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阿法替尼联合Mithramycin A对人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡及基因表达的影响 被引量:1
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作者 黄子凌 黄兰姗 +1 位作者 沈思乔 冯振博 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期638-643,共6页
目的 :观察阿法替尼(afatinib)联合Mithramycin A(MIT)对人肝癌Hep G2细胞增殖、凋亡的作用以及相关因子表达的影响。方法:将afatinib与MIT单独或联合作用于肝癌Hep G2细胞,采用MTT法测定药物对细胞生长的抑制率,并运用倒置显微镜观察... 目的 :观察阿法替尼(afatinib)联合Mithramycin A(MIT)对人肝癌Hep G2细胞增殖、凋亡的作用以及相关因子表达的影响。方法:将afatinib与MIT单独或联合作用于肝癌Hep G2细胞,采用MTT法测定药物对细胞生长的抑制率,并运用倒置显微镜观察药物作用后细胞形态学变化;以流式细胞技术测定药物对细胞周期和凋亡的影响;以实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)定量测定细胞内表皮生长因子受体(EGFR)、Sp1、Sp3以及增殖、凋亡相关因子Cyclin-D1、Cyclin-E2、Bcl-2、Caspase3、Caspase9和p53的表达变化。结果 :afatinib与MIT均能有效抑制肝癌Hep G2细胞的生长,并且呈现时间依赖性,两药联合作用能明显增加抑制率(P均<0.05);联合用药48 h后,可诱导Hep G2细胞产生G0/G1期阻滞并诱发凋亡,抑制作用及凋亡率均较单药组增高(P均<0.05);另外,给药72 h后,单药组均出现不同程度的Cyclin-D1、Cyclin-E2、Bcl-2 m RNA表达量下降,并伴有Caspase3基因上调。单用afatinib组同时出现Caspase9和p53的表达上调,MIT组检测到EGFR、Sp1和Sp3的同步减少,联合用药组以上改变较单药组明显(P均<0.05)。结论:afatinib联合MIT能有效抑制肝癌Hep G2细胞增殖、促进凋亡,这可能与药物作用后Cyclin-D1、Cyclin-E2、Bcl-2下调以及Caspase3、Caspase9和p53的表达上调相关。此项研究可能为以EGFR为中心的肝癌联合治疗提供新方向。 展开更多
关键词 肝细胞癌 HEPG2细胞 阿法替尼 mithramycin A 表皮生长因子受体 SP1
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Mithramycin A对肝癌细胞Huh-7增殖的影响 被引量:1
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作者 杨丽娟 李宁 +3 位作者 周翡 罗金红 高勇 王理伟 《同济大学学报(医学版)》 CAS 2009年第5期32-35,39,共5页
目的研究抗肿瘤抗生素光辉霉素(Mithramycin A,MIT)对人肝癌细胞Huh-7的作用。方法CCK-8比色法观察MIT对Huh-7细胞的生长抑制作用,Hoechst 33342/PI双荧光染色分析细胞凋亡,流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡率。结果MIT可抑制Huh-7细胞的生长... 目的研究抗肿瘤抗生素光辉霉素(Mithramycin A,MIT)对人肝癌细胞Huh-7的作用。方法CCK-8比色法观察MIT对Huh-7细胞的生长抑制作用,Hoechst 33342/PI双荧光染色分析细胞凋亡,流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡率。结果MIT可抑制Huh-7细胞的生长,半数抑制浓度(IC50)为60.12 nmol.L-1。荧光显微镜观察可见细胞凋亡特征性改变;浓度为5×10-2μmol.L-1的MIT作用72 h后,可明显诱导Huh-7细胞凋亡,流式细胞仪检测肿瘤细胞出现典型亚二倍体凋亡小峰。结论MIT对Huh-7细胞有明显的诱导凋亡和生长抑制作用,具有浓度、时间依赖性。 展开更多
关键词 HUH-7细胞 光辉霉素A 凋亡
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Mithramycin inhibits intimal hyperplasia of vein grafts after transplantation of the jugular vein to the abdomainal aorta in rats
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作者 王斌 王新文 段志泉 《Chinese Journal of Traumatology》 CAS 2000年第3期172-175,共4页
