lncRNA MAGI2-AS3靶向调控miR-130a-5p对柯萨奇病毒B3诱导的大鼠心肌细胞H9C2损伤的影响

目的:探讨lncRNA MAGI2-AS3靶向miR-130a-5p调控柯萨奇病毒B3(CVB3)诱导的大鼠心肌细胞H9C2损伤的分子机制。方法:对照组,用不含药物、病毒的DMEM处理H9C2细胞48 h。CVB3组,用含有100倍半数组织培养感染剂量CVB3的DMEM处理H9C2细胞48 h(感染)。CVB3+sh-NC组,H9C2细胞转染sh-NC慢病毒后感染CVB3。CVB3+sh-MAGI2-AS3组,H9C2细胞转染sh-MAGI2-AS3慢病毒后感染CVB3。CVB3+miR-NC组,H9C2细胞转染miR-NC后感染CVB3。CVB3+miR-130a-5p组,H9C2细胞转染miR-130a-5p mimic后感染CVB3。sh-MAGI2-AS3+抗miR-NC组,sh-MAGI2-AS3、抗miR-NC共转染H9C2细胞后感染CVB3。sh-MAGI2-AS3+抗miR-130a-5p组,sh-MAGI2-AS3、抗miR-130a-5p共转染H9C2细胞后感染CVB3。qRT-PCR检测MAGI2-AS3、miR-130a-5p相对表达量;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率;ELISA法检测TNF-α、IL-6分泌水平;双荧光素酶报告实验验证MAGI2-AS3与miR-130a-5p靶向关系;Western blot检测Bcl-2、Cleaved-Caspase-3蛋白相对表达量。结果:与对照组比较,CVB3组MAGI2-AS3相对表达量、细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平及TNF-α、IL-6分泌水平升高,而miR-130a-5p相对表达量、Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05)。分别与CVB3+sh-NC组、CVB3+miR-NC组相比,CVB3+sh-MAGI2-AS3组、CVB3+miR-130a-5p组细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平及TNF-α、IL-6分泌水平降低,Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.05)。MAGI2-AS3可靶向调控miR-130a-5p表达。与sh-MAGI2-AS3+抗miR-NC组比较,sh-MAGI2-AS3+抗miR-130a-5p组细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平及TNF-α、IL-6分泌水平升高,Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:沉默MAGI2-AS3可通过上调miR-130a-5p而抑制细胞凋亡、炎症反应,进而减轻CVB3诱导的H9C2细胞损伤。

miRNA-130a-3p通过调控NF-κB信号通路影响损伤心肌细胞

目的探讨miRNA-130a-3p在LPS诱导的心肌细胞损伤中的作用及可能机制。方法H9C2心肌细胞分为4组,即正常对照组、LPS模型组、miRNA阴性对照组、miRNA-130a-3p mimics组,利用RT-qPCR检测miRNA-130a-3p mRNA表达水平,CCK-8检测细胞活性,ELISA检测培养液中TNF-α、IL-6、IL-1β含量,Western blot检测NF-κBp65、IκBα、Bax、Bcl-2、Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平。结果RT-qPCR结果显示LPS模型细胞中miRNA-130a-3p mRNA水平显著低于正常对照组;与正常对照组相比较,LPS组细胞活性显著降低,而与LPS组相比较,miRNA-130a-3p mimics组细胞活性显著升高;与正常对照组相比较,LPS组细胞培养液中TNF-α、IL-6、IL-1β含量显著升高,而与LPS组相比较,miRNA-130a-3p mimics组细胞培养液中TNF-α、IL-6、IL-1β含量显著降低;与正常对照组相比较,LPS组细胞中NF-κBp65、Bax、Cleaved-Caspase-3蛋白表达量显著升高,IκBα与Bcl-2蛋白表达量显著降低,而与LPS组相比较,miRNA-130a-3p mimics组细胞中NF-κBp65、Bax及Cleaved-Caspase-3蛋白表达量显著降低,IκBα与Bcl-2蛋白的表达量显著升高。结论miRNA-130a-3p可通过抑制NF-κB信号通路激活,抑制细胞凋亡,提高细胞活性,减少炎性因子释放,从而减轻LPS诱导的心肌细胞损伤。

