P<0.05)。由此得出结论,在奶牛氧化应激的情况下,血液离子平衡发生变化、乳腺上皮细胞发生损伤,改变了乳腺上皮细胞对血液物质的吸收和代谢,导致牛奶中pH值降低,游离镁、钾的含量增加,从而降低了牛奶对酒精的稳定性。

基于GC-IMS分析比较不同类型原乳与发酵乳的挥发性物质成分

乳制品中的风味物质是衡量乳制品感官品质的重要指标。采用GC-IMS分析包括牛乳、牦牛乳、山羊乳、骆驼乳在内的不同类型原乳发酵前后的风味物质成分变化情况,同时对采集到的挥发性风味物质数据进行主成分分析。结果表明,牛乳、牦牛乳、山羊乳、骆驼乳原乳分别检测出包括酸类、酮类、醇类、酯类在内的41、43、41、38种挥发性物质。发酵后检测出酸类、烷烃类、酯类、酮类、醛类、醇类等200余种挥发性物质。酸类物质,如丙酸、庚酸等,酮类物质,如2-十一烷酮、2-十三烷酮、2-十五烷酮等,醇类和酯类物质的种类和含量在发酵前后都会有所变化。通过指纹图谱及主成分分析结果也表明不同乳发酵前后其风味物质分布差异明显不同的原因可能是酸类、酮类、酯类在种类和数量上的差异所导致。文章为发酵乳感官品质控制提供理论依据。

新西兰南岛生牛乳中硫氰酸根残留水平检测及影响因素分析

[目的]了解和掌握新西兰生牛乳中硫氰酸根的本底含量、分布情况及影响因素,为生牛乳硫氰酸根残留的风险评估和限量标准制定提供参考。[方法]从新西兰南岛选取50个牧场,于2022年8月—2023年5月,连续逐月采集生牛乳样品800份(6—7月为当地奶牛干奶期,未采集样品);利用离子色谱法检测生牛乳样品中硫氰酸根含量,计算检出率,分析检测结果分布情况;探讨不同采样月份和采样牧场对生牛乳样品中硫氰酸根含量的影响。[结果]800份生牛乳样品中,有798份检出硫氰酸根,检出率为99.75%;检出范围0~10.62 mg/kg,平均值为6.25 mg/kg,中位数为6.21 mg/kg,1.13%的样品硫氰酸根含量在0~2.00 mg/kg,36.62%的样品硫氰酸根含量在4.00~6.00 mg/kg,50.50%的样品硫氰酸根含量在6.00~8.00 mg/kg,仅有0.75%的样品硫氰酸根含量大于10.00 mg/kg。2022年9—11月采集的生牛乳样品中硫氰酸根含量呈逐月上升趋势,2022年12月—2023年5月采集的生牛乳样品中硫氰酸根含量总体呈逐月上升趋势;2023年1—5月采集的生牛乳样品中硫氰酸根含量高于2022年8—12月采集的生牛乳样品中硫氰酸根含量;2023年5月采集的生牛乳样品中硫氰酸根含量平均值最高,为7.02 mg/kg;2022年9月采集的生牛乳样品中硫氰酸根含量平均值最低,为2.95 mg/kg。随机选取的2家牧场2023年1—5月采集的生牛乳样品中硫氰酸根含量变化趋势与800份生牛乳样品中硫氰酸根含量同期变化趋势一致,并且2家牧场的生牛乳样品中硫氰酸根含量无显著(P>0.05)差异。[结论]新西兰南岛牧场生牛乳中普遍存在硫氰酸根残留,主要来源于本底,外源添加的可能性极低。当地生牛乳中硫氰酸根含量存在季节性变化。

婴配乳粉中2'-岩藻糖基乳糖和乳糖-N-新四糖含量离子色谱法检测

研究了离子色谱法同时测定婴配乳粉中2′-岩藻糖基乳糖和乳糖-N-新四糖的含量及影响因素。采用离子色谱柱分离,脉冲安培检测器检测和外标法定量分析等方法。通过对不同净化方式、酶解处理和洗脱条件等过程进行考察和优化,比较确定色谱条件和前处理条件对分离的影响,并就线性范围进行探讨。结果表明,优化后的方法线性关系良好,R^(2)>0.999;方法精密度好,相对标准偏差(n=7)<2.7%;方法准确度好,2′-岩藻糖基乳糖回收率为95.97%~103.38%,乳糖-N-新四糖回收率为100.09%~104.01%。该方法能对婴配乳粉中的2′-岩藻糖基乳糖和乳糖-N-新四糖同时测定,操作简单,具有良好的准确度和精密度,可为婴配乳粉质量监控方法提供参考。