Objective: The intimal hyperplasia caused by migration and proliferation of the smooth muscle cells play a most important role in the stenosis of the vein grafts. This study is to explore how the C myc oncogene and it... Objective: The intimal hyperplasia caused by migration and proliferation of the smooth muscle cells play a most important role in the stenosis of the vein grafts. This study is to explore how the C myc oncogene and its protein contribute to the intimal hyperplasia after the jugular vein is transplanted to the abdominal aorta and to assess the effect of Mithramycin on the intimal hyperplasia. Methods: In 60 Wistar rats, a 0.8 cm segment of the right jugular vein graft was interposed at the level of the abdominal aorta. The experiment group received Mithramycin (150 μg/kg IP) 1 h before and after the operation. The control group received normal saline, specimens of vein graft at 2 and 6 h postoperatively were subjected respectively to in situ hybridization. The vein grafts 4 weeks after operation were perfusion fixed. The specimens were stained with hemotoxylin eosin and the computer morphologic analysis system was used to evaluate the degree of intimal thickening. Immunohistochemistry studies of muscle specific α actin, C myc protein and 5 Bromodeoxyuridine were performed. Results: The areas of neointimal and the ratios of neointimal to medial area were significantly smaller and lower in the Mithramycin treated than in the control rats (P< 0.05 ). The 5 Brdu labeling rate between the two groups were also different significantly (P< 0.05 ). Muscle specific α actin showed that the smooth muscle cells formed the most area of myointimal hyperplasia. Steady state C myc mRNA level was increased from 2 h to 6 h postoperatively. The positive rate of the placebo treated group was higher significantly than that of the Mithramycin treated group (P< 0.05 ). Conclusions: Mithramycin may effectively inhibits transcription of C myc in proliferating vascular smooth muscle cells and could be useful in the prevention of restenosis after vascularization. These results support the hypothesis that systemic administration of Mithramycin might immediately prevent intimal proliferation. 展开更多
关键词 Intimal hyperplasia Genes C mye In situ hybridization mithramycin
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BRD7基因调控区的克隆与功能研究 被引量:3
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作者 刘华英 罗晓敏 +7 位作者 牛朝霞 周艳宏 周鸣 彭聪 向波 李伟松 李小玲 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第6期531-539,共9页
BRD7基因是采用cDNA代表性差异分析法克隆得到的一个新的Bromodomain基因(GenBank登录号AF152604).它在鼻咽癌细胞和组织中表达明显下调,过表达BRD7基因能部分逆转鼻咽癌细胞的恶性表型.为了揭示BRD7基因在鼻咽癌细胞和组织中表达下调... BRD7基因是采用cDNA代表性差异分析法克隆得到的一个新的Bromodomain基因(GenBank登录号AF152604).它在鼻咽癌细胞和组织中表达明显下调,过表达BRD7基因能部分逆转鼻咽癌细胞的恶性表型.为了揭示BRD7基因在鼻咽癌细胞和组织中表达下调的分子机制,利用生物信息学技术已预测出其启动子区.荧光素酶活性检测结果表明该区域具有强启动子活性;转录因子Sp1特异性地结合于BRD7该启动子区;Sp1特异性阻断剂mithramycinA能明显地抑制BRD7启动子的活性和BRD7基因的表达. 展开更多