miR-130a/b在消化系统疾病中的研究进展

自1993年在线虫中首次发现微小RNA(microRNA,miRNA)之后,人们对其的发生、功能、作用方式等认识逐渐完善,随着方法学的进步及实验仪器的完善,其研究热度逐步提升。miR-130家族在肿瘤方面研究甚广,但尚未在消化系统疾病方面做出详细回顾,本文旨在以作用靶点及通路为重点阐述miR-130家族在消化系统疾病中的作用。

糖尿病合并代谢综合征病人血清miR-126a、miR-130b水平及与骨质疏松的关系

目的:探讨2型糖尿病合并代谢综合征(MS)病人血清miRNA-126a、miRNA-130b水平及其与骨质疏松的关系。方法:选取162例2型糖尿病病人为研究对象,其中72例单纯糖尿病病人为对照组,90例糖尿病合并MS病人为观察组,同时根据是否发生骨质疏松将2型糖尿病合并MS病人分为骨质疏松组(52例)与非骨质疏松组(38例)。实时定量聚合酶链反应法检测病人血清miR-126a、miR-130b相对表达量;检测各项实验室指标及骨质疏松症相关因子水平。Pearson法分析骨质疏松病人血清miR-126a、miR-130b表达水平与骨质疏松症相关因子的相关性;多因素logistic回归分析法分析影响骨质疏松发生的相关因素。结果:观察组血清miR-126a、miR-130b表达水平均高于对照组(P<0.05);骨质疏松组病人体质量指数(BMI)、血红蛋白(Hb)、骨钙素、骨密度(BMD)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)均低于非骨质疏松组(P<0.05),而总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血清Ⅰ型前胶原氨基端肽原(P1NP)及血清miR-126a、miR-130b表达水平均升高(P<0.05);miR-126a、miR-130b均与BMI、Hb、骨钙素、BMD、IGF-1呈明显负相关关系(P<0.01),而与TC、TG、HDL-C、HbAlc、PINP呈明显正相关关系(P<0.01);logistic分析显示BMI、Hb、IGF-1及miR-126a、miR-130b表达水平均为骨质疏松发生的影响因素(P<0.05~P<0.01)。结论:2型糖尿病合并MS病人血清miR-126a、miR-130b表达水平升高可促进骨质疏松发生,并可能作为预测骨质疏松发生的重要辅助指标。

非小细胞肺癌患者血清miR-130b、miR-937-5p表达及其诊断价值分析

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清miR-130b、miR-937-5p表达水平及其临床诊断价值。方法选取2020年11月—2022年11月收治的NSCLC 100例作为NSCLC组,同期体检健康者100例作为对照组,采用RT-qPCR法检测miR-130b、miR-937-5p表达水平;采用Pearson法分析NSCLC患者血清miR-130b与miR-937-5p表达水平的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析NSCLC患者血清miR-130b、miR-937-5p检测对NSCLC的诊断价值;行Cox回归分析探讨NSCLC发生的危险因素。结果与对照组相比,NSCLC组血清miR-130b、miR-937-5p表达水平升高(P<0.01)。相关性分析显示,NSCLC患者血清miR-130b与miR-937-5p表达水平呈正相关(r=0.672,P<0.01)。淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、低分化NSCLC患者血清miR-130b、miR-937-5p表达水平显著高于淋巴结未转移、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、中高分化NSCLC患者(P<0.05,P<0.01)。血清miR-130b、miR-937-5p二者联合诊断NSCLC的曲线下面积高于单独诊断(Z=20.819,P<0.001;Z=4.328,P=0.037)。多因素Cox回归分析显示,分化程度及血清miR-130b、miR-937-5p表达水平是影响NSCLC发生的危险因素(P<0.01)。结论NSCLC患者血清miR-130b、miR-937-5p表达水平均升高,二者联合诊断NSCLC有较高的价值。

