用cox1基因片段的PCR鉴别亚洲带绦虫和牛带绦虫

目的:用cox1基因片段的PCR技术对亚洲带绦虫和牛带绦虫的快速鉴别。方法:用亚洲带绦虫和牛带绦虫线粒体cox1基因片段的特异性引物以及带绦虫cox1基因片段的通用引物,对贵州省都匀地区和从江地区的带绦虫虫卵和节片DNA进行常规PCR扩增,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测和核酸序列测定,并用NC-BI Blast对扩增产物的核酸序列与NCBI数据库中带绦虫的cox1基因进行比对。结果:5株都匀带绦虫DNA样品经亚洲带绦虫cox1基因片段的特异性引物PCR,均扩增出约260 bp的产物,PCR产物的核酸序列与NCBI数据库中亚洲带绦虫线粒体cox1基因片段的同源性为100%;2株从江带绦虫的DNA样品用亚洲带绦虫特异性引物和牛带绦虫特异性引物的PCR均未见扩增产物,而通用引物PCR则扩增出约1 000 bp的产物,核酸序列与NCBI数据库中牛带绦虫线粒体cox1基因片段的同源性为99%,在牛带绦虫特异性引物的结合位点存在一个碱基差异。结论:常规PCR扩增特异性的cox1基因片段可快速鉴定亚洲带绦虫;从江牛带绦虫株的cox1基因特异性片段部分存在变异,导致与特异性引物结合能力的差异,可采用cox1基因通用引物PCR结合测序进行鉴定。

贵州黔南5条带绦虫的分类研究

目的用形态学方法和分子生物学方法对贵州黔南地区5条带绦虫进行分类学鉴定。方法在观察虫体头节、孕节等形态的基础上,采用带绦虫线粒体细胞色素C氧化酶亚单位1(cy-tochrome c oxidase subunit 1,cox1)基因片段的特异性引物对虫体DNA进行PCR扩增,产物经琼脂糖凝胶电泳分析。结果 5条带绦虫头节近方形,有4个吸盘,无顶突和小钩,孕节子宫每侧分支数为18～24支。以Tasia为引物的PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳,均出现约260bp的条带,而以Tsag引物均未见扩增产物。结论经鉴定,所采集的4株都匀绦虫和1株独山绦虫均为亚洲带绦虫,提示贵州都匀、独山地区为亚洲带绦虫流行区。