关键词 BRD7基因 启动子 启动子活性 sp1转录因子 mithramycinA
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Gene environment interaction in periphery and brain converge to modulate behavioral outcomes:Insights from the SP1 transient early in life interference rat model 被引量:1
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作者 Eyal Asor Dorit Ben-Shachar 《World Journal of Psychiatry》 SCIE 2016年第3期294-302,共9页
It is generally assumed that behavior results from an interaction between susceptible genes and environmental stimuli during critical life stages.The present article reviews the main theoretical and practical concepts... It is generally assumed that behavior results from an interaction between susceptible genes and environmental stimuli during critical life stages.The present article reviews the main theoretical and practical concepts in the research of gene environment interaction,emphasizing the need for models simulating real life complexity.We review a novel approach to study gene environment interaction in which a brief post-natal interference with the expression of multiple genes,by hindering the activity of the ubiquitous transcription factor specificity protein 1(Sp1) is followed by later-in-life exposure of rats to stress.Finally,this review discusses the role of peripheral processes in behavioral responses,with the Sp1 model as one example demonstrating how specific behavioral patterns are linked to modulations in both peripheral and central physiological processes.We suggest that models,which take into account the tripartite reciprocal interaction between the central nervous system,peripheral systems and environmental stimuli will advance our understanding of the complexity of behavior. 展开更多
关键词 Gene-environmental interaction SPECIFICITY protein 1 mithramycin Stress Animal-model Essential amino acids TRYPTOPHAN Insulin
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光辉霉素对胃癌细胞周期、凋亡的影响及可能机制
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作者 何灏澜 李倩 +2 位作者 姜晗 王晓 陆明 《临床肿瘤学杂志》 CAS 北大核心 2019年第2期133-136,共4页
