MnSOD基因Val16Ala多态性与前列腺癌骨转移患者易感性的关系

目的探讨MnSOD基因Val16Ala多态性与前列腺癌骨转移患者易感性的关系。方法选择94例前列腺癌患者为研究对象。根据患者是否发生骨转移进行分组,将前列腺癌发生骨转移的患者作为骨转移组,将前列腺癌未发生骨转移的患者作为前列腺癌组。统计分析骨转移组与前列腺癌组患者临床资料(年龄、病程、TNM分期、体质量指数等)、两组MnSOD基因Val16Ala遗传平衡检验、MnSOD基因Val16Ala多态性分布以及携带不同基因型前列腺癌骨转移患者临床特征。结果骨转移组40例,前列腺癌54例。两组年龄、病程、TNM分期、体质量指数等临床资料比较,差异无统计学意义(P>0.05)。骨转移组和前列腺癌组MnSOD基因Val/Val、Val/Ala和Ala/Ala基因型实际频数和理论频数分布比较,差异无统计学意义(P>0.05)。骨转移组MnSOD基因Ala/Ala基因型、Ala等位基因频率高于前列腺癌组,Val/Val基因型频率、Val等位基因频率低于前列腺癌组(P<0.05)。MnSOD基因Val16Ala基因型与前列腺癌骨转移患者PSA、年龄以及Gleason评分无关(P>0.05);TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期患者Ala/Ala比例75.00%(18/24)显著高于Ⅰ~Ⅱ期患者(P<0.05)。结论MnSOD基因Val16Ala多态性与前列腺癌骨转移患者易感性存在关系,可能存在促进前列腺癌发生骨转移的作用。

柽柳MnSOD基因的克隆及功能验证

根据已克隆得到的柽柳MnSOD基因片段,采用RACE技术从柽柳中获得MnSOD的cDNA全长序列。该基因全长为1087bp。其中,5'非编码区40bp,3'非编码区333bp,开放读码框(ORF)长699bp,编码232个氨基酸。分子量为26KD,等电点为7.10。该MnSOD氨基酸序列与拟南芥MnSOD序列同源性最高为83%,从12个物种的序列比对可以看出MnSOD氨基酸序列保守性较高。该序列的Genbank注册号为AY573576(基因)和AAS77885(蛋白)。将MnSOD基因与酵母表达载体pYES2连接,并进一步转化到酵母基因组中。对重组酵母INVSc1(pYES2-SOD)和对照INVSc1(pYES2)进行干旱、高温胁迫实验。结果表明:重组酵母的抗干旱、高温能力明显高于对照,证实了来源于柽柳的MnSOD基因具有抗干旱和耐高温能力。

柽柳MnSOD基因(英文)

在环境胁迫下,植物体内活性氧(ROS)的大量积累会对其本身产生毒害作用。SOD酶在清除这些活性氧化酶机制中发挥关键作用。大量研究表明,MnSOD可有效增强转基因植物抵抗氧化胁迫的能力。我们从抗逆性较强的木本植物紫杆柽柳中克隆到一个新的MnSOD基因,并将该全长基因在GenBank上注册,其登录号分别为AY573576(基因序列)和AAS77885(氨基酸序列)。这将为研究木本植物的抗逆机理和该酶在抗逆基因工程中的应用奠定基础。

山新杨遗传转化体系的优化及转MnSOD基因植株的鉴定

为建立农杆菌介导的山新杨高效遗传转化体系,对MnSOD基因导入山新杨的遗传转化体系进行了优化,获得的较优转化体系如下：菌液浓度OD600=0.1,浸染2~5 min,共培养时加入200μmol/L乙酰丁香酮,脱菌时加入3 mg/L的AgNO3;对部分抗性植株经PCR及Northern杂交检测,证明MnSOD基因已经整合到山新杨基因组中并能够在转录水平上表达。

MnSOD基因对疾病进展的影响

MnSOD基因是铁锰氧化物歧化酶家族的成员,是生物体内重要的氧自由基清除剂。具有抗氧化抗肿瘤的作用,其基因的表达量与序列对于各疾病具有重要的意义。通过研究控制其基因的序列与表达量可达到疾病的预防,诊断,治疗,提高预后。