miR-130b在食管鳞癌中的表达及对食管鳞癌细胞增殖和迁移的影响

目的:检测微小RNA-130b(miR-130b)在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中的表达并探讨其对ESCC细胞增殖、迁移的影响.方法:microRNA(miRNA)芯片筛选ESCC组织中异常表达的miRNAs,TaqMan MGB探针法定量PCR检测19例ESCC组织及配对癌旁组织标本中miR-130b的表达;通过脂质体转染模拟物miR-130b mimics(miR-130bm)促进ESCC细胞Eca109中miR-130b的表达,转染抑制物miR-130b inhibitor(miR-130bi)抑制Eca109细胞中miR-130b的表达;进一步采用CCK-8法和Transwell迁移实验检测ESCC细胞增殖、迁移的变化;生物学信息预测miR-130b的靶基因,双荧光素酶报告基因验证其靶向作用;采用SYBR Green定量PCR和Western blot检测靶基因mRNA和蛋白表达.结果:miR-130b在ESCC组织中的表达明显高于癌旁组织(P<0.01);转染miR-130bm可有效增加ESCC细胞Eca109中miR-130b的表达,进而促进Eca109细胞的增殖和迁移,平均迁移细胞数明显多于对照(112.9±2.4vs54.3±1.8,P<0.01);转染miR-130bi则降低细胞中miR-130b的表达;进而抑制细胞的增殖和迁移,平均迁移细胞数较对照明显减少(33.9±2.3vs56.2±1.9,P<0.01).miR-130b可作用于PTEN3'非翻译区抑制其表达.miR-130b可负向调控PTEN蛋白表达,并促进Akt磷酸化,但对PTENmRNA表达无明显影响.结论:miR-130b在ESCC组织中表达上调,增加其表达促进ESCC细胞Eca109增殖和迁移,降低其表达则抑制Eca109细胞增殖和迁移;miR-130b可在转录后水平负向调控PTEN的表达并促进Akt磷酸化.提示miR-130b有望成为ESCC治疗的新靶点.

miRNA-130b在骨肉瘤组织中的表达及其对骨肉瘤细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨骨肉瘤组织中miRNA-130b的表达及其对骨肉瘤细胞增殖、细胞周期以及凋亡的影响。方法用Real-time PCR法检测48例骨肉瘤患者肿瘤组织与癌旁组织中miRNA-130b的表达水平。用脂质体法将miRNA-130b inhibitor瞬时转染入U2人骨肉瘤细胞,实时定量RT-PCR检测U2细胞miRNA-130b的表达,CCK8增殖实验检测各组细胞的增殖情况,流式细胞仪检测各组细胞周期及细胞凋亡率,荧光素酶基因报告实验检测miRNA-130b与RUNX3之间的调控机制、荧光素酶的相对活性和转染后RUNX3及miRNA-130b的表达水平。结果骨肉瘤组织中miRNA-130b的表达明显高于癌旁组织,转染miRNA-130b inhibitor后U2细胞miRNA-130b的表达水平明显受抑制,人骨肉瘤细胞U2转染miRNA-130b inhibitor的细胞增殖速度明显下降,细胞周期阻滞在G0/G1期,凋亡率增高,细胞中RUNX3蛋白及m RNA表达水平明显升高;miRNA-130b显著抑制野生型RUNX3-3’UTR表达载体的荧光素酶活性;抑制miRNA-130b表达后,RUNX3表达明显升高;抑制RUNX3表达后,miRNA-130的表达无明显变化。结论 miRNA-130b在骨肉瘤中呈高表达水平,抑制miRNA-130b可能通过调控RUNX3抑制骨肉瘤细胞的增殖,并促进细胞凋亡。