目的探讨光辉霉素(MTM)对胃癌细胞周期、凋亡的影响及可能的机制。方法体外培养胃癌BGC-823、SGC-7901、MKN-28、AGS和正常胃黏膜GES-1细胞,采用实时荧光定量(QPCR)和Western blotting检测SP1 mRNA和蛋白表达。0、25、50、100 nmol/L MT... 目的探讨光辉霉素(MTM)对胃癌细胞周期、凋亡的影响及可能的机制。方法体外培养胃癌BGC-823、SGC-7901、MKN-28、AGS和正常胃黏膜GES-1细胞,采用实时荧光定量(QPCR)和Western blotting检测SP1 mRNA和蛋白表达。0、25、50、100 nmol/L MTM处理BGC-823细胞24 h,QPCR和Western blotting检测SP1、p53、p21 mRNA和蛋白表达。流式细胞术检测50 nmol/L MTM处理BGC-823细胞周期和凋亡的变化。结果 QPCR检测胃癌BGC-823、SGC-7901、MKN-28、AGS细胞系中SP1 mRNA表达量为6. 12±0. 15,5. 42±0. 24,3. 33±0. 21,3. 01±0. 12,均显著高于GES-1细胞(P<0. 05); Western blotting检测SP1蛋白表达与mRNA表达一致。0、25、50、100 nmol/L MTM处理BGC-823细胞,SP1 mRNA和蛋白表达逐渐降低,p53、p21 mRNA和蛋白表达逐渐升高。50 nmol/L MTM组SP1表达量最低(mRNA:0. 48±0. 12;蛋白:0. 28±0. 09),p53表达量最高(mRNA:5. 37±0. 45;蛋白:1. 29±0. 20); 100 nmol/L MTM组p21表达量最高(mRNA:4. 92±0. 53;蛋白:0. 86±0. 15);与0 nmol/L MTM组比较,差异具有统计学意义(P<0. 05)。流式细胞术结果显示,50 nmol/L MTM组BGC-823细胞G0/G1比例为(63. 71±2. 14)%和凋亡率为(24. 68±1. 09)%,均明显高于0 nmol/L MTM组[(57. 39±1. 83)%和(9. 23±0. 75)%],差异具有统计学意义(P<0. 05)。结论 MTM通过降低SP1、上调p53、p21表达水平来增加胃癌细胞周期阻滞,诱导凋亡。 展开更多
关键词 胃癌 SP1 光辉霉素 P53 P21
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肺癌细胞株中EPS8表达下降对顺铂化疗敏感性的影响
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作者 杜海坚 李伟峰 +2 位作者 孙青峰 王元亨 黄文杰 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第15期15-21,共7页
目的探究肺癌细胞株中表皮生长因子受体通路底物8(EPS8)表达下降对顺铂化疗敏感性的影响。方法脂质体转染法将EPS8沉默后并通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测EPS8在各细胞系的沉默效率。采用Caspase-3/7细胞凋亡实验检测,5μmo... 目的探究肺癌细胞株中表皮生长因子受体通路底物8(EPS8)表达下降对顺铂化疗敏感性的影响。方法脂质体转染法将EPS8沉默后并通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测EPS8在各细胞系的沉默效率。采用Caspase-3/7细胞凋亡实验检测,5μmol顺铂对淋巴母细胞样细胞系(LCLs)和A549肺癌细胞凋亡的影响。Alamar Blue细胞生长抑制实验中采用0.01μmol/L光神霉素A作为EPS8抑制剂单用及联用不同浓度顺铂,Alamar Blue细胞生长抑制实验检测其对癌和非癌细胞系生长抑制的影响。结果与对照组比较,LCLs细胞系中EPS8的沉默导致顺铂干预时细胞存活率升高7.9%,凋亡率下降8.7%。与此相反,顺铂干预导致肺癌细胞存活率下降20.6%。光神霉素A在LCLs细胞系中能够降低EPS8的表达,并与对照组比较,非癌细胞系LCLs在顺铂干预时具有更低Caspase-3/7活性,凋亡率降低。在5种非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系中,光神霉素A同样能够导致EPS8表达下降。与LCLs细胞系比较,光神霉素A的干预能够使4种NSCLC细胞和膀胱癌细胞HTB9对顺铂的敏感性增加(P<0.05),但NSCLC中存在EGFR突变的H1975细胞对顺铂的敏感性并未出现统计学改变(P>0.05)。结论通过核糖核酸(RNA)干扰或者光神霉素A将EPS8表达抑制后,肿瘤细胞对顺铂的敏感性升高,而正常细胞LCLs对其敏感性却出现下降。对EPS8分子机制的进一步研究有望其成为抗肿瘤治疗的新靶点。 展开更多
关键词 顺铂 光神霉素A 敏感性 淋巴母细胞样细胞 非小细胞肺癌
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普卡霉素产生菌SIPI91-81的分类与鉴定
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作者 姜健 陈瑞英 龚炳永 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期155-157,共3页
从上海郊区土壤中分离到一株链霉菌,编号SIPI91-81,其代谢产物具有抗肿瘤活性。经鉴别该活性物质与普卡霉素为同一物质。该菌株在形态培养特征和生理生化特征上与已知的暗黑橄榄链霉菌相似,但又有一定的差别,故定名为暗黑... 从上海郊区土壤中分离到一株链霉菌,编号SIPI91-81,其代谢产物具有抗肿瘤活性。经鉴别该活性物质与普卡霉素为同一物质。该菌株在形态培养特征和生理生化特征上与已知的暗黑橄榄链霉菌相似,但又有一定的差别,故定名为暗黑橄榄链霉菌上海变种(StreptomycesatroolivaceusshanghaiensisSIPI91-81)。 展开更多
关键词 普卡霉素 暗黑橄榄链霉菌 上海变种 抗肿瘤物质
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Sp1在人肺癌细胞中对survivin表达的调控 被引量:2