高压酸水解-离子交换色谱法测定乳粉中的酵母β-葡聚糖

目的:采用高压酸水解-离子交换色谱法建立乳粉中酵母β-葡聚糖含量的分析方法。方法:先对乳粉中的酵母β-葡聚糖进行富集,富集得到的酵母β-葡聚糖利用高压酸水解成葡萄糖后利用离子色谱法检测分析,最后通过公式换算计算出酵母β-葡聚糖的含量。结果:葡萄糖在2~200 mg/L质量浓度范围内的线性关系良好,相关系数r为0.9998。酵母β-葡聚糖的定量限为11.1 mg/100 g。在20,50,100 mg/100 g加标水平下,酵母β-葡聚糖的加标回收率为81.5%~99.8%,相对标准偏差小于5%。结论:该方法简便高效、灵敏度高、准确性好,适用于乳粉中酵母β-葡聚糖的定量检测。

离子色谱法测定婴幼儿乳粉中低聚半乳糖含量

建立了一种准确测定婴幼儿配方乳粉中低聚半乳糖含量的离子色谱-脉冲安培分析方法。样品以水超声溶解提取,用乙腈沉降蛋白后经OnGuard^(TM)ⅡRP柱净化,经PA20离子色谱柱分离,脉冲安培检测器测定。用3-O-β-D-吡喃半乳糖基-D-吡喃葡萄糖标准品溶液来定性低聚半乳糖标准溶液中的低聚半乳糖二糖色谱峰,并以此峰作为定量峰,外标法定量。该方法前处理简单、快速,准确度高,稳定性好,可满足婴幼儿乳粉中低聚半乳糖含量的测定要求。

基于气相色谱-离子迁移谱法的不同地区驴乳粉挥发性风味物质指纹图谱分析

目的探究不同地区驴乳粉挥发性风味物质组成及差异。方法采用顶空气相色谱-离子迁移谱法(gas chromatography-ion mobility spectrometry,GC-IMS)对5种驴乳粉的挥发性风味物质进行分析。结果5种驴乳粉共鉴定出53种挥发性风味物质,主要包括醇类、醛类、酮类、酸类、酯类、萜烯类、呋喃类和含硫化合物等。喀什产驴乳粉中共鉴定出48种挥发性风味物质,哈密产两种驴乳粉均鉴定出47种挥发性风味物质,山东和昌吉产驴乳粉均鉴定出40种挥发性风味物质。2-甲基丙酸只在山东产驴乳粉中检出;丁酸乙酯只在昌吉和喀什产驴乳粉中检出;3-甲基-1-丁醇、1-戊醇二聚体和辛酸乙酯只在喀什产驴乳粉中检出,1-辛醛二聚体、丙酸丁酯、丁酸丁酯和γ-萜品烯只在哈密产驴乳粉中检出。通过GC-IMS指纹图谱可筛选出每个产地驴乳粉的特征风味区域,主成分分析可将5种驴乳粉很好地区分开。结论不同地区驴乳粉其挥发性风味物质种类和含量均存在一定差异。通过GC-IMS构建的指纹图谱可以直观地将不同驴乳粉特征风味区域表征出来,这一研究结果为不同地区驴乳粉风味品质评价和产地鉴别提供理论依据。

辣木籽凝乳酶的提取分离条件优化

为给辣木籽凝乳酶的开发利用提供理论依据,以脱脂辣木籽粉为原料,采用盐法提取、硫酸铵(AS)分级沉淀和离子交换色谱法提取分离凝乳酶。通过单因素试验和正交试验对辣木籽凝乳酶的盐法提取条件进行优化,采用单因素试验对离子交换色谱法分离纯化条件进行优化,并采用SDS-PAGE和RP-HPLC对分离得到的辣木籽凝乳酶的分子质量和纯度进行分析。结果表明:盐法提取的最佳条件为料液比1∶10、提取温度30℃、pH 7.15、NaCl浓度0.3 mol/L、提取时间0.5 h;在20%~40%AS饱和度下的沉淀蛋白凝乳活性最好且蛋白质总占有率达61.71%;离子交换色谱法的最佳分离条件为进样质量浓度30 mg/mL、流动相pH 5.15、流速1.68 mL/min、流动相组成为0.05 mol/L醋酸钠+0.05 mol/L氯化钠,在此条件下辣木籽凝乳酶的凝乳比活力值达到24 SU/mg;该凝乳酶的分子质量主要分布在35~45 kDa,纯度达到90%以上。采用该方法能有效提取分离辣木籽凝乳酶,且能很好地保持其凝乳活性。