miR-130b在肝细胞癌中的表达及临床病理意义

目的探讨miR-130b在人肝细胞癌(HCC)中的表达、与临床病理特征的关系及可能机制。方法用实时定量PCR(qRT-PCR)检测miR-130b在86例HCC及癌旁组织、不同肝癌细胞系的表达;免疫组织化学染色检测miR-130b不同表达水平的HCC组织中上皮钙黏素(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的表达情况;qRT-PCR检测miR-130b在LO2人正常永生化肝细胞及Hep G2、Hep3B、SMMC-7721、Hu7肝癌细胞系的表达水平;应用人工合成的miR-130b抑制物转染SMMC-7721细胞,TranswellTM实验检测SMMC-7721细胞侵袭能力变化;应用人工合成的miR-130b抑制物及PPARγ小干扰RNA(siRNA)转染SMMC-7721人肝癌细胞,qRT-PCR检测癌细胞中miR-130b、PPARγ、E-cadherin、vimentin的mRNA水平,Western blot法检测癌细胞中PPARγ、E-cadherin、vimentin的蛋白水平。结果 miR-130b在HCC组织中表达水平显著高于对应癌旁组织;肝癌组织中miR-130b异常表达与门静脉侵犯、原发肿瘤分级、肿瘤TNM分期显著相关;miR-130b在不同肝癌细胞系中表达均高于LO2细胞;miR-130b高表达组PPARγ及E-cadherin蛋白水平显著低于miR-130低表达组,而vimentin水平显著高于miR-130b低表达组,相关性分析结果显示肝癌组织中miR-130b与PPARγ蛋白、E-cadherin蛋白水平呈显著负相关,与vimentin蛋白水平呈显著正相关;抑制miR-130b水平,可上调PPARγ蛋白的水平,E-cadherin蛋白的表达显著增加,而vimentin蛋白表达显著降低,SMMC-7721细胞的侵袭能力降低。PPARγsiRNA可部分逆转miR-130b抑制物对SMMC-7721细胞的作用。结论 miR-130b在HCC组织中表达上调并与HCC恶性临床病理特征有关,miR-130b可能通过抑制PPARγ表达及诱导上皮间质转化促进肝癌细胞侵袭。

MicroRNA-181b和microRNA-130a在冠状动脉粥样硬化性心脏病患者血浆中的表达及临床意义

目的探讨micro RNA-181b(mi R-181b)和micro RNA-130a(mi R-130a)在冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)患者血浆中的表达及临床意义。方法选取106例冠心病患者和40例健康者作为对照组,收集临床资料,行冠状动脉造影检查及Gensini评分,利用实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测冠心病患者和对照组血浆中mi R-181b和mi R-130a的表达,利用受试者工作特征曲线(ROC曲线)对血浆中mi R-181b和mi R-130a的相对表达量在评估冠心病患者病程进展中的价值进行分析。结果冠心病患者血浆中mi R-181b和mi R-130a相对表达量与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),冠心病患者血浆中mi R-181b相对表达量低于对照组,而mi R-130a相对表达量则高于对照组,冠心病患者中,中重度组患者血浆mi R-181b相对表达量低于轻度组,而mi R-130a相对表达量则高于轻度组;Pearson相关分析显示,冠心病患者血浆中mi R-181b相对表达量均与Gensini积分、脂蛋白a(Lp-a)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)呈负相关(r=-0.504、-0.382和-0.415,P<0.05),血浆中mi R-130a相对表达量均与Gensini积分、Lpa和hs-CRP呈正相关(r=0.586、0.335和0.394,P<0.05);ROC曲线分析显示,冠心病患者血浆中mi R-181b相对表达量在评估患者病程进展时,曲线下面积0.871(95%CI:0.807,0.936),敏感性75.0%,特异性82.3%,血浆中mi R-130a相对表达量在评估患者病程进展时,曲线下面积0.931(95%CI:0.887,0.976),敏感性93.2%,特异性81.2%。结论冠心病患者血浆中mi R-181b表达水平降低,而mi R-130a表达水平升高,且均与患者病情严重程度有关,可作为评估患者病情进展的指标。