银杏锰型超氧化物歧化酶GbMnSOD基因的克隆与表达

利用RACE技术首次从银杏中克隆到锰型超氧化物歧化酶基因(GbMnSOD)的cDNA全长。GbMnSOD的cDNA全长965bp(GenBank accession number:EF633506)。生物信息学分析GbMnSOD cDNA序列含有一个681bp最大读码框,编码一个226氨基酸多肽链,通过软件预测分子量为25.5kD,等电点为8.97。三维结构预测结果显示,GbMnSOD含有12个α螺旋和3个β折叠构成一个篮子状的活性中心。GbMnSOD氨基酸序列与其它植物的MnSOD具有很高的相似性。进化树分析结果表明GbMnSOD和其他物种的MnSOD源自于相同的祖先。Southern杂交显示,GbMnSOD属于一个小的多基因家族。Northern杂交表明GbMnSOD在银杏的根、茎、叶和果中都有表达,在叶中的表达量最高,GbMnSOD的转录受到ABA、IAA、蔗糖、甘露醇、NaCl和低温的诱导。

特异启动子调控的MDR1和MnSOD基因对骨髓的选择性保护作用

目的探讨特异保护骨髓细胞免受抗癌药物及射线损害的新途径。方法 构建了由APN骨髓特异性启动子调控的耐药、耐辐射基因的逆转录病毒载体,导入骨髓母细胞及癌细胞中,用细胞存活实验对耐药耐辐射性能进行观察。分离小鼠骨髓细胞,经转染基因后,再输回到预先用射线处理以破坏骨髓系统的同种受体小鼠体内。经化疗药物或射线处理后,不同时间采血,计算白细胞数,观察在药物或射线照射后导入耐药或耐辐射基因对造血细胞的保护作用。结果 导入MDR1基因的KGla细胞对秋水仙素、足叶乙甙、长春新碱、阿霉素及紫杉醇与对照组相比,各提高了10.6,10.4,11.2,4.2和14.2倍。导入由APN启动子驱动的MnSOD基因,使KGla细胞比对照组对射线(10 Gy)的耐受性提高3.7倍。相反,导入以上两个基因后,肝癌细胞BEL7402的化、放疗耐受性未见明显变化。体内实验表明,转染了MDR1和MnSOD基因的小鼠血液中,白细胞数量明显高于对照组(P<0.01)。结论体外由APN骨髓启动子调控的MDR1和MnSOD基因能特异性地保护骨髓细胞,而对肿瘤细胞无明显影响。体内,在用药物或射线处理动物时能重建造血功能。此研究为肿瘤患者在接受化、放疗时特异性保护骨髓系统,提供了新的思路和依据。

毛白杨PtoMnSOD基因克隆及生物信息学分析

为了揭示毛白杨锰超氧化物歧化酶基因PtoMnSOD在植物抗逆中的功能。本研究通过RT-PCR方法获取毛白杨PtoMnSOD基因序列,并对该基因及其编码蛋白进行生物信息学分析。结果显示:PtoMnSOD基因开放阅读框(ORF)为699 bp,编码232个氨基酸,具有PF00081和PF02777两个保守结构域,属于MnSOD亚家族。其编码的蛋白含有20个磷酸化位点,是无跨膜结构、无信号肽且定位于线粒体的不稳定亲水性蛋白。同源序列比对显示,不同物种的MnSOD氨基酸序列具有很强的保守性。研究结果为进一步开展毛白杨锰超氧化物歧化酶基因PtoMnSOD的功能研究奠定了理论基础。

