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大鼠抑癌基因Mob1a的克隆和体外表达 被引量:1
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作者 谈毅城 陈锡峰 +1 位作者 金鑫 陈子健 《广西医学》 CAS 2014年第11期1522-1525,共4页
目的对大鼠抑癌基因Mob1a进行基因扩增,体外表达载体构建并且体外表达,为了进一步研究大鼠癌症发生分子机制提供支持。方法采用RNA提取技术获得总RNA后,进行体外反转得到c DNA。利用依据大鼠Mob1a基因序列设计合成的一对特异性引物,以大... 目的对大鼠抑癌基因Mob1a进行基因扩增,体外表达载体构建并且体外表达,为了进一步研究大鼠癌症发生分子机制提供支持。方法采用RNA提取技术获得总RNA后,进行体外反转得到c DNA。利用依据大鼠Mob1a基因序列设计合成的一对特异性引物,以大鼠c DNA为模板,RT-PCR扩增得到了预期大小的DNA片段。利用NheⅠ和HindⅢ限制性酶切位点将该目的 DNA片段与p CDNA3.1-HA载体酶切后进行连接。转染HEK293T细胞系,获得总蛋白后通过Western Blot分析检测该基因在体外是否成功表达。结果通过RT-PCR方法扩增了Mob1a基因,并且将该基因克隆至p CDNA3.1-HA。Western Blot分析显示Mob1a-HA融合蛋白在体外表达。结论成功克隆了Mob1a基因并且成功在体外表达该蛋白。 展开更多
关键词 大鼠 抑癌基因 mob1a PCR WESTERN BLOT
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Hippo通路蛋白在凝血酶活化的血小板中激活并调控体外血小板活化
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作者 谯从超 孙盼 +3 位作者 袁欣 苏娜 蒋鹏 林方昭 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1143-1149,共7页
目的:探讨Hippo通路蛋白在凝血酶刺激的血小板中的磷酸化水平,并探索其对血小板活化的影响。方法:免疫印迹法检测凝血酶活化的人血小板中Hippo通路蛋白—哺乳动物STE20样激酶1/2(MST1/2)、核Dbf2相关激酶1/2(NDR1/2)和MOB1的磷酸化水平... 目的:探讨Hippo通路蛋白在凝血酶刺激的血小板中的磷酸化水平,并探索其对血小板活化的影响。方法:免疫印迹法检测凝血酶活化的人血小板中Hippo通路蛋白—哺乳动物STE20样激酶1/2(MST1/2)、核Dbf2相关激酶1/2(NDR1/2)和MOB1的磷酸化水平;血小板聚集仪检测MST1/2抑制剂XMU-MP-1对血小板聚集的影响;流式细胞仪检测XMU-MP-1对血小板整合素αIIbβ3活化和CD62p表达的影响;血块回缩实验检测XMU-MP-1对血小板整合素“outside-in”信号的影响;免疫印迹法检测XMU-MP-1对血小板Hippo通路蛋白和p38磷酸化水平的影响。结果:MST1/2、NDR1/2和MOB1的磷酸化水平在凝血酶活化的血小板中显著升高(P<0.05);XMU-MP-1可抑制凝血酶诱导的血小板聚集和αIIbβ3活化(P<0.05),但不影响α颗粒释放和血块回缩;在XMU-MP-1处理的血小板中,凝血酶诱导的Hippo蛋白的磷酸化水平下降(P<0.05),而p38的磷酸化不受影响。结论:Hippo通路蛋白在凝血酶诱导的血小板中被激活,并参与血小板活化调控。 展开更多
关键词 Hippo通路 血小板活化 哺乳动物STE20样激酶1/2 核Dbf2相关激酶1/2 MOB1 XMU-MP-1
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植物Hippo信号通路研究进展 被引量:1
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作者 张平平 佟鑫 +2 位作者 张天乐 黎子琛 龚清秋 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期568-575,共8页
植物器官大小如何决定是发育生物学的基本问题之一。Hippo信号通路是动物中最重要的负调控器官大小的信号通路。近期研究表明,植物中可能也存在Hippo信号通路。本文回顾了植物中已经发现的两个Hippo信号通路的核心蛋白——Ste20/Hippo... 植物器官大小如何决定是发育生物学的基本问题之一。Hippo信号通路是动物中最重要的负调控器官大小的信号通路。近期研究表明,植物中可能也存在Hippo信号通路。本文回顾了植物中已经发现的两个Hippo信号通路的核心蛋白——Ste20/Hippo同源蛋白SIK1与MOB1/Mats同源蛋白MOB1,着重论述了SIK1和MOB1在调控植物生长发育中的作用,并对未来建立一条完整的植物Hippo信号通路进行了展望。 展开更多
关键词 Hippo信号通路 SIK1 MOB1 器官大小 细胞分裂 细胞延展