液态乳中8种阴离子残留量的同时检测

目的:对液态乳中多种阴离子进行快速检测。方法:通过乙腈沉淀液态乳中的大分子蛋白质并提取多种阴离子,经C 18柱净化,利用Dionex IonPac AS19-HC离子色谱柱分离,氢氧化钾梯度洗脱,电导检测,采用离子色谱仪对液态乳中溴酸根、硫氰酸根、亚硝酸根、硝酸根、氯酸根、高氯酸根、磷酸根、碘离子8种常见阴离子进行检测。结果:8种阴离子在线性浓度范围内的相关系数为0.9990~0.9998,检出限为0.065~0.417 mg/kg,回收率为81.4%~102.0%,相对标准偏差为1.1%~6.7%(n=6)。结论:该方法操作简单、准确度和灵敏度高,可用于液态乳中多种阴离子残留量的同时检测。

基于Al^(3+)与ATP协同增敏荧光法快速检测牛奶中氧氟沙星

目的利用铝离子(aluminumions,Al^(3+))与三磷酸腺苷(adenosinetriphosphate,ATP)对氧氟沙星(ofloxacin,OFL)荧光的协同增强特性,建立一种灵敏、快速、准确地定量检测牛奶中OFL的方法。方法通过Al^(3+)与ATP协同增强OFL荧光强度对OFL进行定量检测,对荧光激发波长、pH、反应温度、反应时间等条件进行优化,并在实际样品牛奶中进行加标回收实验。结果Al^(3+)与ATP可协同增强OFL溶液荧光强度,并使荧光发射峰红移以实现对OFL选择性检测。在最优实验条件(pH 7.0、反应时间5 min和反应温度25℃)下,在0.1~100.0μmol/L范围内,OFL荧光强度与其浓度呈现良好的线性关系,其相关系数r^(2)为0.9973,检出限为4.48 nmol/L。在两种牛奶中的加标回收率分别为98.59%~102.48%和87.32%~104.29%,相对标准偏差小于5%。结论本方法具有操作简便、灵敏、快速等优点,并成功地用于测定牛奶中的OFL,具有良好的回收率,为牛奶中OFL的灵敏快速检测提供了一种可行的方法。

基于母乳生物标志物的产妇泌乳启动延迟预警模型构建与验证

目的构建基于母乳生物标志物的产妇泌乳启动延迟预警模型并评估其效能。方法选取486例产妇作为研究对象,按7∶3比例分为建模组340例和验证组146例,并将建模组产妇根据是否泌乳启动成功分为泌乳启动成功组255例和泌乳启动延迟组85例。采用Logistic回归分析明确产妇泌乳Ⅱ期启动延迟的影响因素。采用R软件构建预测产妇泌乳Ⅱ期启动延迟风险的列线图模型,通过受试者工作特征(ROC)曲线和校准曲线评估列线图模型的区分度和一致性。结果泌乳启动延迟组年龄31~40岁者占比、初产妇占比、剖宫产者占比和母乳中钠离子、蛋白质水平均高于泌乳启动成功组,母乳中乳糖、柠檬酸盐水平低于泌乳启动成功组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,母乳中钠离子、乳糖、柠檬酸盐水平是产妇泌乳Ⅱ期启动延迟的影响因素(P<0.05)。ROC曲线显示,列线图模型在建模组和验证组中预测泌乳Ⅱ期启动延迟的曲线下面积(AUC)均为0.998;Hosmer-Lemeshow拟合优度检验显示,列线图模型的校准曲线预测值与实际值基本一致(建模组χ^(2)=6.062,P=0.511;验证组χ^(2)=7.288,P=0.506)。结论基于母乳生物标志物乳糖、钠离子、柠檬酸盐构建的预测产妇泌乳Ⅱ期启动延迟风险的列线图模型,一致性和区分度均较好。