基于MnSOD9Ala16Val基因多态性的缺血性脑卒中发病风险预测模型的构建研究

目的探讨MnSOD9Ala16Val基因多态性与缺血性脑卒中(IS)相关性并构建风险预测模型。方法纳入2018年6月至2019年6月四川省广安市人民医院行健康体检人群,根据是否诊断为IS,分为IS组与非IS组,每组各50例,收集其一般人口学资料、实验室检查指标及MnSOD9Ala16Val基因型等临床资料。采用二元Logistic回归分析环境暴露因素、MnSOD9Ala16Val基因多态性与IS易感性的相关性,并构建回归预测模型,通过ROC曲线对模型进行评价。结果单因素分析表明,年龄、吸烟、糖尿病、高血压、其他血管疾病、空腹血糖(FBG)及MnSOD9Ala16Val基因多态性,两组间比较差异有统计学意义(χ^(2)=41.558、7.250、5.005、4.006、9.458、5.005、12.148,P<0.05)。二元Logistic回归分析表明,年龄、糖尿病、MnSOD9Ala16Val基因多态性与IS发病风险相关,且VV基因型的IS发病风险为AV或AA基因型的10.666倍[OR(95%CI)=10.666(2.557~44.502),P<0.01]。联合预测因子Y=年龄(≥65岁=1,<65岁=0)+0.63×糖尿病(是=1,否=0)+0.65×MnSOD9Ala16Val基因多态性(VV=1,AV或AA=0),ROC曲线下面积(AUC)为0.90,灵敏度为0.80,特异度为0.88,最佳界值为0.83。结论MnSOD9Ala16Val基因型与IS发病风险相关,基于MnSOD9Ala16Val基因多态性的联合预测因子对IS发病风险具有较好的临床诊断价值。

锰超氧化物歧化酶基因V(16)A多态性的种族差异及与糖尿病肾病的关系

目的:探讨锰超氧化物歧化酶(MnSOD)基因V(16)A多态性的种族差异及与糖尿病肾病(DN)的关系.方法:在中国昆明地区汉族人中对187例2型糖尿病患者(其中正常白蛋白尿即DN0组50例,微量白蛋白尿DN1组64例,大量白蛋白尿即DN2组73例)和97例健康对照者的MnSOD基因V(16)A多态性进行检测,并比较不同种族中该位点基因型和等位基因分布及频率.结果:(1)中国昆明地区汉族人中存在MnSOD基因V(16)A多态性;(2)与日本人群、俄罗斯人群相比其基因型和等位基因频都存在显著性差异,中国和日本人群以VV型为主,俄罗斯人群以AA和AV型为主;(3)DN组(DN1+DN2)VV基因型和V等位基因频率显著高于不伴肾病的DN0组(分别为χ2=6·42和5·08,P<0·05),Logistic回归分析表明VV基因型相对于VA+AA基因型是DN发生的遗传危险因素.结论:MnSODV(16)A多态性分布存在种族异质性,在中国昆明汉族人2型糖尿病患者中MnSOD基因V(16)A多态性与DN发生相关.不同种族人群MnSODV(16)A多态性分布的差异,可能是亚裔人群比白种人群2型糖尿病患者DN发病率高的原因之一.

PCR-RFLP方法检测锰超氧化物歧化酶基因V(16)A多态性的实验条件研究

目的:确定PCR-RFLP技术检测锰超氧化物歧化酶基因(MnSOD)V(16)A多态性的最适实验条件.方法:对影响MnSOD基因PCR反应以及用限制性内切酶BsawI切割主要因素进行了系统研究.结果:最适退火温度为55℃;最适引物浓度为0.25μmol/L;最适Mg2+浓度为1.5 mmol/L;最适dNTP浓度为0.20 mmol/L;以0.6 U为最适Taq酶量.酶切体系为15μL体系中加8μL产物用2 U的酶消化,为后续研究奠定了实验基础.