miR-130a/b与肿瘤关系的研究进展

目的:总结国内外miR-130a和miR-130b在肿瘤学领域研究的现状。方法 :应用PubMed和中国知网数据库检索系统,以"microRNA、miR-130a、miR-130b和肿瘤"等为关键词,联合检索1993-01—2013-12的相关文献。纳入标准:1)microRNA在肿瘤研究中的新进展;2)miR-130a;3)miR-130b;4)肿瘤。根据纳入标准,符合分析的文献47篇。结果:miR-130a和miR-130b是高度同源的microRNA,通过干扰靶mRNA转录或降解靶基因来调控基因表达,它们在不同的肿瘤中差异表达,并在多种肿瘤细胞的增殖、凋亡、转移和肿瘤耐药方面发挥着重要作用。结论:miR-130a/b在肿瘤发生发展中发挥促癌或抑癌的作用,其在肿瘤耐药方面的研究可以为多重耐药的患者提供新的视角。

婴儿血管瘤组织中微小RNA-130a、B淋巴细胞瘤-2的表达观察

目的观察婴儿血管瘤(Infantile hemangioma,IH)组织中微小RNA(micro RNA,miR)-130a、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的表达变化。方法 33例IH患者,其中增殖期17例、退化期16例,留取IH组织、瘤旁正常皮肤组织。采用荧光实时定量PCR法检测IH组织、瘤旁正常皮肤组织中miR-130a和Bcl-2 mRNA,采用SP免疫组织化学法检测IH组织、瘤旁正常皮肤组织BCl-2蛋白,分析IH组织miRNA-130a、Bcl-2 mRNA表达的相关性。结果 IH组织、瘤旁正常皮肤组织中miR-130a相对表达量分别为3.71±1.23、 0.87±0.21,退化期、增殖期IH组织miRNA-130a相对表达量分别为3.68±1.40 、3.72±1.63;IH组织及瘤旁正常皮肤组织Bcl-2 mRNA相对表达量分别为1.213±0.272 、0.614±0.22,退化期、增殖期IH组织Bcl-2 mRNA相对表达量比较分别为3.68±1.40 、 3.72 ±1.63,与瘤旁正常皮肤组织比较,退化期、增殖期IH组织miRNA-130a及Bcl-2 mRNA相对表达量均升高( P 均<0.05)。与瘤旁正常皮肤组织比较,IH组织Bcl-2蛋白光密度值和阳性面积率均升高( P 均<0.05);与退化期IH组织、瘤旁正常皮肤组织比较,增殖期IH组织Bcl-2蛋白光密度值和阳性面积率均升高( P 均<0.05)。IH组织中miR-130a 与Bcl-2 mRNA的表达呈正相关( r =0.451, P =0.008)。结论IH组织miR-130a、Bcl-2 mRNA及蛋白表达均升高,增殖期IH组织Bcl-2蛋白表达高于退化期。miR-130a、Bcl-2可能协同促进IH的发生、发展。

食管鳞癌患者血浆miR-424、miR-92a及miR-130b水平变化及意义

目的探讨食管鳞癌(ESCC)患者血浆miR-424、miR-92a及miR-130b水平变化及意义。方法采用qRT-PCR法检测43例食管鳞癌患者及43例同期体检健康者血浆miR-424、miR-92a、miR-130b,分析血浆miR-424、miR-92a、miR-130b水平与食管鳞癌临床病理特征间的关系,应用受试者工作特征(ROC)曲线计算血浆miR-424、miR-92a及miR-130b用于食管鳞癌诊断的特异度及灵敏度,评价其在食管鳞癌中的诊断价值。结果食管鳞癌患者血浆miR-424、miR-92a及miR-130b水平均明显高于体检健康者,差异均有统计学意义(P均<0.05)。血浆miR-92a、miR-130b表达均与食管鳞癌患者的病理分级、淋巴结转移和TNM分期相关,此外,低分化患者血浆miR-130b表达较高分化者明显上调。血浆miR-424、miR-92a及miR-130b单独用于食管鳞癌诊断的特异度分别为72.09%、51.84%、90.7%,灵敏度分别为62.79%、88.37%、81.4%,曲线下面积(AUC)分别为0.703、0.720、0.862。结论食管鳞癌患者血浆miR-424、miR-92a及miR-130b水平升高,检测患者血浆miR-92a及miR-130b水平有助于食管鳞癌的诊断及病情评估。