离子色谱法快速测定牛奶中硝酸盐的研究

目的:建立用离子色谱法测定牛奶中硝酸盐含量的方法。方法:样品用3 %乙酸和1mol/LKOH溶液脱去蛋白质和脂肪等有机物,再通过Sep PakC18小柱预处理后,进行离子色谱法测定,色谱柱为DIONEXIonpacAS14-4mm ,以3.5mMNa2 CO3/ 1.0mMNaHCO3为淋洗液,流速为1 2ml/min ,抑制电流:5 0mA ,电导检测。结果:该方法硝酸盐在2 μs量程档线性范围是0.1～1.0mg/L在10 μs量程档线性范围是1.0～15.0mg/L ,相关系数均大于0 999。最低检出限为0.0 0 13mg/L ;回收率在98%～10.6 %之间;样品测定相对标准偏差为3.3 7%。结论:该方法操作方便,准确,重现性好。

牛乳体细胞数与乳中离子含量相关性的研究

对呼和浩特市郊区一牧场30头荷斯坦乳牛进行6个月跟踪采样,共得427个有效样本。根据体细胞数的高低将乳样分成五个不同的组,分别测定样本的氯、钾、钠、游离钙、总钙含量。结果表明:牛乳中氯、钠的含量与SCC呈显著的正相关(p＜0．001);游离钙含量与SCC有一定的负相关(p＜0．05);总钙、钾离子的含量与SCC的相关性不显著(p＞0．05)。乳中体细胞数和乳中氯、钾、钠、游离钙、总钙含量与月份没有相关性(p＞0．05)。氯与总钙有显著的正相关性(p＜0．001);乳中氯离子与钠离子之间;总钙与游离钙之间有一定的正相关(p＜0．05);钠离子与总钙之间有显著的正相关(p＜0．01)。其余离子之间相关性均不显著(p＞0．05)。

离子色谱法测定奶粉中胆碱含量方法的研究

目的：丰富奶粉中胆碱含量测定的方法,同时对其他同类产品中胆碱含量的测定提供参考。方法样品经盐酸水解,水解液五倍稀释后采用离子色谱仪进行测定。结果离子色谱法对胆碱含量测定的最低检测限为2 mg/kg,相关系数达到0.9998,添加回收率为88.7%~102.5%,平行样标准偏差为0.72~4.15 mg/100 g,相对标准偏差为0.66%~3.30%。结论该方法操作简单,灵敏度高,选择性强,能克服传统方法中繁琐、准确度低等缺陷和不足。

酒精阳性乳患牛血清及乳清离子和微量元素分析

通过检测不同酒精阳性乳血清和乳清中Ca2+、Mg2+、Na+、K+浓度及Cu、Zn、Fe、Mn含量,探讨其与酒精阳性乳的关系,结果显示,酒精阳性乳患牛体内的微量元素Zn、Cu和Fe代谢紊乱,会导致抗氧化酶的活性降低、毒性产物含量升高而使自由基代谢平衡紊乱,且Zn、Cu含量的缺乏会降低机体的免疫力;患牛乳中过多的Ca2+、Mg2+中和酪蛋白微胶粒表面的电荷,导致酪蛋白稳定性下降,致使乳胶体聚集能力增强;这些都易导致酒精阳性乳的形成。

离子色谱法同时测定奶粉中亚硝酸根、硝酸根、氯离子和磷酸根

使用透析袋将溶解后的奶粉透析,用乙醚萃取,过C18柱分离后使用4.5 mmol.L-1Na2CO3--4.5 mmol.L-1NaHCO3作为淋洗液,用离子色谱法同时分离和测定了奶粉中亚硝酸根、硝酸根、氯离子和磷酸根。动态透析平衡时间只要1 h左右,四离子的离子色谱峰形较好,共存离子的干扰较小。峰面积与Cl-,PO43-,NO3-及NO2-4种阴离子浓度之间呈线性关系的相关系数依次为0.9982,0.9999,0.9997及0.9867,检出限(S/N=3)依次为9.36,15.0,0.1及0.02 mg.kg-1,测得4种离子测定结果的RSD值(n=7)分别为1.3%,2.6%,2.2%及7.3%。以3种奶粉为基体作加标回收试验,所得回收率均在92%以上。