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MOB1B过表达对子宫内膜癌细胞生物学行为的影响及机制研究 被引量:1
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作者 庞槐 王竞州 +4 位作者 杨冰琪 袁成钢 魏茜茜 刘杰 谢建新 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2022年第6期772-778,共7页
目的 子宫内膜癌(Endometrial Cancer, EC)是女性生殖系统常见的恶性肿瘤,但其发生发展的分子机制目前尚不十分明确。MOB1B(Mps One Binder Kinase Activator 1B)是Hippo通路激酶级联反应的核心组成部分,是一个肿瘤抑制因子,而其在EC中... 目的 子宫内膜癌(Endometrial Cancer, EC)是女性生殖系统常见的恶性肿瘤,但其发生发展的分子机制目前尚不十分明确。MOB1B(Mps One Binder Kinase Activator 1B)是Hippo通路激酶级联反应的核心组成部分,是一个肿瘤抑制因子,而其在EC中的分子作用尚未有文献报道。尝试阐明MOB1B对EC细胞生物学行为的影响及可能的分子机制,将为临床治疗EC提供新的实验依据和理论基础。方法 利用starBase数据库分析MOB1B、CCND1(Cyclin D1)和XIAP(X-linked inhibitor of apoptosis)在EC中的mRNA表达水平,以及运用在线生物信息学软件Kaplan-Meier Plotter分析MOB1B的表达水平与EC患者生存率的关系;qRT-PCR和Western Blot检测EC细胞系Ishikawa中转染MOB1B过表达质粒后MOB1B、CCND1和XIAP的mRNA和蛋白表达水平;CCK-8、细胞集落形成、Transwell和划痕实验检测细胞的增殖、侵袭和迁移能力。结果 starBase数据库分析发现:在EC患者肿瘤组织中MOB1B的mRNA表达水平显著降低(P<0.05);利用Kaplan-Meier Plotter数据库进一步分析后发现:MOB1B低表达的EC患者生存率明显降低(P<0.05);在EC细胞中转染MOB1B过表达质粒后,MOB1B的mRNA和蛋白表达水平显著升高,而促癌因子CCND1和XIAP的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与对照组相比,过表达MOB1B后EC细胞的增殖、侵袭和迁移能力被显著抑制(P<0.05)。结论 MOB1B过表达可抑制EC的细胞增殖、侵袭和迁移能力,其分子机制可能与抑制促癌因子CCND1和XIAP的表达有关。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 MOB1B Hippo通路 生物学行为
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MOB1蛋白通过调控AKT/Cyclin D1信号通路促进肝癌细胞增殖
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作者 陈建林 陶江涛 +6 位作者 帅建 艾小江 郑锦锋 余小舫 肖凌云 凌云志 曾小斌 《肝胆胰外科杂志》 CAS 2022年第1期35-42,共8页
目的探讨MOB1蛋白在肝癌中的作用及其调控机制。方法利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析MOB1在肝癌中的表达水平及其与患者生存期的关系。利用Western blotting验证MOB1蛋白在肝癌组织样本中的表达情况。用siRNA敲低MOB1表达,慢病毒构... 目的探讨MOB1蛋白在肝癌中的作用及其调控机制。方法利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析MOB1在肝癌中的表达水平及其与患者生存期的关系。利用Western blotting验证MOB1蛋白在肝癌组织样本中的表达情况。用siRNA敲低MOB1表达,慢病毒构建MOB1稳定过表达细胞系,CCK-8法检测MOB1蛋白对肝癌细胞增殖的影响,流式细胞术检测MOB1蛋白对肝癌细胞周期的影响。Western blotting检测关键信号通路蛋白水平的表达。结果通过TCGA数据库分析,同源基因MOB1a和MOB1b在肝癌样本集中存在显著高表达,且肿瘤样本高表达MOB1a和MOB1b基因与患者的生存期缩短显著相关。在临床样本分析中,MOB1在86.7%的肝细胞癌患者肿瘤组织中显著高表达。MOB1过表达后Huh7和HepG2细胞的增殖速度显著上升,G_(2)/M期细胞比例显著上升。反之,MOB1敲低后,Huh7和HepG_(2)细胞的增殖速率显著下降,G2/M期细胞比例显著下降。进一步研究发现,MOB1蛋白过表达不影响经典的Hippo-YAP信号通路,但能促进AKT蛋白的磷酸化和提高Cyclin D1水平。结论MOB1蛋白可能通过调节AKT/Cyclin D1信号通路促进肝癌细胞增殖,影响疾病进展。 展开更多