microRNA-130b的表达对靶向治疗肺腺癌患者预后的影响

目的探讨microRNA-130b(miR-130b)表达与经靶向治疗的肺腺癌患者预后的关系。方法收集2013年1月至2014年1月间于大连大学附属新华医院胸外科行靶向治疗的肺腺癌患者278例,其中男113例,女165例;年龄40~82(60.8±10.3)岁。有肺癌家族史者41例,吸烟史者71例。TNMⅢ期者115例,Ⅳ期者163例。靶向治疗前4 h内抽取空腹静脉血,采用定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-130b的表达,并随访其生存情况。采用Kaplan-Meier并Log-rank检验对经靶向治疗肺腺癌患者的生存情况进行单因素分析,采用多因素Cox回归模型分析经靶向治疗肺腺癌患者死亡的危险因素。结果278例患者靶向治疗前miR-130b表达水平为11.3±2.1,治疗后miR-130b表达水平为9.3±1.8,差异有统计学意义(t=10.388,P<0.001)。miR-130b预测靶向治疗肺腺癌患者死亡的最佳临界点为9.93;灵敏度为82.2%,特异度为66.2%;ROC曲线下面积(AUC)为0.76。将患者分为miR-130b高表达组(miR-130b≥9.93,145例)和低表达组(miR-130b<9.93,114例),miR-130b高表达组有肿瘤家族史、吸烟、低肿瘤分化程度以及高TNM分期患者比例高于低表达组。本组259例患者获得随访,中位随访时间为42个月,死亡191例。miR-130b高表达组、低表达组患者中位生存时间分别为36和48个月,miR-130b低表达组患者的生存情况优于高表达组(Log-rankχ^2=28.341,P<0.001)。多因素Cox回归分析显示,肺癌家族史、吸烟史、较低分化程度、较高TNM分期、miR-130b高表达是经靶向治疗肺腺癌患者死亡的独立危险因素。结论miR-130b表达上调的肺腺癌患者靶向治疗预后更差,其可能作为肺腺癌患者靶向治疗预后的生物标志物之一。

130t BOF-LF-150mm×150mm CC流程控制高碳钢SWRH82B氮含量的工艺实践

0.79%~0.86%C SWRH82B高碳钢的生产流程为130 t顶底复吹转炉-LF-8流150 mm×150 mm坯连铸工艺。通过转炉吹炼时采用较高泡沫渣高度,终点枪位较其他钢种高100~150mm,转炉全程底吹氩0.02~0.05 m^3/(t·min),圆流出钢,LJ精炼时快速成渣,合适的吹氩量20~30 m^3/h,连铸全程保护等工艺措施,有效控制钢中氮含量,205炉氮含量分析表明,钢中氮含量为13.7×10^(-6)~37.4×10^(-6),平均氮含量为23.3×10^(-6)。

新型螯合剂B-130提高难选氧化铜矿浮选指标应用研究

通过小型对比试验、工业试验和工业应用,证实了新型螯合剂B-130在难选氧化铜矿石选矿中的应用效果,该药剂提高难选氧化铜矿石铜回收率10.53%。

MiR-130b调控巨噬细胞极化的分子机制研究

目的:研究miR-130b对巨噬细胞极化的调控作用及机制。方法:选用人白血病单核THP-1细胞,通过PMA使其诱导为Mφ巨噬细胞,然后加入LPS诱导为M1或加入IL-4诱导为M2巨噬细胞;流式细胞仪检测标记物比例;应用Real-time PCR和Western blot方法检测特异性标志物和目的蛋白的mRNA和蛋白表达水平;ELISA法检测特异性分泌因子的表达水平。结果:与Mφ巨噬细胞比较,LPS诱导的巨噬细胞中CD86高表达,TNFα和IL-1β表达和分泌水平均增多,符合M1巨噬细胞特征;IL-4诱导的巨噬细胞中CD206的阳性表达率升高,CCL22、CCL17表达和分泌水平均增多,符合M2巨噬细胞特征;M1细胞中miR-130b表达明显高于M2细胞(P<0.05);miR-130b过表达后的M2细胞中,CCL22 mRNA和蛋白表达减少,IL-1βmRNA和蛋白表达增多,PPAR-γ的蛋白表达降低。结论:MiR-130b可能通过靶向抑制PPAR-γ表达调节巨噬细胞极化。