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作者 张晓洁 陈余清 李伟 《中国肿瘤》 CAS 2009年第4期319-321,共3页
[目的]探讨Sp1转录因子在人肺腺癌细胞株A549中对survivin基因表达影响。[方法]电泳迁移率分析(EMSA)检测A549细胞核蛋白与标记的survivin启动子序列在有、无mithramycin时的结合情况。用不同浓度mithramycin处理A549细胞,RT-PCR检测sur... [目的]探讨Sp1转录因子在人肺腺癌细胞株A549中对survivin基因表达影响。[方法]电泳迁移率分析(EMSA)检测A549细胞核蛋白与标记的survivin启动子序列在有、无mithramycin时的结合情况。用不同浓度mithramycin处理A549细胞,RT-PCR检测survivin mRNA的表达。[结果]标记的survivin启动子序列-126bp~-106bp与核蛋白作用,出现DNA-核蛋白结合条带,经mithramycin预处理的相同序列出现减弱的DNA-核蛋白结合条带;序列-186bp~-166bp与核蛋白作用后无相应条带。mithramycin使A549细胞survivin mRNA表达显著下降。[结论]survivin启动子-121bp~-116bp处存在Sp1结合位点,mithramycin抑制Sp1与此位点的结合;-178bp~-175bp处可能不存在Sp1结合位点。mithramycin抑制survivin mRNA表达,抑制作用具有浓度依赖性。 展开更多
关键词 肺肿瘤 Sp1转录因子 SURVIVIN mithramycin A549细胞
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光神霉素A抑制人肺腺癌A549/DDP细胞MRP1基因表达 被引量:2
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作者 李怀永 邵淑丽 +5 位作者 张伟伟 杨希婷 刘锐 陈闯 车家祥 徐君懿 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期326-330,共5页
该研究旨在探讨Sp1抑制剂光神霉素A(Mithramycin A)对人肺腺癌A549/DDP细胞MRP1表达的影响。不同浓度光神霉素A作用A549/DDP细胞48 h后,采用MTT法检测细胞存活率,Real time RT-PCR检测Sp1和MRP1基因表达水平,Western blot检测Sp1和MRP1... 该研究旨在探讨Sp1抑制剂光神霉素A(Mithramycin A)对人肺腺癌A549/DDP细胞MRP1表达的影响。不同浓度光神霉素A作用A549/DDP细胞48 h后,采用MTT法检测细胞存活率,Real time RT-PCR检测Sp1和MRP1基因表达水平,Western blot检测Sp1和MRP1蛋白表达水平。结果显示,300 nmol/L光神霉素A作用A549/DDP细胞48 h后Sp1和MRP1 mRNA表达水平分别降低31.22%和85.44%,Sp1和MRP1蛋白表达水平分别降低53.27%和40.42%。提示光神霉素A能够通过抑制Sp1表达,从而抑制MRP1表达。 展开更多
关键词 肺癌 MRP1 SP1 光神霉素A
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光辉霉素A对人胃癌BGC823细胞增殖、凋亡、迁移的影响及其机制 被引量:2
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作者 马西强 刘庆彤 +4 位作者 谢江柳 王永翔 王洋 陈永华 师水生 《中国临床研究》 CAS 2014年第9期1049-1052,共4页
目的观察光辉霉素A(MIT)对人低分化胃癌BGC823细胞增殖、凋亡、迁移的作用,以及对转录因子Sp1和乙酰肝素酶(heparanase,Hpa)表达的影响,并探讨其可能的机制。方法采用不同浓度的MIT作用于胃癌BGC823细胞,以Cell Counting Kit-8(CCK8)法... 目的观察光辉霉素A(MIT)对人低分化胃癌BGC823细胞增殖、凋亡、迁移的作用,以及对转录因子Sp1和乙酰肝素酶(heparanase,Hpa)表达的影响,并探讨其可能的机制。方法采用不同浓度的MIT作用于胃癌BGC823细胞,以Cell Counting Kit-8(CCK8)法测定对细胞增殖的影响;以流式细胞仪测定对细胞凋亡的影响;以细胞划痕法观察对细胞迁移能力的影响;以实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法定量测定细胞内Sp1和Hpa mRNA表达的变化。结果 MIT抑制胃癌BGC823细胞增殖的效应呈浓度和时间依赖性(P均<0.05);不同浓度(0、0.15、0.30、0.60μmol/L)的MIT作用于胃癌BGC823细胞24 h后,细胞的凋亡率随药物浓度的增加而增加,分别为(2.100±0.985)、(13.533±0.777)、(21.533±0.874)、(27.500±0.964)%,即MIT促进胃癌BGC823细胞的凋亡呈浓度依赖性(P<0.05);MIT对胃癌BGC823细胞迁移的抑制作用具有量效和时效性;胃癌BGC823细胞Sp1和Hpa mRNA表达量随MIT浓度的增加而降低(P均<0.05)。结论 MIT对胃癌BGC823细胞增殖、凋亡、迁移影响可能通过抑制Sp1、Hpa的表达而实现。 展开更多
关键词 胃肿瘤 光辉霉素A 转录因子SP1 乙酰肝素酶 增殖 凋亡 迁移 转移
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