关键词 肝癌 癌症基因组图谱(TCGA) MOB1蛋白 蛋白表达 细胞增殖 细胞周期 AKT/Cyclin D1信号通路
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稻瘟病菌蛋白激酶调控因子MoMOB1的功能分析
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作者 张君 刘丹 +3 位作者 陈培蕊 许庆国 王宗华 张冬梅 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2022年第4期1170-1175,共6页
稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)引起的水稻稻瘟病,每年造成全球水稻减产约10%~30%,对全球粮食生产构成严重威胁。MOB(Mps one binder)蛋白家族成员在物种进化过程中高度保守,并作为重要激酶调控因子与NDR(Nuclear DBF2-related)蛋白激酶... 稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)引起的水稻稻瘟病,每年造成全球水稻减产约10%~30%,对全球粮食生产构成严重威胁。MOB(Mps one binder)蛋白家族成员在物种进化过程中高度保守,并作为重要激酶调控因子与NDR(Nuclear DBF2-related)蛋白激酶等结合,在细胞周期的有丝分裂退出和胞质分离等事件中发挥重要作用。本研究利用功能丧失和获得的方法建立了MoMOB1敲除突变体,对突变体进行了功能回补;并对背景菌株、敲除突变体和回补菌株,在形态特征和致病性等方面进行了生物性状分析,以解析稻瘟病菌中MoMOB1的生物学功能。与背景菌株Ku80相比,MoMOB1缺失后稻瘟病菌生长速率明显减慢,分生孢子萌发延迟,突变体产孢量显著降低,分生孢子出现畸形且隔膜数目异常,部分分生孢子没有隔膜或只有一个隔膜。致病性分析发现,ΔMoMOB1突变体致病性明显减弱。回补菌株的表型与背景菌株Ku80相似。综上所述,MoMOB1在稻瘟病菌营养生长、产孢量、分生孢子发育、附着胞形成和致病性方面发挥关键作用。 展开更多
关键词 稻瘟病菌 MOB1 激酶 致病性
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森林草莓FvMOB1与FvM4K1互作及响应生长素调控初探
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作者 刘璐 谷思 +3 位作者 张伟伟 赵帅琪 李安然 邢宇 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期2185-2196,共12页
为研究草莓FvMOB1基因参与生长素调控生长发育及细胞增殖过程中的作用,以森林草莓(Fragraria vesca)‘Hawaii 4’为材料,对同源基因FvMOB1A和FvMOB1B的编码区序列进行基因克隆,对基因进行生物信息分析。应用荧光定量PCR分析了FvMOB1在... 为研究草莓FvMOB1基因参与生长素调控生长发育及细胞增殖过程中的作用,以森林草莓(Fragraria vesca)‘Hawaii 4’为材料,对同源基因FvMOB1A和FvMOB1B的编码区序列进行基因克隆,对基因进行生物信息分析。应用荧光定量PCR分析了FvMOB1在森林草莓不同器官、不同发育时期果实和IAA处理不同天数的幼苗中的相对表达量,对FvMOB1蛋白进行亚细胞定位和酵母双杂互作分析。结果表明,FvMOB1A和FvMOB1B的开放阅读框分别为648和651 bp,编码215个和216个氨基酸。在森林草莓中,FvMOB1A的表达量远远高于FvMOB1B,其中FvMOB1A在根和瘦果中表达量高,茎中最低,FvMOB1B在瘦果和茎中表达量相对较高,叶中最低;两个基因都在花后30 d(成熟后期)果实中表达最高;幼苗经IAA处理后两个基因的表达模式相同,表达量都显著上调并在7 d达到峰值。FvMOB1A和FvMOB1B蛋白定位在细胞核和细胞膜上,酵母双杂交验证二者均可与促分裂原活化蛋白激酶FvM4K1蛋白互作。 展开更多
关键词 森林草莓 MOB1 生长素 细胞增殖
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MiR-743a-5p regulates differentiation of myoblast by targeting Mob1b in skeletal muscle development and regeneration 被引量:1
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作者 YongSheng Zhang YiLong Yao +13 位作者 ZiShuai Wang Dan Lu YuanYuan Zhang Adeyinka Abiola Adetula SiYuan Liu Min Zhu YaLan Yang XinHao Fan MuYa Chen YiJie Tang Yun Chen YuWen Liu GuoQiang Yi ZhongLin Tang 《Genes & Diseases》 SCIE 2022年第4期1038-1048,共11页