SDS-PAGE电泳法对4种鲜奶蛋白质组分的分析研究

目的采用SDS-PAGE电泳分析4种鲜奶蛋白质组分的差异。方法将4种鲜奶在10 000r/min离心30min,取上清液,冷冻干燥。冻干粉离子交换层析,洗脱速度为0.5 mL/min,测定280nm处洗脱液的OD值,收集洗脱液,透析,冻干。洗脱液冻干粉进行非连续SDS-PAGE凝胶电泳,浓缩胶3.9%,分离胶为12%。结果根据SDS-PAGE电泳图谱及查鲜奶蛋白组学表可知鲜马奶乳清电泳出了39种蛋白质,其中9种已知蛋白质分别为钙激活氯离子通道调节剂、钙离子ATP酶通道蛋白抗体、葡萄糖调节蛋白、鞘磷脂磷酸二脂酶、伸长率因子1α、β-酪蛋白(亚型2)、热休克蛋白90-α、乳铁传递蛋白和乳脂肪球-EGF因子8剪接变异体;鲜牛奶乳清电泳出了47种蛋白质,其中17种已知蛋白质分别为血清铁传递蛋白、乳铁传递蛋白、α-甘露糖苷酶、钙激活氯离子通道调节剂、钙离子ATP酶通道蛋白抗体、葡萄糖调节蛋白、乳脂肪球-EGF因子8剪接变异体、Hsc70-相互作用蛋白样蛋白、内毒素受体(LPS-受体)、膜联蛋白、Lys-63-特定去泛素化酶BRCC-36、细胞酰基甘油-3-磷酸酰基转移酶、N-乙酰多肽、果糖二磷酸醛缩酶、纤维蛋白原α链、热休克蛋白90-α和蛋白质二硫键异构酶(衣被δ亚单位);鲜驴奶乳清电泳出了42种蛋白质,其中15种已知蛋白质分别为纤维粘连蛋白、α-甘露糖苷酶、钙离子ATP酶通道蛋白抗体、纤维蛋白α链、热休克蛋白90-α、血清铁传递蛋白、葡萄糖调节蛋白、β-氨基己糖苷酶、蛋白质二硫键异构酶(衣被δ亚单位)、伸长率因子1α、乳脂肪球-EGF因子8剪接变异体、膜联蛋白、Lys-63-特定去泛素化酶BRCC-36、细胞酰基甘油-3-磷酸酰基转移酶和β酪蛋白(亚型2);鲜驼奶乳清电泳出了43种蛋白质,其中15种已知蛋白质分别为纤维粘连蛋白、α-甘露糖苷酶、热休克蛋白90-α、血清铁传递蛋白、鞘磷脂磷酸二脂酶、伸长率因子1α、乳脂肪球-EGF因子8剪接变异体、α-ATP合酶亚基假定ATP依赖RNA解旋酶、细胞酰基甘油-3-磷酸酰基转移酶、14-3-3蛋白-ε-样蛋白质、纤维蛋白原β链、蛋白质二硫键异构酶(衣被δ亚单位)、特异性伴侣1样蛋白、纤维蛋白原α链和葡萄糖调节蛋白。结论 SDS-PAGE电泳分析法对4种奶类中蛋白质的分析方法可靠,操作简单,重复性好,分辨率高。4种鲜奶中除了含有相似的蛋白质,还具有不同的功能性蛋白。

毛细管电泳-电容耦合非接触电导法检测牛奶中金属离子和三聚氰胺

采用毛细管电泳-电容耦合非接触电导法检测牛奶中金属离子和三聚氰胺的含量。以20mmol/L乳酸溶液为背景电解质,采用毛细管(50μm×50cm,有效长度40cm),电导检测器的操作参数为180kHz×8V,对标准品和牛奶中K+,Ca2+和Na+的检出限为0.009～0.040μg/g,对三聚氰胺的检出限为0.10～0.20μg/g。本方法仪器简单,可以对牛奶中三聚氰胺及无光学活性的无机离子进行快速准确的检测。

离子色谱法测定牛乳中硫氰酸盐含量的不确定度评估

目的建立离子色谱法测定牛乳中硫氰酸盐含量的不确定度评估方法,找出不确定度的主要影响因素。方法根据《测量不确定度评定与表示》(JJF 1059.1-2012),从样品重复测量、样品前处理、标准曲线回归、标准溶液配制以及方法回收率几个方面分别讨论各不确定度分量。通过合成各不确定度分量得到方法的不确定度。结果 8次测定同一牛乳样品中硫氰酸盐含量均值为1.699 mg/kg,其扩展不确定度为0.063 mg/kg,k=2。结论标准系列溶液的配制过程对扩展不确定度的影响较大,是不确定度的主要影响因素。