miR-130b促进人胃癌BGC823细胞增殖的研究

目的观察靶向干扰miR-130ba对人胃癌细胞系BGC823的增殖作用及相关机制。方法培养人胃癌细胞系BGC823,分成正常组、对照组、抑制组,采用脂质体2000分别转染PBS、miR-130b错义链(50n M)、miR-130b抑制剂(50n M),使用real time PCR方法测定转染后miR-130b水平,CCK8法检测转染后胃癌细胞增殖,Western blot检测转染后增殖细胞核抗原蛋白水平。结果转染48 h后,抑制组胃癌细胞的miR-130b mRNA明显低于正常组、对照组(P<0.01),同时抑制组胃癌细胞CCK8 OD及增殖细胞核抗原蛋白水平均低于正常组、对照组(P<0.05)。结论 miRNA-130b可以促进胃癌细胞BGC823的增殖和增殖细胞核抗原蛋白表达。

miR-130b对胃癌细胞BGC823迁移和侵袭能力的影响

目的探讨microRNA-130b(miR-130b)对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响及作用机制。方法体外培养BGC-823胃癌细胞,通过Lipofectamine2000试剂盒将培养基、miR-130b错义链、miR-130b抑制剂,分别转染进入正常组、对照组、抑制组肿瘤细胞株中。应用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐实验法(MTT)检测转染后胃癌细胞存活率增殖能力变化,划痕实验(wound-healing assay)和侵袭实验(Transwell invasion chamber assay)检测肿瘤细胞迁移、侵袭能力变化,western blot实验检测肿瘤细胞迁移、侵袭相关蛋白分子(Slug、matrix metalloproteinase-9(MMP-9))表达变化情况。结果BGC-823胃癌细胞转染后,与正常组和对照组比较,抑制组细胞增殖能力、迁移和侵袭能力均明显降低(P<0.01)。同时,抑制组细胞迁移、侵袭能力相关蛋白表达水平较正常组和对照组降低(P<0.05)。结论靶向抑制miR-130b可以降低BGC-823胃癌细胞的增值、迁移和侵袭能力。

骨肉瘤组织中miR-494、miR-130b下游靶基因的探究

目的:研究骨肉瘤组织中miR-494、miR-130b的表达量并探究下游靶基因。方法:收集在延安大学附属医院手术切除的骨肉瘤组织,另取同期关节置换术后的正常骨组织作为对照;抽提miRNA后测定miR-494、miR-130b的表达量,抽提RNA后测定增殖基因、侵袭基因的mRNA表达量,抽提蛋白后测定血管新生分子的蛋白含量。结果:骨肉瘤组织中miR-494、Runx3、ELL2、p16、RECK、TIMP1的表达量以及TSSC3的蛋白含量显著低于正常骨组织,miR-130b、β-catenin、CyclinD1、Sox9、ADAMTS18、CatD、STMN1的表达量以及CEACAM6、VEGF、Ang-2的蛋白含量显著高于正常骨组织;骨肉瘤组织中miR-494与Runx3、ELL2、p16、RECK、TIMP1、TSSC3呈正相关,与β-catenin、CyclinD1、Sox9、ADAMTS18、CatD、STMN1、CEACAM6、VEGF、Ang-2呈负相关,miR-130b与Runx3、ELL2、p16、RECK、TIMP1、TSSC3呈负相关,与β-catenin、CyclinD1、Sox9、ADAMTS18、CatD、STMN1、CEACAM6、VEGF、Ang-2呈正相关。结论:骨肉瘤组织中miR-494的低表达以及miR-130b的高表达能够调控增殖、侵袭基因的表达及血管新生分子的生成。