The microRNAs (miRNAs) play an important role in regulating myogenesis by targeting mRNA. However, the understanding of miRNAs in skeletal muscle development and diseases is unclear. In this study, we firstly performe... The microRNAs (miRNAs) play an important role in regulating myogenesis by targeting mRNA. However, the understanding of miRNAs in skeletal muscle development and diseases is unclear. In this study, we firstly performed the transcriptome profiling in differentiating C2C12 myoblast cells. Totally, we identified 187 miRNAs and 4260 mRNAs significantly differentially expressed that were involved in myoblast differentiation. We carried out validation of microarray data based on 5 mRNAs and 5 miRNAs differentially expressed and got a consistent result. Then we constructed and validated the significantly up- and down-regulated mRNA-miRNA interaction networks. Four interaction pairs (miR-145a-5p-Fscn1, miR-200c-5p-Tmigd1, miR-27a-5p-Sln and miR-743a-5p-Mob1b) with targeted relationships in differentiated myoblast cells were demonstrated. They are all closely related to myoblast development. Gene Ontology (GO) and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) analysis indicated cell cycle signals important for exploring skeletal muscle development and disease. Functionally, we discovered that miR-743a targeting gene Mps One Binder Kinase Activator-Like 1B (Mob1b) gene in differentiated C2C12. The up-regulated miR-743a can promote the differentiation of C2C12 myoblast. While the down-regulated Mob1b plays a negative role in differentiation. In addition, the expression profile of miR-743a and Mob1b are consistent with skeletal muscle recovery after Cardiotoxin (CTX) injury. Our study revealed that miR-743a-5p regulates myoblast differentiation by targeting Mob1b involved in skeletal muscle development and regeneration. Our findings made a further exploration for mechanisms in myogenesis and might provide potential possible miRNA-based target therapies for skeletal muscle regeneration and disease in the near future. 展开更多
关键词 DIFFERENTIATION miR 743a-5p Mob 1b MYOBLAST Skeletal muscle .Transcriptome
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