PCR-RFLP方法检测锰超氧化物歧化酶基因V(16)A多态性的实验条件研究(摘要)

目的为确定PCR-RFLP技术检测锰超氧化物歧化酶基因（MnSOD）V（16）A多态性的最适实验条件,对影响PCR的主要因素进行了研究.结果最适变性温度为95℃;最适退火温度为55℃；最适引物浓度为0．25μmol／L；最适Mg^2＋浓度为1．5mmol／L；最适dNTP浓度为0．20mmol／L；最适反应体系为25μL，以0．6U为最适Taq酶量．酶切体系为15μL体系中加8μL产物用2U的酶消化．为后续研究奠定了实验基础．

三种肿瘤易感性相关基因在韩国人中的多态性分析

目的调查疾病易感性相关的髓过氧化酶(MPO)、人类8-羟基鸟嘌呤糖苷酶(hOGG1)、锰超氧化物歧化酶(MnSOD)基因多态性在韩国人群中的分布状况。方法采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术分别分析300名韩国健康男女大学生的MPO基因启动子区-463bp位点、hOGG1基因第7外显子第1245位碱基C/G、MnSOD基因1183位点T/C的单核苷酸多态性—M-4,计算基因型和基因频率。结果 MPO基因型频率为G/G型80.3%、G/A型19.0%、A/A型0.7%,基因频率为G 0.898、A 0.102。hOGG1基因型频率为Ser/Ser型24.7%、Ser/Cys型45.0%、Cys/Cys型30.3%,基因频率为Ser 0.472、Cys 0.528。MnSOD基因型频率为Val/Val型77.0%、Val/Ala型21.3%、Ala/Ala型1.7%,基因频率为Val 0.877、Ala 0.123。结论韩国人的疾病易感相关基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律且与我国人口较为接近。

繁殖和高温对栉孔扇贝抗氧化能力的影响

本研究以栉孔扇贝(Chlamys farreri)为对象,通过分析CuZnSOD和MnSOD基因表达水平的变化,探讨繁殖和高温对扇贝抗氧化能力的影响。研究显示:CuZnSOD和MnSOD在栉孔扇贝各组织中广泛表达,2种SOD的表达水平在不同组织间均差异显著(P<0.05)。在性腺中CuZnSOD的表达水平显著低于在鳃和肾脏中的表达水平(P<0.01),在肝胰腺中MnSOD的表达水平显著高于在鳃、性腺、闭壳肌和肾脏中的表达水平(P<0.001)。单因素方差分析显示:繁殖后,CuZnSOD的表达水平在6种组织中均显著降低(P<0.05),MnSOD的表达水平仅在鳃和肾脏中显著下降(P<0.05);经过1个月的恢复期及再次繁殖后,2种SOD的表达水平与繁殖后相比均未呈现显著差异。高温胁迫实验表明:30℃胁迫12.5h,扇贝死亡率达到62.28%;此时,CuZnSOD的表达水平在鳃、性腺、肾脏及闭壳肌中显著下降,MnSOD的表达水平在外套膜、鳃和肾脏中显著下降。结果显示:繁殖和高温均导致扇贝多个组织中CuZnSOD和MnSOD的表达水平受到不同程度的影响,其中,鳃和肾脏中2种SOD的表达水平在繁殖和高温胁迫后均显著下降,表明繁殖和高温严重影响了这2种组织的抗氧化能力。研究结果将为揭示海洋双壳类动物夏季大规模死亡的原因提供参考。

肉鸡心肌细胞中核转录因子Sp-1和AP-2及其结合序列研究

试验采用21日龄肉鸡的心肌组织作为研究对象用于抽提核蛋白,用蛋白质印记法和电泳迁移率变动分析法研究心肌细胞中与MnSOD基因转录相关的Sp-1和AP-2核转录因子及其结合序列。结果表明,在肉鸡心肌细胞的核蛋白中存有与MnSOD基因转录调控相关的核转录因子Sp-1和AP-2,且能与MnSOD基因启动子区特异性结合位点结合,其中在-79～-58有一个与人和大鼠相同的Sp-1结合位点核心序列(5'-GGGGCGGG-3'),在鸡MnSOD基因启动子区中AP-2结合位点核心序列与现有文献中报道的人和大鼠以及一些病毒AP-2结合位点核心序列不同,分别为位于-34～-14(5'-GGCGCAGGC-3')和-338～-319(5'-CCCAAGGTC-3')。上述结果提示,肉鸡心肌细胞中MnSOD基因的转录调控可能与核转录因子Sp-1和AP-2与MnSOD基因启动子区的特异性结合密切相关。